抗原抗体反应专家讲座.pptx

第二章第二章 抗原抗体反应抗原抗体反应抗原抗体反应第1页 第一节第一节 抗原抗体反应原理抗原抗体反应原理一、抗原抗体结协力一、抗原抗体结协力二、抗原抗体亲和性和亲和力二、抗原抗体亲和性和亲和力三、亲水胶体转化为疏水胶体三、亲水胶体转化为疏水胶体第二节第二节 抗原抗体反应特点抗原抗体反应特点 一、特异性一、特异性 二、可逆性二、可逆性 三、百分比性三、百分比性 四、阶段性四、阶段性抗原抗体反应第2页第三节第三节 影响抗原抗体反应原因影响抗原抗体反应原因 一、反应物本身原因一、反应物本身原因 二、环境原因二、环境原因第四节第四节 免疫学检测技术类型免疫学检测技术类型思索题思索题小结小结抗原抗体反应第3页第一节第一节 抗原抗体反应原理抗原抗体反应原理 抗原抗体反应抗原抗体反应:指抗原与对应抗体之间所发生指抗原与对应抗体之间所发生特异性结合反应。特异性结合反应。物质基础物质基础:抗原表位与抗体高变区间互补结合抗原表位与抗体高变区间互补结合 抗原表位与抗体高变区沟槽分子表面结合抗原表位与抗体高变区沟槽分子表面结合 抗原抗体之间结协力抗原抗体之间结协力 亲水胶体转化为疏水胶体亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体反应第4页静电引力静电引力（electrostatic forces）范德华引力范德华引力:作用最小作用最小（van der Waals interactions）氢键氢键:最具特异性最具特异性（hydrogen bond）疏水作用力疏水作用力:作用最大作用最大（hydrophobic interactions）抗原抗体结协力示意图抗原抗体结协力示意图一、抗原抗体结协力一、抗原抗体结协力抗原抗体反应第5页抗体分子上一个抗抗体分子上一个抗原结合点与对应抗原结合点与对应抗原决定簇之间相适原决定簇之间相适应而存在着引力，应而存在着引力，是抗原抗体间固有是抗原抗体间固有结协力结协力亲和力亲和力(affinity)抗原抗体亲和力示意图抗原抗体亲和力示意图二、抗原抗体亲和力和亲协力二、抗原抗体亲和力和亲协力抗原抗体反应第6页抗体结合部位抗体结合部位与抗原表位之与抗原表位之间结合强度间结合强度亲协力亲协力(avidity)抗原抗体亲协力示意图抗原抗体亲协力示意图抗原抗体反应第7页 可见反应可见反应抗原抗体复合物抗原抗体复合物 (疏水胶体疏水胶体)电解质电解质 抗原抗原(亲水胶体亲水胶体)抗体抗体(亲水胶体亲水胶体)+三、三、亲水胶体转化为疏水胶体亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体反应第8页第二节第二节 抗原抗体反应特点抗原抗体反应特点特异性特异性 可逆性可逆性百分比性百分比性 阶段性阶段性抗原抗体反应第9页特异性：特异性：抗原与抗抗原与抗体结合反应专一性体结合反应专一性抗原抗体反应特异性示意图抗原抗体反应特异性示意图分子基础分子基础:抗原表位与抗体分抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型互补子高变区之间空间构型互补性性一、特异性一、特异性抗原抗体反应第10页两种不一样抗原两种不一样抗原分子含有部分相分子含有部分相同或类似结构抗同或类似结构抗原表位，可与彼原表位，可与彼此对应抗血清发此对应抗血清发生反应生反应交叉反应交叉反应（cross reactions）抗原抗体交叉反应示意图抗原抗体交叉反应示意图抗原抗体反应第11页二、可逆性二、可逆性可逆性：可逆性：抗原与对应抗体结合成复合物后，在一定条抗原与对应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体特征件下又可解离为游离抗原与抗体特征 影响原因：影响原因：抗体对对应抗原亲协力抗体对对应抗原亲协力亲协力越高，结合亲协力越高，结合越牢靠，越不易解离越牢靠，越不易解离 环境原因对复合物影响环境原因对复合物影响pHpH、离子强度、离子强度 抗原抗体反应第12页前带前带(prezone)：抗体过量：抗体过量后带后带(postzone)：抗原过量：抗原过量等价带等价带(equivalence zone)(equivalence zone)：抗原抗体百分比适抗原抗体百分比适当当 抗原抗体反应百分比性示意抗原抗体反应百分比性示意图图百分比性：百分比性：抗原与抗体发抗原与抗体发生可见反应需遵照一定量生可见反应需遵照一定量比关系比关系三、百分比性三、百分比性抗原抗体反应第13页第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象沉淀和细胞溶解等现象 四、阶段性四、阶段性抗原抗体反应第14页第三节第三节 影响抗原抗体反应原因影响抗原抗体反应原因抗原、抗体反应物本身原因抗原、抗体反应物本身原因环境原因环境原因抗原抗体反应第15页一、反应物本身原因一、反应物本身原因抗原抗原:理化性状、表位种类和数目理化性状、表位种类和数目抗体抗体:起源、特异性、亲和性、效价起源、特异性、亲和性、效价抗原抗体反应第16页电解质电解质:生理盐水或缓冲液生理盐水或缓冲液酸碱度酸碱度:pH6pH9温温 度度:1540，37最适最适二、环境原因二、环境原因抗原抗体反应第17页反应类型反应类型试验技术结果判断结果判断凝集反应凝集反应 直接凝集试验直接凝集试验观察凝集现象观察凝集现象间接凝集试验间接凝集试验同上同上抗球蛋白试验抗球蛋白试验同上同上沉淀反应沉淀反应 液相沉淀试验液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参加反应补体溶血试验补体溶血试验观察测定溶血现象观察测定溶血现象补体结合试验补体结合试验同上同上第四节第四节 免疫学检测技术类型免疫学检测技术类型抗原抗体反应第18页反应类型反应类型试验技术结果判断结果判断中和反应中和反应病毒中和试验病毒中和试验检测病毒感染性检测病毒感染性毒素中和试验毒素中和试验检测外毒素毒性检测外毒素毒性标识免疫反应荧光免疫技术荧光免疫技术检测荧光现象检测荧光现象放射免疫技术放射免疫技术检测放射性强度检测放射性强度酶免疫技术酶免疫技术检测酶底物显色检测酶底物显色发光免疫技术发光免疫技术检测发光强度检测发光强度金免疫技术金免疫技术检测金颗粒沉淀检测金颗粒沉淀抗原抗体反应第19页按实际用途分为按实际用途分为:免疫组织化学技术免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT)免疫测定免疫测定(immunoassay)按检测现象分为按检测现象分为:放射免疫技术放射免疫技术 荧光免疫技术荧光免疫技术酶免疫技术酶免疫技术 化学发光免疫技术化学发光免疫技术金免疫技术金免疫技术按测定反应体系物理状态分为按测定反应体系物理状态分为:均相免疫测定均相免疫测定(homogenous immunoassay）非均相免疫测定非均相免疫测定(heterogenous immunoassay)标识免疫技术：标识免疫技术：用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标识抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，经过检测标识质等标识抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，经过检测标识物反抗原或抗体进行定性、定位或定量分析物反抗原或抗体进行定性、定位或定量分析抗原抗体反应第20页1 1什么是抗原抗体反应？什么是抗原抗体反应？抗原抗体反应原理是什么？抗原抗体反应原理是什么？2 2抗原抗体结协力有哪些？抗原抗体结协力有哪些？3 3抗原抗体反应有哪些特点？抗原抗体反应有哪些特点？4 4怎样了解抗原抗体反应特异性和交叉反应？怎样了解抗原抗体反应特异性和交叉反应？5 5什么是抗原抗体反应可逆性？有何应用？什么是抗原抗体反应可逆性？有何应用？6 6怎样了解抗原抗体反应亲和力和亲协力？怎样了解抗原抗体反应亲和力和亲协力？7 7抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体最适百分比？抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体最适百分比？8 8抗原抗体反应有哪些影响原因？抗原抗体反应有哪些影响原因？9 9基于抗原抗体反应免疫学检测技术有哪些？基于抗原抗体反应免疫学检测技术有哪些？1010什么是标识免疫技术？标识免疫技术有哪些类型？什么是标识免疫技术？标识免疫技术有哪些类型？思索题思索题抗原抗体反应第21页小结小结 抗原抗体反应是指抗原与对应抗体之间所发生抗原抗体反应是指抗原与对应抗体之间所发生特异性结合反应。特异性结合反应。抗原抗体之间结协力包括静电引力、范德华引抗原抗体之间结协力包括静电引力、范德华引力、氢键和疏水作用力。力、氢键和疏水作用力。抗原抗体反应特点是特异性、可逆性、百分比抗原抗体反应特点是特异性、可逆性、百分比性和阶段性。性和阶段性。影响抗原抗体反应原因包含反应物本身原因和影响抗原抗体反应原因包含反应物本身原因和环境原因。环境原因。免疫学检测技术基础是抗原抗体反应，免疫学免疫学检测技术基础是抗原抗体反应，免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参加反应、中和技术有凝集反应、沉淀反应、补体参加反应、中和反应和标识免疫反应五种类型。反应和标识免疫反应五种类型。抗原抗体反应第22页