PEG-IFN α-2b治疗后慢性乙肝患者体内PBMC中的p11 mRNA GRα mRNA水平与抑郁症的相关性.pdf

基础研究论著P E G-I F N-2 b治疗后慢性乙肝患者体内P BMC中的p 1 1mR NAG R mR NA水平与抑郁症的相关性庞盼姣李长安赵巍峰王园园李赢作者 简 介:庞 盼 姣,女,4 1岁,汉族,博士,讲师。主要研究成果:发表S C I论文3篇,获 批 国 家 自然科学 基 金 项 目1项,参与国家自然科学基金项目2项。研 究 方 向:肿瘤机制研究。【摘要】目的研究经聚乙二醇干扰素-2 b治疗后,慢性乙肝患者外周血单个核细胞中p 1 1mR NA、糖皮质激素受体(G R)mR NA水平与抑郁症的相关性。方法对6 0例慢性乙型肝炎患者进行编号,采用随机数字表法,随机分为观察组和对照组各3 0例,均常规给予护肝和抗病毒治疗,观察组在此基础上给予聚乙二醇干扰素-2 b治疗,疗程均为2 4周。采用汉密顿抑郁量表评估两组患者治疗前后的抑郁水平,检测外周血中的炎症因子、神经递质、p 1 1mR NA和G R mR NA水平,并对两组患者p 1 1mR NA、G R mR NA水平与抑郁症评分进行相关性分析。结果两组患者治疗2 4周后,乙型肝炎病毒D NA应答率均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P0.0 5)。两组患者治疗2 4周后,汉密顿抑郁量表评分、血清干扰素和肿瘤坏死因子水平均较治疗前升高(P0.0 5或0.0 1),白细胞介素-4、血浆甲肾上腺素和5-羟色胺水平较治疗前降低(P0.0 5或0.0 1),而观察组汉密顿抑郁量表评分和抑郁症发生率均明显高于对照组(P0.0 5)。两组患者治疗2 4周后,观察组外周血单个核细胞中p 1 1mR NA水平高于对照组(P0.0 5),G R mR NA水平则低于对照组(P0.0 5),且观察组外周血单个核细胞中p 1 1mR-NA与干扰素、TN F-和汉密顿抑郁量表评分呈正相关性(P0.0 1),G R mR NA与血浆甲肾上腺素、5-羟色胺水平和汉密顿抑郁量表评分也呈正相关性(P0.0 1)。结论聚乙二醇干扰素-2 b治疗后慢性乙肝患者外周血单个核细胞中p 1 1mR NA表达明显升高,G R mR NA表达明显降低,且与外周血炎症因子和神经递质表达密切相关,可能是导致抑郁症发生的重要原因。【关键词】慢性乙型肝炎;聚乙二醇干扰素-2 b;抑郁症;外周血单个核细胞;p 1 1;G R;相关性d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-1 8 7 X.2 0 2 3.0 4.0 0 1【中图分类号】R5 1 2.6 2【文献标识码】AC o r r e l a t i o no fp 1 1a n dG R m R N Al e v e l s i nP BMCw i t hd e p r e s s i o ni np a t i e n t sw i t hc h r o n i ch e p a t i t i sBt r e a t e da f t e rP E G-I F N-2 bt r e a t m e n tP a n gP a n j i a o,L iC h a n g a n,Z h a oW e i f e n g,W a n gY u a n y u a n,L iY i n g(F i r s t-a u t h o r sa d d r e s s:X i n x i a n gM e d i c a lU n i v e r s i t y,X i n x i a n g4 5 3 0 0 3,H e n a n,C h i n a)C o r r e s p o n d i n ga u t h o r:L iC h a n g a n(E m a i l:l i c h a n g a n 3 6 91 2 6.c o m)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T os t u d yt h ec o r r e l a t i o no fp 1 1mR NAa n dG R mR NAl e v e l si np e r i p h e r a lb l o o dm o n o n u c l e a rc e l l s(P BMC)a n dd e p r e s s i o n i np a t i e n t sw i t hc h r o n i ch e p a t i t i sB(CH B)a f t e rP E G-I F N-2 bt r e a t m e n t.M e t h o d s S i x t yCH Bp a t i e n t sw e r en u m b e r e da n dd i v i d e d i n t oo b s e r v a t i o n(n=3 0)a n dc o n t r o l(n=3 0)g r o u pa c c o r d i n g t or a n d o mn u m b e r t a b l e,b o t hg r o u p s r e c e i v e dr o u t i n e l i v e rp r o t e c t i o na n da n t i v i-r a l t h e r a p y,o nt h i sb a s i so b s e r v a t i o ng r o u pw a sp l u sP E G-I F N-2 bt h e r a p y,a n dt h ec o u r s eo f t r e a t m e n tw a s2 4w e e k s.P r e-a n dp o s t-t r e a t m e n t s c o r e so fb o t hg r o u p so nd e p r e s s i o nw e r ea s s e s s e du s i n g t h eH a m-i l t o nD e p r e s s i o nS c a l e(HAMD),l e v e l so f i n f l a mm a t o r yf a c t o r s,n e u r o t r a n s m i t t e r s,p 1 1mR NAa n dG R mR NAi np e r i p h e r a lb l o o dd e t e c t e d,a n dc o r r e l a t i o na n a l y s e so fp 1 1mRNAa n dGR mRNAl e v e l sw i t h基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号8 2 0 0 3 1 1 8)作者单位:4 5 3 0 0 3(河南新乡)新乡医学院基础医学院(庞盼姣);4 5 3 0 0 3(河南新乡)新乡医学院第三附属医院(李长安,赵巍峰,王园园,李赢)通讯作者:李长安(E m a i l:l i c h a n g a n 3 6 91 2 6.c o m)d e p r e s s i o ns c o r e sc o n d u c t e d.R e s u l t s A f t e r2 4w e e kt r e a t m e n t r e s p o n s e r a t e so f t h eH B VD NAi nb o t hg r o u p se l e v a t e dc o m p a r e dw i t hp r e-t r e a t m e n ta n dt h a tw a sh i g h e r i no b s e r v a t i o nt h a ni nc o n t r o lg r o u p(P0.0 5).A f t e r2 4w e e kt r e a t m e n t s c o r e s1临床心身疾病杂志2 0 2 3年7月第2 9卷第4期JC l i nP s y c h o s o mD i s,J u l.2 0 2 3,V o l2 9,N o.4o nt h eHAMDa n ds e r u mI F N-a n dT N F-l e v e l s i nb o t hg r o u p se l e v a t e dc o m p a r e dw i t hp r e-t r e a t m e n t(P0.0 5o r0.0 1),l e v e l so fI L-4,p l a s m aN Ea n d5-HTl o w e r e d(P0.0 5o r0.0 1),a n ds c o r eo nt h eHAMDa n d i n c i d e n c eo fd e p r e s s i o nw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e ri no b s e r v a t i o nt h a ni nc o n t r o lg r o u p(P0.0 5).A f t e r2 4w e e kt r e a t m e n tp 1 1mR NAi nt h eP BMCw a sh i g h e r i no b s e r v a t i o nt h a ni nc o n t r o lg r o u p(P0.0 5),G R mR NAl o w e r(P0.0 5),i no b s e r v a t i o ng r o u pp 1 1mR NA,I F N-a n dT N F-w e r ep o s i-t i v e l yc o r r e l a t e dt ot h eHAMDs c o r e s(P0.0 1),a n ds ow e r eG R mR NA,N Ea n d5-HT(P0.0 1).C o n c l u s i o nT h ee x p r e s s i o nl e v e l so fp 1 1 mR NAi nt h eP BMCo b v i o u s l ye l e v a t ei nCH Bp a t i e n t sa f t e rP E G-I F N-2 bt r e a t m e n t a n dG R mR NAl o w e r,w h i c ha r ec l o s e l yr e l a t e dt ot h ee x p r e s s i o nl e v e l so f i n-f l a mm a t o r yf a c t o r sa n dn e u r o t r a n s m i t t e r s i np e r i p h e r a lb l o o d,a n dm a yb ea ni m p o r t a n tc a u s eo fd e p r e s-s i o n.【K e y w o r d s】CH B;P E G-I F N-2 b;d e p r e s s i o n;P BMC;p 1 1;G R;c o r r e l a t i o n慢性乙型肝炎(c h r o n i ch e p a t i t i sB,CH B)为常见传染性疾病,流行病学统计结果显示,目前我国居民乙型肝炎病毒(h e p a t i t i sBv i r u s,H B V)携带率约为5%6%,CH B患者数量约为20 0 0万30 0 0万,在引起肝硬化的原因中占比为3 2%1-3。随着医学水平快速发展,CH B治疗方案已较为成熟,在常规抗病毒药物基础上给予干扰素、护肝药或中医药等联合干预,既往文献报道显示聚乙二醇干扰素-2 b(p e g y l a t e di n t e r f e r o n-2 b,P E G-I F N-2 b)治疗CH B具有良好免疫调节作用,通常比一般的干扰素用量更少,故导致其可以使肾脏清除速率得到大幅度降低,可延长药物体内半衰期发挥更持久的抗病毒作用4,但也容易诱发抑郁症等不良反应5。刘金霞等6建立抑郁症大鼠模型研究认为P E G-I F N-2 b作为促炎因子可诱导吲哚胺-2,3-双加氧酶(i n d o l e a m i n e2,3-d i o x y g e n a s e,I D O)表达,导致犬尿氨酸通路(k y n u r e n i n ep a t h w a y,K P)异常,进而引起抑郁症大鼠模型行为学改变。抑郁症是一种以持续情绪低落为主要症状的情感性疾病,近年来研究表明S 1 0 0钙结合蛋白A 1 0(l i g h tp o l y p e p t i d e,p 1 1)做为一种多功能蛋白参与抑郁症 发 病 和 抑 郁 药 起 效7。糖 皮 质 激 素 受 体(g l u c o c o r t i c o i dr e c e p t o r,G R)通过不同作用机制与抑郁症存在密切联系,比如G R基因单核苷酸多态性导致G R功能性障碍,进而影响下丘脑-垂体-肾上 腺 轴(t h eh y p o t h a l a m i c-p i t u i t a r y-a d r e n a la x i s,H P A轴)功能、神经可塑性以及抑郁行为的作用8。但是二者是否参与P E G-I F N-2 b诱导的抑郁症,现阶段尚未明确9-1 0。本研究主要对CH B患者分别给予P E G-I F N-2 b治疗与否,分析外周血单个核细 胞(p e r i p h e r a lb l o o d m o n o n u c l e a rc e l l s,P B-MC)中p 1 1mR NA和G R mR NA表达与CH B患者罹患抑郁症的相关性。1对象与方法1.1对象选取2 0 1 6年6月2 0 2 1年6月新乡医学院第三附属医院收治的CH B患者为研究对象。入组标准:(1)符合 慢性乙型肝炎防治指南 诊断标准1 1,患者表现为乏力、肝区疼痛或食欲不振等症状,同时可伴黄疸、肝掌或蜘蛛痣等体征,实验室检查可见H B s A g或H B V-D NA阳性;(2)入组前3个月内未接受相关治疗;(3)患者及家属对本研究知情同意,自愿签署知情同意书。排除标准:(1)合并其他肝脏疾病;(2)有手术或外伤病史;(3)合并神经系统或精神疾病;(4)合并心肌梗死、脑卒中或肾功能损害等严重器质性病变;(5)无法耐受本研究所用药物;(6)妊娠期或哺乳期患者。脱落标准:(1)患者自行退出本研究;(2)病情迅速恶化或出现严重不良反应;(3)未严格按医嘱用药或存在其它可能影响结果的因素;(4)治疗期间失访者。符合入组标准的患者共6 0例,按照就诊顺序进行编号并采用随机数字表将患者分为观察组和对照组,各3 0例。本研究经新乡医学院第三附属医院医学伦理委员会审核批准。1.2方法1.2.1治疗方法两组患者治疗前详细采集基本资料,明确诊断后均给予常规护肝治疗,每天一次口服恩替卡韦分散片0.5m g,嘱患者健康饮食,以清淡、高蛋白和高维生素食物为主,营养不良者建议少食多餐,能量摄入标准为每日(3 03 5)k c a lk g-1,植物蛋白质摄入标准为每日(1.21.5)gk g-1,同时禁烟酒并保持适当休息。观察组在此基础上采用每 周 一 次P E G-I F N -2 b注 射 液 皮 下 注 射1 8 0g。两组患者疗程均为2 4周。患者每3个月门诊复查1次,观察H B V感染5项指标和肝功能变化情况,H B V-D NA应答定义为H B V-D NA检测结果5 0 0I Um L-1。1.2.2抑郁症状评估两组患者分别于治疗前后采2临床心身疾病杂志2 0 2 3年7月第2 9卷第4期JC l i nP s y c h o s o mD i s,J u l.2 0 2 3,V o l2 9,N o.4用汉 密 顿 抑 郁 量 表(H a m i l t o nd e p r e s s i o ns c a l e,HAMD)评估抑郁症状严重程度。该量表包括1 7个项目,其中第1、2、3、7、8、9、1 0、1 1、1 5和1 7项均采用L i k e r t 5级评分法,分别计0分4分,其余项均分别计0分2分,总分5 4分。得分7分为正常,7分1 6分为疑似抑郁症,1 7分3 5分为抑郁症,3 6分为严重抑郁症。1.2.3炎症因子检测两组患者分别于治疗前后采集外周静脉血3 m L,40 0 0rm i n-1,室温离 心1 0m i n,取上清液,保存备用。双抗体夹心酶联免疫吸 附 法(e n z y m e-l i n k e d i mm u n o s o r b e n t a s s a y,E L I S A)检测白细胞介素4(i n t e r l e u k i n4,I L-4)、干扰 素(i n t e r f e r o n,I F N-)和 肿 瘤 坏 死 因 子(t u m o rn e c r o s i s f a c t o r,T N F-)表达。兔抗人I L-4、I F N-和T N F-多克隆抗体分别加入血清样品并于3 7环境中孵育1h;磷酸盐缓冲液洗涤;加入辣根过氧化氢标记的二抗,3 7环境孵育1h;磷酸盐缓冲液洗涤;四甲基联苯胺底物3 7 显色3 0m i n;加入2M硫酸0.0 5m L终止反应。用E L 3 1 1 S酶标仪,以4 5 0n m波长测吸光度值,分别计算I L-4、I F N-和T N F-相对表达量。1.2.4神经递质检测两组患者分别于治疗前后采集外周静脉血3m L,置于抗凝管中,35 0 0rm i n-1离心1 0m i n,收集血浆,-8 0保存备用。取血浆样本2 0 0L,加入5%高氯酸溶液1 0 0L,混匀,静置1 0m i n1 5m i n,1 00 0 0rm i n-1离心1 0m i n并取上清液待检。高效液相色谱仪分别检测去甲肾上腺 素(n o r e p i n e p h r i n e,N E)和5-羟 色 胺(5-h y d r o x y t r y p t a m i n e,5-HT)水平。色谱柱为X T e r r aR P 1 8型吸附柱,柱温3 5;以磷酸二氢钾-甲醇溶液为流动相,流速1m Lm i n-1;检测时间2 5m i n。另外,分别取7份空白血浆,配置0.5n gL-1、5n gL-1、5 0n gL-1、1 0 0n gL-1、2 0 0n gL-1、5 0 0n gL-1和10 0 0n gL-1的N E和5-HT标准液,按照上述方法检测,制作N E和5-HE标准浓度曲线。以血浆相应浓度对峰面积进行线性回归并计算标准曲线方程。以标准曲线方程分别计算血浆样品中N E和5-HT浓度。1.2.5p 1 1mR NA和G R mR NA检测两组患者分别于治疗前后采集外周静脉血5m L,分离P B-MC,T r i z o n法 提 取 总R NA,测 定R NA浓 度。P r i m eS c r i pR T逆转录c N D A,进行实时荧光定量P C R(R e a l-T i m e P C R,R T-P C R)扩增。p 1 1上游引物:5 -C C C AAG C T T AT G C C AT C T C AAAT G G-3,p 1 1下游引物:5 -C C G GAAT T C C T A C T T C T T T C-C C T T C-3,G R 上游引物:5 -AAA C T C T T G GAT-T C T AT G C AT GAA-3,G R 下游引物:5 -AA C G-GAAT T T C T T T C AG C T T AAT T AT-3。S t e p-O n-e P l u s TM R e a l-T i m e P C Rs y s t e m进行R T-P C R实验,2-C T法计算p 1 1 mR NA和G R mR NA表达。1.2.6统计学方法所有数据应用S P S S2 2.0统计软件处理,计数资料以百分率(%)表示,组间比较采用2检验或F i s h e r精确概率法,计量资料正态性检验采用K o l m o g o r o v-S m i r n o v法,符合正态分布的数据采用均数标准差(xs)表示,组间比较采用独立样本t检验,组内治疗前后比较采用配对样本t检验,非正态分布的数据以M(P2 5,P7 5)表示,采用M a n n-Wh i t n e yU检验进行两组间比较,采用P e a r s o n积差系数进行相关性分析,以P0.0 5),结果见表1。表1两组患者基本资料比较n(%)(xs)M(P2 5,P7 5)项目观察组(n=2 9)对照组(n=2 8)2/t/ZP性别(男/女)1 6(5 5.1 7)/1 3(4 4.8 3)1 7(6 0.7 1)/1 1(3 9.2 9)0.1 80.6 7 2年龄(岁)4 6.2 97.0 34 5.8 16.9 80.2 60.7 9 6CH B病程(a)8.7 42.3 68.4 92.6 10.3 80.7 0 6A L T(UL-1)2 0 7.5 0(2 9.3 0,6 8 4.2 1)1 6 2.8 0(3 4.7 2,7 3 6.1 0)1.2 90.3 1 8A L B(gL-1)3 6.8 24.0 63 7.1 94.2 30.3 40.7 3 7L o g 1 0H B VD NA(I Um L-1)7.2 0(5.3 1,1 0.4 0)8.1 1(6.0 1,9.7 2)0.9 30.4 8 52.2两组患者治疗后H B VD NA应答率比较观察组患者治疗1 2周和2 4周时H B V D NA应答率高于对照组,差异有统计学意义(P0.0 5),结果见表2。3临床心身疾病杂志2 0 2 3年7月第2 9卷第4期JC l i nP s y c h o s o mD i s,J u l.2 0 2 3,V o l2 9,N o.4表2两组患者治疗后H B VD NA应答率比较n(%)组别治疗4周治疗1 2周治疗2 4周观察组(n=2 9)1 0(3 4.4 8)1 9(6 5.5 2)2 6(8 9.6 6)对照组(n=2 8)7(2 8.5 7)1 1(3 9.2 9)1 8(6 4.2 9)20.2 33.9 35.2 1P0.6 3 10.0 4 70.0 2 22.3两组患者治疗2 4周后HAMD评分比较两组患者治疗2 4周后HAMD评分均升高,且观察组HAMD评分和抑郁症发生率均高于对照组,差异有统计学意义(P0.0 5)。观察组在治疗2 4周后,出现6例抑郁症状患者,结果见表3。表3两组患者治疗2 4周后HAMD评分及抑郁症发生率比较n(%)(xs)组别HAMD评分治疗前治疗2 4周治疗2 4周抑郁症发生率观察组(n=2 9)1 0.3 73.0 61 6.2 94.5 16(2 0.6 9)对照组(n=2 8)1 0.8 52.9 41 3.4 83.8 20t0.6 02.5 3-P0.5 4 90.0 1 40.0 2 3注:同组治疗前相比P0.0 5。2.4两组患者治疗前后血清炎症因子水平比较两组患者治疗2 4周时血清I F N-和T N F-水平较治疗前升高,血清I L-4水平较治疗前降低,且观察组血清I F N-和T N F-水平高于对照组,血清I L-4水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.0 5),结果见表4。表4两组患者治疗前后血清炎症因子水平比较(xs)项目时间点观察组(n=2 9)对照组(n=2 8)tPI F N-(p gm L-1)治疗前3 8.4 97.0 23 7.9 16.8 50.3 20.7 5 4治疗2 4周5 2.1 68.3 44 3.7 87.5 03.9 80.0 0 0I L-4(p gm L-1)治疗前2 6.8 15.2 72 6.4 55.6 30.2 50.8 0 4治疗2 4周1 3.9 84.0 61 7.2 44.1 92.9 50.0 0 4T N F-(n gm L-1)治疗前3 0.7 25.6 73 1.4 35.2 80.4 90.6 2 7治疗2 4周4 6.0 17.8 54 1.3 96.9 22.3 50.0 2 2注:同组治疗前相比P0.0 5。2.5两组患者治疗前后血浆神经递质水平比较观察组患者治疗2 4周时血浆N E和5-HT水平较治疗前降低,且低于对照组,差异有统计学意义(P0.0 5),结果见表5。表5两组患者治疗前后血浆神经递质水平比较(xs)组别N E(n gL-1)治疗前治疗2 4周5-HT(n gL-1)治疗前治疗2 4周观察组(n=2 9)5 3.6 79.0 44 0.3 67.1 22 7 1.5 44 3.8 62 4 3.9 53 9.2 7对照组(n=2 8)5 4.2 88.7 35 3.9 18.4 52 6 8.7 94 5.0 82 6 9.4 14 3.6 2t0.2 66.5 60.2 32.3 2P0.7 9 60.0 0 00.8 1 60.0 2 4注:同组治疗前相比P0.0 5。2.6两组患者治疗前后P BMC中p 1 1 mR NA和G R mR NA水平比较观察组患者治疗2 4周时P BMC中p 1 1mR NA水平较治疗前明显升高,G R mR NA水平较治疗前明显降低,且观察组p 1 1mR-NA水平高于对照组,G R mR NA水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.0 5),结果见表6。表6两组患者治疗前后P BMC中p 1 1mR NA和G R mR NA水平比较(xs)组别p 1 1mR NA治疗前治疗2 4周G R mR NA治疗前治疗2 4周观察组(n=2 9)1.0 70.1 61.2 40.2 51.1 20.1 70.9 20.1 9对照组(n=2 8)1.0 20.1 81.0 90.2 11.0 80.1 31.0 40.1 6t1.1 12.4 51.0 02.5 7P0.2 7 20.0 1 80.3 2 40.0 1 3注:同组治疗前相比P0.0 5。4临床心身疾病杂志2 0 2 3年7月第2 9卷第4期JC l i nP s y c h o s o mD i s,J u l.2 0 2 3,V o l2 9,N o.42.7p 1 1和G R mR NA水平与炎症因子、神经递质和HAMD评分相关性分析观察组患者治疗2 4周时p 1 1mR NA与I F N-、T N F-、HAMD评分呈正相关性(P0.0 5),G R mR NA与N E、5-HT、HAMD评分呈正相关性(P0.0 5),结果见表7。表7p 1 1和G R mR NA水平与炎症因子、神经递质和HAMD评分相关性分析指标p 1 1mR NArPG R mR NArPI L-4-0.2 10.1 9 40.1 80.3 2 9I F N-0.5 30.0 0 00.2 50.1 4 5T N F-0.4 40.0 0 80.2 60.1 0 2N E0.2 50.1 2 00.4 00.0 2 75-HT0.2 20.1 7 30.5 40.0 0 0HAMD评分0.5 80.0 0 00.6 10.0 0 03讨论积极抑制H B V病毒复制是延缓CH B患者病情的关键,从而减轻肝功能损害,改善患者预后,I F N作为细胞因子类药物,调节宿主免疫功能,诱导多种抗病毒蛋白表达并增强机体抗病毒作用1 2。P E G-I F N-2 b作为长效I F N代表药物,用于CH B长期治疗较常规I F N可明显增强疗效,同时还有利于预防H B V耐药性产生1 3。H B V-D NA是评估H B V感染程度和CH B治疗效果的重要指标,本研究结果显示观察组治疗1 2周和2 4周时H B V-D NA应答率均高于对照组,表明P E G-I F N-2 b辅助治疗CH B有利于增强抗病毒效果,与罗丹等1 4报道结果大致相近。近年来随着临床上P E G-I F N-2 b应用增多,其诱导抑郁症的问题已引起广泛关注。本研究结果显示两组治疗2 4周 时HAMD评 分 均 明 显 升 高,其 中 对 照 组HAMD评分升高可能与CH B患者长期病变和治疗造成的不良情绪密切相关,但均未达到抑郁症诊断标 准。同 时,本 研 究 中 观 察 组 治 疗2 4周 时HAMD评分明显高于对照组,2 9例患者中共计6例患者确诊为抑郁症,占比2 0.6 9%,表明P E G-I F N-2 b治疗CH B患者容易诱发抑郁情绪,也可能是P E G-I F N-2 b治疗影响p 1 1蛋白或糖皮质激素受体的表达有关,这为进一步研究P E G-I F N-2 b在治疗CH B患者过程中的出现抑郁症状的作用机制提供理论基础,在治疗过程中需密切关注患者情绪,联合草酸艾司西酞普兰或联合中药给予G R信号通路干预治疗1 5-1 6,可能有助于缓解患者抑郁情绪,同时定期评估患者心理状态,并积极干预。目前关于抑郁症发病机制主要存在4种假说,分别为遗传易感性、神经内分泌紊乱、细胞因子平衡破坏以及单胺类神经递质减少,不同假说之间关系密切,组成一个相互影响的信息调节网络,均可能在P E G-I F N-2 b所 致 抑 郁 症 病 程 中 发 挥 重 要 作用1 7。本研究结果显示观察组治疗2 4周时血清I F N-和T N F-水平高于对照组,血清I L-4水平低于对照组,提示T h 1/T h 2细胞因子平衡遭到破坏,其可能在P E G-I F N-2 b治疗后CH B患者的抑郁症发生过程中发挥重要作用。正常生理状态下T h 1和T h 2细胞因子相互制约并形成动态平衡,对维持机体免疫功能平衡和稳定具有重要意义,其中I F N-和T N F-为T h 1类细胞因子,主要参与介导细胞免疫,激活淋巴细胞并促进炎症介质释放,而I L-4为T h 2细胞因子,除参与调节机体免疫和炎症反应外,还可抑制T h 0细胞向T h 1细胞分化,减少I F N-和T N F-等 细 胞 因 子 表 达1 8。M a r t n-H e r n n d e zD等1 9报道显示抑郁症死亡患者可见扣带回和海马等部位胶质细胞形态和代谢改变,同时额叶区促炎因子和趋化因子表达增加。本研究中观察 组 接 受P E G-I F N -2 b治 疗 后T h 1/T h 2向T h 1偏移,导致促炎因子表达增加,虽然对H B V清除具有积极作用,但同时也引起神经系统损伤,导致情绪障碍和抑郁症发生。此外N a z i m e kK等2 0研究认为细胞因子还可能通过影响神经内分泌活动参与神经中枢调节,导致神经递质分泌异常,从而诱导抑郁症发生。本研究观察组治疗2 4周时血浆N E和5-HT水平较治疗前明显降低,而对照组血浆N E和5-HT水平无明显变化,可见P E G-I F N-2 b治疗CH B患者可导致N E和5-HT表达减少,这可能导致抑郁症发生的另一重要机制。p 1 1蛋白为S 1 0 0 E F手形蛋白家族成员,在中缝核、海马和下丘脑等部位脑组织中广泛分布,在外周血淋巴细胞、NK细胞和单核细胞细胞中也均有表达2 1。M i l o s e v i cA等9研究发现抑郁模型小鼠大脑内p 1 1mR NA和p 1 1蛋白表达明显降低,敲除p 1 1基因可导致抑郁样表型。G r e e n H等2 2则报5临床心身疾病杂志2 0 2 3年7月第2 9卷第4期JC l i nP s y c h o s o mD i s,J u l.2 0 2 3,V o l2 9,N o.4道,帕金森病合并抑郁症患者外周血白细胞中p 1 1蛋白表达明显升高,与大脑中p 1 1表达情况存在明显差异,提示p 1 1在大脑和外周中的调节方向可能相反。本研究中观察组治疗2 4周后,P BMC中p 1 1mR NA水平较治疗前明显升高,对照组p 1 1mR NA无明显变化,进一步分析显示观察组p 1 1mR NA与I F N-、T N F-和HAMD评分呈正相关,表明p 1 1mR NA表达升高与P E G-I F N-2 b所致抑郁症有关,且其作用机制可能受炎症反应影响,但是这种相关性依然需要在抑郁性动物模型、其他外周器官等方 面 提 供 更 多 实 验 性 数 据 支 持。v a n C a l k e rD等2 3报道显示抑郁症患者外周血炎症因子和p 1 1表达升高,且经抗抑郁治疗后降低,表明炎症因子可影响p 1 1表达并参与抑郁症发病。P E G-I F N-2 b治疗CH B患者可导致T h 1/T h 2平衡向T h 1偏移,I F N-和T N F-等细胞因子表达增加,从而促进炎症反应加重,导致大脑中p 1 1表达减少,使P BMC中p 1 1表达代偿性上调。鉴于T h 1类细胞因子种类较多,并相互影响,形成炎症网络。因此,明确影响p 1 1表达和抑郁症发生的具体炎症因子和作用机制仍不明确,有待后续开展更多研究。糖皮质激素作为下丘脑-垂体-肾上腺轴末端产物,与G R 结合后可通过负反馈机制调节下丘脑、海马和垂体等上游靶组织,以维持激素水平相对稳定。因此,G R 数量减少或功能减退可造成负反馈抑制功能障碍,导致H P A轴亢进,机体长期处于高激素状态,通过慢性应激作用造成神经系统炎症,进而导致抑郁症2 4。N g u y e nE T等2 5建立抑郁症大鼠模型进行分析显示G R调节剂c o r t 1 1 83 3 5能有效减少大鼠强迫游泳不动时间,对改善抑郁症状具有积极作用。本研究显示,观察组患者治疗2 4周时P BMC中G R mR NA水平较治疗前明显降低,对照组G R mR NA无明显变化,可见CH B患者长期应用P E G-I F N-2 b可导致G R 表达下调,可能与长期应激和炎症反应有关,但其具体机制有待后续更多研究进行探讨。J a c o b s o nL等2 6研究发现,G R缺失可引起雌性小鼠抑郁样社交退缩,为抑郁症治疗提供了新的药物靶点。本研究显示CH B患者接受P E G-I F N-2 b治疗后P BMC中G R mR-NA与N E、5-HT和HAMD评分呈正相关性,提示G R 与N E和5-HT表达异常可能存在密切联系,从而在P E G-I F N-2 b治疗后抑郁症发病过程中发挥重要作用。既往研究表明糖皮质激素可通过激活I D O来促进色氨酸分解,导致5-HT合成减少和神经传导异常,从而引起抑郁症发生2 7。因此,P E G-I F N-2 b治疗CH B可能通过影响G R 表达,介导5-HT作用,从而导致抑郁症发生。综上所述,接受P E G-I F N-2 b治疗的CH B患者P BMC中p 1 1mR NA和G R mR NA表达明显降低,且与炎症因子和神经递质表达密切相关,可能是导致患者发生抑郁症的重要原因。由于神经内分泌调节网络复杂,本研究虽然发现p 1 1蛋白和G R 表达伴随炎症因子和神经递质水平而改变,他们之间是否存在必然的因果联系,需要对p 1 1蛋白和G R 功能获得或缺失性实验验证,为后续进一步揭示p 1 1和G R 蛋白、神经内分泌调节网络与抑郁症发生、发展的详细机制打下基础。参考文献1L i uJ,L i a n gW,J i n gW,e t a l.C o u n t d o w nt o2 0 3 0:e-l i m i n a t i n gh e p a t i t i sBd i s e a s e,C h i n aJ.B u l lW o r l dH e a l t hO r g a n,2 0 1 9,9 7(3