调神益肾针法对更年期大鼠中脑5羟色胺神经元形态功能的影响.pdf

中图分类号：!#$%&(文献标识码：)文章编号：&*+*(*（,*#）*&+*-.+*#调神益肾针法对更年期大鼠中脑!羟色胺神经元形态功能的影响沈晓明杜元灏#李谈#石学敏#（安徽中医学院临床医学二系，合肥$%&%；#天津中医学院第一附属医院，天津%&#(%）内容提要目的：研究调神益肾针法对更年期大鼠中脑!羟色胺神经元形态功能的影响。方法：建立自然的更年期大鼠模型，实验动物包括青年组、更年组、调神益肾组、补肾健脾组，采用免疫细胞化学技术，辅以计算机图像分析，观测中脑中缝背核和正中核!羟色胺样免疫阳性物质总面积、积分光度值。结果：更年组大鼠中脑中缝背核和正中核!羟色胺神经元功能减退，合成、分泌!羟色胺明显减少。经针刺干预后，调神益肾组大鼠该部位!羟色胺神经元活动加强，合成、分泌!羟色胺显著增多；而补肾健脾组则无明显变化。结论：调神益肾针法能够促进更年期大鼠中脑!羟色胺神经元的合成与分泌。关键词更年期针刺法!羟色胺神经元/0 0 1 2 3 4 0)2 5 6 5 7 2 3 5 8 19:7 4 1 5;8 1 :3?7=9 1 7 3:?3:7 AB 4 7?0?7=C?A 7 1”4 79 4 8 6 D 4 4=:7 AE 5 7 2 3?4 74 0 F 1 8 4 3 4 7 1 8=?2G 1 5 8 4 7?J:2 3 1 8?2!:3 F K/GL?:4 M J?7=，N OP 5:7 M D:4#，Q RB:7#，F K RL 5 1 M J?7#（!#$#%&()#*+,&-./0 0%1/2#(0%0#&-3 4 0.&/#5#&-!.2，6#-#0，7 8 9 9 8:；;0.&/#5#&-!.2，!0 1 0，8 9 9;?8）)H 3 8:2 3 S H T 1 2 3?;1：)*+,-,.+/01 0,2 2,/1-*2./3 4 3 5/1 3+,6.5*,3 7+,-*2“+,8 3 9.1:5 86,5 1.9:1;.5 1*5:2;:5 8=:?)）*5 1 0,6*+4 0*9*8;.5 2 3 5/1:*5*2-,+*1*5,+8:/5,3+*5-:5 1 0,6:A+.:5*2/9:6./1,+:/+.1-B 9 1 3 D 4 A：C*+1;2:7,2,6.9,D:-1.+.1-（.8,#E6*5 1 0-）F,+,+.5 *6 9;:7:,?)8+*3 4（G#!），“+,:5 2*+/:5 8 =:5,;.5 H I）8+*3 4（G#!），.:1:*5.9 9;，*1 0,+#!;*3 5 8 2,6.9,+.1-（J6*5 1 0-*9）F,+,6.?)8+*3 4，“C,5 8 2 3”（K L#E），“M.:0 3:”（K L$&），“N:0.:”（O LE）.5“I 0,5-0 3”（M P$%）F,+,4 3 5/1 3+,，F:1 01 0,2*+6,+1 F*./3 4*:5 1-A,:5 8-1:6 3 9.1,A;9:2 1:5 8，1 0+3-1:5 8.5 1 F:+9:5 8 1 0,5,9,-F:1 06*,+.1,.6 4 9:1 3 ,，.5 1 0,9.1,+1 F*./3 4*:5 1-A,:5 8-1:6 3 9.1,F:1 0-6.9 9,+.6 4 9:1 3 H I8+*3 4，“I 0,5-0 3”（M P$%），“Q 3-.5 9:”（I)%E）.5“I.5;:5 R:.*”（I SE）F,+,4 3 5/1 3+,.5-1:6 3 9.1,A;9:2 1:5 8，1 0+3-1:5 8.5 1 F:+9:5 81 0,5,9,-F:1 0-6.9 9.6 4 9:1 3 ,B)0,1+,.1 6,5 1F.-/*5 3/1,*5/,.:9;，/*5 1:5 3*3-9;2*+JF,=-B)0,-,+.1-A+.:5 1:-3,-F,+,/3 1!%针刺研究第$(卷$&J年%月第#!期!#$%&#!$%#$(&%#)!&*+!#,!-.$/#$,&-!)0#&,!1.&（2 3 4 5-&#,$*）67 8 9:8 0!;&!-8-.$）8?$%!#!&?$*.#%+&$(%&*.*&-!$%$?&)*)%)/&*+!#,$-?.#&!A&*!-)B&?$&%!B%/%#&-#$*&#&-!&#,&#$#)0)&)*#,&!#&B 8?$%!#!&%.(%#)&%!4D)*4E$C#,&-!*()!6!#$%&#：5$-?)&*+!#,#,&)&)B&)8?$%!8#!&?$*.#%)*#,&)&)B&!#&B )#&*$?#!)0*&%!#/$C$#$0 B$.?，#,$%&$C 0!-)#&!B$.?*&8&)%&*%!B !C!)#0/（!F 6 F G），%.B B&%#!B)*&0!&$C 7 8 9:%/#,&%!%)*%&#!$!4D)*4E$C#,&()!0!-)#&!)#%6 3 C#&)*-!%#)#!$C).?.#.&，#,&)&)B&)8?$%!#!&?$*8.#%)*#,&)&)B&!#&B H:IB$.?+&-);&*0/,!B,&#,)#,$%&$C 0!8-)#&I=2B$.?%，%.B B&%#!B#,)#&*0!B-)$&.&%$C“&B.0)#!B-&#)0!#/)*#$!C/!B;!*&/”)&%.?&!$#$#,$%&$C“&!C$!B;!*&/)*!B$)#!B%?0&”&*0!B!?$#&#!)#!B)8#!#/$C%&$#$&B!&.$%!0.*!B!&)%&$C#,&%/#,&%!%$C 7 8 9:6 ()*%$#+()：3 .?.#.&!8#&#!$C“&B.0)#!B-&#)0!#/)*#$!C/!B;!*&/”#&,!1.&-)/?$#&#!)#&J?&%!$C%&$8#$&B!&.$%!0!-)#&!)#%6,-.(/0#5 0!-)#&!3 .?.#.&#&,!1.&7 8 9:在更年期综合征的发生、发展过程中，除有卵巢功能减退，雌激素分泌减少，以及下丘脑促性腺激素释放激素（B$)*$#$?!&0&)%!B,$9）神经元、垂体促性腺激素细胞功能的 亢 进 外，尚 伴 有 中 枢 神 经 递 质 的 改变G!7；从另一方面来看，中枢神经递质的变化又常是导致更年期综合征时体内激素水平改变、临床症状的直接原因L，D。因此，关于中枢神经递质及其相关神经元的研究对更年期综合征病因、病理的揭示及防治措施的评价具有重要意义。调神益肾针法是天津中医学院第一附属医院石学敏院士等专家根据多年的临床经验以及中医理论与实践的最新进展所创立的针灸处方，该针法以“肾精亏虚，脑肾失济”为更年期综合征主要病机，以调神益肾为针刺治疗法则，主穴为风府、百会、气海、肾俞，突出“调元神，益肾精，交通脑肾”的组方思想，临床治疗女性更年期综合征疗效确切E，M；动物实验初步证实，这与针刺能升高更年期大鼠原下降的血清雌二醇（&%#)*!$0，NO）水平、降低原升高的血清卵泡刺激素（C$0 0!.0)%#!-.0)#!B,$-$&，P 2 9）和黄体生成素（0.#&!A!B,$-$&，Q 9）水平G F以及改善更年期大鼠卵巢的形态功能活动有关G G。为进一步探讨该针法的作用机制，本研究从中枢角度着手，采用免疫细胞化学和计算机图像分析技术，观察更年期大鼠中脑中缝背核和正中核7 8羟色胺（7 8,/*$J/#/?#)-!&，7 8 9:）神经元的形态功能变化及针刺的干预效应。1材料与方法G R G实验动物选用S月龄雌性T!%#)大鼠G 7只，平均体重G E FB左右；G L月龄雌性T!%#)大鼠S 7只，平均体重O M FB左右。均由天津市劳动职业病卫生研究所动物室提供。喂养在G O,光照、G O,&!,&#8 V.BO F S F普通切片机，德国产；W 0/-?.%4 9 8 O显微镜，日本产；9 X=3 2 8 G F F高清晰度彩色病理图文分析系统，武汉同济医科大学千屏影像公司提供。主要试剂：3#!8 7 8 9/*$J/:/?#)-!&，2!B-)公司产；即用型2 3 4 5免疫组化染色试LY针刺研究第O M卷O F F S年Y月第G 期剂盒，包括正常山羊血清封闭液、生物素化羊抗兔!#、链酶亲合素$生物素$酶复合物（%&()&*+,-,./,0&,.$(.1 2 3(4 0 3)5(6，%*/4）、复合消化液，武汉博士德公司产；7*/显色试剂盒，武汉博士德公司产。8 9:模型复制采用自然老化的更年期大鼠模型8;。8 9 分组与处理购进的动物适应性喂养8周后，月龄雌性?,&A 大鼠随机分为更年期组8=只、调神益肾组8=只、补肾健脾组8=只；8=只天，中间休息8天，周为8个疗程。补肾健脾组：选取“肾俞”、“足三里”、“三阴交”穴。“肾俞”向脊柱方向斜刺B 9=C 3，“足三里”直刺B 9:C 3，“三阴交”直刺B 9;C 3，均行小幅度高频捻转补法。其余处理方法与调神益肾组相同。青年组、模型组动物每天只进行抓取刺激，不作针刺。8 9=标本采集与制备为避免日夜节律对观察指标的影响，标本采集均在上午D：B B#8 8：B B进行。待针刺组动物接受针刺刺激满8个疗程后，所有大鼠断头处死，迅速分离中脑，置8 B E福尔马林液中固定；上行梯度乙醇脱水、二甲苯透明、浸蜡、包埋；参照大鼠脑立体定位图谱8 免疫细胞化学染色（%*/4法）二甲苯脱蜡，下行梯度乙醇入水；:EF;G;甲醇溶液处理切片8 B3,.；切片上滴加正常山羊血清封闭液，室温孵育;B3,.，甩去多余液体；滴加即用型兔抗=$F H!#，置湿盒中，I冰箱孵育约;BJ；滴加生物素化山羊抗兔!#，:KI作用:B3,.；滴加%*/4，:KI作用;B3,.（注：以上每一步骤后均用L/%洗涤切片，:M:3,.）；7*/避光显色约;B3,.，蒸馏水洗涤，终止显色反应；N A 2(氏苏木精复染8#:3,.；上行梯度乙醇脱水，二甲苯透明，封片。光镜下观察，切片上=$F H样免疫阳性物呈棕黄至棕褐色，主要分布于细胞质。8 9 K计算机图像分析采用彩色病理图文分析系统，放大倍数 B B M。每组切片按统一标准随机截取;B个视野，在尽量控制其灰度值一致的基础上，测定阳性反应物面积、积分光度值，并输入计算机进行定量分析。8 9 O统计学处理实验数据用均数P标准差（!P）表示，分析借助%L%8 B 9 BQ 0?,.-0 R 统计软件作方差分析（A.A 5 2 ,0 Q+A ,A.C(，*S G T*）。!结果青年组8=只大鼠8=个中脑：高倍镜下观察，=$F H神经元胞体较大，多呈三角形或椭圆形，胞质中含有棕黄色的=$F H样免疫阳性物，神经元轴突、树突显示清晰。其阳性反应物平均面积、平均积分光度值见表8。更年组8=只大鼠8=个中脑：高倍镜下观察，=$F H神经元数量减少，胞质中=$F H样免疫阳性物着色变浅，与青年组相比差异显著（#B 9 B 8）。其阳性反应物平均面积、平均积分光度值见表8。调神益肾组8=只大鼠8=个中脑：高倍镜下观察，=$F H神经元数目明显增多，胞质中=$F H样免疫阳性物染色强度回升，较更年组有显著改善（#B 9 B 8），接近青年组。其阳性反应物平均面积、平均积分光度值见表8。补肾健脾组8=只大鼠8=个中脑：高倍镜下观察，=$F H神经元数目、胞质中=$F H样免K:针刺研究第;D卷;B B 年:月第8#期疫阳性物染色深浅与更年组类似，明显低于调神益肾组（!#）。其阳性反应物平均面积、平均积分光度值见表#。表#四组大鼠中脑$%&样免疫阳性物平均面积、平均积分光度值比较（(#）组别例数中脑数阳性反应物平均面积（!)*）平均积分光度值青年组#$#$+,-#!(#!./-#-$!(-*!更年组#$#$-+.!/(.0 *.#+0 .0(#.#/#调神益肾组#$#$.!-,(#!0 0*$%#-*#-(*0 *.$%补肾健脾组#$#$/!#-$(,#$#0#-/(#*.$#与青年组比较：#!#；与更年组比较：$!#；与补肾健脾组比较：%!#。!讨论脑内$%&神经元的细胞群共有,个，都分布在脑干中缝核群周围，其中中脑的中缝背核（1.）和中缝正中核（10）是投射到下丘脑的主要核团，若下丘脑去传入后，其$%&含量将减少+!2以上#$，#+。在体内，中枢$%&神经元所分泌的$%&有广泛的生理作用，就与更年期综合征的发生、发展关系来看，有两点应该特别值得注意：一是$%&有调节下丘脑%垂体%卵巢轴的作用。3 4 5 6 7 8 9:7等指出，$%&通过促肾上腺皮质激素释放激素（;6 5:;5 6 6 4 9 4 7?:8 6)4，A B&）的介导，影响阿片促黑素皮质素原（=6 =:;，3 CD A）水平，使%内啡肽（%4 E，%F 3）含量增加，进而抑制下丘脑促性腺激素释放激素（8 7 E 5 6 6 4 9 4 7?:8 6)4，G B&）的分泌#。G 4 7 H%H 7 :则认为，$%&通过刺激下丘脑释放%F 3，抑制促性腺激素的分泌.。二是$%&能影响精神、情绪和行为。A 等指出，体内$%&缺乏可导致抑郁#.。近来研究也表明，更年期综合征时体内$%&水平确有相应改变，但究竟是升高，还是降低，各人研究结果互不一致。马晓等研究显示，去势大鼠下丘脑$%&含量明显低于正常大鼠#0；陈亚琼等也发现，更年期综合征患者潮热、出汗及其他症状群与血浆$%&降低有正相关关系#,；而范红霞、王大增等研究则显示，去势大鼠下丘脑$%&的含量较正常大鼠明显升高*!，*#。我们研究发现，更年组大鼠中脑中缝背核和正中核$%&神经元数目、染色强度均显著低于青年组，推测在更年期综合征的发生、发展过程中，下丘脑%垂体%卵巢轴有关激素水平的改变、精神情绪的变化，部分是由于中脑$%&神经元功能减退，合成$%&减少，以致于不能发挥正常的生理作用，这与G 4 7 H H 7 :的观点基本一致.，同时这也从一个侧面证实“肾精亏虚，脑肾失济”为更年期综合征主要病机的正确性。经针刺干预后，调神益肾组相关指标明显改善，$%&神经元活动加强，合成$%&增多，这样即可以发挥其抑制促性腺激素分泌的作用，使血清原升高的I J&和K&水平降低，进而有助于下丘脑%垂体%卵巢轴重新建立平衡；同时，也有利于更年期综合征精神症状的改观。这种良好的“调元神，交通脑肾”效应，可能是调神益肾针法取效的中枢机制之一。而补肾健脾组则未显示有这方面的作用。参考文献#3 4 5 6 7 8 9:7I，I 7;:4 5 5:I，D 7 6 5:8 :FL J 4 6 5 :4 6 8:;7 8 :?5?:;6 4 7?4=9 7?)7 9 4 M 4 9?E 7 E%9:=5 6 :O)7?L PA 9:F E 9D 4 5 7 Q，#,0/，$,：#-0（下转+*页）0-针刺研究第*,卷*!/年-月第#&期!刘春，杨兆勤，崔玉敏利用经颅多普勒观察针刺穴位对大脑中动脉血流速度的影响#河南中医，$!%，$%（&）：$(于恩华，汪亚晴解剖学（高等医药院校教材）北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，$!，&!&)($粟秀初，吴保仁，黄远桂新编神经病学西安：第四军医大学出版社，(，*+$朱钦人体解剖学北京：人民卫生出版社，$!&，&$!&（收稿日期：(),(,$!）（上接)+页）-./0 1 23 4./56 7 8/9:;?7=2 1.A 1 5 9 1/1 1 B C=1 A A 7/7 D/1 8 7/A0 7/?./9/1 8 7 E /C F./5A 8 G A?./0 1 C HI 1 A A 1/9 1 G 7/8 0 J 1 0.0 5 A/?2 12 /7 J 7 9 7 K/4-，;.J./-4，L .8 A 1M 4 N 7/.5.J A?1 7 5 1 9 8 J.?7/7 D.0 5 A /?2 1.?./?1 7=?8?./52 /7 J 7 9 .P，:?1 D./7Q R，1?.J S 8?7 I I 8/7 I 7 5 8 CJ.?7/，.9 1 C 1 J.?1 57=7 55 D D 1 1/0 1 A /T 1?1 G .?1./5 /T 1?1 CG .?1 I I 8/1 A KP Q，W 1 1 X 3 V 1/?.J A 1 7?7/1 0 1=?7：4 D D 1 0?7 A A?1 I，=2 A 7 J 7 9 7 J 1 A./5 1 9 8 J.?7/H A I.0 7 J，$!+*，!：%*$+马晓，吴富东#针刺治疗女性更年期综合征研究#山东中医药大学学报，$!，)（$）：)&$!陈亚琼，叶雪清#血浆吲哚类神经递质与更年期综合征症状的相关分析#中华妇产科杂志，$!%，)$（$）：&$(范红霞，万力生，黎烈荣#更年安怡片治疗更年期综合征的临床与实验研究#中医药研究，$!，$O（&）：&O$王大增，朱燕青，李燕萍，等#更年舒治疗妇女更年期综合征的临床及实验研究#中国中西医结合杂志，$!&，$&（*）：)!%（收稿日期：(),($,$）%针刺研究第!卷(&年)月第$期调神益肾针法对更年期大鼠中脑5-羟色胺神经元形态功调神益肾针法对更年期大鼠中脑5-羟色胺神经元形态功能的影响能的影响作者：沈晓明，杜元灏，李谈，石学敏作者单位：沈晓明(安徽中医学院临床医学二系,合肥,230038)，杜元灏,李谈,石学敏(天津中医学院第一附属医院,天津,300193)刊名：针刺研究英文刊名：ACUPUNCTURE RESEARCH年，卷(期)：2004，29(1)被引用次数：8次 参考文献(21条)参考文献(21条)1.Petraglia F.Facchinetti F.Martignoni E Serotoninergic agonists increase plasma levels of-endorphin and-lipotropin in humans 19842.Ranceh NE Hypertrophy and increased gene expression of neurons containing neurokini-B andsubstance-P messenger ribonucleic acids in the hypothalamus of postmenopausal women 19913.Brown ER.Harlan RE.Krause LE Gonadal steroid regulation of acids in the rat anteriorpituitary and hypothalamus 19904.叶雪清 围绝经期神经-内分泌-免疫网络的变化 1997(02)5.韩字研 更年期大脑功能变化和早老性痴呆 1999(04)6.Stefano GB.Rimura T.Stefano JM 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交通心肾针法治疗更年期失眠症临床观察-甘肃中医学院学报2009,26(2)目的 观察交通心肾针法治疗更年期失眠症的疗效.方法 将48例患者随机分为治疗组和对照组,每组24例,分别观察各组治疗前后血清雌二醇(E2)水平.结果 治疗组治疗后血清 E2 水平明显升高,自身治疗前后比较差异有高度统计意义(P0.05);治疗后两组比较,差异有统计意义(P0.05).治疗组总有效率为91.7%,对照组为16.7%,两组比较差异有高度统计意义(P0.01).结论 交通心肾针刺法治疗更年期失眠症有较好疗效,能提高患者血清E2 水平,改善患者睡眠质量.3.期刊论文 纪峰.JI Feng 交通心肾针法治疗更年期失眠症临床观察-上海针灸杂志2008,27(12)目的 观察交通心肾法治疗更年期失眠症的疗效.方法 将60例患者随机分为治疗组(针刺组)和对照组(药物组),每组30例,分别观察各组治疗前后匹兹堡睡眠质量指数(PSQI).结果 治疗后,针刺组PSQI得分较前有显著性降低(P0.05),两组间比较差异具有统计学意义(P0.05).结论 交通心肾针刺法治疗更年期失眠症有较好的疗效,能提高患者睡眠质量.4.期刊论文 张润民 针刺申脉穴为主治疗更年期不寐60例-中国民间疗法2000,8(2)笔者自1990年以来,采用针刺法治疗更年期不寐60例,疗效满意,报道如下.5.期刊论文 孙远征.崔淑子.郭淑颖.迟旭 俞募配穴为主治疗更年期综合征-中国针灸2004,24(2)目的:观察俞募配穴针法为主治疗更年期综合征的临床疗效.方法:将65例更年期综合征患者随机分为3组,观察组采用以俞募穴相配为主的针刺方法治疗,并与普通针刺法及药物疗法进行随机对照观察.结果:总有效率观察组为93.3%,普通针刺组为80.0%,药物组为66.7%,3组疗效差异有显著性意义(P0.05).结论:俞募配穴针法为主治疗更年期综合征明显优于普通针法及药物治疗.6.期刊论文 陈贵珍.许云祥.CHEN Gui-zhen.XU Yun-xiang 针灸治疗女性更年期综合征实验研究进展-世界针灸杂志（英文版）2007,17(4)从实验研究角度对近年来针灸治疗女性更年期综合征文献报道进行综述.在各种刺激方式中.以针刺法方面的研究最多,其研究主要体现在针灸对下丘脑-垂体-性轴、神经-内分泌-免疫的影响方面.通过综述可以看到针灸对女性绝经后生殖内分泌环境有调节作用.利用生物医学与多学科交叉优势,进一步提高针灸临床疗效,力争从多层次、多指标、多学科交叉的角度,探讨更年期综合征的发病机制及针灸治疗更年期综合征的作用机制,是今后工作的重点.7.期刊论文 潘文宇.林国华.PAN Wen-yv.LIN Guo-hua 针刺配合火针治疗更年期综合征103例-针灸临床杂志2005,21(2)目的:观察针刺加火针治疗更年期综合征的疗效,为临床选择治疗方法提供依据.方法:对103例更年期综合症患者选用五脏俞穴、神门、三阴交等行复式补泻法,配以火针刺法治疗.结果:经三个疗程治疗,临床痊愈35例(34.0%),好转40例(38.8%),有效40例(20.4%),无效7例(6.8%),总有效率为93.2.结论:本法有调整植物神经功能紊乱的作用,是治疗更年期综合症较为理想的方法之一,在临床上有推广作用的价值.8.期刊论文 CUI Xue-jun.HUANG Qin-feng.XIAO Yuan-chun Acupuncture for Climacteric Syndrome-针灸推拿医学（英文版）2004,2(4)共分析了50篇文章,分别采用单纯针刺法,针刺结合其他疗法,耳穴贴压疗法和其他疗法进行治疗.有39篇文章有明确的诊断标准,其中,Kupperman评分和.治疗组涉及病例总数2946例,临床疗效最高达100%,最低为58.1%.有16篇设立了对照组.15篇进行了辨证分型,共27种证型,有肝肾阴虚,脾肾阳虚,肾阳虚,肾阴虚,心肾不交和肝郁等.针灸治疗更年期综合征具有一定效果,但缺少严格的随机对照试验(RCT).引证文献(8条)引证文献(8条)1.申鹏飞.孔莉 针刺对2型糖尿病患者情绪障碍及糖代谢的干预作用期刊论文-中国针灸 2007(10)2.申鹏飞.孔莉 调神针法对2型糖尿病患者情绪障碍及糖代谢干预作用期刊论文-辽宁中医杂志 2007(8)3.姚敏.李沛 针灸对衰老神经免疫内分泌网络的研究现况及思考期刊论文-针灸临床杂志 2007(3)4.杨国晶.辛浩琳.江新梅 针灸改善神经内分泌、免疫老化的研究纂要期刊论文-针灸临床杂志2006(12)5.黄琴峰.李盛.黄颖 建国以来针灸治疗更年期综合征述评期刊论文-上海针灸杂志 2006(4)6.张慧.张露芬.李晓泓.解秸萍.翟景慧.周登方.詹睿 逆针关元穴对自然更年期大鼠超氧化物歧化酶和一氧化氮合酶活性的调节期刊论文-中国临床康复 2005(31)7.翟景慧 逆针灸对更年期大鼠生殖内分泌及衰老相关指标影响的实验研究学位论文硕士 20058.解秸萍“逆灸”对大鼠更年期衰变的影响及机制研究学位论文博士 2005 本文链接：http:/