食品微生物检验的质量控制专家讲座.pptx

第第第第7 7 7 7章章章章 微生物试验室质量控制准微生物试验室质量控制准微生物试验室质量控制准微生物试验室质量控制准则则则则Biosecurity of Lab.Accurate of Examination1钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第1页质量控制相关定义质量控制相关定义v质量控制：满足质量要求操作技术和活动。v外部质量控制：经过相互校准和/或检验对试验室操作和结果所进行控制v内部质量控制：试验室内部采取以对比分析、跟踪以及相关方法，对试验室工作连续性控制计划。v质量手册：是描述质量系统元素文件或文件集合。2钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第2页试验室要求试验室要求v组织：按国家试验室认可概念，是指一个能够负担法律责任实体。这里所指是试验室（微检室）内建立质量管理确保体系。v人员v房屋 满足检测工作需要。v设备3钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第3页人员要求人员要求v试验室人员分类：管理人员、技术人员、技术支持人员等。v对应岗位人员，应具备对应技术能力，对应技术能力证实（证书及证件）。v微生物检验室因有对应技术能力人负责室内技术工作。并设置质量监督员。4钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第4页房屋条件要求房屋条件要求v房屋要求：含有适宜、足够宽大、通风有良好照明。v房屋内墙面及地等应采取易于清洁材料，保持房间清洁。v房间设置，以其开展工作内容加以分用，设置专用房间。v房间大小还应依据从事试验人员进入数量上加以考虑。5钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第5页环境设施要求环境设施要求v专用房间温湿度控制与统计（样品存放室）v特殊环境微生物指标控制与统计（无菌室等）v专用工作室标准操作规程和定时检测校准程序。（洁净室等）v特殊环境中专用设施质量控制应符合相关要求（净化工作台）6钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第6页环境设施相关技术指标环境设施相关技术指标v净化室、净化工作区域、洁净环境按国家及部颁标准进行检测。v空气洁净度指标：v检测频率及检测方法。一次/月；空气细菌检测（沉降法）。级别0.5m尘粒(个/L)5m尘粒(个/L)活菌颗粒平均数(cfu/平板)1003.50.01.010000350.02.53.07钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第7页设备设备/仪器要求总则仪器要求总则v满足开展相关检测项目标要求。v制订相关设备/仪器作业指导书。v设备/仪器检定校准，尤其是新购仪器检定。分别以送检、送校、自检、自校表示其所检定状态。v设备/仪器运行检验计划。v设备/仪器运行情况及适用统计。v维修后设备/仪器再校准或检验，并含有完整检验统计。8钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第8页设备控制和程序设备控制和程序v微生物检验惯用需监控设备和仪器微生物检验惯用需监控设备和仪器 1.培养箱（生化培养箱或CO2培养箱等）、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、冰箱（低温冰箱或冷柜），温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。2.小计量容器 3.微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。9钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第9页温度计温度计v试验室必须要有工作温度计和参考温度计。v工作温度计：用于日常温度检验。v参考温度计：用于校正工作温度计。v温度计运行检验：普通可采取一次/六个月运行检验。v日常检验、校准检验、运行检验等都应做好对应技术统计。10钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第10页培养箱、水浴箱和冰箱温度控制培养箱、水浴箱和冰箱温度控制v依据培养物性质及温度要求，培养箱应分别设置（以用途和温度分）v培养箱温差要求，普通显示值与实测值相差小于1，箱体内各点温差（内部温度均衡性）以及温度波动一样小于1。v温度监控方法：可将工作温度计置甘油中，放入待测箱体内，观察工作温度计温度，最好1-2次/天监控统计11钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第11页高压灭菌锅温度控制（一）高压灭菌锅温度控制（一）v生物指示菌法（惯用）、高压灭菌锅温度计等方法进行检测。v生物指示菌法是一个高压灭菌锅效果显示法。v高压灭菌锅由专员按作业指导书操作，并做好每一次作业统计。v高压灭菌锅使用时，内置物品不能太多，单位体积内内容物（每瓶内培养基）不能太多。同时应注意内容物不一样耐受温度。总暴露时间最好不要超出45min。12钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第12页高压灭菌锅温度控制（二）高压灭菌锅温度控制（二）v高压灭菌锅日常工作统计应包含以下信息：高压灭菌材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带颜色改变v高压灭菌锅温度波动范围：110，115和1212。v高压灭菌锅校准周期普通在六个月。13钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第13页干燥灭菌箱温度控制干燥灭菌箱温度控制v干燥灭菌箱日常工作统计中应包含以下信息：开始时间、抵达灭菌温度时时间、取出时间（或关闭时间）。v干燥灭菌箱温度校准，用参考温度计进行温度测试。v干燥灭菌箱温度要求与准确度：1605 或180 5。前者为灭菌2h，后者为30min。v干燥灭菌箱校按时间普通为一年。14钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第14页培养基配制用蒸馏水控制培养基配制用蒸馏水控制v对于蒸馏水器来说：按设备说明，定时清洁离子交换器和更换离子交换材料。v检测要求：西欧标准为微生物检验用蒸馏水特定电导率0.5ms/m；细菌数50cfu/ml。我们日惯用标准为 10ms/m，未见有细菌指标。v检测频率：1次/每个月。v蒸馏水定点供给，并做好对应质量控制，统计检测结果。15钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第15页天平管理天平管理v放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。v天平要有使用及运行检验统计。v天平作为计量仪器是列入国家强制检定范围，普通1次/年进行检定。v运行检验频率按运行计划或按产品（天平生产厂家）给出标准重量单位进行对照。16钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第16页pHpH计计vpH计使用前应用标准液进行校准。v缓冲液使用使用期：pH4.00 约1年 pH7.00 约6个月 pH9.00 约6个月vpH计维护：电极外表定时清洗；电极敏感性检测及极性恢复。17钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第17页净化工作台控制净化工作台控制v水平流净化工作台工作区域，要求洁净度为100级。空气沉降30min，细菌数1个/皿。垂直流净化工作台，细菌数0.49个/皿。v净化工作台运行检验频次：1次/月，主要是细菌沉降检测。v净化工作台高效过滤膜普通为一年更换一次，并同时进行粒子与细菌沉降检测。18钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第18页紫外线灯控制紫外线灯控制v检测方法：仪器测试法、生物测试法。检测方法：仪器测试法、生物测试法。v仪器测试法：经过专用仪器检测紫外灯管发射紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射1米处，要求其强度为90。v生物测试法：采取一定菌培养物，经一定百分比稀释，菌量控制在200-250个/0.5ml，涂布平板在紫外灯光下照射，2min，同时设置普通光源对照组，后置3748h，计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。19钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第19页显微镜控制显微镜控制v显微镜应制订作业指导书，日常维护统计及自校统计。v显微镜应置于无振动，防止灰尘，防潮等要求环境。20钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第20页其它微生物检测专用仪器控制其它微生物检测专用仪器控制v细菌判定仪、酶标仪等设备，工作中惯用阳性对照检测其功效正常性。v仪器检定按相关部门检定或按自校作业指导书进行。v仪器使用登记、校准计划、校准统计等文件存档。v仪器专员使用、操作者应取得对应岗位培训合格，持证上岗。21钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第21页培养基质量控制培养基质量控制培养基分类培养基分类v按其成份分类按其成份分类：有天然培养基和合成培养基。v按按用用途途分分类类：基础培养基、增菌培养基、选择性培养基、判别培养基及厌氧培养基等。v按按培培养养基基形形态态分分类类：液体培养基、半固体培养基及固体培养基。v依依据据培培养养基基剂剂型型不不一一样样分分类类：新鲜配制培养基和干燥培养基两种。22钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第22页检验中惯用培养基检验中惯用培养基v水质检测用培养基：7种v化装品检验用培养基：8种v食品检验用培养基：惯用有37 种，110种被列入了GB4789中，其中生化试验培养基23种，普通和专用培养基89种。v食品、化装品及涉水产品等产品微生物检验常规项目中所用增菌分离培养基有所不一样，对于菌种判定所用培养基，各类产品分离菌种其判定所用培养基基本相同。23钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第23页惯用培养基质量控制惯用培养基质量控制 （一）（一）检检验验项项目目与与方方法法：对新批号干燥培养基物理、化学及生物学指标判定vA.感官（外观）研细程度和颜色（溶解前后），透明度，杂质等；vB.pH测定，按各种培养基要求pH0.2，蒸馏水pH应在6.4-7.0之间。24钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第24页惯用培养基质量控制惯用培养基质量控制 （二）（二）vC.C.生生物物学学指指标标检检定定：被被检检培培养养基基对对应应细细菌菌生生长长率率测测试试，菌菌落大小及特征检测。落大小及特征检测。生生长长率率测测试试：适合用于液体和固体培养基：将菌培养液，用生理盐水做倍比稀释，取适当稀释度进行平板计数或接种被检培养基试管，同时以按相关培养基国家标准配方新鲜配制培养基进行对照。不低于10%。菌菌落落大大小小测测试试：划线分离测试菌，取10个菌落测量直径大小，其直径均值与新鲜配制培养基无统计学差异。25钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第25页惯用培养基检定用标准菌株惯用培养基检定用标准菌株甲型副伤寒沙门菌 伤寒沙门菌乙型副伤寒沙门茵 鸭沙门茵鼠伤寒沙门氏菌 痢疾志贺菌1型福氏志贺菌 大肠埃希菌金黄色葡萄球菌 普通变形杆菌肺炎克雷伯菌肺炎亚种 弗劳地枸橼酸杆菌绿脓杆菌 副溶血性弧菌26钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第26页惯用培养基质量标准惯用培养基质量标准 v干粉颜色：淡黄色粉末或展现本培养基特有颜色v溶解后培养基色泽：清楚透明（含琼脂除外），淡黄色或特有色泽；v灭菌后培养基pH：7.22为多；个别弧菌检验用培养基pH值偏高为：8.0 2v生物学指标：菌落特征及菌落大小。27钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第27页培养基保留环境培养基保留环境v制成培养基保留环境为4冰箱，如制成平板则用塑料袋包装置冰箱保留。v干燥培养基干粉含有活性物质、遇热易分解物质应仔细查看存放条件，多数也须放在2-8 条件保留。v有培养基则以存放于10-15 条件为易。如含有高浓度胆盐培养基。28钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第28页培养基配制程序（一）培养基配制程序（一）v不一样培养基配制程序有所不一样，但普通培养基配制程序主要有以下7个步骤：调配、融化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及判定。v注意点：配制时注意各类成份用途。vpH测定：干燥培养基在工厂生产时，对培养基pH进行了一定调试，在实际工作中，因为配制环境、配制所用溶剂（蒸馏水）pH等条件有所不一样，都会对所用培养基pH要有所影响。所以对于干燥培养基配制，一样需要进行pH测定。29钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第29页培养基配制程序（二）培养基配制程序（二）v配制好培养基（尤其是糖发酵管）不宜久放。因为培养培养基吸收空气中二氧化碳，会使培养基变酸，从而影响细菌生长。v培养基中抑制剂及指示剂一定要准确称量，抑制剂要注意合理配伍。30钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第30页培养基原料及相关试剂质量控制培养基原料及相关试剂质量控制 v配配制制培培养养基基主主要要原原料料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、胆盐、无机盐和琼脂等，其优劣直接影响到培养基质量，由此也将影响检验质量。v培培养养基基相相关关试试剂剂质质量量控控制制及及阴阴、阳阳性性对对照照菌菌株株试试验验。对做生化反应各类试剂，在配就后均应进行各项必要判定。用已知阴、阳性菌株进行对照试验。对于其它如氧化酶、触酶、染色液等也一样需要经判定后用于试验。31钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第31页不合格培养基可能原因（一）不合格培养基可能原因（一）v干燥培养基结块干燥培养基结块v培养基过于陈旧v 培养基处于潮湿环境中v培养基生产时水分过高vpHpH偏离要求值偏离要求值v 培养基过于陈旧v配制时所使用蒸馏水非中性v培养基过分灭菌32钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第32页不合格培养基可能原因（二）不合格培养基可能原因（二）v培养基不清澈培养基不清澈v 使用了劣质水v 培养基pH值不对v 使用了不一样容器制备v 生产原料精度不够v 培养基过分灭菌v凝固温度过高凝固温度过高v 培养基干粉用太多v 琼脂质量发生了改变33钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第33页不合格培养基可能原因（三）不合格培养基可能原因（三）v凝胶强度过低凝胶强度过低v 培养基干粉用太少v 培养基未完全溶解v 培养基过分灭菌v 倾注前未振摇培养基瓶v 琼脂粉凝固强度较低v颜色不对颜色不对v pH不正确（带指示剂培养基）v 培养基过分灭菌v 使用了不洁容器制备34钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第34页不合格培养基可能原因（四）不合格培养基可能原因（四）v培养基被污染培养基被污染v 培养基灭菌不彻底v 灭菌后存放不妥而污染v 试验时使用了污染器皿v生长不良生长不良v 可能由制备容器设备、水或样品带入抑制物v 样品中含有亚致死性损伤微生物v pH不正确v 添加物（抑制剂）等浓度不妥v 培养基过分灭菌v 试验时培养基或溶解样品时温度过高35钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第35页不合格培养基可能原因（五）不合格培养基可能原因（五）v过分生长过分生长v 培养基过分灭菌，选择性物质受到了破坏v 添加物浓度不妥v菌落蔓延菌落蔓延v 琼脂表面过湿v 使用了过多接种体积v 培养基过分灭菌v非经典生长非经典生长v 培养基制备不妥v 干燥培养基存放陈旧v 制备成培养基存放时间过长v 生长条件不妥（温度、时间、气体）36钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第36页检测质量确保检测质量确保 v定时使用有证标准物质和次级标准物质（参考物质）进行内部质量控制。v试验室间比对或能力验证v利用相同或不一样方法进行重复检测v对留存样品进行在检测。37钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第37页微生物检验质控方法微生物检验质控方法 （一）（一）菌落计数精密度控制直接计数菌落计数精密度控制直接计数v选择同一标本，要求检验人员进行菌落计数。v将大肠杆菌（25922）或经检定标化菌片，经过适当梯度稀释，选择适当稀释度进行菌落计数试验操作。361培养24h进行菌落计数。38钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第38页微生物检验质控方法（二）微生物检验质控方法（二）v菌落计数精密度控制重复计数法菌落计数精密度控制重复计数法 选择十个平板，每个平板含有适当菌落数（100以内）。将平板编号，由试验人员进行计数并统计结果。去掉平板编号，将平板置冰箱保留过夜，次日取出，重新给予编号，由试验人员重复计数并统计。要求：v本身同一平皿重复计数误差 小于7.7%v试验人员之间同一平皿重复计数误差 18.2%v本身同一梯度平行加样两皿间相对误 小于7.7%v试验人员之间同一梯度计数误差 18.2%范围v不一样梯度间菌落计数最终误差 小于7.7%39钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第39页菌种判定质控菌种判定质控v菌种判定质控要求，对所给微生物菌种，按相关方法及指标进行生化、血清等方面判定。v判定质量评价：判定程序是否正确；判定方法是否正确；详细操作技术是否熟练，结果汇报是否正确。每一项设置分值为25分。总分为100分。40钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第40页Go on please41钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第41页生物安全试验室v感染性微生物危险度等级分类感染性微生物危险度等级分类v生物安全试验室生物安全试验室v生物安全柜生物安全柜42钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第42页感染性微生物危险度等级分类感染性微生物危险度等级分类v危险度危险度1 1级级(无或极低个体和群体危险无或极低个体和群体危险)：不太可能引发人或动物致病微生物 食源微生物中细菌总数、大肠菌群、粪大肠菌群等指标菌列为危险度1级。43钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第43页感染性微生物危险度等级分类感染性微生物危险度等级分类v危险度危险度2 2级级(个体危险中度个体危险中度,群体危险低群体危险低):):病原体能够对人体或动物致病,但对试验室工作人员、小区、牲畜或环境不易造成严重危害。试验室暴露可能会引发严重感染，但对感染有有效预防和治疗办法，而且疾病传输危险有限。v沙门氏菌、副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉、赭曲霉、轮状病毒等列为危险度2级44钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第44页感染性微生物危险度等级分类感染性微生物危险度等级分类v危险度危险度3 3级级(个体危险高个体危险高,群体危险低群体危险低)病原体通常能引发人或动物严重疾病，但普通不会发生感染个体向其它个体传输，而且对感染有有效预防和治疗办法。肉毒梭菌、炭疽芽孢杆菌、肝炎病毒等列为危险度3级45钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第45页感染性微生物危险度等级分类感染性微生物危险度等级分类v危险度危险度4 4级（高度个体和群体危险均高）级（高度个体和群体危险均高）病原体通常能引发人或动物严重疾病，而且很轻易发生个体之间直接或间接传输，对感染普通没有有效预防和治疗办法。鼠疫耶尔森氏菌等列为危险度4级46钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第46页试验室试验室v基础试验室：一级生物安全水平v基础试验室：二级生物安全水平v防护试验室：三级生物安全水平v最高防护试验室：四级生物安全水平47钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第47页48钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第48页1.1.基础试验室基础试验室超净工作台超净工作台无菌操作无菌操作49钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第49页无菌室（接种室）无菌室（接种室）50钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第50页1.1.基础试验室基础试验室处理危险度2级或更高危险度级别微生物时，在试验室门上应标有国际通用生物危害警告标志二级生物安全水平51钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第51页二级生物安全试验室52钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第52页进入要求进入要求v只有经同意人员方可进入试验室工作区域。v试验室门应保持关闭。v儿童不应被同意或允许进入试验室工作区域。v进入动物房应该经过尤其同意。v与试验室工作无关动物不得带入试验室。53钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第53页人员防护人员防护v在试验室工作，都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。v在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其它含有潜在感染性材料或感染性动物操作时，应戴上适当手套。手套用完后，应先消毒再摘除，后必须洗手。v在处理完感染性试验材料和动物后，以及在离开试验室工作区域前，都必须洗手。v为了预防眼睛或面部受到泼溅物、碰撞物或人工紫外线辐射伤害，必须戴安全眼镜、面罩（面具）或其它防护设备。54钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第54页人员防护人员防护v禁止穿着试验室防护服离开试验室，（如去餐厅、咖啡厅、办公室、图书馆、休息室和卫生间）。v不得在试验室内穿露脚趾鞋子。v禁止在试验室工作区域进食、饮水、吸烟、化装和处理隐形眼镜。v禁止在试验室工作区域储存食品和饮料。v在试验室内用过防护服不得和日常服装放在同一柜子内。55钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第55页试验室工作区试验室工作区v试验室应保持清洁整齐，禁止摆放和试验无关物品。v发生含有潜在危害性材料溢出以及在天天工作结束之后，都必须去除工作台面污染。v全部受到污染材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须去除污染。v在进行包装和运输时必须遵照国家和/或国际相关要求。56钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第56页废弃物处理废弃物处理v用以处理潜在感染性微生物或动物组织全部试验室物品，在被丢弃前应考虑主要问题有：1、是否已采取要求程序对这些物品进行了有效去除污染或消毒？2、假如没有，他们是否以要求方式包裹，方便就地焚烧或运输到其它有焚烧设施地方处理？3、丢弃已去除污染物品时，是否会对直接参加丢弃人员，或在设施外可能接触到丢弃物人员造成任何潜在生物学或其它方面危害？57钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第57页废弃物种类废弃物种类v1、可重复或再使用，或按普通“家庭”废弃物丢弃非污染（非感染性）废弃物。v2、污染（感染性）锐器皮下注射用针头、手术刀、刀子及破碎玻璃；这些废弃物应搜集在带盖不易刺破容器内，并按感染性物质处理v3、经过高压灭菌和清洗来去除污染后重复或再使用污染材料v4、高压灭菌后丢弃污染材料v5、直接焚烧污染材料58钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第58页2.2.防护试验室防护试验室 三级生物安全水平三级生物安全水平59钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第59页60钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第60页操作规范操作规范v除以下修改以外，应采取一级和二级生物安全水平基础试验室操作规范：1、张贴在试验室入口门上国际生物危害警告标志，应注明生物安全级别以及管理试验室出入责任人姓名，并说明进入该区域全部特殊条件，如免疫接种情况。2、试验室防护服必须是正面不开口或反背式隔离衣、清洁服、连体服、带帽隔离衣，必要时穿着鞋套或专用鞋。前系扣式标准试验服不适用，因为不能完全罩住前臂。试验室防护服不能在试验室外穿着，且必须在去除污染后再清洗。61钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第61页操作规范操作规范3.开启各种潜在感染性物质操作均必须在生物安全柜或其它基本防护设施中进行。4.有些试验室操作，或在进行了一些病原体动物操作时，必须配置呼吸防护装备。62钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第62页3.3.最高防护试验室最高防护试验室四级生物安全水平四级生物安全水平v最高防护试验室运作应在国家或其它相关卫生主管机构管理下进行。63钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第63页操作规范操作规范除以下修改外，应采取三级生物安全水平操作规范：v1.实施双人工作制，任何情况下禁止任何人单独在试验室内工作，这一点在防护服型四级生物安全水平试验室中工作时尤其主要。v2.在进入试验室之前以及离开试验室时，要求更换全部衣服和鞋子。64钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第64页操作规范操作规范v3.工作人员要接收人员受伤或疾病状态下紧急撤离程序培训。v4.在四级生物安全水平最高防护试验室中工作人员与试验室外面支持人员之间，必须建立常规情况和紧急情况下联络方法。65钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第65页生物安全柜生物安全柜v生物安全柜（biological safety cabinets,BSCs)是为操作原代培养物、菌毒株以及诊疗性标本等含有感染性试验材料时，用来保护操作者本人、试验室环境及试验材料，使其防止暴露于上述操作过程中可能产生感染性气溶胶和溅出物而设计。66钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第66页v当操作流体和半流体，如摇动、倾注、搅拌、滴加液体、划线时等各种操作都可能产生气溶胶。v肉眼无法看到直径小于5um气溶胶及直径为5-100um微小液滴，有可能吸入或交叉污染台面等材料。67钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第67页68钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第68页级生物安全柜级生物安全柜69钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第69页级生物安全柜级生物安全柜v在应用细胞和组织培养物来进行病毒繁殖或其它培养时，未经灭菌房间空气经过工作台面是不符合要求。级生物安全柜在设计上不但能提供个体防护，而且级生物安全柜在设计上不但能提供个体防护，而且能保护工作台面物品不受房间空气污染能保护工作台面物品不受房间空气污染。v级生物安全柜有四种不一样类型（分别为A1、A2、B1、B2型），它们不一样于它们不一样于级生物安全柜之处为，级生物安全柜之处为，只让经只让经HEPAHEPA过滤（无菌）空气流过工作台面过滤（无菌）空气流过工作台面。v级生物安全柜可用于操作危险度2级和3级感染性物质。70钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第70页71钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第71页72钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第72页级生物安全柜级生物安全柜73钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第73页安全柜中物品放置安全柜中物品放置v级生物安全柜前面进气格栅不能被纸、仪器设备或其它物品阻挡。v放入安全柜内物品应采取70%酒精来去除表面污染。能够在消毒剂浸湿毛巾上进行试验，以吸收可能溅出液滴。v全部物品应尽可能地放在工作台后部靠近工作台后缘位置，并使其在操作中不会阻挡后部格栅。74钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第74页安全柜中物品放置安全柜中物品放置v可产生气溶胶设备（比如混匀器、离心机等）应靠近安全柜后部放置。v有生物危害性废弃物袋、盛放废弃吸管盘子及吸滤瓶等体积较大物品，应放在安全柜内某一侧。v在工作台面上试验操作应按照从清洁区到污染区方向进行。75钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第75页安全柜清洁与消毒安全柜清洁与消毒v在每次使用前后在每次使用前后，要去除生物安全柜内表面污染。工作台面和内壁要用消毒剂进行擦拭，杀死安全柜里可能发觉任何微生物。v天天试验结束时天天试验结束时，应擦拭生物安全柜工作台面，四面以及玻璃内外侧等部位来去除表面污染。v在对目标生物体有效时，能够采取漂白剂溶液或70%酒精来消毒。在使用如漂白剂等腐蚀性消毒剂后，还必须用无菌水再次进行擦拭。76钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第76页安全柜中个体防护安全柜中个体防护v应穿着个体防护服。在进行一级和二级生物安全水平操作时，可穿着普通试验服。v反背式试验隔离衣含有更加好防护效果，应在进行三级和四级生物安全水平（防护服型试验室除外）操作时使用。v手套应套在隔离衣外面，能够戴加有松紧带套袖来保护研究人员手腕。v有些操作可能还需要戴口罩和安全眼镜。77钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第77页安全柜警报器安全柜警报器v窗式警报器只能装在带有滑动窗安全柜上。发出警报时表明操作者将滑动窗移到了不妥位置。处理这种警报时，只要将滑动窗移到适宜位置就能够了。v气流警报器报警时，表明安全柜正常气流模式受到了干扰，操作者或物品当即处于危险状态。当气流警报响起时，应立刻停顿工作，并通知试验室主管。生产商说明手册中将提供更详细资料。78钟青萍讲授食品微生物检验的质量控制第78页