989例儿童肺炎支原体感染的临床特征分析.pdf

宁夏医科大学学报4缘卷肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumoniaepneumonia，MPP）为肺炎支原体（mycoplasma pneu原moniae，MP）感染所引起的肺部炎症1，主要经飞沫传播，在秋、冬季发病率较高2-4，若未及时治疗可损伤患者呼吸道及肺部功能，使患者出现慢性呼吸道感染，严重者引发哮喘，造成残疾或死亡5。目前主要采用大环内酯类、糖皮质激素、左氧氟沙星等对 MPP 进行治疗，而治疗前的明确诊断是临床采取积极治疗措施的关键6。近年来，MP 作为儿童社区获得性肺炎的重要病原体之一7，受到医学界的广泛关注。MP 感染常呈不定期流行，且易与其他病原体混合感染8，每 3耀7 年可出现 1 次流行高峰，严重时可导致地方性流行9。因此，掌握 MP 临床及流行病学特征，对于MP 感染的防治十分重要。本研究从 2018 年 1 月至 2020 年 1 月在银川市妇幼保健院因下呼吸道感染首次住院治疗的 989 例患儿中筛选出 198例 MP 感染的患儿后，对患儿外周静脉血及下呼吸道分泌物进行检测并收集临床资料，从季节、年龄及临床症状和实验室指标等综合分析 MP感染的临床特征，以期为 MPP 的临床诊断、治疗及预防提供参考依据。1资料与方法1.1一般资料收集 2018 年 1 月至 2020 年 1 月因下呼吸道感染首次在银川市妇幼保健院住院治疗的989 例患儿。纳入标准：1）年龄约14 岁者；2）临床资料完整者。排除标准：1）合并其他基础疾病者；2）免疫缺陷及先天性肺疾病者；3）严重心、肝、肾功能不全者。1.2方法1.2.1标本采集入院后前 3 天抽取空腹外周静脉血 3 mL，常规离心处理后取血清，用于 MP 抗体的检测。将吸痰器插入咽部以下吸取 2耀4 mL分泌物，立即加入按等比例混合的病毒保护液青霉素（100 U mL-1）、链霉素（100 滋g mL-1）、HEPES（5 958 mg L-1），并做好编号，进行病原体检测。1.2.2支原体检测检测试剂为赛乐迪亚-麦可域MP 抗体检测试剂盒（被动凝集法），该方法是检测 MP 总抗体（IgG+IgM+IgA），以 IgM 为主，收稿日期：2022-11-11基金项目：宁夏自然科学基金项目（2020AAC03377）作者简介：王春莉（1992），女，在读硕士研究生，研究方向：下呼吸道感染病原学。通信作者：李芳，教授，硕士研究生导师，研究方向：下呼吸道感染病原学。989 例儿童肺炎支原体感染的临床特征分析王春莉1，孙锦涵1，黑志平2，闫琰2，季凯2，韩磊3，李 芳4（1.宁夏医科大学临床医学院，银川750004；2.宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系，银川750004；3.银川市妇幼保健院，银川750001；4.宁夏医科大学总医院呼吸与重症医学科，银川750004）摘要：目的探讨儿童肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）感染的临床特征。方法从 2018 年 1 月至2020 年 1 月在银川市妇幼保健院因下呼吸道感染首次住院治疗的 989 例患儿中筛选出 198 例 MP 感染的患儿，采集患儿静脉血，用被动凝集法检测支原体的感染情况。从季节、年龄、性别及临床症状和实验室指标等多方面对 MP 感染的患儿进行分析。结果989 例标本中 MP 占 198 例，检出率为 20.0%；198 例 MP 阳性标本中，MP 混合病毒的感染率最高（66.2%）。秋、冬季 MP 感染的检出率高于其他季节（P约0.01）。MP 感染多见于 6 岁以上的患儿。在与 MP 混合感染的病原体中以人呼吸道合胞病毒（RSV）、人鼻病毒（HRV）、副流感病毒 3 型（PIV3）、肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌多见。与非 MP 感染组比，MP 单独感染组患儿中性粒细胞百分比升高，血清降钙素原含量降低（P均约0.05）。结论MP 是儿童下呼吸道感染的主要病原体之一，MP 感染多发生于秋、冬季和 6 岁以上患儿，与病毒混合感染最多见，中性粒细胞百分比、血清降钙素原、C-反应蛋白可以作为 MP 感染的辅助指标。关键词：肺炎支原体；下呼吸道感染；儿童；临床特征中图分类号：R375+.2文献标识码：ADOI院10.16050/ki.issn1674-6309.2023.06.012第 45 卷6 期2023 年 6 月宁夏医科大学学报Journal of Ningxia Medical University文章编号：1674-6309（2023）06-612-07论著612窑窑6期占 90%。严格按照试剂盒说明书进行操作，对倍稀释血清，加入等量未致敏粒子和致敏粒子（未致敏粒子和致敏粒子须加入血清稀释液溶解30 min 后方可使用）。在水平振荡器上充分混匀，15耀30 益避光静置 3 h 后观察结果，检测 MP 总抗体滴度。根据试剂盒说明书判读结果（逸1颐40判断为阳性）。1.2.3病毒检测首先使用 Quick DNA/RNAViral Kit 试剂盒（Zymo Research，美国），按照说明书步骤提取病毒 RNA，然后用反转录试剂盒（Invitrogen，美国）将 RNA 反转录试为 cDNA，最后进行多重 PCR 及核酸电泳来检测标本中的病毒感染情况。PCR 反应条件为 94 益，2 min；94 益，0.5 min；60 益，1.5 min；72 益，1.5 min；40 个循环，72 益，10 min。1.2.4呼吸道细菌检测在生物安全柜中将等量的液化剂加到分泌物标本中轻轻摇动 10 s。3537 益孵育 15 min，轻轻摇动 15 s 帮助均质化。取 10 滋L 均质化分泌物在 5 mL 的无菌去离子水中稀释。取 1 滋L 接种环的液化分泌物标本接种到 SPUBACT 培养基中，生长出菌落后接种至血培养基，放入恒温箱中生长 24耀48 h，菌落生长后放入自动化细菌分离培养仪，具体操作及结果判定按标本的细菌学检验程序进行。1.3实验室指标判断标准白细胞（WBC）臆3.5伊109/L 视为降低，WBC逸9.5伊109/L 为升高；中性粒细胞百分比臆40%视为降低，中性粒细胞百分比逸75%为升高；C-反应蛋白逸6 mg L-1视为升高；降钙素原逸0.046 ng mL-1视为升高。1.4统计学方法数据采用 SPSS 26.0 统计学软件进行分析，计量资料以中位数和四分位间距 M（P25，P75）表示，组间比较采用Wilcoxon 秩和检验；计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用 字2检验，P臆0.05 为差异有统计学意义。2结果2.1下呼吸道病原体检出构成情况在 989 例下呼吸道感染的患儿当中，病毒感染的患儿有 853 例（86.2%），细菌感染的患儿有243 例（24.6%），MP 阳性 198 例（20.0%）。病原体检测类型中存在混合感染的情况，MP 与病毒混合感染的患儿最多 员猿员 例（66.2%），其次是单纯 MP 34 例（17.2%）、MP+病毒垣细菌 圆苑 例（13.6豫）、酝P+细菌 6 例（3.0豫）。2.1.1合并 MP 感染的病毒构成情况在 198例 MP 感染患儿中，MP 可与 1 种及以上的病毒发生混合感染，也可与病毒、细菌发生混合感染。与 MP 发生混合感染的 13 种病毒分别为：副流感病毒（PIV）14 型、腺病毒（ADV）、冠状病毒（COVID）375 和 578、人鼻病毒（HRV）、人博卡病毒（hBoV）、戊型肝炎病毒（HEV）、人偏肺病毒（hMPV）、呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒 A 型（FluA），其中以 RSV、HRV 和 PIV3 感染的患儿更为多见，见图 1。病毒类型8060402004814759939124713161图 1与 MP 混合感染的病毒类型2.1.2合并 MP 感染的细菌构成情况在 198例 MP 感染患儿中，有 33 例与 1 种及以上细菌混合感染，与 MP 混合感染的 11 种细菌，见图 2。细菌类型108642087571222311图 2与 MP 混合感染的细菌类型2.2不同季节、年龄、性别的 MP 感染率比较不同季节患儿 MP 感染率差异有统计学意义（字2=48.451，P约0.001），经两两比较，秋、冬季患儿 MP 感染率高于春季、夏季（P 均约0.01），秋季和冬季患儿 MP 感染率差异无统计学意义（字2=3.576，P跃0.05）。各年龄段患儿均可发生 MP 感染，6岁学龄期儿童 MP 感染率高于 约1 岁和 1耀3 岁幼儿（P王春莉，等.989例儿童肺炎支原体感染的临床特征分析613窑窑宁夏医科大学学报4缘卷组别nMP 单独感染组349.2（7.6，10.3）50.4（38.7，61.0）7.1（2.0，13.0）0.2（0.1，3.7）非 MP 感染组9559.2（7.2，10.6）38.3（27.6，50.5）4.0（0.7，12.1）1.7（0.1，4.8）Z值-0.140-3.310-1.233-2.653P值0.8890.0010.2180.008WBC/（109/L）中性粒细胞/%C-反应蛋白/（mg L-1）降钙素原/（ng mL-1）均约0.01），36 岁和逸6 岁患儿 MP 感染率差异无统计学意义（P跃0.05）。不同性别患儿 MP 感染率差异无统计学意义（P跃0.05），见表 1。表1儿童下呼吸道支原体感染不同季节、年龄、性别分布情况 例（%）项目nMP 阳性字2值P值感染季节48.4510.001春季20021（10.5）夏季25230（11.9）秋季30570（23.0）冬季23277（33.2）年龄/岁48.3610.0010137439（10.4）1328661（21.3）3623762（26.2）69236（39.1）性别1.9680.161男性573106（18.5）女性41692（22.1）2.3不同组别患儿的临床特征和实验室指标比较2.3.1MP 单独感染患儿与非 MP 感染患儿的临床特征、实验室指标比较MP 单独感染与非 MP感染患儿的临床症状、体格检查指标差异均无统计学意义（P 均跃0.05）；在实验室指标中，非 MP感染组患儿中性粒细胞百分比下降，MP 单独感染组 C-反应蛋白含量升高，两组患儿降钙素原含量均升高。与非 MP 感染组相比，MP 单独感染组患儿中性粒细胞百分比升高，血清降钙素原含量降低（P 均约0.05），见表 圆、表 猿。2.3.2MP 单独感染患儿与 MP 混合感染患儿的临床特征、实验室指标比较MP 单独感染组与MP 混合感染组患儿的临床特征和实验室指标差异均无统计学意义（P 均跃0.05）。MP 单独感染组患儿 C-反应蛋白含量升高，两组患儿降钙素原含量均升高，见表 源、表 缘。2.3.3MP 单纯混合细菌感染患儿与 MP 单纯混合病毒感染患儿的临床特征、实验室指标比较MP 单纯混合细菌感染组与 MP 单纯混合病毒感染组患儿的临床特征和实验室指标差异均无统计学意义（P 均跃0.05）。两组患儿降钙素原含量均升高，见表 6、表 7。3讨论MP 感染是儿童社区获得性肺炎的主要原因，近年来，我国 MP 的感染率呈上升趋势10-12。MP 感染除引起以发热和咳嗽为主的呼吸系统症状外，随着病情的进展还可引起肺外损害，包括脑炎、肝炎、心肌炎、肾病及重度贫血等多系统损害13-15。临床上以咽拭子或痰培养培养出 MP作为诊断 MP 感染的金标准16，但由于 MP 的分离培表 2MP 单独感染组与非 MP 感染组的临床特征比较 例（%）表 猿MP 单独感染组与非 MP 感染组的实验室指标比较 M（P25，P75）表 源MP 单独感染组与 MP 混合感染组的临床特征比较 例（%）组别nMP 单独感染组3431（91.2）11（32.4）17（50.0）8（23.5）27（79.4）8（23.5）非 MP 感染组955752（78.7）203（21.3）427（44.7）170（17.8）596（62.4）199（20.8）字2值1.0230.7590.2080.0800.2910.046P值0.2470.3840.6480.7770.5890.830症状咳嗽咳痰发热体征喘鸣音咽部充血干湿啰音组别nMP 单独感染组3431（91.2）11（32.4）17（50.0）8（23.5）27（79.4）8（23.5）MP 混合感染组164158（96.3）53（32.3）109（66.5）37（22.6）133（81.1）47（28.7）字2值1.7320.0013.2990.0150.0520.369P值0.1860.9970.0690.9020.8200.543症状咳嗽咳痰发热体征喘鸣音咽部充血干湿啰音614窑窑6期表 5MP 单独感染组与 MP 混合感染组的实验室指标比较 M（P25，P75）表 6MP 单纯混合细菌感染组与 MP 单纯混合病毒感染组的临床特征比较 例（%）表 7MP 单纯混合细菌感染组与 MP 单纯混合病毒感染组的实验室指标比较 M（P25，P75）养生长缓慢、条件苛刻17，且容易被污染出现假阳性18-19，且 MP 分子生物学检测方法复杂，对实验室要求高，难以广泛开展，而被动凝集法操作简便快速，经济性高，并且具有较好的特异性和灵敏度，因此常被临床用来诊断 MP20-21。本研究结果显示，989 例下呼吸道感染患儿中 MP 感染率为 20.0%，与有关报道22-23结果不一致的原因可能与当地空气环境、人员流动性及饮食习惯等有关。MP 常与其他病原体混合感染，20.03%的 MP 感染患儿合并病毒感染，7.04%合并细菌感染，病毒感染以 HRV、RSV 居多，细菌感染以肺炎链球菌居多24。本研究结果中，66.2%的MP 感染患儿合并病毒感染，3.0%合并细菌感染，病毒感染以 RSV、HRV、PIV3 多见，细菌感染以肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌多见，这与相关的研究报道一致8，25-27。本研究结果显示，MP 在与病毒发生混合感染的情况下，更易继发细菌感染，其主要原因可能是机体呼吸道感染后，导致清除功能、免疫力下降，肺部感染迁延不愈，所以易发生混合细菌的感染。我国南方地区 MP 感染以夏、秋季多发，北方地区以秋、冬季多发28-29。本研究显示，银川地区患儿 MP 感染率与季节有关，秋、冬季为相对高发季节，与有关研究结论相符28-29。北方地区秋、冬季温度较低，干燥多风，且大多数儿童都在室内聚集活动，为 MP 的生长传播创造了条件。因此，对于气温较低、干燥且晴天居多的银川地区，在秋、冬季更应重视儿童呼吸道感染的 MP抗体检测。有研究30指出，学龄前期、学龄期的儿童 MP感染率最高。海口地区 4 岁以内儿童，特别是女童为 MP 感染的高发人群31。闫超等32研究发现，北京地区 MP 感染率随年龄增长而增高，且儿童MP 感染有低龄化的发展趋势33。本研究发现，MP感染在患儿各年龄段都有出现，以学龄期（跃6岁）儿童为主，跃6 岁患儿的 MP 感染率高于约1 岁和 1耀3 岁幼儿，且随年龄增加 MP 感染率呈上升趋势，这与陈萍等30、闫超等32的研究结论相符，提示在银川地区学龄期（跃6 岁）儿童可能为 MP的主要易感人群。本研究结果显示，MP 单独感染与非 MP 感染、MP 单独感染与 MP 混合感染、MP 单纯混合细菌感染与 MP 单纯混合病毒感染患儿的临床症状、体格检查差异均无统计学意义，说明 MP感染患儿的临床表现无特异性，这与以往的报道34-35相似。有研究36发现，MP 感染患儿中性粒细胞数量会升高。本研究发现 MP 单独感染组中性粒细胞百分比正常，非 MP 感染组患儿中性粒细胞百分比下降且低于 MP 单独感染组患儿，与上述研王春莉，等.989例儿童肺炎支原体感染的临床特征分析组别nMP 单独感染组349.2（7.6，10.3）50.4（38.7，61.0）7.1（2.0，13.0）0.2（0.1，3.7）MP 混合感染组1648.4（6.8，10.4）47.6（35.4，62.0）5.5（1.6，12.7）0.4（0.1，5.4）Z值-1.107-0.577-0.362-1.424P值0.2680.5640.7180.154WBC/（109/L）中性粒细胞/%C-反应蛋白/（mg L-1）降钙素原/（ng mL-1）组别nMP 单纯混合细菌感染组67.4（6.1，8.9）62.8（45.7，66.4）4.4（0.3，35.4）2.9（0.1，7.0）MP 单纯混合病毒感染组1318.6（6.8，10.0）48.4（35.8，61.4）5.0（1.6，11.2）1.0（0.1，5.7）Z值-1.357-1.510-0.216-0.069P值0.1750.1310.8290.945WBC/（109/L）中性粒细胞/%C-反应蛋白/（mg L-1）降钙素原/（ng mL-1）组别nMP 单纯混合细菌感染组66（100.0）1（16.7）3（50.0）2（33.3）5（83.3）2（33.3）MP 单纯混合病毒感染组131125（95.4）46（35.1）87（66.4）29（22.1）105（80.2）36（27.5）字2值0.2870.8660.6860.4110.0370.098P值1.0000.6640.4130.6181.0000.669症状咳嗽咳痰发热体征喘鸣音咽部充血干湿啰音615窑窑宁夏医科大学学报4缘卷究结果不符，究其原因可能与本研究样本量有限，仅局限于银川地区，且实验室仪器及检测者操作水平等因素不同有关。WBC 是各种感染性疾病鉴别诊断中的基础指标，由于个体差异，患者血液 WBC 具有较大差异，容易被多种因素影响，所以在儿童感染性疾病中单一应用 WBC 检测，诊断特异性、灵敏度比较差，无法为临床确诊疾病提供充足的数据37。中性粒细胞属于 WBC的一种分类，因此同样无法为疾病的诊断提供有力的证据。C-反应蛋白是一种非特异性急性时相反应蛋白38，是反映机体遭受微生物入侵或组织损伤的敏感指标，但其缺乏特异性，在一定程度上限制了对感染性疾病的诊断价值39。血清降钙素原是机体感染细菌时释放的一种急性可溶性蛋白，是严重细菌感染和脓毒血症的诊断标志物，对全身细菌感染的诊断和排除具有良好的灵敏度和特异性，常用来区分细菌感染与包括 MP感染在内的非细菌感染40。有研究41指出，血清降钙素原升高是 MPP 患儿热程延长和住院增加的主要危险因素之一。MP 感染急性期血清降钙素原水平略有升高，但随病情恢复而迅速下降16。C-反应蛋白/血清降钙素原值升高提示 MP 感染而非细菌或病毒感染42。在实验室检查指标中，MP 单独感染组患儿的 C-反应蛋白含量升高，与其他感染组比较差异均无统计学意义；血清降钙素原含量普遍升高，MP 单独感染组患儿血清降钙素原含量低于非 MP 感染组，这与高颖猿远、谢维波等43的研究结果一致。因此，在儿童 MP 感染的诊断中应用中性粒细胞百分比、血清降钙素原、C-反应蛋白的联合检测，可以作为判断 MP 感染及感染状况的重要参考指标，以便在早期合理地安排血清学MP 检测，以明确疾病的诊断。综上所述，MP 是下呼吸道感染病原体中的主要病原体之一，在学龄期下呼吸道感染患儿中较常见。秋、冬季是 MP 感染的高峰季节，中性粒细胞百分比、血清降钙素原、C-反应蛋白可以为临床诊断 MP 感染及混合感染病原体类型提供一定的帮助，但作为辅助指标，有一定的局限性，具体诊断还需要结合病原学检测。在临床治疗中，如果单一的抗 MP 感染治疗效果不理想，临床医生应考虑混合感染的可能，以防止 MP 感染发生肺外损害。参考文献：1 郭晓杰，刘静，申秋燕，等.山东省潍坊市 2016-2019 年儿童难治性肺炎支原体肺炎流行病学分析J.中国热带医学，2020，20（9）：893-896.2 Yong SB，Yeh WC，Wu HJ，et al.Impact of mycoplasmapneumonia infection on urticaria：A nationwide，popu原lation-based retrospective cohort study in Taiwan J.PLoS One，2019，14（12）：e0226759.3 Kao KC，Chiu LC，Hung CY，et al.Coinfection andmortality in pneumonia-related acute respiratory dis原tress syndrome patients with bronchoalveolar lavage：Aprospective observational study J.Shock，2017，47（5）：615-620.4 Tanaka T，Oishi T，Miyata I，et al.Macrolide-resistantmycoplasma pneumoniae infection，Japan，2008-2015J.Emerg Infect 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989 Cases of Mycoplasma Pneumoniae inChildren with Lower Respiratory Tract InfectionsWANG Chunli1，SUN Jinhan1，HEI Zhiping2，YAN Yan2，JI Kai2，HAN Lei3，LI Fang4（1.School of Clinical Medicine，Ningxia Medical University，Yinchuan750004，China；2.Department ofBiochemistry and Molecular Biology，School of Basic Medical Sciences，Ningxia Medical University，Yinchuan750004，China；3.Yinchuan Maternal and Child Health Care Hospital，Yinchuan750001，China；4.Department of Respiratory and Critical Care，General Hospital of Ningxia Medical University，Yinchuan750004，China）Abstract：ObjectiveTo investigate the epidemiological and clinical characteristics of mycoplasma pneumoni-ae（MP）infections in children.MethodsFrom 989 children who were first hospitalized for lower respiratory tractinfection in Yinchuan Maternal and Child Health Hospital from January 2018 to January 2020，198 childrenwith MP infection were screened，and their venous blood was collected and tested for mycoplasma pneumoniaeinfection by passive agglutination method.Children with MP infection were analyzed in terms of season，age，gender，and clinical symptoms and laboratory indices.ResultsMP accounted for 198 out of 989 specimens，with a detection rate of 20.0%；among the 198 MP-positive specimens，the infection rate of MP mixed virus wasthe hi