芽孢杆菌微生物制剂对生长猪肠道菌群及淀粉酶活性的影响.pdf

第1 7卷第1期19 97年3月郑 州牧 专学报V o l.1 7N。Jo ur nalofZhengzh ouC oll egeofAnim alHu sbandryMa r.1997芽抱杆菌微生物制剂对生长猪肠道菌群及淀粉酶活性的影响刘延贺马淑玲2(1郑州牲专 畜牲工程系;2郑州市动检站)摘要用5 0头长白x荣昌杂交猪,采用1X4+1设计,研究了4种不 同的芽抱杆 菌制剂对生长猪肠道内微生物数量及淀粉酶活性的影响。结果表明:各试验组肠道中芽抱杆菌、双歧 杆菌、乳酸杆菌的数量均较对照组有所增 加,而大肠杆菌数量有所减少。其中以C种制剂组表现最好,3种有益菌均显著(尸 0.05)或极显著(尸0.0 1)地高于对照,大肠杆菌明显(尸0.0 1)降低。各试验组小肠 中淀粉酶活性 分别比对照组 提高了3.2、2.2、3.5、12倍,其中c组比对照组有显著(尸 0.05)提高。关键词芽抱杆菌;微生物制剂;生长猪;肠道菌群;淀粉酶活性将微生物用 于治疗疾病已有10 0多年的历史,其基本原理就是用有益微生物抑制有害微生物的繁殖。从7 0年代至今,国外在微生物防治畜禽胃肠道疾病腹泻、痢疾方面作了不少试验,多数结果证明它能够有效地抑制畜禽肠道中常见的病原菌。前些年的试验多以乳酸杆菌制剂为主,芽抱杆菌类极少,而芽抱杆菌具有耐酸、耐碱、抗高温、高压等优点,具有较强 的生命力,且还有某些酶的活性,因而对它的研究较乳酸菌类日益受到重视。为此,本试验针对不同芽抱杆菌类制剂对生长猪肠道微生态环境及淀粉酶活性的影响作了研究。1材料与方法1.1试验处理及试验动物选择健康长白x荣昌杂交猪5 0头,按性别、体重随机分为5个组,每组1 0头。设四个试验组,1个对照组,每组设5个重复,每重复2头。预饲1 0d,预饲期内进行防疫注射和 驱虫。4个试验组除了喂给给4种不同的芽 抱杆菌制剂外,其余条件与对照组完全相同。试猪平均起始体重1 9skg。1,2饲养管理和记录试猪自由采食和饮水,每天清粪洗圈1次,保持卫生。每半月称重1次,记录平均日增重、采食量及每组的腹泻发病情况。1.3测定指标和方法1.3.1菌数浏定试猪6 0kg时,每组 随机选3头屠宰,无菌采集小肠内容物,测定其芽抱杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌的数量。按常规分析方法对样本进行稀释分离,滴种培,收稿时间:1996一11一06第1期刘延贺等芽抱杆菌微生物制剂对生长猪肠道菌群及淀粉酶活性的影响一5一养,其中芽抱杆菌、大肠杆菌分别用牛肉膏蛋白膝、伊红美兰培养基需氧培养1 8一2 4h;双歧杆菌、乳酸杆菌分别用二者专用培养基化学厌氧培养7 2h。计算每克肠内容物 中的菌落数(对数均值)。1,3.2淀粉晦活性浏定1.3.2.1晦液 制备取屠宰猪的十二指肠、空肠内容物经冷冻离心,得上清液,用0.IM,pH=8.0的硼酸缓冲液将十二指肠、空肠内容物上清液分别稀释2 0倍和 1 2倍,待测。1.3.2.2一淀粉晦活性浏定比色法在试管中加入可溶性淀粉sm l,pH7.O的磷酸缓冲液4m l、3 7恒温水浴中预热。在比色盘中先加入碘液0sm l备用。预热后的淀粉液,分别加入上 述酶液lm l反应,定时吸0.5m l入小孔内,观察颜色变化,测定反应液呈色度达到与标准度相同时的时间(红色,以碘液色值作标准)。在此条件下,以 反应液的碘反应呈色,在1 0mi n内与标准色值一致时的酶活性作为1糊精化活力单位。1.4数据处理分析分别对各处理的样本均数进行显著性t检验。2结果与讨论不同芽抱杆菌微生物制剂对生长猪小肠中微生物菌群的影响测定结果见表1,一淀粉酶活性的测定结果见表2。从表中看出,饲喂芽抱杆菌制剂的各试验组,肠道 中芽抱杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌数量均较对照组有所增加,而大肠杆菌数量较对照组有所减少。芽抱杆菌数量B、C组显著(尸0.05)高于对照组,双歧杆菌、乳酸杆菌数量除D组外,A、B、C三 组也均显著(尸0.05)或极显著(尸0.0 1)高于对照,大肠杆菌数量的减少,只有C组达到极显著(尸0.0 5)。这一结果与迄今为止大多数微生物制剂在猪生产上应 用的效果一致(Ke rs haw等,19 96;H ale,1979;H in等,1 97 0;P onma nn,1 980),即它能够改善猪肠道 中菌群平衡,增加有益菌数量,抑制有害菌特别是大肠杆菌的繁殖,从而达到防止猪肠道疾病,提高生产性能之 目的。本试验中各试验组的腹泻发生率均比对照组明显降低,生产性能也有不同程度提高也说明 了这一点(已在(饲料工业)199 4年第8期总结报道)。Ha tto n等(198 1)试验表明,芽抱杆菌的引入,使仔猪十二指肠中大肠杆菌浓度明显降低,乳酸菌浓度明显上升。多数结果如此,但亦有例外。从本研究看,不 同芽抱杆菌制剂表现 不一,以C种制剂表现 最好,在考察的4个指标中比对照组均有显著差异,从记录的各组腹泻发生情况也以C组最低,说明 了结果 的一致性。具有进一步研究和推广应用价值。D组则表现 最差,在同一试验条件下的结果不一,说明这与制剂本身的菌种筛选、组成及每克制剂中活菌数量等有关。虽均为芽抱杆菌制剂,但引入后并不一定使猪肠道中该菌数量明显增加,这可能与所用芽抱杆菌在肠道中的附着能力差有关。用别的菌剂也有类似情况,Nem e s ke ry(1983)用乳酸杆菌浓缩物对仔猪的试验,也得 出大肠杆菌显著持续下降,但肠道乳酸杆菌未贝咨明显变化的效果;S ha h a ni(19 89)用枯草芽抱杆菌对火鸡的试验,也未发现其肠道 中枯草芽抱杆菌明显增加。郑州牧 专学报1997年表1肠道菌群测定结果lglon/g肠内容物处理项目芽抱杆菌大肠杆菌双歧杆菌乳酸杆菌5.04.87.04.76.55.87.63.64.66.26.8对照组5.4士0.95.6土0,77.1士0,34.1士0.5,飞口一X6.25.78.66.46.49.26.66.0508.85.46.2土0.24.9士0、78.9士0.36.1 士0.5试验A组t检验P0.05尸 0.05尸 0.0 1尸0.056.74.97.75.26.54.67.95.86.4308.05.06.5士0.34.1 土0,97.9土0.45.4士0.4试验B组t检验尸 0.0 5尸 0.05尸 0.05尸 0.0 56.63,09.06.86.83.38.95.46.53.88.36.76.6士0.23.4 土0.38.7士0.36.3士0.6试验c组t检验尸 0.0 5尸 0.0 1P 0.01尸 0.0 5尸 0,05P 0.05尸0.05*样 本序号第1期刘延贺等芽抱杆菌微生物制剂对生长猪肠道菌群及淀粉酶活性的影响一7表2小肠中。一淀粉酶活性测定结果l糊精化活力单位)处理项目十二指肠段空肠段小肠平均数试验/对照15.02.56.00.42.9250.7对照组4.5,凡、X13.311.80.65.024.00.89.33.212.65.9试验A组t检验P 0.05P,0.0512,010.52.9456.52.27.35.6试验B组t检验尸0.0 5P0.0512.69.810.16017.45.010.23.513.46.9验试C组t检验P 0.05尸0.0 5P0.05郑州牧 专学报1997年各试验组小肠中淀粉酶活性均比对照组有所提高,A到D组依次比对照组提高了3.2、2.2、3.5、1.2倍,t检验结果只有C组达到显著水平(尸 0.05)。这一试验结果证实了芽抱杆菌可提高动物肠道中酶活性的观点。以前的研究就发现,常规猪十二指肠 和空肠中的碳水化合物酶和肤酶活性均高于无菌猪(S zab O,1 97 9),对鸡(S idd on s和C oa te s,1972)也有同样报道。C冶1 1in gto n(1 990)在仔猪日粮中使用微生物制剂,结果发现 肠粘膜中蔗糖酶、乳糖酶及三肤酶活性显著提高。本研 究中只有C种使得淀粉酶活性无论在十二指肠或空肠段均显著提高(尸O,0 5),说明这种芽抱杆菌制剂较其它三种具有较强提高酶活性的性能,从而构成这种制剂显著提高猪对养分的消化率,最终提高生产性能的主 要原因之一。本试验也证明,淀粉酶活性与不同的肠段或位置有关,小肠中十二指肠段比空肠段高。这与多数以前报道(Man ner s和Ste v e n s,1972;Kidder和Man n ers,1976,1978,1980;MeCra eken,1984;C oi l in gt on,19 90)得 出的肠道近端比远端酶活性高的结果相类似。参考文献IC心11ing to n,G.K.et.al.19 90.Theinf lu en eeofin el比io nofeitheranantib otieo rprobiotieinthed ieto nthede ve loPmento fdige stivee n zymea etivityinthepig.Brit.J.Nutr.64:59 一702Hate,O.Ma nd New tonG.L.1979.Effe etofan onviab leLa et obaeil lu ssPe cie sf er ment atio nPro dueto nPe r-f or maneeofpi罗.J.AJlim.S ci.48:770一 7753Hill,I.R.,R.Ke nwo rthyand P.Por te r.1970.Studie so ntheeff e cto odiet aryL刁et oh aeil lu so nintes t in a la ndurina rya mine sinPig sinr e latio nt owear i lingandl幻st 一weanlingdia r rhea.Re s.Vet.反1.11:3 204Ker shaw,G.F.e tal.1966.La etieand拟liumaerylate:eff e cto ngr o机h,rateand ba ete ria lf lo raintheinte s-tineo fwea ne dpi多.Vet.Re c,79:29 65P Ol lmann.D.S.19 80,Effeetso fmiero bia lfeedad ditive so nPer f O r manc eofstar tera ndgrow i呢一f inishi雌Pig S.J.Allim反1.51:577 一58 1