2种生物农药防治番茄根结线虫田间药效及安全性评价.pdf

Pesticide Science and Administration 2023,44(7)应用技术2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 种种种种种种种种种种种种种种生生生生生生生生生生生生生生物物物物物物物物物物物物物物农农农农农农农农农农农农农农药药药药药药药药药药药药药药防防防防防防防防防防防防防防治治治治治治治治治治治治治治番番番番番番番番番番番番番番茄茄茄茄茄茄茄茄茄茄茄茄茄茄根根根根根根根根根根根根根根结结结结结结结结结结结结结结线线线线线线线线线线线线线线虫虫虫虫虫虫虫虫虫虫虫虫虫虫田田田田田田田田田田田田田田间间间间间间间间间间间间间间药药药药药药药药药药药药药药效效效效效效效效效效效效效效及及及及及及及及及及及及及及安安安安安安安安安安安安安安全全全全全全全全全全全全全全性性性性性性性性性性性性性性评评评评评评评评评评评评评评价价价价价价价价价价价价价价马明敏,李 凡,史 东(滨州市农业农村局,山东 滨州 256600)收稿日期：2023-3-23 作者简介：马明敏，男，高级农艺师，主要从事农业技术推广及农业综合执法工作。联系电话：[phone]；E-mail：bznyzf 。通讯作者：李凡，男，农艺师，主要从事农业综合执法工作。E-mail：bznyzf 。通讯作者：史东，男，农艺师，主要从事农业综合执法工作。E-mail：bznyzf 。Study on the Field Efficacy and Safety of Two Biopesticide Against Tomato Root-knot Nem-atodeMa Mingmin,Li Fan,Shi Dong(Binzhou Agricultural and Rural Bureau,Binzhou Shandong 256600,China)Abstract:Tomato production faces significant threats from the root knot nematode,a pervasive soil-borne disease.This study investigates the efficacy and safety of two biopesticides,paecilomy-ces lilacinus(1 billion live spores/g GR)and bacillus cereusl(1 billion CFU/ml SC),against the tomato root-knot nematode.The field efficacy and safety of two biological nematicides against toma-to root-knot nematodes were evaluated using both sprinkling and root irrigation method.The safety study indicated that both biological nematicides were remarkably safe for tomato,with safety factors of 400%each.Furthermore,the results of field efficacy trials showed that paecilomyces lilacinus(1 billion live spores/g GR)and bacillus cereusl(1 billion CFU/ml SC)provided over 80%control efficacy against the tomato root-knot nematode and was safe for tomatoes at the tested doses.These results showed that paecilomyces lilacinus(1 billion live spores/g GR)and bacillus cereusl(1 bil-lion CFU/ml SC)are highly effective biological nematicide for controlling root-knot nematode in to-matoes.Key words:Root-knot nematode;paecilomyces lilacinus;bacillus cereusl;field efficacy摘 要:根结线虫是危害番茄安全生产的主要土传病虫害之一,为明确 10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂和 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂用于防治番茄根结线虫的田间实际防15应用技术 Pesticide Science and Administration 2023,44(7)效,本研究采用撒施法、灌根法分别评价了 2 种生物药剂对番茄根结线虫的田间防效以及对番茄的安全性。安全性试验结果表明,10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂和 10 亿 CFU/mL蜡质芽孢杆菌悬浮剂对番茄十分安全,安全系数分别为 4.0。田间药效试验结果表明,10亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂和 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂试验剂量下防效均在70%左右。研究表明,10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂和 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂对根结线虫具有较好的防治效果,可推荐作为田间防治番茄根结线虫的药剂。关键词:根结线虫;淡紫拟青霉;蜡质芽孢杆菌;田间防效中图分类号:S482.3;S481+.9 文献标志码:A文章编号:1002-5480(2023)7-51-6番茄是世界上重要的蔬菜作物之一,在我国番茄种植分布广泛,一直采用日光温室、塑料棚和露地栽培等 3 种方式,一年四季均有栽培1。按照栽培方式和收获季节不同,主要划分为 5 个种植区域,分别为黄淮海及环渤海设施生产区域、北部高纬度夏秋生产区域、长江流域早春生产区域、西南冬季生产区域和华南番茄生产区域。随着我国农业供给侧结构性改革及产业扶贫事业的大力推进,番茄作为高收益蔬菜品种,种植面积不断扩大,已成为主产区种植户的主要经济来源2-3。根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类专性植物寄生病原线虫,寄生在植物根系处,其寄主范围广泛,多达 5 500 多种,在一些重要的蔬菜如番茄、黄瓜、菠菜以及一些葫芦科、豆科、十字花科的作物上均有发生4-6。根结线虫可使植物根部形成大小不等的球状根瘤,水分和养料的运输受阻,导致其叶片发黄、植株矮化等问题。随着番茄种植面积不断扩大,尤其设施栽培番茄占比不断提高,同时番茄复种指数不断增加,重茬现象严重,根结线虫的危害日趋严重,其病害发生地番茄产量损失达 30%50%,严重地块甚至 70%7,种植户对根结线虫的防治需求十分迫切性。生产实际中根结线虫的防治方式主要有农业防治、物理防治、生物防治和化学防治,其中化学防治仍是最普遍的防治方式,但由于其高毒、高污染等特性,部分化学药剂开始被禁用或者限制使用,同时随着国家出台化肥农药减量增效方案8-9,毒性低、残留少、环境兼容性好的生物农药越来越受重视,市场对于生物农药防治番茄根结线虫的缺口逐渐扩大,亟待增加安全有效的生物农药产品。本研究开展了 10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂和 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂 2 种生物农药防治番茄根结线虫田间药效试验,以期为评价 2 种药剂防治番茄根结线虫的田间防效及作物安全性提供数据支撑,并指导种植户科学选药、合理用药,有效控制番茄根结线虫的为害。1 材料与方法1.1 供试材料 防治对象:根结线虫。供试品种:金鹏 8 号、普罗旺斯、罗拉、一点红、金鹏 1 号、瑞珍番茄和天正粉奥 4 个主栽品种。试验场地:重庆市北培区东阳镇蔬菜基地;河南省新郑市民升种植专业合作社生产基地;安徽省萧县龙城镇;湖南省长沙县春华试验基地。1.2 试验药剂 10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂;10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂;10%噻唑膦颗粒剂。1.3 试验方法1.3.1 作物安全性试验 按照 农药对作物安25 Pesticide Science and Administration 2023,44(7)应用技术全性评价准则第 1 部分:杀菌剂和杀虫剂对作物安全性评价室内试验方法(NY/T 1965.1-2010)要求,10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂设置 2 000、4 000、8 000 g/667 m2 3 个剂量处理,10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂设置6.7、13.4、26.8 mL/667 m2 3 个剂量处理,以清水为对照处理,共 7 个处理,每个处理 4 次重复,每盆 1 株番茄植株,每个重复 8 盆。将处理后的番茄植株放置在环境条件为温度 251、湿度为 80%的玻璃温室内培养(光暗比为 12 h 12 h)。根据需要定量浇水,观察试验结果。药后第 3 d 调查番茄受害情况,并记录番茄有无变色、坏死和萎蔫、畸形等药害症状,并进行相应的药害程度描述。药后第 21 d 调查番茄生长和受害情况,并记录番茄有无生长发育延缓和畸形等药害症状,并进行相应的药害程度描述,测量株高,计算生长速率及其抑制率。1.3.2 田间药效试验 试验在温室大棚内开展,小区面积为 1520 m2,重复 4 次,随机区组排列。10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂试验于番茄移栽前,拌土开沟撒施施药 1 次,用土量 4 kg/667 m2。10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂试验于番茄移栽后,兑水稀释后灌根施药 1 次,用水量为 750 L/667 m2,试验药剂处理浓度(表 1)。表 1 试验处理设计处理编号药剂施药制剂量(g、mL/667 m2)备注110 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂1 500210 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂2 000310 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂2 500410%噻唑膦颗粒剂(对照)1 333510 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂4610 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂5.3710 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂6.7810%噻唑膦颗粒剂(对照)1 3339空白对照/施药后不定期观察番茄生长情况,并于施药后 60 d 调查试验结果,以株为单位,每个小区对角线五点取样,每点调查相连 5 株,共 25株。记录总株数、病株数和病级数,计算病情指数、防治效果。根结线虫病情分级标准如:0 级:无根结(根系上无虫瘿);1 级:根系上有少量根结;3 级:三分之二根系上有虫瘿;5 级:根系上布满小虫瘿,并有次生虫瘿;7 级:根系形成根须团。1.4 数据统计与分析调查结果按下列公式进行统计。公式(1):生长速率=地上部植株新生高度或长度生长天数 公式(2):生长速率抑制率=空白对照生长速率-药剂处理的生长速率空白对照生长速率100 公式(3):安全系数=药剂对作物的最大无影响试验剂量药剂田间最高推荐使用剂量35应用技术 Pesticide Science and Administration 2023,44(7)公式(4):病情指数=各级病株数相对级数字总株数7100 公式(5):防治效果(%)=CK1-PT1CK1100式中:CK1-空白对照区施药后病情指数 PT1-药剂处理区施药后病情指数2 结果与分析2.1 作物安全性试验结果安全性试验结果表明(表 2),10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂(2 000、4 000、8 000 g/667 m2)、10 亿 CFU/mL蜡质芽孢杆菌悬浮剂(6.7、13.4、26.8 mL/667 m2)在田间最大推荐剂量的 1、2、4 倍剂量下,常规处理番茄植株,对 3 品种的番茄株高、生长速率以及生长速率抑制率无明显影响,且植株的叶片形态、叶色等性状也无差异。在试验中观察可知各处理均无药害症状出现。2 种药剂对番茄的安全系数为 4.0。表 2 10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂和 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂对番茄安全性系数测定结果试验药剂施药剂量(g、mL/667 m2)金鹏 8 号普罗旺斯罗拉生长速率(cm/d)生长速率抑制率(%)生长速率(cm/d)生长速率抑制率(%)生长速率(cm/d)生长速率抑制率(%)10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂2 0000.39 a-1.99 a0.52 a-4.28 a0.48 a-4.94 a4 0000.40 a-3.97 a0.54 a-7.63 a0.46 a0.87 a8 0000.39 a-1.88 a0.51 a-1.71 a0.47 a-3.00 aCK0.38 a/0.50 a/0.46 a/安全系数4.04.04.010 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆 菌 悬浮剂6.70.40 a-1.80 a0.51 a-1.20 a0.47 a-2.61 a13.40.39 a-1.03 a0.52 a-3.79 a0.48 a-3.26 a26.80.41 a-3.85 a0.51 a-2.41 a0.47 a-1.96 aCK0.39 a/0.50 a/0.46 a/安全系数4.04.04.02.2田间药效试验结果10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂防治番茄根结线虫田间药效试验结果表明(表 3):1 500 g/667 m2处理下,4 地防效为 60.75%66.30%;2 000 g/667 m2处理下,4 地防效为 66.80%73.82%;2 500 g/667 m2处理下,4 地防效为 72.87%81.72%;对照药表 3 10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂防治番茄跟根结线虫病田间药效试验结果药剂施药剂量(g/667 m2)重庆陕西安徽湖南病情指数防效病情指数防效病情指数防效病情指数防效10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂1 50026.7961.25 cC26.5766.30 bB16.4760.75 bB17.8662.68 cB2 00022.9566.80 bB23.1470.65 cCD12.4270.51 aAB12.573.82 abAB2 50016.5276.09 aA20.8673.55 dD11.4172.87 aA8.5781.72 aA45 Pesticide Science and Administration 2023,44(7)应用技术续表药剂施药剂量(g/667 m2)重庆陕西安徽湖南病情指数防效病情指数防效病情指数防效病情指数防效10%噻 唑膦颗粒剂1 33327.0567.73 bB2469.57 cBC13.9566.52 abAB12.8672.85 bAB空白对照/69.11-78.86-42.51-47.14-剂 10%噻唑膦颗粒剂 1 333 g/667 m2处理下,4 地防效为 66.52%72.85%。对照药剂的防效与试验药剂中剂量防效相当,较试验药剂高剂量防效低,且具有差异显著性。同时,试验药剂的防效随着施药剂量的增加而升高,具有较好的线性关系,说明试验药剂对根结线虫活性十分稳定。10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂防治番茄根结线虫田间药效试验结果表明(表 4):4 mL/667 m2处理下,4 地防效为 54.62%73.01%;5.3 mL/667 m2处理下,4 地防效为60.68%76.93%;6.7 mL/667 m2处理下,4地防效为 68.04%80.74%;对照药剂 10%噻唑膦颗粒剂 1 333 g/667 m2处理下,4 地防效为 60.16%77.28%。对照药剂的防效与试验药剂中剂量防效相当,较试验药剂高剂量防效低,且具有差异显著性。同时,试验药剂的防效随着施药剂量的增加而升高,具有较好的线性关系,说明试验药剂对根结线虫活性十分稳定。表 4 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂防治番茄跟根结线虫病田间药效试验结果药剂施药剂量(mL/667 m2)重庆陕西安徽湖南病情指数防效病情指数防效病情指数防效病情指数防效10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆 菌 悬浮剂431.4354.62 cC13.9373.01 cC18.3463.35 bB9.1759.80 bB5.327.2360.68 bBC11.976.93 bB16.9566.04 bAB8.3364.83 abAB6.722.1468.04 aA9.9480.74 aA14.7270.62 aA5.5675.91 aA10%噻 唑膦颗粒剂1 33327.4160.43 bAB11.7377.28 bB17.2365.41 bAB9.1760.16 bB空白对照/69.29-51.61-50.03-23.06-3 结论与讨论根结线虫寄主广、危害重,每年对我国农业生产造成巨大的经济损失,传统的化学农药不仅用量大,对土壤造成污染,而且随着长时间的使用,抗药性问题也日渐突出10-11,相较于传统化学农药防治的种种弊端,目前生物农药以其低毒、低残留、对环境无害和容易分解的优势,在绿色蔬菜病虫害防治中得到了广泛应用。同时,应用生物农药也是促进化学农药减量使用的有效措施之一,因此生物药剂防治根结线虫越来越受到关注,筛选并推广生物农药用于防治番茄根结线虫具有十分重要的意义。淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)属于内寄生性真菌,是一些植物寄生线虫的重要天敌,在低浓度时还能够促进植物根系与植株的生长。蜡质芽孢杆菌(bacillus cereus)是一种在土壤中分离得到的微生物,也同时具有促进作物的生长和防治根结线虫病等多种土传病害的功效。55应用技术 Pesticide Science and Administration 2023,44(7)已有研究发现应用淡紫拟青霉和蜡质芽孢杆菌不仅可以有效控制番茄根结线虫的危害,而且能够促进植株生长,提高番茄的产量和品质12。在本研究中田间药效试验结果表明,10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂 2 0002 500 g 制剂/667 m2处理下防效在 75%左右,10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂 5.36.7 mL 制剂/667 m2处理下防效在70%左右,在田间推荐剂量下 2 种生物农药均能达到较好的防治效果。因此,生产中推荐在番茄移栽前开沟撒施 10 亿活孢子/g 淡紫拟青霉颗粒剂 2 0002 500 g 制剂/667 m2或者在番茄移栽后灌根施用 10 亿 CFU/mL 蜡质芽孢杆菌悬浮剂 5.36.7 mL 制剂/667 m2,施药 1 次,可有效防治番茄根结线虫的危害。参考文献1 杜若鹏,寇远涛,朱亮.基于近 20 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