毕业设计（论文）人参皂苷糖基水解酶的研究.pdf

大连理工大学博士学位论文题目名称人参昔糖基水解酶的研究计：学位论文117表 格 17插 图 48学位论文完成日期：2002年6月20 口博士生：张春枝专业：生物化丁评阅人：_指导教师：安利佳金凤燮教研室主任：_院（系）主任：安利佳Ph.D.Thesis of Dalian University of TechnologyGinsenoside glycosidases fi-om panax ginsengZhang ChunzhiA Thesis Submitted to Dalian University of Technology for the Degree of Ph.D.Supervised by Prof.An Lijia Prof.Jin FengxieJune 20,2002大连理L大学博士学位论文摘要本文以专一水解人参皂甘特定糖基为付的，进行了人参皂仔糖基水解解的分 离纯化、性质研究、以及人参皂苛Rg3和Rc的定向酶解反应，证明了酶法定向 改造人参皂昔结构的可能性.采用缓冲液抽提、硫钱沉淀、离子交换层析法从人参根中分离纯化了两种人 参皂俘楣基水解酶 人参皂伴小葡萄糖价酶和人参电伊七-阿拉伯糖俘酹。人 参皂甘-B-葡萄糖普酶被纯化厂16倍，收率为14.4%,人参皂甘-比阿拉伯糖仔融 被纯化了18.5倍，收率为4.6%,PAGE检测纯化后的前为单一谱带.人参皂甘-P葡萄糖昔酶能水解人参皂甘Rg3生成人参皂音Rh2.最适作用温 度为55-60C,最适pH为5.0,Ca-对该酶有激活作用，Cu有抑制作用.该酶 在60C以F,pH4.0-7.0稳定，SDS-PAGE测得分子量为59kDa。此酶N-端赛基 酸序列为SLDANYVPKYVTLPL,与已知序列的。-偏萄糖甘酶无同源性，人参皂 苜-P-葡萄糖甘酶在水解特性上也不同于传统的B-葡萄糖甘酶(EC3.2.1.21)。本 文还建立了人参皂昔-0-前萄糖昔的催化Rgj反应的米氏方程。人参皂昔-a阿拉伯糖昔醉能水解人参皂甘Rc生成人参皂仔Rd,最适作用温 度为50*C,最适pH为5.0.CiL对酶有抑制作用。该旃在60*C以下，pH4.0 6.0 稳定,SDS-PAGE测得分子量为86kDa.人参皂甘糖基水解酶在底物浓度10mg/ml,pH5.0,55X7的条件下水解人参电Rgo反应24h,Rg3的转化率可达到60%。经饱和正丁醇萃取，硅胶柱分离，酶解产物Rh?纯度可达90%,得率为32%。人参皂昔平-葡萄糖昔醐能水解20(S)Rg3和20(R)Rgj分别生成20(S)-Rh?和20(R)-Rh2，水解速度大体相同。核磁共 振【HNMR、CNMR)和质谱(MS)检测结果显示，醉解20(S)Rgj所得产物 为20(S)-Rh2.系统名称为30-D-毗喃轴萄糖基)-达玛-24-烯凸乐12p,20(S)-H 醉；酶解20(R).Rg3所得产物为2O(R)-Rh2,系统名称为3.0.(BD-毗喃葡萄糖基)-达玛-24.烯-3d12P,20(R)三醵，分子式为C36H62。8，分子量为622。人参皂甘糖基水解醇在底物浓度30mg/ml,pH5O 50c的条件下水解人参空 计Rc,反应24h.Rc的转化率可达到60%.经饱和正丁醇萃取，硅胶柱分离，陶解产物Rd纯度可达90%.得率为34%,核磁共振(*HNMR.nCNMR)和质 谱(MS)检测结果表明，酶解产物为20(S)-人参皂昔Rd,系统名称为3-CH0-D-毗喃葡萄糖基(1-2)MD.毗喃葡萄糖基A 200邓D4tt喃葡萄糖基)-达玛-摘 要烯邢，】2120(S)三爵,分子式为C48H心(力8，分子量为946.本文在证明酶法定向转化人参皂开制备稀有皂苗可行性的同时，为深入研究 糖若水解酶尤其是皂甘糖基水解醵奠定了一定的实验基础。关键词，人参皂昔呻-葡萄糖昔薛，人参皂昔-a-阿拉伯精昔醇，人叁皂昔糖基水 解醒，薛纯化，薛水解.人身皂昔Rh人叁皂昔Rd大比理丁大学媳士学位论文AbstractIn order to hydrolyze the ginsenosides specifically,the ginsenoside-P-glucosidase and the ginsenoside-a-arab inofurana$c are purified,characterized,and ginsenoside Rg?and Rc are hydrolyzed b y the enzymes as well.It shows the possib ility of hydrolyzing ginsenosides specifically.The ginsenoside-p-glucosidase and the ginsenoside-a-arab inofuranase from ginseng root are purified to one spot in PAGE b y b uffer extraction,(NH4)2SO4 precipitation and ion exchange chromatography.The ginsenoside-p-glucosidase hydrolyzes the ginsenoside Rgj sugar moiely to ginsenoside Rh?.The optimal temperature is 55-60,and the optimal pH is 5.0.Ca2 ion has the positive effect,while has the negative effect on it.Its molecular weight is ab out 59 kDa in SDS polyacrylamide gel electrophoresis.The N-er)d sequence of ginsenoside-P-glucosidase is SLDANYVPKYVTLPL,which has no homology with the P-glucosidases whose protein sequence are known.The hydrolysis of ginsenoside-P-glucosidase is different from the original exocellulase such as P-glucosidase(EC3.2.I.21).In addition,the Michael is-Mcntcn model of ginsenoside-P-glucosidase is b uilt.The ginsenoside-a-arab inofuranase hydrolyzes the ginsenoside Rc to ginsenoside Rd.Ihe optimal temperature is 50C,and the optimal pH is 5.0.Cu?*inhib ites the enzyme activity.Its molecular weight is ab out 86 kDa in SDS polyacrylamide gel electrophoresis.In hydrolyzing ginsenoside Rga to Rh2 b y(he saponin glycosidases,the conversion rate is 60%in the condition of sub strate Rg3 lOmg/ml,pH5.0,55C,24h.After b utanol extraction and separation on the silica gel column,the purity of the product Rh is ab out 90%and the yield is 32%.The ginsenoside-P*glucosidase can hydrolyze b oth 20(S)-Rgj and 20(R)-Rg3 to form 20(S)-ginsenoside Rh：,i.e.3-O-(p-glucopyranosyl)-dammar-24-en-3p,12(3,20(S)-triol and 20(R)-ginsenoside Rhj,i.c.3-0-(p-glucopyranosyl)-dammar-24-en-3p I2p,20(S)-triol respectively,according to the data of the IHNMR,13CNMR and MS.The reaction rate of 20(S)-Rg3 and 20(R)-Rgj is nearly the same.AbstruttIn hydrolyzing ginsenosidc Rc to Rd b y the ginsenoside-a-arab inofuranasc,the conversion rate is 60%in the condition of sub strate Rc 30mg/ml,pH5.0.50c.24h.?fier b utanol exiraction and separation on the silica gel column,the purity of the product Rd is ab out 90%and the yield is 34%.The product from Rc is 20(S)-Rd.i.e.3-0-(P-glucopranosyl-(1-2)-P-lucopyranosyl)-20-O-(p-glucopyranosyl)-dammar 24-en-3p,12(3.20(S)-triol according io the data of the NMR,3CNMR and MS.All this proves the possib ility of transforming ginsenosides into the rare ginsenosides.It also lays a foundation on studying glycosidase especially saponin glycosidase further.Key Words:oinsenoside-p-glucosidase,ginsenoside-a-arab inofuranase,saponin glycosidases,enzyme purification and characterization,enzyme hydrolysis,ginsenoside Rli：,ginsenosidc Rd人过理工大学博上学位论文目 次摘要.【Ab stract.11!前言.I第一章文献综述.31.1 人参及其有效成分.31.1.1人参的种类.3I.1.2人参的有效化学成份.41.2 人参皂昔的结构与性质.41.2.1人参皂昔的分类及其化学结构.412.2人参皂苛的性质.7L 3人参皂音的分析分离与鉴定.81.3.1人参皂昔的分隔提取方法.81.3.2 人参皂昔的分析方法.91.3.3 人参皂昔的结构测定.91.4人参皂昔的药理作用.101.4.1人参皂甘的抗疲劳作用.101.4.2人参轻音的延缓衰老作用.111.4.3人参皂昔的增强免疫力作用.121.4.4人参皂件的改善心血管和血液循环作用.131.4.5人参皂甘的抗肿瘤作用.14L 5皂昔的结构改造.151.5.1皂甘糖基与生物活性的关系.151.5.2皂昔糖基改造的研究方法.161.5.3酶法改造人参皂甘糖基提高其活性的研究.171.6 酶学研究的基本方法.181.6.I酶的分类.181.6.2酶分离纯化的基本方法.191.6.3酶性质的一般研究内容及方法.251.6.4酶结构的一般研究内容及方法.2r1.7 人参事昔的国内外研究现状及本文研究的内容.2目次1.7.1 人参皂好的国内外研究现状.281.7.2 本文研究的内容.29第二章人参皂昔糖基水解酶的分离纯化.312.1引言.312.2材料与方法.322.2.1实验材料.322.2.2实聆方法.332.3结果与讨论.352.3.I人参皂甘邛-葡萄糖昔酶的分离纯化.352.3.2人参皂昔-or阿拉伯糖在酶的分离纯化.372.3.3高效液相蛋白制备色谱进 步纯化人参皂俘时葡萄糖背酣.392.3.4的纯度的鉴定.402.4小结.41第三章人参皂昔糖基水解酶的性质.423.1引言.423.2材料与方法.423.2.1实验材料.423.2.2实验方法.433.3结果与讨论.453.3.1 人参皂参呻-葡萄糖昔簿的部分性质.453.3.2 人参皂甘-a-阿拉伯糖昔酶的部分性质.503.3.3人参皂甘邛-筒萄糖昔的催化反应动力学.543.3.4人参皂昔邛-葡萄糖首前的N-端序列测定.553.4小结.58第四章人参皂昔糖基水解酶的催化作用.594.1引言.591.2材料与方法.594.2.1实验材料.591.2.2实验方法.604.3 结果与讨论.614.3.1不同来源。-葡萄糖源酶催化水解标准底物.614.3.2不同来源。-葡萄糖甘酶催化水解人参皂昔Rgs.6,4.3.3人参皂昔-a-阿拉伯糖昔酶的催化作用.6,大连理T人学慨十学位论文4.4小结.65第五章 酶法水解人参皂昔Rgj制备稀有皂昔Rh?.675.1 引言.:.675.2 材料与方法.685.2.1 实验材料.685,2.2 实验方法.695.3结果与讨论.705.3.1酶液的大量制备.705.3.2酶水解人参皂仔Rgi生成Rhz反应条件的确定.705.3.3 20(S)-Rg3和 20(R)-Rg?的酶水解.725.3,4醐解产物人参皂昔Rhi的分离纯化.735.3.5酶解产物的分析鉴定.755.4 小结.82第六章酶法水解人参皂甘Rc制备人参皂昔Rd.846.1 引言.846.2材料与方法.856.2,1实验材料.856.2.2实验方法.856.3结果与讨论.866.3.1酶液的大量制备.866.3.2水解人参皂音Rc生成Rd反应条件的确定.876.3.3人参皂甘Rc的酶水解.896.3.4酶解产物Rd的分离纯化.896.3.5酶解产物的分析鉴定.916.4 小结.94第七章结论与展望.967.1 结论.967.2 本论文的创新点.987.3 有待深入的内容.98参考文献.101附录.”3攻读博士学位期间发表的论文.115创新点摘要.11iil致谢117人连理丁大学博匕学位论文ContentsChinese Abstract.IAbstract.IllPreface.1Chapter 1 Review.31.1 Ginseng and its active components.3L 1.1 Species of ginseng.31.1.2 Active components in ginseng.41.2 Structure and character of ginsenosides.41.2.1 Structure and classification of ginsenosides.41.2.2 Character of ginsenosides.7I.3 Separation and analysis of ginsenosides.81.3.1 Separation methods of ginsenosides.8I.3.2 Analysis methods of ginsenosides.91.3.3 Structure determinalion of ginsenosides.9L 4 Pharmacological activities of ginsenosides.101.4.1 Anti-faiigue actions of ginsenosides.101.4.2 Postponing decrepitude actions of ginsenosides.111.4.3 Enhancing immunity actions of ginsenosides.121.4.4 Improving b lood cycle actions of ginsenosides.131.4.5 Anti-cancer actions of ginsenosides.14I.5 Stmcture modification of saponin.151.5.1 Relationship b etween saponin glycosyl structure and activities.151.5.2 Study methods of modifying saponin glycosyl structure.161.5.3 Study on modifying saponin glycosyl b y Enzyme.171.6 Common methods in enzymology study.181.6.1 Classification of enzyme.181.6.2 Common methods in enzyme purification.191.6.3 Contents and methods in enzyme character study.251.6.4 Contents and methods in enzyme structure study.271.7 Studies on ginsenosides in the world and the studies in this text.2Contents1.7.I Studies on ginsenosides in the world.281.7.2 Studies in this text.29Chapter 2 Purification of ginsenoside glycosidases.312.1 Introduction.312.2 Materials and Methods.322.2.1 Materials.322.2.2 Methods.332.3 Results and discussion.352.3.1 Purilication of ginsenoside-p-glucosidase.352.3.2 Puri ilcation of ginsenoside-a-arab inofiiranase.372.3.3 Further purification of ginsenosidc-P-glucosidasc b y FIPLC.392.3.4 Analysis of enzyme purity.402.4 Summary.41Chapter 3 Characterization of ginsenoside glycosidases.423.1 Introduction.423.2 Materials and Methods.423.2.1 Materials.423.2.2 Methods.433.3 Results and discussion.453.3.1 Characters of ginsenoside-p-glucosidase.453.3.2 Characters of ginsenoside-a-arab i nofuranase.503.3.3 Kinetics of ginsenoside-P-glucosidase.543.3.4 N-end Sequence of ginsenoside-a-arab inofuranase.553.4 Summary.58Chapter 4 Catalysis of ginsenoside glycosidases.594.1 Introduction.594.2 Materials and Methods.594.2.1 Materials.594.2.2 Methods.604.3 Results and discussion.614.3.1 Hydrolysis of standard sub strates b y p-glucosidases.614.3.2 Hydrolysis of ginsenoside R&b y|3-glucosidases.624.3.3 Hydrolysis of giiisenosidc-a-arab inofiiranase.6vi人连理I大学博士学他给文4.4 Summary.65Chapter 5 Hydrolyzing ginsenoside Rgj to Rh2 by enzyme.675.I Introduction.675.2 Materials and Methods.685.2.I Materials.685.2.2 Methods.695.3 Results and discussion.705.3.1 Preparation of enzyme solution in a large scale.705.3.2 Hydrolyzing ginsenoside Rgj to Rhj b y ginscnoside-p-glucosidase.7()5.3.3 Hydrolyzing 20(S)-Rgj and 2O(R)-Rg3 b y ginsenoside-p-glucosidase.725.3.1 Separation of product Rh?from enzyme reaction.735.3.5 Analysis of the product from enzyme reaction.75ft.4 Summary.82Chapter 6 Hydrolyzing ginsenoside Rc to Rd by enzyme.846.1 Introduction.846.2 Materials and Methods.856.2.I Materials.856.2.2 Methods.856.3 Results and discussion.866.3.1 Preparation of enzyme solution in a large scale.866.3.2 Hydrolyzing ginsenoside Rc to Rd b y enzyme.876.3.3 Hydrolyzing ginsenoside Rc b y ginsenoside-a-arab inofiiranasc.896.3.1 Separation of product Rd from enzyme reaction.896.3.5 Analysis of the product from enzjme reaction.916.4 Summary.94Chapter 7 Conclusions and outlook.967.1 Conclusions.967.2 Innovation in the paper.987.3 Further studies in the future.98References.101Appendix.113Published papers.115Innovation.1viiContentsAcknowledgement.117viii人选理工大学博士学位论文刖 百植物是人类赖以生存的自然环境物质.它既是人类的食物资源，又是人类防 病、治病的药物资源。人类对植物代谢产物的利用可追溯到远占时代，应用范围 涉及食品、医药卫生、畜牧业和工业等诸多领域,直到现在，植物的天然产物依 然在人类生活中占有重要地位。植物的次生代谢产物不管在远古、当今还是未来 都是药物的重要来源。据资料显示，美国现今的药方中，25%以上含有植物药品 成份la我国的天然药物资源十分丰富，中草药是一个拥有几千年文明史的医药 宝库,神农本草经以及李时珍的本草纲目都详尽记载了各种草药的神奇疗 效，然而究竟是哪种单一成份或哪几种成份协同作用却鲜为人知,研究植物天然 成份的分离提取技术，获取单体成份，对于进一步研究中药药理、开发药物疔效 潜力，有着十分重要的意义。从古至今，研究最多的药用植物当属人参.早在神农本草经中就已记载 人参有“补五脏、安精神、止惊悸、明目、益智”之功效.现代医学研究表明.人参中的工要有收成份是人参皂苜，目前已分离并鉴定的人参皂苜已达40余种.各种人参皂音都有其独特的药物疗效大量研究结果表明，人参皂才具有抗疲劳、延缓衰老、调节中枢神经系统、提高机体免疫力、改善心脑血管供血不足、抑制 肿痛细胞生长等作用。人参中含量较高的皂存有原二醉人参目音Rb、Rc Rd和原三醇人参皂昔Re,Rgi.二卜世纪八十年代研究者发现红参中含有微量皇音Rgz、Rg3、Rgs、RE、Rh2,它们在红参中的含景虽然仅占十万分之几，却有着极其特殊的生理功能。如低浓度人参皂仔Rh；可改变癌细胞性质，使其向正常细胞变化。高浓度Rh.具 有杀灭癌细胞的作用”，但由于其含量极低无法得以应用.人参皂甘是人参的 次级代谢产物,由于代谢过程复杂、代谢途径不明确，无法在生长过程中予以控 制使人参定向积累某种稀有皂书.鉴于一些人参皂昔结构相近，研究苕大胆地进 行了改变人参皂白:糖基结构获取稀有皂件的科学探索，并取得了可喜的成果。目 前采用酸法水解原二醇人参皂苜生产人参皂音Rg3己在长春亚太集团实现产业 化，由吉林省中医中药研究院李龙云教授主持的陵水解人参皂昔Re生产Rg?也 即将产业化。人参皂昔Rhi、Rh2分子结构特殊，很难用酸水解法获得。沈阳药科 大学陈英杰教授进行了碱水解法和化学合成法的研究，但因化学合成法成本过高.前融法使用的浓碱会造成环境污染等原因未能形成规模生产，大连轻工业学院金风 燮教授进行了的转化法生产稀有皂甘Rh?的研究，并已经形成产业化规模，所用 之酶来源于微生物为寻找高效、专一的人参皂甘糖基水解醐，本论文选取人参为材料,从中分 离纯化人参皂甘糖基水解防，研究其性质和水解作用特点，旨在找到一种具有专 一水解人参皂仔特定糖基的皂甘水解蹲,以达到人参皂昔的高效定向转化.本文的创新点在r：首次从人参根中分离纯化了以人参皂苛为作用底物的两 种人参皂甘糖军水解的一一人参皂甘-M葡萄糖甘醐和人参皂件 a-阿拉伯糖伊 艇；较为系统地研究了以上两种酶的性质和水解作用；发现了它们与以糖类物质 为作用底物的触书酹的区别，为深入研究糖昔酶奠定了基础。本研究首次将来源 人参的皂甘糖基水解酶用于人参皂仔Rg到Rh2、Rc到Rd的定向转化，产物 结构分析测定结果显示，人参皂昔Rga酶解产物为RW，人参皂昔Rc酶解产物为 Rd,证明了酶法定向转化人参皂昔的可行性.大连理工大学博士学位论文第一章文献综述人参作为滋补珍品已有几千年的历史，神农本草经一书中详细介绍了人参 有“补五脏、安精神、定魂晚、止惊悸、除邪气、明目开心益智，久服轻身延年”的功效。汉代已开始广泛应用人参治疗疾病.李时珍的本草纲目更是赋予了 人参聿要的药用地位L虽然人参的发现和利用走过漫长的道路，但是真正揭 示人参作用的奥秘，寻找它的有效物质，探讨其作用机理的历史，则不过百年口 在这方面，中国、朝鲜、日本、前苏联、美国等国家致力于人参研究的学者们，都建立了卓越的功勋。现今，人参的栽培、组织细胞培养、人参的生化药理学、分子药理学及临床应用,都有较大发展“人参经化学药理及生物化学研究证明 其主要成份人参皂昔具有多种生理活性19、各种人参皂甘单体的生理活性不尽 相同【吐川.现代医学研究表明，人参有抗疲劳、调节中枢神经、促进蛋白质合成、提高免疫力、增进性功能等功效，近代研究还发现了人参的抗肿瘤作用，因而越 来越引起国内外的重视.1.1 人参及其有效成分1.1.1 人参的种类人参为五加科(Amliaceae)人参属(Pomx)植物的干燥根。栽培者称“园参”,野生者称“山参”，园参经晒干或烘干称“生晒参”，蒸制后干燥称“红参”。目前 已知的人参属中有以下五种Panax ginseng C.A.Meyer该品种即我国的普通人参，朝鲜叫高丽人参。其味甘、微苦,性温.系补气药。该种人参生长于我国东北大小兴安岭地区、长 白山脉、朝鲜及前苏联和日本有野生者也可栽培。Panax quinquefolium L.美国参，又称西洋参或花旗参。其味苦,药性寒凉，与普通人参药性有别.生长于美国、加拿大等地，此参种已在我国广东、东北三 省和陕西等地引种成功UPanax notoginseng(Burk.)F.H.Chen 三七参，又称田七或参三七。其味 甘、微苦，归肝，胃经，系止血，散血，定痛药。主产于我国云南、广西等地。Pa it ax japonic us C.A.Meyer竹节参，又称竹根七或峨三七。野生于日本3文献侔述中国。Panax japonic us C.A.Meyer.var.major(Burk.)C.Y.Wu et K.M.Feng 珠 子参，又称土三七、钮子七或扣子七。生长于中国云南。1.1.2 人参的有效化学成份早在1854年，中国、日本、朝鲜等国家就已开始了关于人参有效成份的研究，但由于受分离手段和检测仪器的限制，研究工作进展不大.近三十年来，借助于 高技术的分离手段和先进的测试仪器，人参成份的分离和结构研究有了突破性的 进展.现已发现人参的主要活性成份是人参皂甘(ginsenoside),除此之外人参中 还含有人参多糖(polysuccharidc)、人参多肽(polypeptide)、人参挥发油(volatile oil)氨,基酸(amino acid)、维生素(vitamin)、无机物(inorganic sub stance),有机酸(organic acid)生物碱(alkaloid)、人参焕醇(panaxynol)核昔(rib oside)、人参黄的(flavone)和少量的酶(enzyme)等。不同参种和人参的不同部位，上 述物质的含量不尽相同.在人参的有效成分中，研究最多的是人参皂昔。自1854年Garrigue由西洋 参根中分离得到的人参奎酮(panaquilon.C35Hs6。|4)算起，已有百年历史。但 受当时科技水平的限制，无法弄清其结构1963年，Shib ata等人将由人参根中 提取的总皂昔，称为人参电昔-Rx(Ginsenoside-Rx),并依薄层层析的&值，由 低到高将人参皂昔命名为人参皂普-Ro、-Ra、-RM、-Rb2,-Rc、-Rd、-Rc、-Rf,-Rgi、-Rg2、-Rg3和-Rh.1978年，SanadJ等人又报道了两种新单体皂昔.Rb 3 和Rf。与此同时，各种单体皂仔的化学结构也陆续被鉴定“8年1。我国的蔡培列、徐绥绪、陈英杰、张绍林等人在人参皂昔的分离和结构鉴定方面做出了新的贡献。它们不仅从人参茎叶中成功地分离鉴定了上述皂普成份卬口3而且分离鉴定出新 皂甘 20(R)-Rhz、-Rh3.-Rg4 和L/s 261。1996 年,新皂昔-Rg$、-Rh4 20(E)-F4s Rs?、Rf2等新皂昔单体被相继报道1.2 人参皂音的结构与性质1.2.1 人参皂昔的分类及其化学结构按照皂音的系统分类，上述人参皂昔均属于三麻类皂昔。按其结构不同可分 为两类：一类为齐墩果烷型(OleananeType)五环三砧皂昔，其皂昔元为齐墩 大连理工大学博士学位论文酸(O【eam)lic acid),此类皂音在自然界中存在普遍，人参皂音-R。属此类有音(图 1-1),另一类为达玛烷型CDammaranc Type)四环三菇皂甘，人参皂甘绝大多数 属此类皂昔。目前认为该类皂行是人参的主要活性成份之丁达玛烧型人参胆普 水解可生成不同的皂昔元，据此又将其分成两类：一类为20(S)-览人参二醇类(Protopanaxadiol PD)包括人参皂皆-Ra1、-Ra2、-Rb 1、Rb?、Rc、-Rd、-Rgj 和.Rh2等(图1-2)；另一类为20(S)-原人参三酹类(Protopanaxatr沁1 PT)包括 人参皂甘Rc、Rf、Rgi、-Rgz、和-Rhi等(图1-3)。据此可将人参皂昔分类概 括如下：20(5)-原人参二醇类人参它甘(PD)：人参电trRa|、-Ra?、Rb,-Rb?.Rc、-Rd、-Rg?和-Rh?达玛烷型人参皂昔人参电可J 20(SA原人参三解类人参府首(PT)：人参照甘Rc、-Rf、-Rgi、-Rgz、和-Rhil齐墩果酸型人参皂甘：人参皂甘-R。Ri&Ginsenoside Ro:GlcA-(2-1)-Glc GIc图1-1齐敦果酸类人叁皂昔的结构GIc:B-D-毗喃葡萄糖基；GlcA:B-D-毗喃葡萄糖醛酸基Fig.1-1 Structures of oleanolic acid type saponinsGlc:B-D-glucopyranosyl;GlcA:B-D-glucuronopyranosyl5文献踪述RiRzGinsenosideRa(:Glc-(2*-l)-GlcGlc-(6-1)-Ara(p)(4-l)XylGinsenosideRa2:Glc-(2*-l)-GlcGlc-(6*-l)-Ara(f)-(2-1)-XylGinsenosideRaj：Glc-(2-l)-GlcGlc-(6*-l)-Glc-(3*-l)-XylGinsenosideRbi：Glc-(2*-l)-GlcGlc(6一1)GlcGinsenosideRb2：GIc-(2-1)GlcGlc-(6-1)-Ara(p)GinsenosideRb3:Glc-(2-l)-GlcGlc(6-1 卜 XylGinsenosideRc:Glc-(2*-l)-GlcGlc-(6-1)-Ara(f)GinsenosideRd:Glc-(2-l)-GlcGlcGinsenosideRg3；Glc-(2*-l)-GlcHGinsenosideF2：GlcGlcGinsenosideRh2:GlcH图1-2 20(S).原二醇类人参皂昔的结构Glc:PD毗喃葡萄糖基；Ara(p):a-L毗喃阿拉伯糖基;Ara(f)：a-L味喃阿拉伯糖基;Xyl:B-D-毗喃木糖基Fig.1-2 Structures of 20(S)-protopanaxadiol type saponinsGlc:P-D-glucopyranosyl;Ara(p):a-L-arab inopyranosyl;Ara(f):a-L-arab inofuranosyl;Xyl:B-D-xylopyranosyl6大连理工大学博J学位论文Ri 氏GinsenosideRe:Glc-(2*-l)-RhaGlcGinsenosideRf:Glc(2-1)-GlcHGinsenosideRgi：GlcGlcGinsenosideRg2：Glc-(2*-l)-RhaHGinsenosideRhi：GlcH图1-3 20(S)原三尊类人参皂昔的结构Glc:BD毗喃葡萄糖基；Rha:a-L毗喃鼠李糖基Fig.1-3 Structures of 20(S)-protopanaxatriol type saponins Glc:B-D-glucopyranosyl;Rha:a-L-rhamnopyranosyl;1.2.2 人参皂昔的性质人参皂昔大多为白色无定型粉末，或者为无色针状结晶。味微甘苦，具有较 强的吸湿性。易溶于水、甲醇和乙醇,可溶于正丁醇、醋酸和醋酸乙酯，不溶于 乙醐、荒中。人参电昔具有光学性质，在甲群中多数呈现右旋性。人参皂昔遇酸 极不稳定，易生成人参皂甘原和糖类。人参总皂普在人参的不同部位含量不同。花蕊中含量最高，其次是根须和人 参叶,种子中含徵最低。人参总皂昔中含PD约45-60%,PT约1220%,Ro约 7-10%,不同来源的总皂甘中各