HCMV-DNA在不同类型标本中的检出率差异研究.pdf

m u n o l,2 0 1 8,1 8(1 0):6 4 8-6 5 9.7M I L L AN O,R A F A E L-VA L D I V I A L,T O R R A D EM E,e t a l.I n t r a c e l l u l a r I F N-g a mm a a n d I L-2 e x p r e s s i o n m o n i t o r i n g a s s u r-r o g a t e m a r k e r s o f t h e r i s k o f a c u t e r e j e c t i o n a n d p e r s o n a l d r u g r e-s p o n s e i n d e n o v o l i v e r t r a n s p l a n t r e c i p i e n t sJ.C y t o k i n e,2 0 1 3,6 1(2):5 5 6-5 6 4.8KAUR S,B AN S A L Y 2,KUMA R R,e t a l.A p a n o r a m i c r e v i e w o f I L-6:S t r u c t u r e,p a t h o p h y s i o l o g i c a l r o l e s a n d i n h i b i t o r sJ.B i o o r g M e d C h e m,2 0 2 0,2 8(5):1 1 5 3 2 7.9KOH H J,J OO J,CHO M L,e t a l.P r o i n f l a mm a t o r y a n d a n t i-i n-f l a mm a t o r y c y t o k i n e b a l a n c e i n p a t i e n t s w i t h c i r r h o t i c h e p a t i t i s d u r i n g l i v e-d o n o r l i v e r t r a n s p l a n tJ.E x p C l i n T r a n s p l a n t,2 0 1 3,1 1(1):3 9-4 3.1 0HA S S AN L,B U E NO P,F E R R N C I,e t a l.E a r l y p o s t o p e r a t i v e r e s p o n s e o f c y t o k i n e s i n l i v e r t r a n s p l a n t r e c i p i e n t sJ.T r a n s p l a n t P r o c,2 0 0 6,3 8(8):2 4 8 8-2 4 9 1.通信作者,E-m a i l:d r d o n g 1 6 3.c o m。论 著HCMV-D NA在不同类型标本中的检出率差异研究徐 爽,吕晓丽,王 琳,郜赵伟,董 轲空军军医大学第二附属医院检验科,陕西西安 7 1 0 0 3 8 摘 要:目的 分析不同标本种类检测不同疾病患者人巨细胞病毒核酸(HCMV-D NA)的阳性率,为临床患者进行HCMV感染诊治提供依据。方法 以该院2 0 1 3年至2 0 2 1年接诊患者(住院、门诊)为分析对象,采用实时荧光定量P C R法对患者血清、尿液、乳汁(幼儿患者母亲乳汁)、组织(肠黏膜病变组织)进行HCMV-D NA检测。结果 不同疾病患者,标本种类不同,检出率大相径庭,血液病患者血清检测HCMV-D NA的阳性率为1 7.8 6%,而尿液的阳性率为6 3.1 0%,差异有统计学意义(2=3 6.6 7 5,P0.0 0 1);溃疡性结肠炎(U C)患者血清检测HCMV-D NA的阳性率为4.1 6%,而组织的阳性率为7 9.1 7%,差异有统计学意义(2=5 5.5 4 3,P0.0 0 1);小儿患者血清检测HCMV-D NA的阳性率为8.8 7%,而小儿尿液阳性率为6 3.7 1%,差异有统计学意义(2=8 0.6 4 4,P0.0 0 1),小儿患者血清检测HCMV-D NA的阳性率为9.0 9%,而小儿其母亲乳汁的阳性率为7 4.5 4%,差异有统计学意义(2=3 2.8 2 5,P0.0 0 1)。结论 血液病患者选择尿液检测HCMV-D NA比血清检出率高,溃疡性结肠炎(U C)患者选择肠黏膜病变组织检测HCMV-D NA比血清检出率高,小儿患者可联合检测尿液及其母亲乳汁HCMV-D NA,为小儿感染HCMV诊断提供了有力的依据;故标本种类的选择对患者HCMV感染的早期诊断有重要意义。关键词:尿液;乳汁;组织;血液病;人巨细胞病毒核酸S t u d y o n t h e d i f f e r e n c e o f d e t e c t i o n r a t e o f H CMV-D N A i n d i f f e r e n t t y p e s o f s p e c i m e n sXU S h u a n g,L V X i a o l i,WANG L i n,G A O Z h a o w e i,D ONG K eD e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,t h e S e c o n d A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f A i r F o r c e M i l i t a r y M e d i c a l U n i v e r s i t y,X i a n,S h a a n x i 7 1 0 0 3 8,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o a n a l y z e t h e p o s i t i v e r a t e o f HCMV-D NA i n p a t i e n t s w i t h d i f f e r e n t d i s e a s e s,a n d t o p r o v i d e e v i d e n c e f o r d i a g n o s i s a n d t r e a t m e n t o f HCMV i n f e c t i o n i n c l i n i c a l p a t i e n t s.M e t h o d s T h e p a t i e n t s(i n p a t i e n t s a n d o u t p a t i e n t s)a d m i t t e d t o t h e S e c o n d A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f A i r F o r c e M i l i t a r y M e d i c a l U n i v e r-s i t y f r o m 2 0 1 3 t o 2 0 2 1 w e r e a n a l y z e d.T h e s e r u m,u r i n e,M i l k(m o t h e r s m i l k o f i n f a n t p a t i e n t s)a n d T i s s u e(m u c o s a l l e s i o n t i s s u e)o f t h e p a t i e n t s w e r e d e t e c t e d b y r e a l-t i m e f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v e P C R.R e s u l t s T h e p o s i t i v e r a t e o f HCMV-D NA w a s 1 7.8 6%i n s e r u m a n d 6 3.1 0%i n u r i n e,t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s i g-n i f i c a n t(2=3 6.6 7 5,P0.0 0 1).T h e p o s i t i v e r a t e o f HCMV-D NA w a s 4.1 6%i n s e r u m a n d 7 9.1 7%i n t i s-s u e o f p a t i e n t s w i t h u l c e r a t i v e c o l i t i s(U C),t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(2=5 5.5 4 3,P0.0 0 1).T h e p o s i t i v e r a t e o f s e r u m HCMV-D NA i n c h i l d r e n w a s 8.8 7%,T h e p o s i t i v e r a t e o f u r i n e i n c h i l d r e n w a s 6 3.7 1%,t h e d i f f e r e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(2=8 0.6 4 4,P0.0 0 1).T h e p o s i t i v e r a t e o f HCMV-D NA i n s e r u m o f c h i l d r e n w a s 9.0 9%.T h e p o s i t i v e r a t e o f c h i l d r e n s m o t h e r s m i l k w a s 7 4.5 4%,t h e d i f f e r-e n c e w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(2=3 2.8 2 5,P0.9 8。阴阳性判断:(1)对于测定C t 3 9的样本,报告为人巨细胞病毒D NA阳性;(2)对于C t 3 9的样本,同时,内标 检 测 为 阳 性(C t4 0),报 告 注 明HCMV-D NA低于检测下限;若内标C t 4 0或无显示,则该样本的检测结果无效,应查找并排除原因,并对此样本进行重复实验。定量结果:(1)对于定值在4.0 0 E1 02c o p y/m L4.0 0 E1 09c o p y/m L之间的样本,报告相应的测定 结 果;(2)对 于 测 定 值4.0 0 E1 09c o p y/m L的样本,报告注明4.0 0 E1 09c o p y/m L,若需精确定量可根据结果,将样本稀释至4.0 0 E1 09c o p y/m L以下在复测;(3)对于测定值4.0 0 E1 02c o p y/m L的样本报告样本中HCMV-D NA含量低于试剂盒检测下限。1.5 统计学处理 均采用S P S S 2 6.0统计软件包进行分析,组间比较采用2检验,计数资料采用例数或百分率表示。以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结 果2.1 血液病患者血清及尿液标本HCMV-D NA检测结果 血液病患者血清检测HCMV-D NA的阳性率为1 7.8 6%,而尿液的阳性率为6 3.1 0%,差异有统计学意义,故血液病患者检测尿液HCMV-D NA更有利于早期诊断患者感染HCMV的情况。见表1。2.2 溃疡性结肠炎患者血清及组织标本HCMV-D NA检测结果 溃疡性结肠炎患者血清检测HC-MV-D NA的阳性率为4.1 6%,而组织的阳性率 为421国际检验医学杂志2 0 2 3年第4 4卷Z7 9.1 7%,差异有统计学意义,故溃疡性结肠炎患者检测组织HCMV-D NA更有利于早期诊断患者感 染HCMV的情况。见表2。表1 8 4例血液病患者血清及尿液标本HCMV-D NA 检测结果比较标本种类n阳性例数阳性率(%)2P血清8 41 51 7.8 63 6.6 7 50.0 0 1尿液8 45 36 3.1 0表2 4 8例溃疡性结肠炎患者血清及组织标本 HCMV-D NA检测结果比较标本种类n阳性例数阳性率(%)2P血清4 824.1 65 5.5 4 30.0 0 1组织4 83 87 9.1 72.3 幼儿血清、尿液标本HCMV-D NA检测结果 小 儿 患 者 血 清 检 测HCMV-D NA的 阳 性 率 为8.8 7%,而小儿尿液的阳性率分别为6 3.1 0%和,差异均有统计学意义,故小儿患者检测尿液HCMV-D NA更有利 于 早 期 诊 断 患 者 感 染HCMV的 情 况。见表3。表3 1 2 4例幼儿血清及尿液标本HCMV-D NA 检测结果比较标本种类n阳性例数阳性率(%)2P血清1 2 41 18.8 78 0.6 4 40.0 0 1尿液1 2 47 96 3.7 12.4 幼儿血清、其母亲乳汁标本HCMV-D NA检测结果 小儿患者血清检测HCMV-D NA的阳性率为9.0 9%,而小儿其母亲乳汁的阳性率分别为7 4.5 4%,差异均有统计学意义,故小儿患者检测尿液HCMV-D NA更有利于早期诊断患者感染HCMV的情况。见表4。表4 5 5例幼儿血清及其母亲乳汁标本HCMV-D NA 检测结果比较标本种类n阳性例数阳性率(%)2P血 清(幼儿)5 51 19.0 93 2.8 2 50.0 0 1乳 汁(幼儿母亲)5 54 17 4.5 42.5 通过表3、表4的研究结果,可以看出小儿患者可联合检测尿液及其母亲乳汁HCMV-D NA,为小儿感染HCMV诊断提供了有力的依据。3 讨 论HCMV属于疱疹病毒科,是一种特异性的D NA病毒,为已知人类疱疹病毒中最大的一组病毒,自首次分离出来后被证实是一种在人群中广泛存在的感染因子3。因HCMV在体内可感染T细胞、B细胞、NK细胞及单核细胞,进一步造成免疫抑制,因此免疫功能低下者较正常人更易感染。随着现代生物医学的发展,造血干细胞移植取得了长足进步,尤其是在血液恶性疾病的危险分期和分层治疗中得到了广泛应用,大大改善了疾病的预后,但移植后细胞免疫和体液免疫功能下降,导致患者易发生病毒(单纯疱疹病毒、带状疱疹病毒、E B病毒、巨细胞病毒)感染,其中HCMV感染发生率较高已被证实4,但由于 在HCMV感染早期,机体刚开始产生的I g M时,血循环内只有微量的病毒颗粒,并未达到检测标本含有 HC-MV的 I g M 5,但是此时体内病毒颗粒复制最为活跃同时随肾脏大量排出 6,故检测尿液HCMV-D NA可提高血液病患者HCMV感染的阳性率,同时表1也显示血液病患者尿液检出HCMV-D NA阳性率明显高于血清。溃疡性结肠炎(U C)是一种病因尚未明确的慢性非特异性炎性疾病,它属于炎症性肠病,近年来溃疡性结肠 炎 发 病 率 逐 年 增 高,已 成 为 消 化 系 统 常 见病7-8。有研究表明,最近几年临床中U C合并HC-MV感染的发生率不断升高,且CMV感染是导致重度U C或使得U C病情加重的一个因素9。有研究报道,促炎因子的释放可加重U C肠炎,CMV可激活N F-k B信号通路1 0,诱导促炎细胞因子,包括C O X-2、5-L O等表达,导致炎症反应恶化;国外也很早有研究HCMV原发性感染后会潜伏于人体组织形成终身感染1 1,但通常呈潜伏感染,当机体免疫功能下降时,潜伏的病毒可再激活而致病,目前越来越多的研究也显示U C合并HCMV感染时,抗病毒治疗可显著改善病情,提高临床缓解率,改善U C患者的临床结局,降低死亡率和手术干预的概率1 2,故能准确快速的诊断有无CMV感染对于U C患者而言迫在眉睫,本研究显示肠黏膜病变组织检出HCMV-D NA的阳性率明显高于血清,所以患者肠黏膜病变组织为现阶段首选的标本种类。巨细胞病毒感染为全球分布,目前国内缺乏围产期获得性HCMV感染状况的大样本调查,只有少数地区进行了区域的感染率调查:北京地区新生儿围产期HCMV感染率为2 0.2 2%1 3,武汉地区新生儿围产期HCMV感染率为1 5.3 9%1 4。巨细胞病毒感染为婴幼儿的常见感染疾病,主要通过产道、胎盘以及母乳传播,对婴幼儿的危害性较大,可导致患儿多器官受损、肝肾功能不 良、肺炎、智力下降、血小板下降等,病情严重的患儿甚至会死亡1 5-1 6。大约9 0.0 0%的CMV新生儿在出生时临床无症状,但在之后其发521国际检验医学杂志2 0 2 3年第4 4卷Z育 过 程 中 发 生 神 经 功 能 受 损 后 遗 症 的 风 险 高 达5.0 0%1 5.0 0%1 7。因 此,快 速、准 确 的 检 测 出HCMV-D NA为临床工作制定减少或预防感染不良后遗症的有效策略提供了有力依据。近年来越来越多的研究表明,在先天性感染高危新生儿中进行HC-MV-D NA检测可以确保准确诊断,同时使用抗病毒药物干预可改善感染幼儿的预后1 8-2 0,故选择合适的标本提高HCMV-D NA的检出率显得尤为重要,通过表3、表4的数据分析,可以看出联合检测患儿尿液其母亲乳汁HCMV-D NA对临床诊断HCMV感染的重要性,本研究也与黄斌2 1等的观点一致。综上所述,血液病患者检测尿液HCMV-D NA、U C患者检测肠黏膜病变组织HCMV-D NA、而幼儿患者联合检测尿液及其母亲乳汁HCMV-D NA,是现阶段最有利于诊断患者感染HCMV的最佳选择,大大提高了HCMV的检出率防止漏诊,以便及时给予抗病毒治疗。对降低疾病的严重性 和死亡率 至关重要。参考文献1 阮强,何蓉.人巨细胞病毒感染的实验室检测与诊断.实用儿科临床杂志,2 0 1 2,2 7(1 0):7 2 9-7 3 1.2L I N YH,Y EH C Y.R e c u r r e n t c y t o m e g a l o v i r u s c o l i t i s w i t h m e g a-c o l o n i n a n i mm u n o c o m p e t e n t e l d e r m a nJ.J M e d V i r o l,2 0 1 0,8 2(4):6 3 8-6 4 1.3MUO Z-C O B O B,S O L ANO C,C O S T A E,e t a l.D y n a m i c s o f c y-t o m e g a l o v i r u s(CMV)p l a s m a D NA e m i a i n i n i t i a l a n d r e c u r r e n t e p i s o d e s o f a c t i v e CMV i n f e c t i o n i n t h e a l l o g e n e i c s t e m c e l l t r a n s-p l a n t a t i o n s e t t i n g:i m p l i c a t i o n s f o r d e s i g n i n g p r e e m p t i v e a n t i v i r a l t h e r a p y s t r a t e g i e sJ.B i o l B l o o d M a r r o w T r a n s p l a n t,2 0 1 1,1 7(1 1):1 6 0 2-1 6 1 1.4 金欣,陈建魁,于农,等.荧光定量聚合酶链反应监测造血干细胞移植后巨细胞病毒感染J.中国卫生检验杂志,2 0 1 0,2 0(6):1 4 3 1-1 4 3 2。5AGU I A R R O,V I E GA S F C,F E R NAN D E Z R Y,e t a l.T h e p r e p a-t e l l a r b u r s a:c a d a v e r i c i n v e s t i g a t i o n o f r e g i o n a l a n a t o m y w i t h m r i a f t e r s o n o g r a p h i c a l l y g u i d e d b u r s o g r a p h yJ.A J R Am J R o e n t-g e n o l,2 0 0 7,1 8 8(4):3 5 5-3 5 8.6D Y E S F,C AMP A GNA-P I N T O D,D Y E C C,e t a l.S o f t-t i s s u e a-n a t o m y a n t e r i o r t o t h e h u m a n p a t e l l aJ.J B o n e J o i n t S u r g Am,2 0 0 3,8 5-A(6):1 0 1 2-1 0 1 7.7S Z I G E THY E,MC L A F F E R T Y L,GOYA L A.I n f l a mm a t o r y b o w e l d i s e a s eJ.C h i l d A d o l e s c e n t P s y c h N o r t h Am e r i c a,2 0 1 1,5 8(4):9 0 3-9 2 0.8OUYANG Q,XU E L Y.I n f l a mm a t o r y b o w e l d i s e a s e i n t h e 2 1(s t)c e n t u r y i n C h i n a:t u r n i n g c h a l l e n g e s i n t o o p p o r t u n i t i e sJ.J D i g D i s,2 0 1 2,1 3(4):1 9 5-1 9 9.9 温红珠,赵秋枫,方邦江,等.中西医结合治疗溃疡性结肠炎过渡使合并坏疽性脓皮病一例J.中国中西医结合杂志,2 0 1 9,3 9(6):7 5 6-7 5 8.1 0I S EM E,GU S T EM S M,ME S S E R D E M,e t a l.T h e a c t i v a t o r p r o-t e i n 1 b i n d i n g m o t i f s w i t h i n t h e h u m a n c y t o m e g a l o v i r u s m a j o r i mm e d i a t e-e a r l y e n h a n c e r a r e f u n c t i o n a l l y r e d u n d a n t a n d a c t i n a c o o p e r a t i v e m a n n e r w i t h t h e N F-k a p p a B s i t e s d u r i n g a c u t e i n f e c-t i o nJ.J V i r o l,2 0 1 1,8 5(4):1 7 3 2-1 7 4 6.1 1B E L L ON EM,S A C C I D C,S T E I G E R D A,e t a l.M a g n e t i c r e s o-n a n c e i m a g i n g i n h o u s e m a i d,s k n e eJ.M a g n R e s o n I m a g i n g,1 9 8 7,5(3):1 7 5-1 7 7.1 2郭亚惠,尹凤荣,郭金波,等.溃疡性结肠炎合并巨细胞病毒感染的治疗进展J.国际病毒学杂志2 0 2 0,2 7(3):2 6 2-2 6 4.1 3北京地区母婴巨细胞病毒感染调查协作组.北京地区母婴巨细胞病毒感染状况调查J.中华围 产医学杂志,2 0 1 2,1 5(8):4 5 9-4 6 1.1 4润袁敏,管建,徐春芬.武汉地区儿童感染巨细胞病毒状况J.广东医学杂志,2 0 1 3,3 4(1 8):2 8 4 9-2 8 5 1.1 5张慧华,方水晶.两种实验室检测方法在小儿巨细胞病毒感染诊断中的比较J.中国妇幼保健,2 0 1 8,3 3(1 3):3 0 0 0-3 0 0 2.1 6于锰锰,李小芹.HCMV-P P 6 5抗原检测在小儿巨细胞病毒感染诊断中的应用价值J.中国现代医药杂志,2 0 1 8,2 0(5):7 9-8 0.1 7N I C L OUX M,P E T E RMAN L,P A R O D I M,e t a l.O u t c o m e a n d m a n a g e m e n t o f n e w b o r n s w i t h c o n g e n i t a l c y t o m e g a l o v i r u s i n f e c-t i o nJ.A r c h P e d i a t r,2 0 2 0,2 7(3):1 6 0-1 6 5.1 8N I S H I D A K,MO R I OKA I,NAKAMA C H I Y,e t a l.N e u r o l o g i c a l o u t c o m e s i n s y m p t o m a t i c c o n g e n i t a l c y t o m e g a l o v i r u s-i n-f e c t e d i n-f a n t s a f t e r i n t r o d u c t i o n o f n e w b o r n u r i n e s c r e e n i n g a n d a n t i v i r a l t r e a t m e n tJ.B r a i n D e v,2 0 1 6,3 8(2):2 0 9-2 1 6.1 9潘颖,韩小雪,李瑞满.人巨细胞病毒在妊娠期筛查中的意义J.中国实用妇科与产科杂志,2 0 2 1,3 7(1 0):1 0 1 2-1 0 1 6.2 0朱艳,周灵玲,蓝俊伟,等.人巨细胞病毒D NA检测在小儿人巨细胞病毒感染诊断中的应用J.中华全科医学,2 0 2 0,1 8(3):4 6 0-4 6 2.2 1黄斌,刘素云,万丽佳,等.不同时段尿标本检测巨细胞病毒在小儿人巨细胞病毒感染中的应用J.中国当代医药,2 0 1 8,2 5(1 2):1 1 9-1 2 1.论 著个体化临床干预对宫颈癌患者术后治疗依从性、负性情绪及生活质量的影响商 双1,江佳东1,刘霞琴2,刁雯静1,刘 岚2复旦大学附属妇产科医院:1.宫颈疾病门诊 2.门诊手术室,上海 2 0 0 0 1 1 摘 要:目的 探讨宫颈癌手术患者应用个体化护理干预措施改善治疗依从性、负性情绪、生活质量的实际作用。方法 选择2 0 1 8年1月至2 0 2 2年2月在本院进行手术治疗的1 0 2例宫颈癌患者作为观察对象,运用数字随机表法设为常规组(常规干预)、研究组(个体化临床干预),各5 1例。结果 研究组治疗依从性、生活质量621国际检验医学杂志2 0 2 3年第4 4卷Z