实时荧光PCR检测传染性疾病的技术和产品.pdf

上海市浦东新区科技进步奖推荐书一、项目基一、项目基本本情况情况浦东新区科技进步奖推荐书浦东新区科技进步奖推荐书（2013年度）（2013年度）推 荐 号20130118040039项目编号评审组:评审组:项 目名 称英 文中 文The Technology and Related Products of Infectious DiseasesBase on Real-Time PCR实时荧光PCR检测传染性疾病的技术和产品主要完成人员主要完成单位邵俊斌,朱旭平,朱勤玮,王逸芸,李沛晓,沈步超,林海洋,刘燕,舒锋,倪卫琴上海之江生物科技股份有限公司主题词传染性疾病、分子诊断、产品推荐单位/推荐专家张江高科技园区管委会成果类别项目水平所属学科相关学科一相关学科二学科代码学科代码学科代码技术开发实验室诊断传染病预防诊断检验用器械国内领先3201050330243706028技术领域所属行业任务来源创 新 性生物与医药技术制造业自选国内首创出口情况密 级保密期限可否公布已出口非密/是 市成果登记号9312012Y0399,9312012Y0398,9312012Y0400,9312010Y1014,9312010Y1016,9312010Y1013,9312010Y1012,9312010Y1011,9312010Y1015,9312010Y1017 9312013Y0110 9312013Y0111 9312013Y0116项目研究起止时间2007-01-01 至 2010-12-31生物医药上海市埔东新区科学技术奖励委员会制-1-上海市浦东新区科技进步奖推荐书二、项目简介二、项目简介 项目所属科学技术领域、主要技术创新内容、特点及应用推广情况：（限项目所属科学技术领域、主要技术创新内容、特点及应用推广情况：（限 1 1 页页，控制在控制在 12001200 字以内字以内）“实时荧光 PCR 检测传染性疾病的技术和产品”项目属于“生物与医药技术”技术领域。病原微生物可以导致重大传染病及突发公共卫生事件，从而造成重大人员伤亡和经济损失，并影响社会稳定。近年来发生的“SARS”、“手足口病毒”、“甲型 H1N1 流感”和近期发生的“禽流感病毒 H7N9”流行事件均充分说明由病原微生物导致的传染病的严重性。传染病的临床早期诊断，及早确定传染源是预防传染病危害性的有效手段，因此，及早准确检测传染病病原微生物是传染病有效防治的前提。实时荧光 PCR 技术因其准确、快速、灵敏的特点被国际上公认为是病原微生物实验室确证的最有效手段。本项目即基于此技术，建立了具有自主知识产权的核心技术专利，并在此专利基础上，使得产品研制周期短、响应速度快、产品品种全及检测速度快及准等优点。在近年来爆发的几次病毒疫情中（包括近期爆发的禽流感病毒 H7N9 疫情），能快速开展相关检测产品的研制。1、自主知识产权技术自主知识产权技术：本项自主建立了一种新的标记寡核苷酸的方法，可减少引物探针的长度，使设计者拥有更大的选择空间，提高检测的灵敏度和特异性。2、研制周期短：研制周期短：项目全方位建设实时荧光 PCR 技术平台，使得研制一个产品最短周期只需要 5 天。3、响应速度快：响应速度快：项目建立了完善的生物信息数据库，能对国内外各种病原微生物的序列进行跟踪和产品的调整。提高了整个响应的速度。4、产品品种全：产品品种全：基于自主的知识产权核心技术，本项目建立了 200 余种传染病病原体检测产品，几乎全部涵盖我国法定的传染病、国内外区域性传染病、烈性传染病和近几年来新发突发的传染病病原体等。5、检测速度快及准：检测速度快及准：项目研制的传染病病原微生物检测产品，最快能在半个小时内完成整个检测过程。对项目中的核心技术申请了多项发明专利，目前有 5 项专利已获得授权，另外有 4 项专利正在申请中，其中包括了 1 项国际专利。除专利外，还对项目产品进行相关部门的产品注册申报。目前已取得 17 项类医疗器械注册证，有百余种产品获得欧盟的 CE 认证。本项目的实施具有明显的社会效益。项目产品不仅实现了常规传染病和新发传染病临床诊断的高灵敏度、高特异性、高自动化，也为国内外应对各类新发突发疫情提供保障。本项目的实施具有明显的经济效益。本项目 2010 年-2012 年新增产值 10397.2 万元，利税 1196.2 万元。-2-上海市浦东新区科技进步奖推荐书三、项目详细内容三、项目详细内容 1 1、主要科技创新内容、主要科技创新内容（采用的技术原理与方案；关键技术创新点；必要的图表（采用的技术原理与方案；关键技术创新点；必要的图表数据，数据，限限 1010 页页）1.1 1.1 总体思路总体思路 因传染病具有病原体传播的特性，周期长，灵敏度低、特异性差成为传染病诊断亟待解决的难题。实时荧光定量 PCR 技术融核酸扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术于一身，具有准确、快速、灵敏的特点，是解决传染病诊断难题的突破点。新发和突发传染病（如“非典型性肺炎”、“甲型流感”“禽流感（H7N9）”）和微生物类生物战剂（如炭疽）感染是一类具有未知性和突发性，破坏力强和传播速度快的特殊传染病，准确的早期诊断是其防治的前提。发明建立具有自主知识产权的荧光 PCR 核心技术，建立基于荧光定量 PCR 技术的高灵敏度的分子诊断平台，可以提高国内常规传染病、新发和突发传染病的能力，从而减轻其带来的经济负担。因此，本项目组首先需要实现的是对荧光定量 PCR 技术的创新，并建立基于新技术的分子诊断平台，在此过程中将技术转化成为诊断各种病原的系列检测产品，满足临床传染病诊断的需求。1.2 1.2 项目主要创新点：项目主要创新点：1 1、自主知识产权技术、自主知识产权技术：本项目组在国家和地方政府基金支持下，针对目前我国实时荧光PCR 技术存在的关键问题，发明了一种具自主知识产权的“TaqMan-MGB-LNA 探针”实时荧光PCR 检测新技术。该技术使 Tm 值提高了 1225 度，并且对寡核苷酸序列中 A、T、C、G 的组成要求降低，造成退火温度提高，从而使设计时选择空间更大，特异性更强。该技术是国内唯一的荧光 PCR 核心专利技术，使实时荧光 PCR 检测本底大大下降，稳定性显著增强，应用潜力明显提升。2 2、研制周期短、研制周期短：项目建立了完善的实时荧光 PCR 技术平台，从最初的生物信息分析平台、实时 PCR 检测平台至最后的产业化生产质检平台，全方位建设。在项目建立的平台上，研制一个产品最短周期只需要 5 天。这在 2008 年手足口病事件、2009 年的 H1N1 事件和今年的禽流感病毒 H7N9 事件都获得验证，在疫情爆发的几天内即能完成产品的研制，是全球首个首个禽流感病毒 H7N9（2013）核酸测定试剂盒。3 3、响应速度快、响应速度快：公司除了建立完善的实时荧光 PCR 技术平台外，建立了生物信息数据库，对国内外各种病原微生物的序列进行跟踪，若发现有序列发生变异，能及时根据变化的程度调整产品。提高了整个响应的速度。在本次禽流感病毒 H7N9 事件中，得益于平时建立的生物信息数据库，公司才能在首例 H7N9 病人确诊后 2-3 天内及完成产品的研制，遥遥领先于其它同行业厂家。4 4、产品品种全、产品品种全：基于自主的知识产权核心技术，本项目建立了 200 余种传染病病原体检-3-上海市浦东新区科技进步奖推荐书测产品，几乎全部涵盖我国法定的传染病、国内外区域性传染病、烈性传染病和近几年来新发突发的传染病病原体等。5 5、检测速度快及准、检测速度快及准：在荧光 PCR 技术的基础上，建立了快速准确的各类传染病病原微生物检测试剂盒。最快能在半个小时内完成整个检测过程。1.3 1.3 项目成果项目成果 （1）在荧光 PCR 技术的基础上，建立了具有快速应对新发和突发传染病病原检测、高灵敏度的分子诊断技术平台。荧光定量 PCR 技术是在 PCR 反应体系中引入了荧光物质，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 过程。实时荧光 PCR 技术与其他方法相比具有多方面的优点：通过引物或探针与模板的特异性杂交来鉴别模板，具有很高的准确性，假阳性低，特异性好。光谱技术和计算机技术联合使用，极大提高了检测的灵敏度。不受扩增效率和实际损耗影响，精确度高。扩增和检测同步完成，无需开盖，无交叉污染，自动化程度高。无后处理，操作快速简便。能准确对涉及的型别进行精确分型。这些荧光定量 PCR 技术的优点是本项目分子诊断技术平台的先天优势。分子诊断技术平台的建立是基于成熟技术路线、丰富的开发和应用经验。本项目建立的分子诊断技术平台具备了新病原检测 24 小时出方法、5 天出产品的应对能力。基孔肯亚病毒核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）曾经在 2010 年 10 月发生的广东东莞市基孔肯亚热社区聚集性疫情中发挥了重要作用，是该次疫情检测使用量最多的试剂盒。2013 年 4 月爆发的禽流感病毒 H7N9（2013），基于该平台的禽流感病毒禽流感病毒 H7N9H7N9（20132013）核酸测定试剂盒）核酸测定试剂盒成为国内首个首个推出的商品化试剂盒，在该病的早期控制上发挥了重要作用。从 2007 年我国山东临沂出现手足口病爆发疫情后，本项目平台形成了国内首个首个手足口病病原体核酸测定试剂盒。（2）发明了“TaqMan-MGB-LNA 探针”并建立了成熟的生产工艺，该项技术由本项目自主研发的核心专利技术，该技术使 Tm 值提高了 1225 度，并且对寡核苷酸序列中 A、T、C、G 的组成要求降低，造成退火温度提高，从而使设计时选择空间更大，特异性更强。该技术是国内唯一的荧光 PCR 核心专利技术，使实时荧光 PCR 检测本底大大下降，稳定性显著增强，应用潜力明显提升。（3）本项目在制备病毒核酸标准品、临界阳性对照品时，采用自主研发的“人工假病毒”替代其他同类产品普遍使用的天然病毒或裸露核酸。现有阳性参考品的来源主要有：病人血清（/血制品）；体内或体外转录或扩增核酸；质粒或化学合成核酸。所有阳性参照品中，最准确贴切的阳性参照应该是含该特定病毒的天然样本，其同质性可充分保证其作为阳性参照，但其缺陷在于 样本来源少，且由于含有天然宾度，因此具有传-4-上海市浦东新区科技进步奖推荐书染性和危害性。要克服天然病毒来源少且具有传染性的缺点，本质上可以通过离体培养来解决，但把病毒（尤其是基因组经过无害化改造的病毒）导入合适的人工培养宿主细胞系，重组病毒颗粒即可从细胞中产生并分泌至培养基上清。然而，该技术的关键步骤为保密状态，目前仅有少数实验室所拥有；另一方面，这种病毒生产方法可能尚存在若干缺陷，如成本高病毒数量仍然较低、结构不天然、重复性差等。体外转录或复制的核酸因其不具备病毒外壳，因此不适合作为从标本中提取病毒核酸的操作阳性参考。质粒作是闭合环状超螺旋双链形式，非单线性，为阳性参考不能作为 RNA 病毒的阳性对照，仅能作为 PCR 参照,而且无法作为从标本中提取病毒核酸操作的阳性参考。化学合成的核酸，目前技术尚不成熟，且成本高，易降解，尚无实际应用报道。本项目基于反转录病毒等技术制备的假病毒克服了天然病毒来源少、具有传染性的缺点，突破了重组病毒基因组无害化改造技术的垄断局面，弥补了裸露核酸易降解、不能同步参与病毒核酸提取的缺陷。（4）第三，本项目有 17 项检测产品获得了食品药品监督管理局的类医疗器械注册证。包括：1.乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2009 第 3400628 号）、2.乙型肝炎病毒（HBV）基因分型测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400126 号）、3.丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400273 号）、4.丙型肝炎病毒（HCV）基因分型测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400998 号）、5.甲型 H1N1流感病毒（2009）RNA 检测试剂盒（国食药监械（准）字 2009 第 3401022 号）、6.结核杆菌（TB）核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400128 号）、7.巨细胞病毒(CMV)核酸定量测定试剂盒(国食药监械（准）字 2010 第 3400273 号)、8.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因检测试剂盒（国食药监械（准）字 2010 第 3400274 号）、9.沙眼衣原体（CT）核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2010 第 3400270 号）、10.解脲支原体（UU）核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400032 号）、11.淋球菌（NG）核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400035 号）、12.人乳头瘤病毒（HPV）6 型、11 型核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400033 号）、13.人乳头瘤病毒（HPV）16 型、18 型核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400121 号）、14.高危型人乳头瘤病毒（HPV）分型核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400139 号）、15.肠道病毒 71 型(EV71)核酸测定试剂盒(国食药监械（准）字 2010 第 3400272 号)、16.柯萨奇病毒 16 型(CA16)核酸测定试剂盒(国食药监械（准）字 2010 第 3400271 号)、17.肠道病毒通用型核酸测定试剂盒（国食药监械（准）字 2011 第 3400034 号）。上述 17 个产品均已获得上海市科技成果登记号（见图 1）。-5-上海市浦东新区科技进步奖推荐书 图 1 上海市科技成果登记号 其中，“高危型人乳头瘤病毒（HPV）分型核酸测定试剂盒”为我国首个首个获得注册证书的、最全面的 HPV 高危分型的产品。“耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因检测试剂盒”是国内首首个个获得国家食品药品监督管理局的注册证产品。“甲型 H1N1 流感病毒（2009）RNA 检测试剂盒”成为 2009 年疫情爆发时科技部统一测评成功的 8 种推荐产品之一。除了获得食品药品监督管理局的医疗器械注册证外，项目中有百余种产品获得欧盟的 CE认证。有很大部分产品都为国内乃至国际首创国际首创。如禽流感病毒 H7N9（2013）核酸测定试剂盒是全球首个首个相关的检测试剂盒。1.41.4 实施效果实施效果 1.4.1 知识产权 自主知识产权是“自主创新”的核心支撑和重要前提条件，是产品和产业自主的基础和关键，也是创新自主和技术标准自主的基础和关键。因此只有拥有自主知识产权的产品才能在日益激烈的市场竞争中取得优势。本项目除了研制开发传染性疾病病原体病毒检测试剂盒，还对相关研制方法及试剂盒进行了专利申请。本项目中，在传统的探针标记技术的基础上，发明了一种在同一条寡核苷酸链上既标记 LNA 又标记 MGB（TaqMan-MGB-LNA）的方法，使 Tm值提高了 12-25 度，并且对寡核苷酸序列中 A、T、C、G 的组成要求降低。与单个标记相比，该方法进一步提高了其稳定性，造成退火温度提高，从而使得设计时选择空间更大，序列特异 性 更 强。该 方 法 已 申 请 了 PCT，现 已 进 入 国 家 阶 段，LockedNucleicAcid 和MinorGrooveBinder 共修饰核酸片段，受理申请号：PCT/CN2009/072848。本项目中已申请专利的试剂盒有以下几种：人丙肝病毒的人工假病毒及其制备和应用专利号：ZL 200810041872.7；-6-上海市浦东新区科技进步奖推荐书人免疫缺陷病毒 I 型的人工假病毒及其制备和应用专利号：ZL 200810204135.4；HBVcccDNA 核酸定量检测试剂盒及其制备方法和应用专利号：ZL 200910047009.7；用于检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒及其制备和应用专利号：ZL 200910047010.X；锁核酸和小沟结合物共修饰核酸片段专利号：ZL 200910054805.3；甲型流感病毒耐药位点检测试剂盒及其制备与使用，受理申请号：201010255791.4；1.4.2 人才团队：本项目申报团队上海之江生物科技股份有限公司是一家专业从事事荧光定量 PCR 等核酸检测产品的开发、生产和销售的公司。公司目前已获得了医疗器械生产企业许可证。公司团队内部分工明确。研发部门由生物信息组、产品研究组、技术平台组、临床检验组。其中，生物信息组 6 人，主要负责核酸序列分析、引物探针设计等产品前期研发工作。产品研究组主要负责探针的合成、试剂盒各各组分的研制和优化。技术平台组配合产品研究组开展产品开发，并承担试剂盒技术支持服务。临床检验组负责产品的临床试验和获取报告。公司具有专门的注册报批队伍，保障平台技术上产生的新产品能够迅速产业化。公司拥有一群长期从事产品生产和推广的工作人员，由公司负责人直接负责项目的产业化管理。上海之江生物科技股份有限公司具有成熟的国内外销售网络，目前国内市场已涉及26 个省/区/直辖市，公司的产品在国内整个疾病预防和控制中心系统中的销售率居国内同类企业第一，公司还积极拓展国外市场，目前产品已经销往包括欧洲、亚洲、美洲等地的 60多个国家和地区，在国内同行中处于领先地位。本项目团队的多个项目获得资助，军队特需检测试剂产学研联盟建设项目，公司作为项目的牵头单位，获得“重大新药创制”科技重大专项“十二五”计划 2011 年课题；食源性致病菌多重 PCR 核酸检测试剂盒研制及应用研究获上海市科委 2010 年度“科技创新行动计划”生物医药和农业科技领域重点科技项目；扩建手足口病病原体核酸测定试剂盒批量生产线获上海市高新技术产业化 2010 年度生物医药产业转化项目。公司研制的核糖核酸(RNA)提取试剂盒(磁珠法)，是国内首个首个利用国内自主生产的磁珠开发的病毒核酸提取试剂盒。目前，我们已经研制成功配套使用的自动化提取核酸的仪器，临床性能评估正在开展过程中。公司研制的新产品甲型 H1N1 流感病(2009)RNA 检测试剂盒(荧光 PCR 法)，通过了国家科技部组织的统一测评，成为试剂特异性和敏感性过关的 7 家单位之一。现已获得医疗器械注册证，产品已进入临床和疾控系统广泛使用。公司参与起草的乙型脑炎病毒核酸检测方法行业标准已获得批准。公司有良好的机制，研究基础扎实，反应速度快，强调服务的理念，坚持不断创新，能快速满足客户的需求，把握市场发展的趋势。1.4.3 对产业发展的推动作用 本项目为分子诊断技术产业的发展具有重要的、积极的推动作用。本项目产品种类全，涉及生物战剂或生物恐怖剂、新突发、媒介传播、检验检疫等相关病原微生物。所有产品均已产业化，产品研发中心和生产区面积达 10，000 平方米，配备净化本项目建立了 18 条生产线，用于探针原料和试剂盒生产，产品的年产量可达到 50 万套。产品具自主知识产权，被广-7-上海市浦东新区科技进步奖推荐书泛应用于医疗卫生、食品、口岸防疫等领域，突破西方贸易技术知识产权壁垒。产品先后参与 2008 年奥运青岛赛区、2010 年上海世博会和 2010 年广州亚运会的安保工作，为这些重大国际交流项目/赛事的开展提供了有力的保障。本项目产业化能力的提升和产品在关键事件上的应用，说明本项目推动了分子诊断技术产业在技术方法、生产能力和实际应用等方面的发展。1.4.4 国际影响力 基于本项目分子诊断平台的 HPV 检测等多项产品已通过 CE 认证，实现了商品在欧盟成员国范围内的自由流通，扩大了国际影响。另外，基于本项目产品的价格优势，其前景将十分广阔。-8-上海市浦东新区科技进步奖推荐书2 2、第三方评价及当前国内外同类研究、同类技术的综合比较：、第三方评价及当前国内外同类研究、同类技术的综合比较：（限（限 2 2 页）页）2.1 2.1 第三方评价第三方评价 （1）我公司于 2008 年 6 月获得了乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（2）我公司于 2010 年 5 月获得了 乙型肝炎病毒（HBV）基因分型测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（3）我公司于 2010 年 9 月获得了 丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（4）我公司于 2010 年 9 月获得了 丙型肝炎病毒（HCV）基因分型测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（5）我公司于 2009 年 3 月获得了沙眼衣原体（CT）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（6）我公司于 2010 年 4 月获得了人乳头瘤病毒（HPV）6 型、11 型核酸测定试剂盒（荧光PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（7）我公司于 2010 年 4 月获得了人乳头瘤病毒（HPV）16 型、18 型核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（8）我公司于 2010 年 4 月获得了高危型人乳头瘤病毒（HPV）分型核酸测定试剂盒（荧光PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（9）我公司于 2009 年 8 月获得了新型甲型（H1N1）流感病毒核酸检测试剂盒（Real-time RT-PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（10）我公司于 2010 年 4 月获得了巨细胞病毒（CMV）核酸定量测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（11）我公司于 2010 年 6 月获得了结核杆菌（TB）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（12）我公司于 2009 年 4 月获得了金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药基因（MRSA）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（13）我公司于 2010 年 4 月获得了解脲支原体（UU）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（14）我公司于 2009 年 3 月获得了柯萨奇病毒 16 型（CA16）核酸测定试剂盒（荧光 PCR法）的检测报告，详见附件目录 3。（15）我公司于 2010 年 5 月获得了肠道病毒通用型核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（16）我公司于 2009 年 3 月获得了肠道病毒 71（EV71）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的检测报告，详见附件目录 3。（17）我公司于 2009 年 3 月获得了沙眼衣原体（CT）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）的-9-上海市浦东新区科技进步奖推荐书检测报告，详见附件目录 3。2.22.2 项目与国内外同行技术分析比较项目与国内外同行技术分析比较 本项目涉及 17 个产品，与相应检测项目金标准的检测结果符合率均大于 90%，在性能、灵敏度、准确性上均优于国内同类产品，检测结果一致性大于 90%。仅以 HPV 核酸检测试剂盒为例，对本项目基于分子诊断技术的传染病病原检测产品与同类病原检测技术和产品进行比较。目前，使用较多的 HPV 感染试验室诊断方法是针对核酸分子如杂交捕获 2 代（HC2）技术、核酸测序法、基因芯片技术及 PCR 检测技术等，优缺点比较如表 1。表 1 各种 HPV 感染核酸检测方法的优缺点 HC2 技术被视为 HPV 检测的金标准，但是不能对 HPV 进行分型，且检测周期长（4 小时）。而本项目产品“人乳头瘤病毒（HPV）6 型、11 型核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“人乳头瘤病毒（HPV）16 型、18 型核酸测定试剂盒（PCR 法）”，“高危型人乳头瘤病毒（HPV）分型核酸测定试剂盒（PCR 法）”采用的荧光 PCR 技术能准确、灵敏、特异地进行 HPV 不同亚型及突变株的鉴定，而且结果事实监控，检测耗时少（1.5-2 小时）。目前临床常见的 HPV 核酸检测产品有 HC2 杂交捕获、凯普 HPV 分型诊断系统、COBUS4800和开发的荧光 PCR 检测系统，各种代表性产品的比较见表 2。表 2 国内外 HPV 检测同类产品比较 上面四个 HPV 核酸检测系统中，只有开放的荧光 PCR 检测系统无需单独购买专用设备用于检测。其他荧光 PCR 检测 HPV 的产品多数只能检测是否感染 HPV，不能对具体感染的型别进行分析检测或分型不全，相比，本项目产品可区分 13 中高危险和 2 中低危型 HPV。综上所述，本项目的产品在主要技术指标上已达到国内外先进水平，并且与国内的同类产品比较占有较大优势。-1 0-上海市浦东新区科技进步奖推荐书3.3.推广应用情况：推广应用情况：（限（限 1 1 页）页）本项目研制的 17 项产品，在上海交通大学医学院附属仁济医院、同济大学附属同济医院、浙江大学医学院附属邵逸夫医院、浙江省疾病预防控制中心、湖南省疾病预防控制中心和广东省疾病预防控制中心、中国医学科学院皮肤病医院、浙江大学医学院附属第一医院和浙江大学医学院附属第二医院等多家临床研究机构都先后进行了临床验证考核。经过临床验证，上海之江生物科技有限公司研制的“乙型肝炎肝炎病毒核酸荧光定量检测及 YMDD 变异检测试剂盒”，“乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“乙型肝炎病毒（HBV）基因分型测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“丙型肝炎病毒（HCV）核酸定量测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“丙型肝炎病毒（HCV）基因分型测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“甲型 H1N1 流感病毒（2009）RNA检测试剂盒（荧光 PCR 法）”，“结核杆菌（TB）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“巨细胞病毒(CMV)核酸定量测定试剂盒(荧光 PCR 法)”，“耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因检测试剂盒（荧光 PCR 法）”，“沙眼衣原体（CT）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“解脲支原体（UU）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“淋球菌（NG）核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“人乳头瘤病毒（HPV）6 型、11 型核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”，“人乳头瘤病毒（HPV）16 型、18 型核酸测定试剂盒（PCR 法）”，“高危型人乳头瘤病毒（HPV）分型核酸测定试剂盒（PCR法）”，“肠道病毒 71 型(EV71)核酸测定试剂盒(荧光 PCR 法)”，“柯萨奇病毒 16 型(CA16)核酸测定试剂盒(荧光 PCR 法)”及“肠道病毒通用型核酸测定试剂盒（荧光 PCR 法）”各项指标均符合要求，适合临床应用。本项目产品均已产业化，从少量生产往大批量生产转化，产品的年产量可达到 50 万套。产品应用范围广，可应用于各级临床医院、出入境检验检疫局、省级疾病预防控制中心、食品检验、畜牧业、水产等相关单位。本项目产品的开发是采用荧光 PCR 检测技术，与其他方法相比，它不需要专用设备，因此成本相对较低，适合临床的推广使用。另外，本产品与同类产品相比具有可分型、分型全面的优势更具有竞争优势。目前，本项目的产品已覆盖国内80%的省市疾病预防控制中心、传染病医院，包括上海、北京、重庆、天津、深圳市的疾病预防控制中心；四川、湖南、广东、浙江、江苏等的省级疾病控制中心；国内各大传染病医院：河南新乡传染病医院、长春市儿童医院等，皆取得良好的使用效果。本项目的产品销售至今，3 年间累计的产值达 10397.2 万元，新增利润达 3474.31 万元，新增的税收达 1196.2 万元。产值、销售、税收、市场占有率逐年稳定上升。根据现行的实验室诊断要求，需要对疑似患者进行病原学检查，因此预计每年需要大量的检测试剂应用；另外，一旦实现在临床医院开展常规监测，则每年将又需要大量的检测试剂应用。对于国际市场，基于本项目产品的价格优势，其前景将十分广阔。-1 1-上海市浦东新区科技进步奖推荐书4.经济效益:4.经济效益:注：必须加盖单位财务章单位：万元 项目总投资额 4295.73回收期4.58年 份新增产值新增利润新增税收节约资金创 收 外 汇（万美元）20124393.51363.7482.860.7020113237.81009.6438980020102765.91100.97324.4700累 计10397.23474.311196.2210.70经济效益额的计算依据：1、新增产值指标：新增产值=(不含税)单价*销售数量计算 因项目产能的释放及技术改进，营业渠道的逐步开拓，项目新增产值呈现稳步增长趋势。2、新增利润指标 2011年因受金融危机的影响，与项目相关的净利润与上年同期基本持平；如果扣除该因素影响，则2011年应该比上年有所增长。3、新增税收指标 因收入指标呈现上升趋势，随之带来对国家税收贡献的上升。4、创收外汇指标-系与项目相关所产生的外汇创收金额。5、社会效益:5、社会效益:项目的实施具有明显的社会效益。产品不仅实现了常规传染病和新发传染病临床诊断的高灵敏度、高特异性、高自动化，也为国内外应对各类新发突发疫情提供保障。产品先后参与2008年奥运青岛赛区、2010年上海世博会和2010年广州亚运会的安保工作，为这些重大国际交流项目/赛事的开展提供了有力的保障。本项目产业化能力的提升和产品在关键事件上的应用，说明本项目推动了分子诊断技术产业在技术方法、生产能力和实际应用等方面的发展。-1 2-上海市浦东新区科技进步奖推荐书四、本项目曾获科技奖励情况四、本项目曾获科技奖励情况项目名称获 奖时 间奖项名称奖 励等 级授奖部门(单位)生物安全相关病原微生物检测新技术和新产品国家技术发明奖二等中华人民共和国国务院2011-12-23人免疫缺陷病毒I型的人工假病毒及其制备和应用上海发明创新奖优胜奖上海发明创新大赛组委会2010-12-23人乳头瘤病毒（HPV6&11、HPV16&18、高危型分型）核酸测定试剂盒上海市高新技术成果转化项目A上海市高新技术成果转化项目认定办公室2012-02-02丙型肝炎病毒（HCV）（核酸定量、基因分型）测定试剂盒（荧光PCR法）上海市高新技术成果转化项目B上海市高新技术成果转化项目认定办公室2012-03-29-1 3-上海市浦东新区科技进步奖推荐书五、知识产权情况五、知识产权情况国 别知识产权类别授权号名 称CN授权发明专利ZL200910054805.3锁核酸和小沟结合物共修饰核酸片段CN授权发明专利ZL200910047010.X用于检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒及其制备和应用CN授权发明专利ZL200810204135.4人免疫缺陷病毒I型的人工假病毒及其制备和应用CN授权发明专利ZL200810041872.7人丙肝病毒的人工假病毒及其制备和应用CN授权发明专利ZL200910047009.7HBVcccDNA核酸定量检测试剂盒及其制备方法和应用CN授权发明专利ZL200510049666.7以分子探针技术检测线粒体DNA11778点突变的试剂盒-1 4-上海市浦东新区科技进步奖推荐书六、发表论文、著作情况六、发表论文、著作情况论文著作被SCI、EI收录引用次数序号-1 5-上海市浦东新区科技进步奖推荐书七、本项目获计划资助情况七、本项目获计划资助情况序号计划编号及计划名称计划类型资助金额（万元）111DZ0512000，上海分子诊断试剂产业技术创新战略联盟科委其它计划30212DZ1941500，器官移植组织配型及易感病原体快速检测产品的研制科委其它计划18310DZ1901500，扩建手足口病病原体核酸测定试剂盒批量生产线科委其它计划145410391902200，食源性致病菌多重PCR核酸检测试剂盒研制及应用研究科技攻关计划20509DZ1904000，感染性疾病分子快速诊断技术平台建立与系列产品产业化发展科委其它计划9060902H165800，手足口病病原体核酸测定试剂盒研制及产业化中小型企业创新资金15-1 6-上海市浦东新区科技进步奖推荐书八、其它统计信息八、其它统计信息已获国外发明专利已获国内发明专利已申请国外发明专利已申请国内发明专利已获实用新型专利软件著作权0613003、发表论文、著作情况3、发表论文、著作情况著 作论 文收 录,引 用国外出版数国内出版数国外发表数国内发表数被SCI、EI收录数被国内外他人引用次数0000004、科研投资情况(万元)4、科研投资情况(万元)国家拨款自然基金部门、地方 拨 款委 托 单位 拨 款自 筹国外资金00001296.90其它科研资金0合计1296.95、生产投资情况(万元)5、生产投资情况(万元)贷 款单位自筹其它生产投资04295.730合计4295.731、专利、软件著作权项数（已申请发明专利数不含已获得的）1、专利、软件著作权项数（已申请发明专利数不含已获得的）已颁布国家标准已颁布行业标准已颁布地方标准已颁布国家规范已颁布行业规范已颁布地方规范0200002、标准、规范2、标准、规范-1 7-九、推荐意见九、推荐意见实时荧光PCR检测传染性疾病的技术和产品项目属于生物与医药技术技术领域。病原微生物可以导致重大传染病及突发公共卫生事件，从而造成重大人员伤亡和经济损失，并影响社会稳定。近年来发生的SARS、手足口病毒、甲型H1N1流感和近期发生的禽流感病毒H7N9流行事件均充分说明由病原微生物导致的传染病的严重性。传染病的临床早期诊断，及早确定传染源是预防传染病危害性的有效手段，因此，及早准确检测传染病病原微生物是传染病有效防治的前提。该项目实时荧光PCR检测传染性疾病的技术和产品基于实时荧光PCR技术的基础上建立了具有自主知识产权的核心技术专利，并在此专利基础上，使得产品具有研制周期短、响应速度快、产品品种全及检测速度快及准等优点。在近年来爆发的几次病毒疫情中（包括近期爆发的禽流感病毒H7N9疫情），能快速开展相关检测产品的研制。项目产品不仅实现了常规传染病和新发传染病临床诊断的高灵敏度、高特异性、高自动化，也为国内外应对各类新发突发疫情提供保障。综上所述，特此推荐项目实时荧光PCR检测传染性疾病的技术和产品申报2012年度浦东新区科技进步奖。推荐单位（盖章）（或专家签字）年 月 日-1 8-十、主要完成单位情况表十、主要完成单位情况表单位名称组织机构代码排 名通讯地址邮 编电子邮件774301456上海之江生物科技股份有限公司单位性质1上海市漕河泾开发区浦江高科技园区新骏环路188号15号楼2楼201114weiqin_科技管理部门联系人倪卫琴手 机13501862263股份制及有限公司联系电话34680598-8003传 真021-34680010主要贡献:注：主要完成单位名称栏内加盖单位公章项目完成单位上海之江生物科技股份有限公司是一家集研发、生产、销售于一体的高新技术企业，主要从事核酸诊断试剂的研制、生产和销售。公司通过了国家食品药品监督管理局体外诊断试剂生产质量管理体系考核，并且通过了欧洲EN ISO9001：2000体系论证和EN ISO13485：2003+AC2007体系论证，获得医疗器械生产企业许可证和医疗器械经营许可证，具有生产和经营医疗器械的资质，是目前国内分子诊断试剂生产的龙头企业之一。公司的研发团队是一群专业性高、技术能力强、以公司执行董事为首的一群以博士、硕士为主体的科研团队。研发技术已达到国际水平，研制的产品已经能够全部覆盖国内法定传染病，80%以上是同类企业所不具有的，是国内感染性疾病分子诊断产品最为齐全的企业。公司已完成了近300项的基因诊断快速诊断产品的研发，其中有21个产品已获得了医疗器械注册证。公司成立至今，已建立了一定的销售渠道，建立了一定的品牌效应，有一定的美誉度。目前在国内疾病预防控制中心已经具有了相当的影响力，之江生物的产品是疾病预防控制中心系统的首先品牌。作为项目完成单位，上海之江生物科技股份有限公司在本项目的研发、生产、销售的各类支撑条件已具备。项目按照国家食品药品监督管理局和卫生部临检中心相关标准建设已建立了2个十万级和2个万级生产车间及其配套的质量检验室，并配备了各类软硬件设施，能为项目的开展、转化等提供有效支持。-1 9-十一、主要完成人情况十一、主要完成人情况姓 名出生年月证件类型工作单位通讯地址家庭地