中药材检验8.ppt

薄层层析可分为吸附薄层层析和分配薄层层析，我们常用的是吸附薄层层析。吸附薄层层析的原理即不同物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断的吸附、解吸附、再吸附、再解吸附。易被吸附的物质相对移动得慢，难被吸附的物质相对移动的快，经过一段时间的展开，不同物质就彼此分开，从而形成相互分离的斑点。1 1 薄层色谱的规范化操作薄层色谱的规范化操作1.1薄层板的制备市售薄层板：临用时要活化，即110加热30分钟。自制薄层板：除另有规定外，取1份吸附剂和3份水（或相应的溶剂），向一个方向研磨，研至有些挂壁，除去表面气泡后，倒入涂布器中，移动速度要均匀，板的厚度0.2-0.3mm,在平台上晾干，110加热30分钟进行活化。1.2点样点样时不要刺破板面。点样后将板放入干燥器中，待溶剂完全挥干后再进行展开。高效板 普通板距底边距离 8-10mm 10-15mm 圆点直径 2mm 3mm条带宽度 4-8mm 5-10mm点间距 5mm 8mm2 2 影响薄层色谱的主要因素影响薄层色谱的主要因素 薄层色谱是一种敞开系统的色谱技术，除材料和器材外，外界环境条件对被分离物质的层析行为影响较大，其次由于分析的全过程是横向的离线多步操作，所以操作技巧也明显影响色谱质量，因而薄层色谱是一种较难驾驭的技术。为提高薄层色谱分离水平,需注意以下几个影响因素.2.1供试品溶液的影响供试品溶液纯度影响:如果供试品提取过程中带来杂质太多,那么薄层色谱斑点很难辨认（如图）。制备样品所用的溶剂一般要求溶解度不宜太大，粘度不宜太高，沸点适中。供试品溶液浓度的影响:供试品溶液浓度过浓,易产生拖尾或形成一条甚至展不上去。解决办法是将供试品稀释。供试品溶液纯度影响供试品溶液浓度影响2.2薄层板质量的影响薄层板质量对色谱质量有很大影响，如使用不合格的预制板或手铺不均匀的自制板，得到的谱图很难辨认（如图）。因此，薄层板的制备一定要均匀。2.3上样技术的影响薄层色谱的点样量无论是供试品还是对照品均不宜过大，点样量过大斑点分离不清（如图）。2.4吸附剂的活性与相对湿度的影响吸附剂的活性是由表面能与表面积决定的。表面积越大，吸附力越大，活性越高。硅胶之所以有吸附力，是由于表面有众多硅醇基，硅醇基的活泼羟基及游离羟基与极性化合物或不饱和化合物形成氢键所致。但硅醇基是亲水性基团，很容易吸水形成水合硅醇基而失去活性。因此相对湿度对其影响很大（如图）1、2 为白芍 3、4 为赤芍 相对湿度小于30%下展开，二者不易区分，在高湿度下80%以上展开色谱分离度提高，二者可区分开。1-51-5样品样品 6 6黄连对照药材黄连对照药材 7 7盐酸小糪碱，在相对盐酸小糪碱，在相对湿度低时较相对湿度较高时，分离效果好。湿度低时较相对湿度较高时，分离效果好。2.5溶剂蒸气的影响薄层色谱的特点是溶剂的蒸汽在展开箱中也参与色谱展开而形成三维的层析过程，因此展开箱一定要饱和即预平衡。否则影响分离效果（如图）氨蒸气饱和的影响展开剂相差极性大出现解混现象(或分层)展开剂予平衡的影响2.6温度的影响在相对湿度恒定的条件下，一般在较高温度时，Rf值高；反之，Rf值低（如图）。如:人参在低温时（10以下）分离效果好，甘草在高温时（28以上）分离效果好。2.7其他因素影响 如果喷显色剂后,整板均不显色,那么要考虑显色剂有问题.如果显色后斑点在原点未动,那么要考虑溶剂有问题.总之：薄层色谱是一个分离机制复杂，而影响因素较多的过程。因此，我们在操作过程中要注意影响质量的因素，出现问题查找原因，做好系统实用性试验，以得到满意的分离效果。八、贮藏与保管问题 中药材及中药饮片应分别贮藏,有些企业将购进的中药饮片放到中药材库，而且包装也不符合规定。中药材贮藏过程中，由于管理不当，在外界条件和自身性质的的相互作用下，会逐渐发生物理及化学变化，出现发霉、虫蛀、变色、变味、泛油、含量降低等现象。那么在贮藏过程中要根据药材的性质，做好在库养护。易发霉的药材：川牛膝、玉竹、天冬，当归、怀牛膝、百部、天花粉、独活、麦冬、苍术、商路、远志等，它们含有霉菌生长需要营养物质，在适宜的条件下及易生霉。易生虫的药材：山药、泽泻、板蓝根、桔梗、防己、薏苡仁、柏子仁、北沙参等，它们含有淀粉和糖等成分，极易虫蛀。易变色的药材：枸杞子、玫瑰花、月季花、款冬花、菊花、红花、金银花、槐花、莲须、佛手、麻黄等，这些品种日晒易变色，宜置阴凉干燥处。易泛油的药材：柏子仁、郁李仁、苦杏仁、桃仁、斑蝥、火麻仁、党参、板蓝根、肉豆蔻、牛膝等。毒性中药材:砒石、砒霜、水银、生马钱子、生川乌、生草乌、生白附子、生附子、生半夏、生南星、生巴豆、斑蝥、青娘虫、红娘虫、生甘遂、生狼毒、生藤黄、生千金子、生天仙子、闹洋花、雪上一支蒿、红升丹、白降丹、蟾酥、洋金花、红粉、轻粉、雄黄。谢谢!