无菌工艺和无菌检验.pptx

无菌工艺和验证无菌工艺和无菌检验第1页指导思想：产品质量是产品质量是检验检验出来出来标志：抽样检验理论关注点：样品检验质量管理基本方法一：无菌工艺和无菌检验第2页抽样检验应用 抽样检验：经过样本，推断整体。抽样检验是数理统计分支，它用尽 量少样本尽可能反应全部产品质量。无菌工艺和无菌检验第3页抽样检验应用 抽样检验：经过样本，推断整体。抽样检验是数理统计分支，它用尽 量少样本尽可能反应全部产品质量。无菌工艺和无菌检验第4页样品抽样检验结果是判别药品质量唯一法定依据。样品按USP(美国药典)和USP-NF（国家处方集）要求检验合格，即判合格；反之，则判为不合格。无菌工艺和无菌检验第5页FDA观点：一个科学、庞大抽样计划，经过扩大抽样检验方法能够实现确保药品质量目标。无菌工艺和无菌检验第6页FDA面临新挑战-样品是否有代表性-抽样检验不可能发觉药品生产中污染/混同-低剂量高活性药品混合是否均匀-无菌药品灭菌是否有效无菌工艺和无菌检验第7页抽样检验困境：抽查批号产品、其对应原料、半成品及成品均经过抽样检验且检验结果符合标准，抽样和检验方法方面毫无问题。但FDA查不到所采取工艺能一直如一地生产出符合要求质量标准产品证据。无菌工艺和无菌检验第8页FDA官员感叹：“我们这些药政管理官员，经历了许多年经验和教训之后终于明白，我们在制订法规过程中并没真正研究过工艺过程本身，我们以往立足点是在质量检验上，而不是在质量确保上”。无菌工艺和无菌检验第9页FDA结论：“工艺验证应该是我们立足点。”产品质量是生产出来，不是靠检验来。无菌工艺和无菌检验第10页无菌无菌工艺无菌检验无菌工艺和无菌检验无菌工艺和无菌检验第11页没有活体微生物（细胞繁殖体）存在。无菌：无菌工艺和无菌检验第12页 无菌药品是指法定药品标准中列有没有菌检验项目标制剂和无 菌原料药，包含注射剂、眼用制剂、无菌软膏剂、无菌混悬液等。比如：大容量注射剂、小容量注射剂、无菌粉针、无菌冻干粉针、无菌眼药水、无菌混悬剂、无菌原料药等。无菌药品：无菌工艺和无菌检验第13页1、湿热灭菌法2、干热灭菌法3、辐射灭菌法4、气体灭菌法5、过滤灭菌法6、无菌生产工艺怎样到达无菌？中国药典年版 附录 灭菌法无菌工艺和无菌检验第14页1.残余概率法（Bioburden based process）2.过分杀灭法（Overkill process）3.生物指示剂/残余概率相结合灭菌工艺（Biological indicator/bioburden combined process）USP 灭菌方式:32版 1222章无菌工艺和无菌检验第15页 以生物负荷（产品灭菌前微生物污染水平）为基础方法，用于生产过程中极少检出芽孢，产品稳定性较差，只能适度灭菌产品。残余概率法Bioburden basedprocess无菌工艺和无菌检验第16页 适合用于稳定性很好，能经受苛刻灭菌条件产品。过分杀灭法Overkill process无菌工艺和无菌检验第17页过分杀灭法过分杀灭法 VS 残余概率法残余概率法 无菌工艺和无菌检验第18页灭菌抉择树：能否121、15分钟湿热灭菌能否采取F08湿热灭菌，SAL10-6否121、15分钟湿热灭菌是采取F08湿热灭菌，SAL10-6能否对药液除菌过滤否是无菌原料、无菌配制、无菌灌封药液除菌过滤及无菌灌封否是无菌工艺和无菌检验第19页灭菌工艺选择：无菌工艺和无菌检验第20页灭菌工艺与生物负荷关系：无菌工艺和无菌检验第21页1、终端灭菌工艺 2、无菌生产工艺无菌药品生产工艺无菌工艺和无菌检验第22页能够最终用热力学方法除去微生物生产工艺。如：大容量注射剂、水针等产品生产。终端灭菌生产工艺无菌工艺和无菌检验第23页严格原料微生物标准严格控制微生物污染、制订灭菌前生物负荷程度标准控制药液存放温度和时间 药液取样、污染菌判别目标：控制生物负荷终端灭菌生产工艺质量确保：无菌工艺和无菌检验第24页空载热分布满载热分布热穿透试验微生物挑战试验 终端灭菌生产工艺验证关键点：无菌工艺和无菌检验第25页过滤除菌工艺无菌分装工艺如：冻干粉针、粉针、无菌原料药、生物 疫苗、血液制品等产品生产。无菌生产工艺：无菌工艺和无菌检验第26页对进入无菌区物料充分灭菌，消除污染源。全部接触经除菌过滤药液设备都经过清洁和灭菌验证防止人员直接接触除菌后药液、容器预防人员活动干扰层流目标：以预防污染为目标，消除生产工艺中潜 在污染各种可能性。无菌生产工艺质量确保：无菌工艺和无菌检验第27页终端灭菌工艺 VS 无菌生产工艺无菌工艺和无菌检验第28页无菌工艺模拟或无菌工艺模拟或培养基灌装验证培养基灌装验证无菌生产工艺工艺验证关键点：无菌工艺和无菌检验第29页Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products无菌灌装产品工艺模拟试验解读：PDA Technical Report N0.22 无菌工艺和无菌检验第30页评价无菌工艺操作能力最有效方法。完全模拟工艺配制和灌装工艺，用一个能够促进微生物生长培养基替换无菌产品。确认无菌生产工艺无菌确保水平（SAL）方法。工艺模拟试验（培养基灌装）无菌工艺和无菌检验第31页证实采取无菌工艺生产无菌产品能力无菌工艺人员资质和确保符合现行GMP要求无菌工艺模拟目标：无菌工艺和无菌检验第32页安装干扰容器尺寸容器密封灌装速度灌装体积灌装连续时间生产批量、工艺模拟批量工艺模拟试验原理1无菌工艺和无菌检验第33页手动灌装培养条件培养基选择容器检验惰性气体设施考虑人员考虑工艺模拟试验原理2无菌工艺和无菌检验第34页工艺人员设备环境培养基灌装验证包含：无菌工艺和无菌检验第35页模拟工艺定义:使用促微生物生长培养基，及与无菌物料生产相同方法评定无菌工艺方法。包含工艺全部步骤，从药品成份、赋形剂（假如有）、容器、密封灭菌到产品密封。在无菌灌装之前无菌药品容器和密封后放置最长时间必须包含在模拟范围内。工艺无菌工艺和无菌检验第36页非无菌物料进入无菌区域“切入点”。未经灭菌或消毒物料，灭菌后进入灌装间保护手工操作进入灌装间前防护。设备：无菌工艺和无菌检验第37页生产环境一直符合无菌产品生产要求确保系统和设备按照设定目标正常运转无菌确保 环境监测无菌工艺和无菌检验第38页取样点选择取样频率行动限和警戒线方法学和数据解释GMP附录1：无菌药品 第十条（二）：A级区监测频率及取样量，应能及时发觉全部些人为干预、偶发事件及任何系统损坏。环境监测：无菌工艺和无菌检验第39页最长无菌生产、操作时间无菌生产中每次发生干预事件冷冻干燥设备无菌组装人员数目和活动无菌条件转移交接班改变、中止和衣物更换模拟无菌工艺应该包含（1）：（FDA提议）无菌工艺和无菌检验第40页无菌设备连接和断开无菌样品搜集生产线速度和配置重量检验设备、容器密闭检验SOP特殊要求模拟无菌工艺应该包含（2）：（FDA提议）无菌工艺和无菌检验第41页灭菌系统洁净环境系统公用辅助系统生产控制系统设备清洗模拟工艺还包括：无菌工艺和无菌检验第42页（一）选择标准：促生长能力、低选择性、澄明度、中 等浓度和过滤性。培养基：无菌工艺和无菌检验第43页促生长能力 支持少许微生物复壮和生长，10-100CFU或更少。低选择性 1、适应广谱微生物生长，细菌、霉菌和酵母菌都能够生长。2、企业自己菌种库（环境中分离微生物）培养基：无菌工艺和无菌检验第44页澄明 清澈，假如发生浑浊，能够观察到 中等浓度 遵照供给商提议。其它浓度或经过验证过滤性 培养基应该能够穿过生产过程所使用一样级别过滤器培养基无菌工艺和无菌检验第45页（二）培养基灵敏度检验：1、将无菌培养基分装到一定数量无菌试管。2、制备好菌悬液（枯草杆菌、白色念珠菌）10-100cfu/mL。3、加入上述菌悬液1mL进准备好培养基内，每 份培养基最少加2管。4、培养7天。5、每种培养基50%发生浑浊，长菌。培养基：无菌工艺和无菌检验第46页1、培养基储罐灭菌，移入无菌区域。2、灭菌后连接件、阀门、过滤器等和培养 基储罐无菌连接。3、灭菌后培养基经过滤器和储罐无菌连接。4、储罐另一端和灌装机相连，连接时无菌。USP培养基制备：无菌工艺和无菌检验第47页1、培养基无菌检验 灭菌后，灌装前培养基取样，进行无菌检验。确认培养基是无菌 微生物检验：无菌工艺和无菌检验第48页2、瓶子、瓶盖和胶塞无菌检验 灌装前瓶子、瓶盖和胶塞取样，进行无菌检验。确认进入灌装线瓶子、瓶盖和胶塞是无菌。微生物检验：无菌工艺和无菌检验第49页3、灌装后培养基灵敏度检验 同培养基灵敏度检验。确认灭菌后培养基灵敏度符合要求。微生物检验：无菌工艺和无菌检验第50页4、瓶子培养和破损检验 灌装培养基瓶子编号后，按照预定培养温度培养至14天。统计培养结果。微生物检验：无菌工艺和无菌检验第51页1、FDA：20-35，目标值2.5，不少于14天；如选择两个温度，则每一温度下最少培养7 天，从低温开始。2、PIC：20-35下最少14天。或先20-25下7天，然后30-35下7天。培养时间：无菌工艺和无菌检验第52页 发觉微生物生长瓶子污染百分比=100%灌装瓶数 破损瓶数评定结果：无菌工艺和无菌检验第53页生产部人员 灌装人员（灌装、胶塞、清洗瓶等）、清洁人员质量部人员 QA（IPC、监测人员）、QC(取样、检验)工程部人员 运行人员、维护人员人员：无菌工艺和无菌检验第54页上岗前：最少参加一次无菌工艺模拟考 核，为其上岗资质主要内容。年度资质确认：无菌岗位操作员工每年至 少参加一次无菌工艺模 拟。人员资质无菌工艺和无菌检验第55页禁止“非无菌”仪器或器材接触无菌材料。迟缓、有目标移动。操作中身体一直处于A级层流之外无菌操作确保无菌工作服不受污染无菌操作人员行为：无菌工艺和无菌检验第56页接收培训人员 生产部人员、质量部人员、工程部人员人员培训：无菌工艺和无菌检验第57页首次验证首次验证 最少连续成功灌装3个批次。年度验证年度验证 每条生产线每年不得少于2次。6个月生产期间没有有目标停顿生产无菌生产区域生产线退伍验证生产线退伍验证 生产线退伍前必须进行一次无菌工艺模拟。验证频率：无菌工艺和无菌检验第58页环境监测数据水系统检验数据无菌检验数据关键工艺变更、空调系统变更以上趋势评定，决定了周期性培养基灌装验证次数。培养基灌装验证次数：无菌工艺和无菌检验第59页 方案、汇报和调查无菌工艺和无菌检验第60页定义被模拟工艺定义使用房间定义使用灌装线和设备使用容器和密封类型线速度灌装单位数量干扰和中止数目和类型一起参加人数使用培养基模拟方案内容1：无菌工艺和无菌检验第61页灌装到容器内培养基体积培养条件同时环境监测批统计复印件全部测试可接收标准最终汇报描述选择“最差条件”原理阳性数量和编号促生长试验要求和结果模拟方案内容2：无菌工艺和无菌检验第62页测试方法应该尽可能模拟工艺选择方法和程度必须理由充分而且文件化试验方法必须足够灵敏，程度时能够到达全部阳性都应该判别全自动生产线发生污染率靠近于零在旧设施中生产或是较长生优点理步骤或是手工操作情况下，污染率不应该超出1个（3000灌装单位内）。在少于3000瓶批量中，工艺模拟数量最少要等于批量，因为小批量低灵敏度，不允许有阳性出现。大于3000瓶批量，能够接收阳性数量计算是应该慎重。建立可接收程度标准：无菌工艺和无菌检验第63页是一组到达工艺极限值上限或下限情况，和那些在SOP范围内，但与理想情况相比时有最大可能造成工艺或产品失败情况。最差条件不一定会造成产品或工艺失败。最差条件：无菌工艺和无菌检验第64页使用原料、组件和密封在无菌工艺区域保留时间超出范围无菌操作人员数量，超出正常生产所需人员数量在特殊线上，以最快速度灌装最少数量（操作困难），以最慢速度灌装最大数量（最大暴露）促生长培养基有抑制性或保护性处方“最差条件”类型无菌工艺和无菌检验第65页污染容器应仔细调查其完整性。阳性应该判定到种、属。全方面取样，查找污染源。确定潜在污染源，污染源是怎样进入工艺。回顾生产统计。回顾关键系统：HVAC等对全部程序和工艺变更进行回顾。失败调查无菌工艺和无菌检验第66页失败原因：能够指定。污染为一个清楚、单一起源。纠正办法：立刻纠正，而且文件化。调查结果1：无菌工艺和无菌检验第67页失败原因：不能够指定。含糊指定，各种系统和工艺共同作 用。纠正办法：工艺重新验证，进行屡次工艺模拟试验来 证实能够连续生产出能够接收产品。调查结果2：无菌工艺和无菌检验第68页发生事件摘要调查全部系统，不但仅是发生失败系统造成失败原因和支持文件对以前批次潜在影响纠正活动额外试验适当署名调查进度汇报失败调查汇报应该包含：无菌工艺和无菌检验第69页粉剂选择：-能够灭菌 -能够上灌装机灌装 -在培养基中可溶 -对微生物无抑制性粉针剂灌装验证：无菌工艺和无菌检验第70页把重量确定性粉剂加入到已灌有灭菌培养基瓶里，加胶塞，封口。相对于液体培养基灌装验证，粉针灌装增加了一个步骤。粉针剂灌装验证：无菌工艺和无菌检验第71页向瓶内加入要求量灭菌注射用水，接着进行冷冻、干燥，接下来再灌入一定量灭菌液体培养基，其余同液体灌装方法。相比液体灌装方法，增加了冷冻干燥和传递两个步骤。冻干产品灌装：无菌工艺和无菌检验第72页参考资料：参考资料：1、PDA Technicial Report No.22 “Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products”2、FDA无菌制剂生产管理规范3、PIC/S 无菌工艺验证提议4、工业指南：用无菌工艺生产无菌产品 现行GMP5、欧盟GMP 附录一 无菌药品6、GMP 附录一 无菌药品7、PIC/S PI 007-2“无菌生产工艺验证指南”无菌工艺和无菌检验第73页