白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的提取工艺探索.pdf

研究报告中国酿造2 0 1 5 年第3 4 卷第6 期总第2 8 0 期8 9 白芸豆中仪淀粉酶抑制剂的提取工艺研究程敏，田童童，李甜，朱新荣，张建：(石河子大学食品学院，新疆h 5 河子8 3 2 0 0 3)摘要：以白芸豆为原料，采用3，5 一二硝基水杨酸比色法测白芸豆中d 淀粉酶抑制剂(a A I)抑制率。在单因素的基础上，选择料液比、p H 值、提取时间、提取温度为自变量，o t-A I 抑制率为响应值，利用响应面分析法，研究各自变量及其交互作用对A I 抑制率的影响。根据预测模型得到最佳的提取工艺条件为料液比1：3 0 0 5(g：r 1 1 L)，p H 值为3 6，提取时间2 6 6h，提取温度5 0 1 4。在此条件下得到的口-A I 抑制率为9 5 4 3 5。所得白芸豆a-A I 抑制率提取回归模型高度显著氓k O 9 7 3)，拟合性好，可用于预测白芸豆中a-A I 抑制率。关键词：白芸豆；提取；“淀粉酶抑制率；响应面分析中图分类号：Q 5 1文献标识码：A文章编号：0 2 5 4 5 0 7 1(2 0 1 5)0 6 0 0 8 9 0 5d o i：1 0。1 1 8 8 2 j i s s n。0 2 5 4 5 0 7 1 2 0 1 5 0 6 0 2 0E x t r a c t i o nt e c h n o l o g yo fa a m y l a s ei n h i b i t o rf r o mw h i t ek i d n e yb e a nC H E N GM i n，T I A NT o n g t o n g，L IT i a n，Z H UX i n r o n g，Z H A N GJ i a n 4(C o l l e g eo f F o o dS c i e n c e,S h i h e z iU n i v e r s i t y,S h i h e z i8 3 2 0 0 3,C h i n a)A b s t r a c t：U s i n gw h i t ek i d n e yb e a na sm a t e r i a l，t h ed a m y l a s e(o c A I)i n h i b i t i o na c t i v i t yi nw h i t ek i d n e yb e a nw a sd e t e r m i n e db y3,5 一d i n i t r o s a l i c y l i ca c i d(D N S)c o l o r i m e t r y B a s e do ns i n g l ef a c t o re x p e r i m e n t，t h ei n t e r a c t i o ne f f e c to fs o l i d l i q u i dr a t i o，p H，e x t r a c t i o nt i m e，a n dt e m p e r a t u r eo n 乜-A Ir a t ew e r eo p t i m i z e du s i n gr e s p o n s es u r f a c em e t h o d o l o g y T h eo p t i m u me x t r a c t i o nc o n d i t i o n sw e r ea sf o l l o w s：s o l i d-l i q u i dr a t i o1：3 0 0 5(g：m 1)，p H3 6，t i m e2 6 6h，t e m p e r a t u r e5 0 1 4c Cb a s e do nt h ep r e d i c t i o nm o d e l U n d e rt h e s ec o n d i t i o n s，t h ed A Ir a t eO fe x t r a c t i o ns o l u t i o nw a s9 5 4 3 5 T h ee s t a b l i s h e dr e g r e s s i o nm o d e lw e r eh i g h l ys i g n i f i c a n t(R Z=-O，9 7 3)，w h i c hc a nb eu s e df o rt h ep r e d i c t i o no fa-A Ir a t ei nw h i t ek i d n e yb e a n K e yw o r d s：w h i t ek i d n e yb e a n；e x t r a c t i o n；a a m y l a s ei n h i b i t i o nr a t e；r e s p o n s es u r f a c ea n a l y s i s自芸豆(w h i t ek i d n e yb e a n)属豆科(L e g u m i n o s a e)，蝶形花亚科(P a p i l i o n o i d e a e)，菜豆族菜豆属 1 ，原产美洲的阿根廷和墨西哥，后经人工栽培驯化已适应冷凉潮湿的高原地带。白芸豆营养价值丰富，据分析，每1 0 0g 干豆中含碳水化合物3 7 6 4 8 5，蛋白质1 9 9 2 0 0，脂肪1 6 2 1，钙1 2 0m g，铁1 0m g t 2 1。白芸豆作为一种高钾低钠食品，适合于高血脂、心脏病、动脉硬化和忌盐患者食用。因为价格便宜，所以在国内外倍受消费者的青睐。白芸豆富含a 淀粉酶抑制剂和膳食纤维。d 淀粉酶(】，4 理口葡聚糖水解酶，E C 3 2 1 1)作用于淀粉时，从其分子内部切开O 一1，4 糖菅键，生成还原糖和糊精，由于产物的末端残基碳原子为晓构型，故称为a 淀粉酶。能与“淀粉酶分子上的相应部位结合并引起O 淀粉酶分子构象改变，使其催化活性降低或者丧失的化合物为O 一淀粉酶抑制剂(a a m y l a s ei n h i b i t o r，O t A I)，属于糖普水解酶抑制剂的一种，国外称之为“淀粉阻断剂(s t a r c hb l o c k e r)”O 它能有效阻断高淀粉类食物(杂粮、面食、米饭及相关糕点和零食)中淀粉的分解，阻断大部分淀粉热量的摄取，减少人体最大的脂肪来源。而且白芸豆O 淀粉酶抑制剂经胃肠道排出体外，不必经过血液循环，不作用于大脑神经中枢，食用后不腹泻、不乏力、不厌食、体质量不反弹、完全符合世界卫生组织的减肥原则冈。1 材料与方法1 1 材料与试剂白芸豆：购买于新疆石河子市农贸市场；3,5 一二硝基水杨酸(3，5 一d i n i t r o s a l i c y l i ca c i d，D N S)：上海盐季生物有限公司；氢氧化钠(分析纯)：天津市巴斯夫化工有限公司；盐酸(分析纯)：北京化工厂；可溶性淀粉(分析纯)：天津市化学试剂三厂；葡萄糖(分析纯)：天津市致远化学试剂有限公司；丙三醇(分析纯)：天津永晟精细化工有限公司；n 淀粉酶(分析纯)：北京奥博星生物技术有限公司。1 2 仪器与设备U V m i n i 1 2 4 0 紫外可见分光光度计：日本岛津公司；M u l t i f u g eX 3 高速冷冻离心机：美国T h e r m oH e r a e u s 公司；收稿日期：2 0 t 5 0 5 2 5基金项目：石河子大学青年骨干教师培训项目(3 1 5 2 S P X Y 0 1 0 2 7)作者简介：程敏(1 9 9 2)，女，本科生，研究方向为食品质量与安全。*通讯作者：张建(1 9 7 9 一)，男，副教授，博士，研究方向为食品生物化学。万方数据2 0 15V 0 1 3 4N O。69 0 S e r i a lN o 2 8 0C h i n aB r e w i n gR e s e a r c hR e p o r tR H P 6 0 0 高速多功能粉碎机：浙江荣浩工贸有限公司：E P E D 一2 0 T J 超纯水器：南京易普易达科技发展有限公司；Z X R D 7 0 8 0 全自动新型鼓风干燥箱：上海智城分析仪器制造有限公司；8 5 1 磁力搅拌器、D K 8 D 数显恒温水浴锅：江苏金坛市医疗仪器厂；J M B 1 0 0 0 2 电子天平：诸暨市超泽横器设备有限公司；P H S 3 C 型p H 计：上海仪电科学仪器股份有限公司。1 3 试验方法1 3 1 原料预处理将市场上购买的白芸豆去除杂质，在4 水中浸泡1 2h后去皮，在3 5 烘箱中干燥后经粉碎机粉碎，过1 0 0 目筛得白芸豆种子粉末。经过上述处理的样品装入聚乙烯袋中在4 冰箱内保藏备用。1 3 2a。淀粉酶抑制剂的提取称取5g 的样品，按照一定料液比加入蒸馏水，在恒定的温度下不断的搅拌使其充分溶解。通过加入0 5m o l LN a O H 或0 5m o l LH C l 来调节水解液的p H 值。然后将水解液于1 00 0 0r r a i n 的条件下离心2 0m i n，合并上清液。并且用D N S 比色法 7-1 0 测定其中还原糖的含量。1 3 3 葡萄糖标准曲线的制作取6 只试管依次加入0、0 2m L、0 4m L、0 6m L、0 8m L、1 0m L 的葡萄糖标准溶液(3m g m L)，制成质量浓度依次递增的系列标准葡萄糖溶液，充分混匀后加入2m LD N S 试剂，于沸水浴中反应5m i n。流水冷却，各管定容至2 5m L。以管l 为空白对照，在4 7 0 n l n 波长下测各管的吸光度值。1 3 4 样品测定参考赵蓉等2】的方法。样品管：精确吸取0 5m L 从自芸豆提取的O f A I 和0 5m L 仅淀粉酶溶液，充分混匀，在3 7 水浴反应1 0m i n，然后加入1m L2 可溶性淀粉溶液，在3 7 水浴中准确反应5r a i n，之后，再加入2m LD N S显色剂，在沸水浴中反应5m i n，之后立即用流动自来水冷却(终止反应)，适量稀释，在波长4 7 0n n 处测定吸光度值，记为O D 伽。对照管：用蒸馏水替代“一A I，其他条件同上，记为O D 锏。空白管：用蒸馏水替代a A I 和玟淀粉酶，其他条件同上，调零。O f 一淀粉酶抑制剂抑制率的计算公式如下：“舢抑制率：塑：塑叵垒坠竺1 0 0 O D 4 7 0 m式中：0 1)4。为样品管的吸光度值，0 1 9 枷。为对照管的吸光度值。1 3 5 提取条件优化单因素试验f j 3】准确称取2 0 份5 9 白芸豆粉，分别按照料液比1：1 0、1：2 0、1：3 0、1：4 0、1：5 0(g：m L)加蒸馏水，调溶液p H 值分别为3 0、4 0、5 0、6 0、7 0，分别在2 0、3 5、5 0、6 5、8 0 水浴条件下搅拌浸提1 5h、2 5h、3 5h、4 5h、5 5h。粗提液倒入离心管中，于离心机中4、1 00 0 0r m i n 离,5,2 0r a i n，取上清液，测定1 3 1 一淀粉酶抑制剂抑制率，考察料液比、p H 值、提取时间及温度对a-A I 抑制率的影响。1 3 6 响应面试验设计在单因素试验基础上，采用D e s i g n E x p e r t8 0 6 软件的B o x B e h n k e n，以料液比(A)，p H 值(B)，提取时间(c)，提取温度(D)为主要影响因素，以O L A I 抑制率(Y)为响应值，设计4 因素3 水平共2 9 个试验点，所有的试验随机进行，每组试验至少重复3 次。响应面试验设计因素水平编码如表1 所示。每个因素被编码为3 个水平(-1，0，1)。表1晌应面试验因素与水平T a b l e1F a c t o r sa n dl e v e l so fr e s p o n s es u r f a c ee x p e r i m e n t2 结果与分析2 1 葡萄糖标准曲线的制作以葡萄糖标准溶液质量浓度为横坐标，O D 值为纵坐标，绘制标准曲线，结果见图1。1 4121 0i0 880,6O 4O 20 00 20 40 60 81 0葡萄糖质量浓度(m g m L。)图1葡萄糖标准曲线F i g。1T h es t a n d a r dc u r v eo fg l u c o s e由图1 可知，标准曲线回归方程为y=1 3 4 99 x-0 0 1 88，相关系数为R Z=0 9 9 71，表明葡萄糖的质量浓度与吸光度值在0 6 3 0m g m L 范围内有良好的线性关系。2 2 提取条件优化单因素试验2 2 1 料液比对理一淀粉酶抑制剂抑制率的影响由图2 可知，随着料液比的增加，提取液中O A I 抑制率先增大，后减小。在料液比1：3 0(2：m L)时O f A I 抑制率达到峰值，之后0 1 A I 抑制率却有所降低，究其原因可能是由于料液比的增加，活性物质在两相中浓度差增大，活性物质溶出增加，O f A I 抑制率增加，但随着活性物质溶出达到平衡，料液比继续增加，活性物质在提取液中的浓度被稀释而降低，从而导致提取液n A I 值降低。因此提取料液比万方数据研究报告中国酿造2 0 1 5 年第3 4 卷第6 期总第2 8 0 期9 1 在1：3 0(g：m L)适宜。装擗器嚣1：1 0l：2 0l：3 01：4 01：5 01：6 0料液比(g：m L)图2 料液比对淀粉酶抑制率的影响F i g 2E f f e c to fs o l i d-l i q u i dr a t i oo nt h ea-a m y l a s ei n h i b i t i o nr a t e2 2 2 不同p H 值对O L 一淀粉酶抑制剂抑制率的影响逞瓣磊露图3p H 值对淀粉酶抑制率的影响F i g 3E f f e c to fp Ho nt h ea-a m y l a s ei n h i b i t i o nr a t e由图3 可知，随着p H 值的增加，提取液中理A I 抑制率一直减小，在p H 值为3 时，戊A I 抑制率达到最大值，这可能是因为酸性浸提下接近O d 淀粉酶抑制剂的等电点，更容易使蛋白充分溶出，能除掉较多的杂蛋白，使浸提液澄清；随着碱性的增强，造成了部分蛋白的损失，所以抑制率呈现下降趋势。故p H 值选择为3 0 适宜。2 2 3 浸提时间对0 1 淀粉酶抑制剂抑制率的影响摹僻壮爨图4 提取时间对a _ 淀粉酶抑制率的影响F i g 4E f f e c to fe x t r a c t i o nt i m eo nt h ea-a m y l a s ei n h i b i t i o nr a t e由图4 可知，随时间的延长抑制率先上升后平稳，时间 2 5h 后抑制率增加幅度不明显。说明随着时间的进行，蛋白质的溶出率逐渐趋于稳定，活性成分在细胞内外浓度逐渐达到平衡。从提取提效果和实验周期2 方面考虑，浸提时间选择在2 5h L l 较合适。2 2 4 浸提温度对d 一淀粉酶抑制剂抑制率的影响摹得罨嚣图5 提取温度对淀粉酶抑制率的影响F i g 5E f f e c to fe x t r a c t i o nt e m p e r a t u r eo nt h ea-a m y l a s ei n h i b i t i o nr a t e由图5 可知，温度对提取液仪淀粉酶抑制剂抑制率的影响较大，当温度在2 0 5 0o c 时，抑制效果增高明显，5 0 时抑制效果达到最大值 从5 0-一8 0，抑制率有所下降。这说明适度的增加提取液的温度可以提高抑制效果，但加热浸提过程中当温度过高时，可能会导致部分O t。淀粉酶抑制剂结构改变，O L A I 活性成分会部分失活，因此提取温度为5 0 较合适。2 3 响应面法优化提取条件2 3 1 响应曲面试验设计与结果在单因素试验的基础上，以抑制率为(功为响应值，用D e s i g n E x p e r t8 0 软件设计响应面试验方案，以料液比(A)，p H 值(B)，提取时间(6 3，提取温度(D)为主要影响因素，响应面试验设计及结果见表2。对该回归模型及其系数进行显著性检验，结果见表3。运用D e s i g n E x p e r t8 0 数据统计分析软件对表2 试验结果进行多元回归拟合，拟合所得白芸豆O A I 抑制率(Y)的多元二次回归方程；1 1 T：y=9 4 5 4 0 6 9 A+3 0 7 B+3 6 0 C+2 3 7 A B+1 7 5 A D-2 9 7 B C-6 8 1 A 2 _ 5 3 4 8 2 4：5 7 C 2 2 1 0 D 2由表3 可知，模型的F 值为4 8 3 3，P O 0 0 01，说明该模型极显著，可较好地描述各因素与响应值之间的真实关系，可以利用该回归方程确定最佳提取参数。失拟项在0 0 5 水平上不显著(P=-0 0 6 52)，说明残差均由随机误差引起。模型校正决定系数R 2 础=0 9 4 59，说明模型能解释9 4 5 9 n 向应值的变化；模型的复相关系数为R Z=-0 9 7 30，说明该模型与实际拟合较好，故适用于提取工艺条件的预测。其中模拟一次项B、镢、二次项A 2、B 2、c 2、D 2 项及交互项A B、B C蛇锚明鲫记矾甜印舛配鳃铂钳铉驱稻甜舵粥弘踟他M记加醌酯甜酡铅弘：万方数据2 0 15V 0 1 3 4N o 69 2 S e r i a lN o 2 8 0C h i n aB r e w i n gR e s e a r c hR e p o r t项对白芸豆1 9 1 A I 抑制率有极显著影响，而A D 对白芸豆o t A I抑制率值有显著影响，其他因素影响不显著。表2 响应面试验设计及结果T a b l e2E x p e r i m e n t a ld e s i g na n dr e s u l t so fr e s p o n s es u r f a c ea n a l y s i s1 0 0摹9 5料9 0鹾8 5鞲8 07 5厶p。2 0 0表3 回归方程方差分析T a b l e3V a r i a n c ea n a l y s i so fr e g r e s s i o ne q u a t i o n注：“”表不影响极显著(P O 0 1)：“”，表不影响显著(P 0 0 5)。2 3 2 响应面分析响应面分析(r e s p o n s es u r f a c ea n a l y s i s，R S M)法按照参考文献 1 4 采用多元二次回归方法作为函数估计的工具，将多因子试验中因子与指标的相互关系用多项式近似，依此可对函数的响应面和等高线进行分析，当得到的曲面较为平缓，等高线密度较为稀疏，则各个试验变量对响应值的影响显著性很小；当曲面较陡，等高线密度较大，证明该条件下的各个变量对试验的响应值影响比较显著，试验的响应面及等高线见图6。1 0 0摹9 5藤9 0磊8 5霉8 07 51 0 0芝；瓣8 5是8 0幂7 57 0 2 0 0图6 料液比、提取温度、提取时I a-D p H 值的交互作用对白芸豆=-A I 抑制率影响的响应曲面图及等高线F i g 6R e s p o n s es u r f a c ep l o t sa n dc o n t o u rl i n eo fe f f e c t so fi n t e r a c t i o nb e t w e e ns o l i d-l i q u i dr a t i o，p He x t r a c t i o nt i m ea n dt e m p e r a t u r eo nt h ei n h i b i t i o nr a t eo fa-a m y l a s ei n h i b i t o r万方数据研究报告中国酿造2 0 1 5 年第3 4 卷第6 期总第2 8 0 期9 3 由图6 可知，随着各因素水平的升高或延长，d 枷抑制率先增加后减少。根据图6 A、6 B、6 C 的曲面图的陡峭程度显示，可得出料液比对提取率的影响要小于p H 和提取时间，但大于提取温度；同理，图6 D、6 E 的曲面图显示p H 对“m 抑制率的影响要弱于提取时间，强于提取温度；图6 F响应面图显示提取时间对d A j 抑制率的要大于提取温度。再次验证了单因素与交互作项对仅一A I 抑制率的影响的主次顺序。通过响应面软件的优化程序模块对提取条件进行优化，结果如下：料液比1：3 0 0 5 6(g：m L)，提取时间2 6 6h，p H 值为3 6 和温度5 0 1 4，在此条件下模型预测理A I 抑制率可达到9 5 4 3 5。2 3 3 验证试验实际操作过程中选择料液比1：3 0(g：m L)，提取时间2 7h，p H 值为3 6 5 t I 温度5 0，进行3 次试验，得到的O L A I抑制率的平均值为(9 4 9 0 6 5 6)。结果表明，模型预测值与试验实际值相对偏差较小，说明本试验所选模型具有很高的拟合性，该模型能较好的预测白芸豆中O L 淀粉酶抑制剂的抑制率，可用于指导生产实践 1 5-i q。3 结论利用D e s i g n E x p e r t8 0 6 统计软件，选用B o x B e h n k e n试验优化白芸豆中O t 淀粉酶抑制剂最佳条件为料液比1：3 0 0 5 6(g：m L)，提取时间2 6 6 h，p H 值为3 6 和温度5 0 1 4，该条件下经模型预测得到的O A I 抑制率为9 5 4 3 5，实际试验值为(9 4 9 0 6 5 6)，与预测值基本一致。参考文献：1】李锋，王竞，赵晓军，等小白芸豆凝集素的分离纯化及性质研究 J 郑州大学学报：理学版，2 0 1 0，4 2(1)：1 2 0 1 2 4 2】J L E ESC T h es t r u c t u r eo f n a t u r a l l y o c c u r r i n gd a m y l a s ei n h i b i t o r s C F o o do f2 1 s tC e n t u r y F o o da n dR e s o u r c e，t e c h n o l o g y，e n v i r o n m e n t(I D，2 0 0 0：8 2 7【3】魏鹏娟，王鲁峰，徐晓云，等o 一淀粉酶蛋白类抑制剂的研究进展 J】食品科学，2 0 1 1，3 2(9)：3 1 2 3 1 8 4】赵蓉，李多伟，沈晓东，等白芸豆中a 一淀粉酶抑制剂的研究【J】中成药，2 0 0 8，3 0(9)：1 3 5 5 一1 3 5 7 5 吕凤霞，陆兆新a 一淀粉酶抑制剂的研究进展 J 食品科学，2 0 0 2，2 3(3)：1 5 2 1 5 5 6 张晓琦，杨明琰，马瑜，等白豆“淀粉酶抑制剂糖蛋白的提取纯化及降血糖活性研究 J 药物生物技术，2 0 0 7，1 4(6)：4 0 6 4 1 0 7】王文蒙，李楠，王玲玲，等小麦麸皮中o t 一淀粉酶抑制剂的分离、纯化及性质研究 J】食品与发酵工业，2 0 0 9，3 5(11)：2 8 3 1 8 赵凯，许鹏举，谷广烨3，5 一二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量的研究 J】食品科技，2 0 0 8，2 9(8)：5 3 4 5 3 6【9 9 王红英，钱斯日古愣，赵前程，等3，5 二硝基水杨酸比色法测定麦冬多糖含量 J】沈阳农业大学学报，2 0 0 5，3 6(5)：6 2 8 6 3 0 1 0 齐香君，苟金霞，韩戍琚，等3，5 一二硝基水杨酸比色法测定溶液中还原糖的研究 J 纤维素科学与技术，2 0 0 4，1 2(3)：1 8 3 0【1 1】赵蓉，李多伟，任涛，等D N S 比色法测定白芸豆中O 一淀粉酶抑制剂活性的方法研究【J】中成药，2 0 1 3，3 5(3)：5 7 3 5 7 6 1 2 杨明琰，宋纪蓉，张晓琦，等白豆O t 一淀粉酶抑制剂糖蛋白的提纯及性质研究 J】西北大学学报，2 0 0 7，3 7(5)：7 5 3 7 5 7 1 3】贾光锋，赵晨，陆文总，等超声波辅助提取白芸豆o 淀粉酶抑制剂的研究 J】食品研究与开发，2 0 1 4，3 5(1 6)：3 9 4 2 1 4】许云青，龙盛京响应面分析法对O t 一淀粉酶抑制剂筛选方法的优化 J 食品工业科技，2 0 1 3，3 4(2 2)：1 6 9 1 7 3 1 5 史光辉，胡志和，马科铭，等紫薯花青素提取条件优化及淀粉等产物的制备 J 食品科学，2 0 1 4，3 5(2 2)：3 9 4 5 1 6】董红敏，牛小勇，刘继，等响应曲面分析法优化川明参总香豆素超声辅助提取工艺 J 食品工业科技，2 0 1 4，3 5(2 4)：2 8 5 2 8 9，2 9 3 万方数据白芸豆中-淀粉酶抑制剂的提取工艺研究白芸豆中-淀粉酶抑制剂的提取工艺研究作者：程敏，田童童，李甜，朱新荣，张建，CHENG Min，TIAN Tongtong，LI Tian，ZHU Xinrong，ZHANG Jian作者单位：石河子大学食品学院,新疆石河子,832003刊名：中国酿造英文刊名：China Brewing年，卷(期)：2015,34(6)参考文献(16条)参考文献(16条)1.李锋,王竞,赵晓军 小白芸豆凝集素的分离纯化及性质研究期刊论文-郑州大学学报（理学版）2010(1)2.JLEE S C The structure of naturally-occurring-amylase inhibitors 20003.魏鹏娟,王鲁峰,徐晓云,潘思轶-淀粉酶蛋白类抑制剂的研究进展期刊论文-食品科学 2011(9)4.赵蓉,李多伟,沈晓东,王乐 白芸豆中-淀粉酶抑制剂的研究期刊论文-中成药 2008(9)5.吕凤霞,陆兆新-淀粉酶抑制剂的研究进展期刊论文-食品科学 2002(3)6.张晓琦,杨明琰,马瑜,田稼,宋纪蓉,戴德慧 白豆-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提取纯化及降血糖活性研究期刊论文-药物生物技术2007(6)7.王文蒙,李楠,王玲玲,庞雅稚,张冰,刘晨 小麦麸皮中-淀粉酶抑制剂的分离、纯化及性质研究期刊论文-食品与发酵工业2009(11)8.赵凯,许鹏举,谷广烨 3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量的研究期刊论文-食品科学 2008(8)9.王红英,钱斯日古楞,赵前程,藏姝,金凤燮 3,5-二硝基水杨酸比色法测定麦冬多糖含量期刊论文-沈阳农业大学学报 2005(5)10.齐香君,苟金霞,韩戌珺,闫博 3,5-二硝基水杨酸比色法测定溶液中还原糖的研究期刊论文-纤维素科学与技术 2004(3)11.赵蓉,李多伟,任涛,林芳,林道发 DNS比色法测定白芸豆中-淀粉酶抑制剂活性的方法研究期刊论文-中成药 2013(3)12.杨明琰,宋纪蓉,张晓琦,马瑜,田稼 白豆-淀粉酶抑制剂糖蛋白的提纯及性质研究期刊论文-西北大学学报（自然科学版）2007(5)13.贾光锋,赵晨,陆文总,伊康,苏加强 超声波辅助提取白芸豆-淀粉酶抑制剂的研究期刊论文-食品研究与开发 2014(16)14.许云青,龙盛京 响应面分析法对-淀粉酶抑制剂筛选方法的优化期刊论文-食品工业科技 2013(22)15.史光辉,胡志和,马科铭,孙振刚,武文起,冯永强 紫薯花青素提取条件优化及淀粉等产物的制备期刊论文-食品科学 2014(22)16.董红敏,牛小勇,刘继,李路,沈丽雯,秦文 响应曲面分析法优化川明参总香豆素超声辅助提取工艺期刊论文-食品工业科技2014(24)引用本文格式：程敏.田童童.李甜.朱新荣.张建.CHENG Min.TIAN Tongtong.LI Tian.ZHU Xinrong.ZHANG Jian 白芸豆中-淀粉酶抑制剂的提取工艺研究期刊论文-中国酿造 2015(6)