不同生态区维西糯山药品质与生态因子相关性研究.pdf

生态环境学报 2023,32(6):1053-1061 http:/ Ecology and Environmental Sciences E-mail: 基金项目：云南省科技创新强省计划（2014AE014）；维西县乡村振兴涉农项目（ZD20210147）；云南省科技厅 2022“三区”科技人才支持计划 作者简介：杜彩艳（1977 年生），女，副研究员，博士，主要从事植物营养和环境生态研究。E-mail: 收稿日期：2022-12-01 不同生态区维西糯山药品质与生态因子相关性研究 杜彩艳1，杨鹏2，蜂述先2，毛妍婷1，陶琼1，此主拉姆2，彭慧娉2，和建美2，李卫林2 1.云南省农业科学院农业环境资源研究所，云南 昆明 650205；2.维西傈僳族自治县农业农村局，云南 维西 674600 摘要：为了探明生态因子对维西糯山药品质性状的影响，寻找影响维西糯山药生长发育的生态因子。该研究采用 GPS 定位及“点对点”采样方法采集了不同生态区维西糯山药块茎样品和土壤样品各 60 个，对维西糯山药品质进行分析与综合评价，分析了维西糯山药品质与土壤养分相关性，筛选出了影响维西糯山药品质的主要土壤因子，并对品质指标与气象因子之间的关系作了详细分析。结果表明，（1）维西糯山药在不同生态区种植时，其品质存在明显差异。（2）根据各主成分的贡献率可知，对维西糯山药品质指标影响最大的是粘液蛋白含量、皂苷含量、支链淀粉含量、水溶性浸出物、多糖与灰分含量；维西糯山药在不同生态区种植的综合评价结果为：扎子村碧罗村保和镇周边。（3）影响维西糯山药品质的主要土壤因子为：有机质、碱解氮、有效磷、全钾、有效铁、有效锰、有效硼、有效锌、有效铜、交换性钙。（4）Person 相关性分析和冗余（RDA）分析结果表明：生长季最低温度和海拔是影响维西糯山药品质的显著气象因子。生长季最低温度与多糖和多酚之间为负相关关系外，与糯山药其他品质均为正相关关系；海拔与多酚、灰分、水溶性浸出物和粘液蛋白之间均为正相关关系，与多糖、淀粉、直链淀粉、支链淀粉、皂苷、水分和氨基酸之间呈负相关关系。增施有机肥，科学合理施用氮、磷、钾肥，并及时补充钙和铁肥是提升维西糯山药综合品质的关键；此外，在进行维西糯山药种植过程中，应注意生长季最低温度和海拔对糯山药品质的影响。研究结果可为维西糯山药生态种植技术及道地性研究提供依据。关键词：维西糯山药；品质评价；气象因子；生态区；道地性 DOI:10.16258/ki.1674-5906.2023.06.006 中图分类号：Q948;X171.1 文献标志码：A 文章编号：1674-5906（2023）06-1053-09 引用格式：杜彩艳,杨鹏,蜂述先,毛妍婷,陶琼,此主拉姆,彭慧娉,和建美,李卫林,2023.不同生态区维西糯山药品质与生态因子相关性研究J.生态环境学报,32(6):1053-1061.DU Caiyan,YANG Peng,FENG Shuxian,MAO Yanting,TAO Qiong,CI Zhulamu,PENG Huiping,HE Jianmei,LI Weilin,2023.Correlation between quality and ecological factors of Weixi glutinous yam in different ecological regions J.Ecology and Environmental Sciences,32(6):1053-1061.山药也称白山药、薯蓣或土薯，是薯蓣科（Dioscoreaceae）薯蓣属（Dioscorea L.）多个种的统称。山药是多年生的草质藤本植物，为药食同源食材，药性甘、平，益气养阴，补脾肺肾，固精止带（李明军，2013）。因其营养丰富，易消化，可作为食品长期食用。维西糯山药素以软糯细腻、香甜可口而驰名，作为药食又具有补脾养胃、补肺益肾的功效，深得广大食客的喜爱。2021 年 11 月 23 日，维西糯山药被农业农村部列为“农作物 10 大优异种质资源”之一。目前，维西县种植的糯山药面积400 hm2左右，主要分布在保和镇周边、白济汛乡碧罗村、康普乡扎子村，其他乡镇零星种植。然而，随着种植面积不断扩大，由于缺乏科学栽培管理技术指导，导致维西糯山药产业发展缓慢，产量低，品质良莠不齐。生态因素指环境中直接影响药材形态、生理及其分布的因素，光照、温度、水分、空气、土壤是构成生态因素的主要因子，适宜生长环境对优质药材的形成起着举足轻重的作用（谢彩香等，2011）。研究其与中药材品质的相关性，对于筛选最佳种植环境及其道地性研究具有重要意义（Dawish，2014）。郭杰等（2017）研究证实，降水是影响人参皂苷含量的主要气象因子，高温、日照时间是皂苷含量的限制因子，全氮、磷（P）、钾（K）、有机质（OM）、pH 值、铁（Fe）、锰（Mn）、锌（Zn）对人参化学品质的影响较大。年降水量和相对湿度是影响黄花蒿（Artemisia annua）中青蒿素积累的主要气象因子（Huang et al.，2010）。生长环境是影响山药营养品质的重要外在因素，不同山药种植区域的气候条件、土壤养分状况千差万别，导致同种异地山1054 生态环境学报 第 32 卷第 6 期（2023 年 6 月）药质量存在明显差异（郭林宇等，2021）。闫沛沛等（2016）研究表明，河南产地怀山药多糖含量显著高于河北产地怀山药（P0.05），药用价值更高、品质更优。丰县铁棍山药的灰分、多糖、可溶性糖含量和 K、Fe、Zn、铜（Cu）含量显著高于温县铁棍山药（P0.05）。不同生态区维西糯山药灰分含量为 0.46%0.59%（表 1），表现为：碧罗村扎子村保和镇周边，3 个生态区之间相比，差异分别都达到显著水平（P扎子村碧罗村（表 1），其中保和镇周边糯山药多糖含量较碧罗村高 4.28%，3 个生态区之间相比，差异分别都达到显著水平（P0.05）。不同生态区维西糯山药氨基酸含量 13.4%13.7%，水溶性浸出物含量在12.9%14.2%之间，均以扎子村的氨基酸含量和水溶性浸出物含量最高，保和镇周边最低（表 1），然而不同生态区之间糯山药氨基酸含量无显著差异。不同生态区糯山药皂苷含量为：0.26%0.38%（表 1），以扎子村最高，碧罗村次之，保和镇周边最低，3 个生态区之间糯山药皂苷含量都达到显著水平（P0.05）。不同生态区糯山药粘液蛋白含量表现为扎子村最高，碧罗村第二，保和镇周边最低（表1），且不同生态区之间糯山药粘液蛋白含量差异分别都达到显著水平（P扎子村保和镇周边，然而不同生态区之间糯山药多酚含量差异不显著。不同生态区糯山药淀粉含量从高到低依次为：扎子村碧罗村保和镇周边（表 1），3 个生态区之间差异分别都达到显著水平（P碧罗村保和镇周边，3 个生态区之间差异分别都达到显著水平（P0.05）。不同生态区糯山药支链淀粉含量高低顺序与淀粉、直链淀粉含量相同，以扎子村最高，达 12.5%，均显著高于碧罗村 13.1%、保和镇周边 13.8%（P0.05），碧罗村和保和镇周边之间支链淀粉含量差异不显著。2.2 不同生态区维西糯山药品质综合评价 对不同生态区维西糯山药块茎主要品质性状指标进行主成分分析，得到不同生态区糯山药成分特征、方差贡献率和累计贡献率（表 2）。第 1 主成分特征值 4.75，方差贡献率 43.2%，第 2 主成分特征值 1.67、方差贡献率 15.2%，第 3 主成分特征值1.35、方差贡献率 12.3%，第 4 主成分特征值为 1.03，方差贡献率 9.39。4 个主成分特征值均大于 1，并且累计方差贡献率达到 80.1%，可代表维西糯山药块茎主要品质性状指标基本信息。根据因子旋转后的载荷矩阵可知，主成分 1 中，以粘液蛋白含量（0.92）、皂苷含量（0.80）、支链淀粉含量（0.81）、水溶性浸出物（0.61）、多糖（0.66）与灰分含量（0.91）为主，说明在第一个主成分中主要反映这 6 个指标主要信息；第 2 主成分主要以淀粉含量（0.71）与水溶性浸出物含量（0.67）为主；第 3 主成分主要以直链淀粉含量为主；第 4 主成分主要以氨基酸含量（0.85）为主。根据各主成分贡献率，说明对维西糯山药品质影响最大是粘液蛋白含量、皂苷含量、支链淀粉含量、水溶性浸出物、多糖与灰分含量。进一步计算变量，得到 4 个主成分 Y1、Y2、Y3和 Y4的函数表达式如下：表 1 不同生态区维西糯山药品质比较 Table 1 Comparison of the quality of Weixi glutinous yam in different ecological regions%品质指标 碧罗村 保和镇周边 扎子村 水分含量 74.92.07a 1)76.54.68a 76.32.62a 灰分含量 0.590.03a 0.460.02c 0.540.02b 多糖含量 7.280.15c 7.650.13a 7.470.07b 氨基酸含量 13.50.41a 13.40.69a 13.70.66a 水溶性浸出物含量 13.30.79a 12.90.87a 14.20.60a 粘液蛋白含量 0.860.06b 0.730.03c 0.950.04a 皂苷含量 0.290.01b 0.250.02c 0.380.03a 多酚含量 0.040.00a 0.040.00a 0.040.00a 淀粉含量 17.40.54b 16.70.62c 19.30.80a 直链淀粉含量 6.620.42b 6.000.25c 6.830.23a 支链淀粉含量 10.80.45b 10.70.52b 12.50.73a 1)平均值标准误（n=20），不同小写字母表示处理间差异显著（P碧罗村保和镇周边（表 3）。2.3 维西糯山药品质与不同生态区土壤养分之间的相关性分析 2.3.1 不同生态区土壤养分状况分析 为了了解土壤养分含量与不同生态区维西糯山药品质之间关系，本研究对土壤因子与糯山药品质指标进行相关性分析和多元回归分析建立回归方程，对影响糯山药品质主要土壤因子进行筛选。表 4 表明，维西县不同生态区土壤 pH 在 5.575.78 之间，3 个生态区间无显著差异。维西糯山药 3 个主要种植生态区土壤有机质含量依次为：碧罗村扎子村保和镇周边，3 个生态区之间差异分别都达到显著水平（P0.05）。维西糯山药主要种植生态区土壤碱解氮含量为 102.2199.4 mgkg1（表 4），以碧罗村最高，保和镇周边最低，3 个生态区之异差异分别都达到显著水平（P0.05）。维西糯山药 3 个主要种植生态区中扎子村土壤有效磷最高，为 36.6 mgkg1，较碧罗村、保和镇周边分别高 19.68%和 43.08%，3 个生态区间差异分别都达显著水平（P0.05）；速效钾含量碧罗村（370.9 mgkg1）生态区显著高于扎子村（336.9 mgkg1）和保和镇周边（266.4 mgkg1），3个生态区间差异分别都达显著水平（P0.05）。维西糯山药 3 个生态区土壤全氮含量以碧罗村（2.90 mgkg1）最高（表 4），扎子村（2.66 gkg1）次之，保和镇周边（1.82 gkg1）最低，3 个生态区间差异分别达到显著水平（P0.05）；碧罗村和扎子村土壤全磷含量分别为 1.05gkg1和 1.00gkg1显著高于保和镇周边全磷含量 0.66 gkg1；全钾含量扎子村生态区显著高于碧罗村和保和镇周边（P0.05），碧罗村和保和镇周边生态区全钾含量无显著差异。3 个不同生态区土壤中有效锌、有效锰、有效铁和有效硼含量均存在显著性差异（P碧罗村保和镇周边；土壤有效硼含量表现为扎子村最高为 0.73 mgkg1，保和镇周边（0.64 mgkg1）居中，碧罗村 0.53 mgkg1最低。就有效铜而言，3 个生态区表现为碧罗村显著高于扎子村和保和镇周边（P0.05），扎子村和保和镇周边无显著差异；维西县 3 个主要种植糯山药生态区土壤交换性钙为 1042.11808.0 mgkg1，扎子村最高，保和镇周边最低，3 个生态区间差异亦分别都达显著水平（P0.05）；保和镇周边土壤交换性镁（209.9 mgkg1）含量最高，扎子村（194.3 mgkg1）次之，碧罗村（182.2 mgkg1）最低，3 个生态区间差异分别都达显著水平（P0.05）。就土壤阳离子交换量而言，3 个生态区表现为碧罗村（17.9 cmolkg1）显著高于保和镇周边和扎子村（P0.05），保和镇周边和扎子村无显著差异。2.3.2 维西糯山药品质与土壤养分的相关性分析 土壤养分与维西糯山药品质之间的相关性如表 5 所示，除土壤 pH、全钾外，多糖含量与有效硼呈正相关关系；与有效锰、交换性镁呈极显著正相关关系，相关系数分别为 0.721 和 0.461，与有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、全磷、有效锌、有效锰、有效铁、有效铜、交换性钙和阳离子交换量之间均有极显著负相关关系；淀粉含量与有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、全磷、全钾、有效锌、有效铁、有效硼和交换性钙之间呈极显著正相关关系，但与交换性镁呈显著负相关，与有效锰呈极显著负相关关系，相关系数为0.526；直链淀粉含量与有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、全磷、全钾、有效锌、有效铁、交换性钙和阳离子交换量之间呈极显著正相关关系，但与有效锰和交换性镁呈极显著负相关关系，相关系数分别为0.696 和0.415；支链淀粉含量与碱解氮、有效磷、全磷、全钾、有效锌、有效铁、有效硼和交换性钙之间呈极显著正相关关系，但与有效锰之间呈极显著负相关关系；灰分含量与有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、全氮、全磷、有效锌、有效铁、交换性钙和阳离子交换量之间呈极显著正相关关系（P扎子村碧罗村外；生长季平均温、最低温度和昼夜温差均表现为：扎子村保和镇周边碧罗村。降水是一个地区湿度的直接影响因子，是糯山药生长发育的重要影响因子之一。表 7 中显示了不同生态区年总降水量与糯山药生长季的总降水量，年总降水量为：碧罗村扎子村保和镇周边（表 7）；生长季总降水为：碧罗村保和镇周边扎子村。海拔主要通过影响环境中温度及降雨量对植物生长产生影响。表 7 表明，3 个不同生态区海拔为：碧罗村保和镇周边扎子村。2.4.2 气象因子与维西糯山药品质之间的相关性分析 对维西糯山药不同生态区 7 个气象因子与维西糯山药 11 个品质指标进行 RDA 分析（图 2）。结果表明，所选择的 7 个气象因子共解释了 57.8处理变化信息。前 2 轴累计解释了 50.3%的处理变化信息 7.61%的糯山药品质指标与环境因子变化关系信息。根据 Effects 重分析，在选择的 7 个因子共同作用下，生长季最低温对维西糯山药品质影响解释度是：42.1%，P=0.002；海拔对维西糯山药品质影响解释度：15.8%，P=0.002，可以看出生长季最低温度和海拔是影响维西糯山药品质的显著环境因子（P0.05）。生长季最低温度与多糖和多酚之间为负相关关系外，与糯山药其他品质均为正相关关系；海拔与多酚、灰分、水溶性浸出物和粘液蛋白之间均为正相关关系，与多糖、淀粉、直链淀粉、支链淀粉、皂苷、水分和氨基酸之间呈负相关关系。3 讨论 3.1 不同生态区维西糯山药品质的分析 药用植物的品质除决定于物种的遗传特性，生态环境对物种亦起重要作用（祝蕾等，2021）。近年来，维西糯山药的种植面积在不断扩大，基于维西表 7 不同生态区主要气象资料 Table 7 Main meteorological data for different ecological regions 气候因子 年总降水/mm 生长季平均温度/生长季最低温度/生长季最高温度/昼夜温差/生长季总降水/mm 海拔/m 保和镇周边 829 16.4 6.5 25.8 11.1 673.1 2 326.1 碧罗村 1 416.4 15.4 6.2 21.7 10.7 1 122.6 2 483.1 扎子村 839.1 19.5 13.5 23.1 13.2 661 2 298.1 表 6 影响维西糯山药品质的主要土壤养分因子筛选和回归方程建立 Table 6 Selection of main soil nutrient factors affecting the quality of Weixi glutinous yam and establishment of regression equations 品质指标 主要影响因子 回归方程 方程 F 值 Y1多糖含量 X3碱解氮、X8全钾 Y1=0.709+0.021X30.004X8 43.4*Y2淀粉含量 X8全钾、X9有效锌 Y2=12.8+0.23X8+0.55X9 68.4*Y3直链淀粉含量 X11有效铁、X3碱解氮 Y3=4.84+0.02X11+0.004X3 38.9*Y4支链淀粉含量 X8全钾 Y4=6.44+0.29X8 105.3*Y6灰分含量 X10有效锰，X13有效硼，X12有效铜 Y6=0.7230.002X100.101X130.06X12 87.9*Y7水溶性浸出物含量 X9有效锌、X16阳离子交换量 Y7=13.6+0.625X90.098X16 18.4*Y8粘液蛋白含量 X9有效锌、X12有效铜、X8全钾、X2有机质 Y8=0.23+0.031X9+0.109X12+0.016X8+0.003X2 68.5*Y9皂苷含量 X8全钾、X14交换性钙 Y9=0.004+0.011 X8+0.001X14 129.9*Y10水分含量 X1 pH Y10=58.3+3.10X1 4.3*Y11氨基酸含量 X4有效磷、X15交换性镁 Y11=11.1+0.029X4+0.008X15 5.34*杜彩艳等：不同生态区维西糯山药品质与生态因子相关性研究 1059 糯山药本身的遗传因素和生长环境的影响，维西糯山药在不同生态区种植时，块茎品质性状存在差异。对其差异进行分析与综合评价有利于选择优异种质和推广种植。本研究选择保和镇周边、白济汛乡碧罗村和康普乡扎子村 3 个不同生态区的维西糯山药进行品质的差异分析与评价，在此之前，并未见对维西糯山药品质指标进行相关研究，本研究一定程度上填补了维西糯山药在不同生态区种植时块茎品质差异方面的研究空白。但此研究结果仅限于对2021 年不同生态区维西糯山药块茎品质的分析。主成分分析法被广泛用于农产品品质评价因子的筛选和品质的综合评价，适用于评价指标较多时的降维处理，利用主成分分析法进行降维处理后，可以根据主成分综合得分模型计算综合得分值进行排序评价（关倩倩等，2018；郭林宇等，2021）。本研究通过主成分分析可以将糯山药块茎品质的11 个指标简化为 4 个主要成分，4 个主要成分特征值均大于 1，方差贡献率达 80.1%，可以代表指标绝大部分的信息，根据主成分得分方程计算得到不同生态区的综合得分，由此可知维西糯山药在保和镇周边、白济汛乡碧罗村和康普乡扎子村 3 个不同生态区种植时，综合得分顺序为：扎子村碧罗村保和镇周边。这一结果与康普乡扎子村生态区的昼夜温差大有关，这与田彦龙等（2021）的结果类似。不同生态区糯山药综合品质各有差异，可能是因为气象因子和土壤因子对山药块茎品质有综合影响，生态因子与农产品品质之间有着极为复杂的关系（Hossain et al，2011）。3.2 维西糯山药品质与生态因子的关系 本研究在对不同生态区维西糯山药块茎品质进行差异分析及评价基础上，进一步研究了糯山药块茎品质与土壤、气象因子之间相关性。不同矿质元素对糯山药块茎品质影响不同。本研究发现，通过相关系数大小筛选的影响糯山药块茎品质的土壤因子与应用典型相关性分析得出的结果存在较大差异。因此需要采用多元分析法代替简单相关性分析，才能探究土壤元素与糯山药块茎品质之间关系。本研究通过典型相关性分析，分析了不同生态区维西糯山药块茎品质与种植土壤养分含量两个不同正态总体间关系，并筛选出有机质、碱解氮、有效磷、全钾、有效铁、有效锰、有效硼、有效锌、有效铜、交换性钙是影响糯山药块茎品质重要因子。陈美艳等（2021）通过典型相关性分析，分析了 32 家 东红 猕猴桃果园果实品质与果园土壤元素两个不同正态总体间关系，并筛选出土壤果园有机质含量是影响果实综合品质的重要因子，其次是速效钾、有效硫和碱解氮。刘振成等（2021）采用相关性分析、多元回归分析等方法，探讨了土壤因子对朝鲜淫羊藿活性成分的影响，结果发现，影响朝藿定 A 的土壤决定因子是有效钙；影响朝藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷的土壤决定因子是有效钙、有效镁；影响总黄酮土壤决定因子是有机质、有效钙、有效镁、碱解氮。高柱等（2022）采用典型相关性分析筛选出交换性镁、有效态铜是影响红阳猕猴桃果实品质的关键土壤因子，其次为有机质、有效态铁与土壤 pH。综上可以看出，影响作物品质主要土壤因子因不同研究区不同作物不同品种各有差异，这主要与土壤养分背景值、作物种类不同所致。气象因子对中药材质量的影响主要通过气温、光照、降雨量等来表达。赵倩（2019）研究了北沙参多糖及浸出物含量与气象因子相关性，结果显示水溶性浸出物、多糖含量与海拔高度、日照时数等呈正相关，与降水量、相对湿度呈负相关，与经纬度有一定相关性。郭兰萍等（2005）通过逐步回归分析寻找影响苍术质量的生态主导因子，结果表明，降雨量是影响其质量的生态主导因子之一，降雨量越大组分与总挥发油含量就越高，而组分是随旱季长短和降雨量大小处于动态变化中。影响人参皂苷含量的气象因子主要是降水，高温、日照时间是皂苷含量的限制因子（郭杰等，2017）。赵英等（2001）通过对西洋参产地生态环境进行分析，确定月平均气温、月平均气温、年相对空气湿度、年降雨量和无霜期作为其气候生态的控制因子。本研究 图 2 气象因子与维西糯山药品质的 RDA 分析 Figure 2 RDA analysis of meteorological factors and the quality of Wixi glutinous yam 1060 生态环境学报 第 32 卷第 6 期（2023 年 6 月）对维西保和镇周边、白济汛乡碧罗村、康普乡扎子村 3 个不同生态区的气象因子与糯山药块茎品质相关性进行研究。结果表明，生长季最低温度和海拔是影响维西糯山药品质的显著环境因子。生长季最低温度与多糖和多酚之间为负相关关系外，与糯山药其他品质均为正相关关系；海拔与多酚、灰分、水溶性浸出物和粘液蛋白之间均为正相关关系，与多糖、淀粉、直链淀粉、支链淀粉、皂苷、水分和氨基酸之间呈负相关关系。可见，糯山药块茎品质形成与产生地气象条件密切相关，同一品质指标同时受多个气象因子影响，同一气象因子也影响糯山药多个品质指标，这与杨素苗等（2021）和张波等（2022）研究结果基本一致，但不同作物之间存在较大差异性。此外，研究中气象资料均来自于维西糯山药不同生态区所在乡镇两要素自动站数据，缺少日照时数等要素，气象要素不全，不能完全代表糯山药不同生态区气象条件，因此分析结论将有待进一步完善和验证。4 结论（1）根据各主成分贡献率可知，对维西糯山药品质指标影响最大为粘液蛋白含量、皂苷含量、支链淀粉含量、水溶性浸出物、多糖与灰分含量。（2）通过对土壤养分与果实品质进行 Person 相关分析、多元逐步回归筛选影响果实品质主要土壤指标和回归方程的建立，结果表明，影响维西糯山药品质主要土壤因子为：有机质、碱解氮、有效磷、全钾、有效铁、有效锰、有效硼、有效锌、有效铜、交换性钙。增施有机肥，科学合理施用氮、磷、钾肥，并及时补充钙和铁肥是今后提升维西糯山药综合品质的关键。（3）生长季最低温度和海拔是影响维西糯山药品质显著环境因子。生长季最低温度与多糖和多酚之间为负相关关系外，与糯山药其他品质均为正相关关系；海拔与多酚、灰分、水溶性浸出物和粘液蛋白之间均为正相关关系，与多糖、淀粉、直链淀粉、支链淀粉、皂苷、水分和氨基酸之间呈负相关关系。在进行维西糯山药种植过程中，应注意生长季最低温度和海拔对糯山药品质的影响。参考文献：DAWISH M S A,2014.Essential oil variation and trace metals content in garden sage(Salvia officinalis L.)grown at different environ-mental conditions J.Journal of Agriculture Science,6(3):209.HOSSAIN M B,PATRAS A,BARRY-RYAN 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