苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响.pdf

动物营养学报，（）：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响樊 政 刘远斌 张翘楚 宋亚汝 楚丽翠 侯丹熹 左建军 王伟唯（华南农业大学动物科学学院，广州；帝斯曼（中国）有限公司，上海）摘 要：本试验旨在探究苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响。选取 只 日龄 雌性肉仔鸡，随机分为 组，每组 个重复，每个重复 只。对照组（组）和模型组（组）肉仔鸡饲喂基础饲粮；苯甲酸组（组）肉仔鸡饲喂基础饲粮 苯甲酸。组和 组肉仔鸡分别于 日龄感染艾美尔球虫，于 日龄期间感染产气荚膜梭菌。试验期 。结果显示：）与 组相比，球虫和产气荚膜梭菌联合感染显著降低了 日龄和 日龄肉鸡的平均末重（）、平均日增重（）及 日龄和 日龄肉鸡的平均日采食量（）（）；显著提高了肉鸡 日龄时的肝脏指数和法氏囊指数（）；显著提高了肉鸡 日龄时血清中白细胞介素（）、肿瘤坏死因子（）及 日龄时血清中白细胞介素（）含量（）；显著降低了肉鸡 日龄时血清中免疫球蛋白（）含量（）；显著降低了肉鸡 日龄时空肠和 日龄时回肠的绒毛高度与隐窝深度比值（）（），显著提高了肉鸡 日龄时空肠和回肠的隐窝深度（）（）；显著上调了肉鸡 日龄时空肠、回肠白细胞介素（）相对表达量（）；显著下调了肉鸡 日龄时空肠闭合小环蛋白（）、黏蛋白（）及 日龄时空肠、回肠闭锁蛋白（）和 相对表达量（）。）与 组相比，添加苯甲酸可显著缓解因球虫和产气荚膜梭菌联合感染导致的肉鸡、及 的降低（）；显著降低受感染肉鸡 日龄时肝脏指数和法氏囊指数（）；显著降低受感染肉鸡 日龄时血清中 含量（）；显著提高受感染肉鸡 和 日龄时血清中免疫球蛋白（）、免疫球蛋白（）含量（）；显著提高受感染肉鸡 日龄时空肠和回肠 、回肠绒毛高度（）及 日龄时空肠（）；显著降低受感染肉鸡 日龄时空肠（）；显著降低受感染肉鸡 日龄时回肠、及 日龄时回肠 相对表达量（）；显著提高受感染肉鸡 日龄时空肠 相对表达量（）。综上所述，饲粮中添加 苯甲酸能有效缓解球虫和产气荚膜梭菌联合感染对 日龄肉鸡造成的肠道炎症及肠道屏障损伤，增强肉鸡免疫功能，改善肠道组织形态，维护肠道健康，从而提高生长性能。关键词：苯甲酸；球虫；产气荚膜梭菌；肉鸡；生长性能；免疫功能；肠道健康中图分类号：文献标识码：文章编号：（）收稿日期：作者简介：樊 政（），男，湖北荆州人，硕士研究生，动物营养与饲料科学专业。：通信作者：左建军，教授，博士生导师，：；王伟唯，副研究员，硕士生导师，：饲料端“禁抗”后，畜禽疾病频发，其中禽坏死性肠炎（，）尤为突出。又称肠毒血症，是一种主要由 型产气荚膜梭菌（，）引起的肠道疾病，在动 物 营 养 学 报 卷生产中常与球虫病相伴或相继发生。家禽感染 后，食欲减退，肠道出血、溃疡、坏死，腹泻率提高，生长性能降低，急性 感染还可导致鸡群突然大量死亡。给全球养殖业带来了巨大的经济损失，据统计，年经济损失高达 亿美元。因此，为了遏制禽 的病发率，兼顾抗生素杀菌抑菌和促生长两大特性，寻求绿色安全的饲用抗生素替代品迫在眉睫。研究表明，短链有机酸能够作用于畜禽小肠后端和大肠，增强肠道屏障功能和免疫功能，并在消化道后端创造弱酸性环境，抑制病源微生物的定植，调控肠道微生态平衡，提高养分消化率和生长性能，且无污染、无残留，应用前景广阔。苯甲酸作为最简单的芳香酸，具备短链有机酸的功能。目前苯甲酸在正常饲养肉鸡上的应用研究已经较多，但关于苯甲酸在预防球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡上的应用研究较少。因此，本研究旨在探究苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康相关指标的影响，为白羽肉鸡生产中缓解 感染提供一种新的营养策略。材料与方法 试验材料 试验所采用的苯甲酸（含量）由上海某公司提供。鸡球虫病三价活疫苗（堆型、巨型、柔嫩艾美尔球虫混合株）购自佛山某生物技术有限公司。产气荚膜梭菌（编号：，主要产生 毒素）购自广东省微生物菌种保藏中心。试验设计 试验选用体况正常、健康的 日龄 雌性白羽肉仔鸡 只，随机分为 组，分别为对照组（组）、模型组（组）和苯甲酸组（组），每组 个重复，每个重复 只，各组试验鸡初始体重差异不显著（）。组和 组肉仔鸡饲喂 基 础 饲 粮；组 肉 仔 鸡 饲 喂 基 础 饲 粮 苯甲酸。组和 组肉仔鸡在 日龄时每只灌服 混合型球虫卵液（含 个混合虫卵），再于 日龄期间每天灌服 产 气 荚 膜 梭 菌 菌 液（活 菌 数 为 ）；组肉鸡同期灌服等量无菌的生理盐水或庖肉培养基。试验期为 。基础饲粮 试验采用玉米豆粕型基础饲粮，基础饲粮根据我国肉鸡饲养标准（）配制，其组成及营养水平见表。饲养管理 饲养试验于广东省畜牧研究所家禽代谢室进行。各组肉鸡饲养环境和管理条件保持一致且符合 白羽肉鸡饲养要求，按照所在试验场地的常规管理规程和免疫程序进行饲养管理。肉鸡饲养期间，自由采食和饮水。饲养前 保持 光照，之后每天光照时间减少 ，直至每天光照时间恒定为 。试验鸡除每周称重 次外，在 日龄和 日龄攻毒前禁食 ，攻毒当天进行称重。于 和 日龄进行屠宰取样。表 基础饲粮组成及营养水平（干物质基础）（）项目含量 日龄 日龄 原料 玉米 豆粕 豆油 石粉 食盐 磷酸氢钙 氯化胆碱 蛋氨酸 赖氨酸盐酸盐 预混料）期樊 政等：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响续表 项目含量 日龄 日龄 合计 营养水平 ）代谢能 （）粗蛋白质 钙 总磷 有效磷 赖氨酸 蛋氨酸 蛋氨酸半胱氨酸 色氨酸 苏氨酸 ）预混料为每千克饲粮提供 ：，生物素 ，叶酸 ，泛酸 ，烟酸 ，（），（），（），（），（），（）。）营养水平均为计算值。屠宰取样 分别于 和 日龄：，从每个重复中挑选 只体重接近该重复平均体重的肉鸡，每组 只，共计 只，禁食 后，颈静脉采血 ，静置 后，于 离心 ，分离上层血清，于 保存。将采血后的肉鸡进行解剖，分离器官及肠道，称重免疫器官，收集空肠、回肠组织置于 冻存管中，液氮速冻。取十二指肠、空肠和回肠中段组织 左右，在磷酸盐缓冲液（）中清洗食糜后，置于 多聚甲醛溶液中固定。指标测定 生长性能 每周对试验鸡进行空腹称重，计算 日龄、日龄肉鸡的平均末重（）、平均日采食 量（）、平 均 日 增 重（）和 料 重比（）。免疫器官指数 屠宰前对每只待屠宰试验鸡进行称重，记录活体重，取样后去除肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊周边脂肪，称重并记录，计算器官指数，计算公式为：器官指数器官重（）活体重（）。血清免疫指标 采用酶联免疫吸附测定（）法测定、日龄肉鸡血清中免疫球蛋白（）、免疫球蛋白（）、免疫球蛋白（）含量（试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司）和血清中细胞因子白细胞介素 （）、白细 胞 介 素 （）、白细胞介素（）、肿瘤坏死因子（）含量（试剂盒购自武汉华美生物工程有限公司）。肠道组织形态 将固定好的肠道组织样用于制作苏木精伊红（）染色石蜡切片，并将切片置于显微镜 倍下观察，测量绒毛高度（）、隐窝深度（），并计算二者的比值（）。肠道病理损伤评分 肉鸡肠道损伤评分标准参照张贝贝的文章，评分标准如下：分，无明显损伤；分，小肠的浆膜面和肠系膜严重充血；分，肠壁变薄、变脆、有红色出血点（个）；分，肠腔内有气体，肠壁出现针尖样坏死或溃疡点；分，肠腔内充满气体，肠壁出现成片状坏死或溃疡；分，肠腔内有大量气体，出现弥漫性坏死。肠道屏障及炎症相关基因表达 采用组织总 抽提试剂盒，生工生物工程（上海）股份有限公司提取空肠、回肠组织总，提取完毕后使用 核酸蛋动 物 营 养 学 报 卷白测定仪测定 的浓度与纯度，通过 琼脂糖凝胶电泳确定 完整性。确认提取的总 可用于后续试验后，采用逆转录 试剂盒（南京诺唯赞生物科技股份有限公司）对提取的组织总 进行反转录制备，然后使用实时荧光 仪及 染料体系（南京诺唯赞生物科技股份有限公司）对反转录得到的 进行。以 肌动蛋白（）作为内参基因，采用 法来计算各目的基因的 相对表达量。内参基因，肠道炎症相关基因、，肠道屏障相关基因闭合蛋白（）、闭锁蛋白（）、闭合小环蛋白（）、黏蛋白（）引物序列根据 中 提 供 的 基 因 序 列，使 用 软 件 进行设计，各基因特异性上、下游引物见表。试验所用引物均由北京擎科生物科技有限公司合成。表 特异性引物序列 项目引物序列 （）产物长度 肌动蛋白：白细胞介素：白细胞介素：白细胞介素：白细胞介素：肿瘤坏死因子：闭合蛋白：闭锁蛋白：闭合小环蛋白：黏蛋白：数据处理与分析 试验数据经过 进行初步处理后，采用 统计软件进行单因素方差分析（），方差齐性时使用 氏法多重比较检验组间差异的显著性，方差不齐时使用 检验与 检验判断差异的显著性，试验数据用平均值和均值标准误（）表示，为差异显著，表示有显著趋势。结果与分析 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能的影响 由表 可知，日龄时，组肉鸡 和 与 组相比显著降低（），组肉鸡生长性能与 组和 组差异不显著（）；日龄时，组和 组肉鸡 显著高于 组（），组肉鸡 恢复到 组水平（）；从整个试验期（日龄）来看，组和 组肉鸡、期樊 政等：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响均显著高于 组（），且 组肉鸡 显著高于 组（）。表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能的影响 项目组别 值 日龄 平均初重 平均末重 平均日采食量 平均日增重 料重比 日龄 平均日采食量 平均日增重 料重比 日龄 平均末重 平均日采食量 平均日增重 料重比 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（），不同小写字母表示差异显著（）。下表同。，（），（）苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡免疫器官指数的影响 由表 可知，日龄时，组肉鸡肝脏指数和法氏囊指数显著高于 组和 组（）。日龄时，各组间免疫器官指数差异不显著（）。表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡免疫器官指数的影响 项目组别 值 日龄 肝脏指数 脾脏指数 法氏囊指数 胸腺指数 日龄 肝脏指数 脾脏指数 法氏囊指数 胸腺指数 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡血清细胞因子含量的影响 由表 可知，日龄时，与 组相比，组肉 鸡 血 清、含 量 显 著 提 高（），血清 含量有提高的趋势（）；与 组相比，组肉鸡血清 含量显著降动 物 营 养 学 报 卷低（），血清 含量有降低的趋势（）。日龄时，组肉鸡血清 含量显著高于 组和 组（），各组间肉鸡血清、和 含量差异不显著（）。表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡血清细胞因子含量的影响 项目组别 值 日龄 白细胞介素 白细胞介素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 日龄 白细胞介素 白细胞介素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡血清免疫球蛋白含量的影响 由表 可知，日龄时，与 组相比，组和 组 肉 鸡 血 清 含 量 显 著 降 低（）；与组相比，组肉鸡血清、含量显著提高（）。日龄时，与 组相比，组和 组肉鸡血清 含量显著提高（）；与 组相比，组肉鸡血清 含量显著提高（）。表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡血清免疫球蛋白含量的影响 项目组别 值 日龄 免疫球蛋白 免疫球蛋白 免疫球蛋白 日龄 免疫球蛋白 免疫球蛋白 免疫球蛋白 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道组织形态的影响 由表 可知，日龄时，与 组相比，组肉鸡空肠 显著降低（）；与 组相比，组肉鸡空肠、回肠 和回肠 均显著提高（）。日龄时，与 组相比，组肉鸡空肠和回肠 显著提高（），回肠 显著降低（）；与 组相比，组肉鸡空肠 显著降低（），空肠 显著提高（）。期樊 政等：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道组织形态的影响 项目组别 值 日龄 绒毛高度 空肠 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 绒毛高度 回肠 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 日龄 绒毛高度 空肠 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 绒毛高度 回肠 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道病理损伤评分的影响 由表 可知，日龄时，与 组相比，组肉鸡回肠病理损伤评分显著提高（）。日龄时，与 组相比，组肉鸡空肠病理损伤评分显著提高（）；与 组相比，组肉鸡空肠病理损伤评分显著降低（）。表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道病理损伤评分的影响 项目组别 值 日龄 空肠 回肠 日龄 空肠 回肠 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道炎症因子相关基因表达的影响 由表 可知，日龄时，与 组相比，组肉鸡空肠、回肠 相对表达量显著上调（），空肠（）、回肠（）、回肠（）相对表达量有上调趋势；与 组相比，组肉鸡回肠、相对表达量显著下调（），回肠 相对表达量有下调趋势（）。日龄时，与 组相比，组肉鸡回肠 相对表达量显著降低（）；与 组相比，组肉鸡回肠 相对表达量显著降低（）；空肠炎症因子相关基因 相对表达量各组间均无显著差异（）。苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道屏障相关基因表达的影响 由表 可知，日龄时，与 组相比，动 物 营 养 学 报 卷组肉鸡空肠、相对表达量显著下调（），空肠 相对表达量有下调趋势（）；与 组相比，组肉鸡各肠道屏障相关基因 相对表达量无显著变化（）。日龄时，与 组相比，组肉鸡空肠、回肠 和 相对表达量显著降低（），回肠 相对表达量有降低趋势（）；与 组相比，组空肠 相对表达量显著提高（）。表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道炎症因子相关基因表达的影响 项目组别 值 日龄 白细胞介素 白细胞介素 空肠 白细胞介素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 白细胞介素 白细胞介素 回肠 白细胞介素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 日龄 白细胞介素 白细胞介素 空肠 白细胞介素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 白细胞介素 白细胞介素 回肠 白细胞介素 白细胞介素 肿瘤坏死因子 表 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道屏障相关基因表达的影响 项目组别 值 日龄 闭合蛋白 空肠 闭锁蛋白 闭合小环蛋白 黏蛋白 闭合蛋白 回肠 闭锁蛋白 期樊 政等：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响续表 项目组别 值闭合小环蛋白 黏蛋白 日龄 闭合蛋白 空肠 闭锁蛋白 闭合小环蛋白 黏蛋白 闭合蛋白 回肠 闭锁蛋白 闭合小环蛋白 黏蛋白 讨 论 苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能的影响 大量研究表明，球虫或产气荚膜梭菌感染显著降低肉鸡的体重、和，提高 。本研究也发现，球虫和产气荚膜梭菌联合感染后，肉鸡各阶段、均有不同程度降低。与前人研究相比较，虽然各试验所使用的产气荚膜梭菌菌株和感染模型存在差异，但是均证实了同一结论，即产气荚膜梭菌感染可降低肉鸡的生长性能。球虫感染引起的肠道黏膜损伤是产气荚膜梭菌引起禽类 发生的主要诱导因子之一，预防球虫病也是降低 发病率的有效办法。等报道，饲粮中添加包被苯甲酸可以缓解球虫攻毒带来的肉鸡生长性能下降。黄灵杰等研究也表明，饲粮中添加苯甲酸对球虫攻毒肉鸡体重有提高的趋势。本试验中，在球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡的同时在饲粮中补充苯甲酸，肉鸡生长性能得到显著的提升，基本恢复至 组水平，说明在球虫和产气荚膜梭菌联合感染条件下，饲粮中添加适量苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染造成的肉鸡生长性能下降有一定的恢复效果。推测其原因可能是苯甲酸进入肠道后，在肠道内定点释放，创造弱酸性环境，抑制多种病原体定植，改善肠道健康，减少病原微生物与宿主的营养竞争，增强营养物质吸收，从而提高生长性能，。另外，本研究依旧按照 白羽肉鸡生长阶段（日龄、日龄后）来统计生长性能数据，前人试验中也有采用类似的方式来划分数据采集阶段，但这存在一定的局限性。在本研究中，肉鸡于 日龄预先感染球虫，再于 日龄感染产气荚膜梭菌，二者均为诱导肉鸡 的条件，可合并为一个整体的感染阶段。按照常规感染 攻毒试验的阶段划分规范，本研究应该划分为 个试验阶段，即感染前（日龄）、感染期间（日龄）和感染后的恢复阶段（日龄），并按这 个阶段来采集生长性能数据，以确认正式开展细菌感染 攻毒前各组试验鸡生长性能没有统计学差异，这样处理可能更为合理和规范。苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡免疫功能的影响 机体免疫功能对于维护机体健康至关重要，而免疫器官的发育状态直观反映了免疫功能的强弱，在一定范围内，免疫器官相对重量越大，免疫水平越高，但感染状态下，免疫器官相对重量的增加往往是器官肿大的表现。胸腺、脾脏和法氏囊为家禽的主要免疫器官，肝脏在维持机体代谢平衡的同时也具备一定的免疫功能。本试验发现球虫和产气荚膜梭菌联合感染显著提高了 日龄鸡肝脏指数和法氏囊指数，表现为感染早期肝脏与法氏囊肿大，机体受产气荚膜梭菌感染水平较高。这与孙亚楠、等的研究结果相似，说明球虫和产气荚膜梭菌感染早期机体处于抗感染的高免疫水平状态。而饲粮中添加苯甲酸后，肉鸡感染早期的肝脏与法氏囊的肿大被缓解，表明机体受感染程度降低。推测其原因：一方面在于苯甲酸抑制梭菌生长，另一方面可能是由于苯甲酸进入消化道后，影响了产气荚膜梭菌动 物 营 养 学 报 卷通过肠道向肝脏中的转移，降低了机体的感染程度，进而缓解了肝脏的肿大现象。球虫和产气荚膜梭菌感染可引发机体炎症反应，释放炎性因子。谢涛研究发现，肉鸡感染球虫后血清中白细胞介素（）的分泌水平提高，进一步介导细胞免疫反应，引起肉鸡的肠道损伤，而饲粮中添加酸化剂能够缓解肠道损伤。孙秋娟等试验结果显示，日龄感染产气荚膜梭菌的肉仔鸡血清 含量提高，炎性因子 被证明可诱导发热反应，激活细胞因子网络。本试验中，球虫和产气荚膜梭菌联合感染后，肉鸡 日龄时血清 和 含量显著提高，表明机体炎症水平提高，而在感染的同时补充苯甲酸，肉鸡血清、和 含量降低，含量提高，与前人研究结果基本一致，表明苯甲酸可以更好地调动机体抗炎反应，削弱球虫和产气荚膜梭菌感染带来的炎症反应强度。免疫球蛋白是体液免疫应答中最主要的免疫分子，其最突出的生物学特性是能够特异性地与相应抗原结合，消除侵入体内的异物。免疫球蛋白含量的升高可以体现出机体免疫水平的增强。薛敬洁等研究发现，球虫感染降低了罗曼公雏鸡血清、和 含量。黄灵杰等也报道，球虫攻毒降低了肉鸡 日龄时血清 含量，在补充苯甲酸后，肉鸡 日龄时血清 含量有所提高。本试验中，球虫和产气荚膜梭菌联合感染后，肉鸡 日龄时血清 含量显著下降，补充苯甲酸后，肉鸡血清 和 含量显著提高。与前人研究结果，相似，表明饲粮中添加苯甲酸可在一定程度上缓解球虫和产气荚膜梭菌联合感染导致的体液免疫功能降低。苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道组织形态及肠道病理损伤评分的影响 肠道作为机体营养物质吸收的主要部位，在维持机体健康和提高生长性能上发挥了重要作用。肠黏膜形态结构组成了肠道的机械屏障，能够避免肠道内细菌或抗原物质穿过肠黏膜进入其他组织，是肠道屏障功能的结构基础。肠道、是评价肠道消化吸收能力的重要指标。肠道 增加会促进肠道对营养物质的吸收，增加则对应肠上皮组织分泌消化液的能力减弱，在一定程度上可以反映肠道吸收功能的强弱，比值越高表示消化吸收能力越强。等研究表明，产气荚膜梭菌感染肉鸡的肠道损伤评分显著提高。本研究结果与上述研究结果基本一致，且本研究表明饲粮中补充苯甲酸可降低肠道病理损伤评分。等研究发现，产气荚膜梭菌感染会导致肉鸡肠道 和 显著降低。刘阳等研究也表明产气荚膜梭菌感染显著增加了肉鸡十二指肠，显著降低了十二指肠和回肠 和 。本试验中，球虫和产气荚膜梭菌联合感染显著降低肉鸡 日龄时空肠 和 日龄时回肠 ，显著提高肉鸡 日龄时空肠和回肠，与前人研究结果基本一致，但损伤的肠段略有差异，可能与球虫和产气荚膜梭菌感染的方式及菌株类型不妥有关，但也基本说明球虫和产气荚膜梭菌感染降低了肉鸡肠道吸收能力。补充苯甲酸后，肉鸡 日龄时空肠、回肠 和回肠 得到显著提高，日龄时空肠 和空肠 分别得到的显著提高与降低。这表明添加苯甲酸后，因 感染而降低的肉鸡肠道吸收能力得到了一定程度上的恢复。其原因可能是在较高水平苯甲酸的添加下，肠道 降低，增加机体细胞分裂，使得 增加，提高。另外，有机酸也被证明可以通过促进消化功能的变化和改变肠道微生物的数量来改善肠道形态。苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡肠道炎症及屏障相关基因表达的影响 肠黏膜通过发挥免疫功能抵御产气荚膜梭菌在肠道中的增殖，其激活主要表现为炎症因子的释放。、为促炎细胞因子，在机体的炎症反应中发挥作用，机体受到病原微生物入侵，会刺激其释放。可诱导细胞形态发生改变，释放中性粒细胞，增强 免 疫 细 胞 的 抗 菌 能 力。是调控机体免疫反应、炎症反应和细胞凋亡的关键因子。能够拮抗炎性因子，缓解炎症反应，是一种抗炎细胞因子。病原菌入侵时，会激活免疫反应，促炎细胞因子被释放，但促炎细胞因子过度释放会引发代谢异常和炎症反应，导致机体受到损伤。郭双双研究表明，产气荚膜梭菌感染上调了肠道 和 干扰素（）的表达。等研究发现，感染显著上调了鸡肠道 和 的表达。等也观察到，鸡感染 后，肠道中 的表达量显著增加。等研究显示，产气荚膜梭菌感染肉仔鸡，其肠道 干扰素（）、等基因的 表 期樊 政等：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响达被抑制，而、等基因的 表达被上调。这些研究均表明 感染能诱导宿主基因参与肠黏膜先天性免疫。本试验中，球虫和产气荚膜梭菌联合感染诱导了肉鸡的肠道炎症，导致 日龄肉鸡空肠或回肠的促炎细胞因子、和 抗 炎 细 胞 因 子 相对表达量均增加，在 日龄这些现象得到缓解。等研究发现，相较于产气荚膜梭菌单独感染，球虫和产气荚膜梭菌联合感染后、和 的 表达均被下调，与本研究结果类似。而在球虫和产气荚膜梭菌感染的同时补充苯甲酸，可以观察到 日龄肉鸡肠道促炎细胞因子、的 相对表达量下调，虽未完全恢复至 组水平，但相较于 组已经有了明显的降低，说明饲粮中补充苯甲酸可以缓解因球虫和产气荚膜梭菌感染所导致的炎症反应，预防或缓解 带来的损伤。这与 等的观点相似，推测原因可能是苯甲酸进入后肠部位后，进入有害菌细胞，打破该细胞内酸碱平衡，降低呼吸相关酶的活性，最终杀死有害菌，降低有害菌对肠道的侵害与损伤，缓解肠道损伤，从而下调肠道炎症相关基因的表达。动物的肠道屏障功能能有效抵御病原菌入侵，保障机体健康。肠道机械屏障主要由固有层、肠上皮紧密连接和黏液层组成，在维持肠道健康方面发挥着重要作用。紧密连接主要由、闭合 蛋 白（）和 闭 合 小 环 蛋 白（）构成。其中 和 负责形成肠道屏障；是紧密连接支持结构的基础，具有连接跨膜蛋白与细胞骨架、维持上皮极性等功能。作为小肠黏液层中最主要的黏蛋白成分，可阻碍病原体及毒素等的入侵。夏亿研究显示，产气荚膜梭菌感染导致黏液中 含量减少，肠道屏障功能减弱。张贝贝研究发现，球虫和产气荚膜梭菌联合感染下调了肉鸡肠道 和 的 相对表达量。曹力等研究发现，肉鸡感染产气荚膜梭菌后，肠道 的 相对表达量下调，并伴随着肠上皮紧密连接的通透性增加。本研究中，球虫和产气荚膜梭菌联合感染 后，肉鸡 日龄时空肠、和 回 肠、的 相对表达量被下调，表明肉鸡小肠机械屏障受到破坏，直至感染 后（日龄）小肠机械屏障仍旧存在一定程度的损伤。有报道称酸化剂可以通过调控肠道免疫功能抑制炎症反应，进而维持肠道屏障功能。谢涛研究也发现，饲粮中添加复合酸化剂可以缓解肉鸡感染球虫后空肠紧密连接蛋白、闭合小环蛋白（）和 表达的下调。本试验中。肉鸡在球虫和产气荚膜梭菌联合感染的同时在饲粮中补充苯甲酸，一定程度上缓解了感染早期（日龄）肉鸡肠道屏障相关基因表达的下调，在 日龄时，相较与 组，组肠道屏障相关基因的表达存在一定优势，表明饲粮中添加苯甲酸能在一定程度上通过调节肠道黏蛋白和黏膜紧密连接蛋白相关基因的表达，改善肠道屏障紧密连接结构和功能的完整性，缓解球虫和产气荚膜梭菌联合感染导致的肠道损伤，提高肉鸡的生长性能。推测其原因可能是苯甲酸通过抑制促炎细胞因子的释放来改善肠道屏障的完整性，因为细胞因子、被证明能够通过调节肠道紧密连接蛋白的表达来调节肠道通透性。结 论 饲粮中添加 苯甲酸能有效缓解球虫和产气荚膜梭菌联合感染对 日龄肉鸡造成的肠道炎症及肠道屏障损伤，增强免疫功能，改善肠道组织形态，维护肠道健康，从而提高生长性能。参考文献：臧江华，安一娜，王婧，等鸡源 型产气荚膜梭菌致病性及药物疗效分析畜牧兽医学报，（）：，（）：（）王佰魁，徐歆，毛予龙，等禽类坏死性肠炎发病机理的研究进展中国畜牧杂志，（）：，（）：（），动 物 营 养 学 报 卷，（）：，（）：晏家友缓释复合酸化剂对断奶仔猪消化道酸度及肠道形态和功能的影响硕士学位论文雅安：四川农业大学，：，：（），（）：王宇绿原酸对断奶仔猪生产性能、肠道健康及抗氧化能力的影响硕士学位论文雅安：四川农业大学，：，：，：（）张贝贝精氨酸对肉仔鸡肠道黏膜损伤的缓解作用及机理研究博士学位论文北京：中国农业大学，：，：（）黄灵杰，彭焕伟，张克英，等苯甲酸对球虫攻毒肉鸡生长性能、免疫功能及血清抗氧化能力的影响动物营养学报，（）：，（）：（），（）：韩迪饲粮中添加，葡聚糖对感染产气荚膜梭菌肉鸡生长性能和肠道健康的影响硕士学位论文杨凌：西北农林科技大学，：，：，：（），（）：，：，：苏文璇，黎育颖，田军权，等植物精油的生理作用及其有机酸复合使用效果的研究进展中国畜牧杂志，（）：，（）：（）邓沛杰，宋泽和，罗国升，等枯草芽孢杆菌对球虫和产气荚膜梭菌混合攻毒肉鸡生长性能及肠道健康的影响 动物营养学报，（）：，（）：（），（）：王莎莎，刘丽英，吴桂贤，等肠炎沙门氏菌接种对雏鸡免疫器官指数的影响家禽科学，（）：，（）：（）孙亚楠纳豆芽孢杆菌的沸石吸附条件筛选及其缓解产气荚膜梭菌对肉鸡负面影响的研究硕士学位论文南京：南京农业大学，：，：（）期樊 政等：苯甲酸对球虫和产气荚膜梭菌联合感染肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响 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