细菌耐药性及耐药性检验.pdf

学a田菌耐药性及耐药性检验；专题讨论*八 第一节 抗菌药物的作用机制抗菌药物：对病原微生物具有较高的“选择性毒性作用 对患者不造成损害n主要作用机制:a.干扰细菌细胞壁的合成所有细菌（除支原体）都具有细胞壁，而哺乳动物 则无。细菌的细胞膜为一种半透膜，内外 各一层蛋白质，中间一层类脂质。作用：具有选择性输送营养物质及催化重要生化代谢过程的作用。多粘菌素B、两性霉素B、制霉菌素。口比咯类：咪康建、酮康建、杆菌肽C.影响细菌蛋白质的合成蛋白质的合成看三个阶凌厂起 始阶段、延长阶段和终止阶段。不 同抗生素作用不同阶段。哺乳动物细胞核糖体的沉降系数 为80s邂比60s与40s亚单元。细菌核糖体的沉降系数为 70S解J)S与30s亚单元氨基糖昔类、林可霉素 类、大环内脂类、四环素、氯霉素、夫西地碱、莫比罗 星。d.抑制细菌核酸的合成利精霉素类炭黄霉素类7瓦诺 酮类、甲硝噗、吠喃类、新生霉素、香豆霉素 其他e.抑制细菌叶酸的代谢f.抑制结核环脂酸的合成 磺胺药、甲氧茉咤第二节细菌对抗菌药物的耐药性 细菌的耐药性分为：:天然或突变产生的耐药性，即 遗传基因介导的耐药性:获得性耐药性或 介导的耐药性。易于传播，在临床上占重要地位细菌耐药性的分子遗传学基础细菌可通过不同的机制产生遗传 变异和对抗菌药物的耐药性微观的变化：在某一核甘酸碱基 对中发生点突变。导致抗菌药物 作用靶位的改变产生耐药性。八、宏观的变化:导致细菌DNA的一大片全部重排，包括倒位、复制、插入、中间缺失或细 菌染色体DNA的大段序列从原有部位转座到另一部位（通过 和来完成），由质粒或噬菌体或其他遗传 片段所携带的外来DNA片段导致细菌耐 药。(-)突变耐药性:染色体介导的耐药性。:细菌可经过物理因素和化学 因素等处理而诱发突变；:突变也可为遗传基因DNA自 发变化的结果。n染色体介导的耐药特点:比较稳定:与药物接触无关:自然界的耐药菌中仅居次要 地位染色体介导的耐药性存在的例子-b声星|旗布菌藕:肺炎和催产克雷伯菌可产生由染色 体介导的青霉素酶,因而对氨茉西林 和竣苇西林耐药:金葡菌甲氧西林耐药株:肺炎链球菌对青霉素的耐药株:细菌对蔡咤酸的耐药等（二）质粒介导的耐药性耐药质粒广泛存在于G+与 G-细菌中几乎所有致病菌都 具有耐药质粒。通过耐药质粒传递的耐药 现象最多见耐药质粒可分为两种主要类型接合型质粒(conjugative plasmid)非接合型质粒(nonconjugative plasmid)接合型质粒包括两部分:耐药决定因子A耐药转移因子耐药决定因子 _-:具有一个至数个耐药基因:破坏抗生素:改变细菌细胞壁或细胞膜的通透性:阻断抗生素到达作用靶位等r耐药转移因子:负责耐药因子转移时所需物质 的制备和合成。:性纤毛为接合的必需物质，如 果细菌性纤毛脱落，则不再出现 接合过程。:此外耐药转移因子还与质粒DNA 的复制、接合过程中耐药基因的 转移等有关。n非接合型质粒非接合型质粒的耐药因子仅有 耐药决定因子，无耐药故不能通过细菌接合转移，而通 过转化，转导或由接合型质粒“动员(mobilization)等方 式转移。转化(transgomation)。转导(transduction)。接合(conjugation)。易位(translocation)或 转座(transposition)位点特异的基因重组即通过整合子可使耐 药基因发生转移转化(transgomation)/耐药菌溶解后释出的DNA进入敏 感菌体内，其耐药基因与敏感菌 中的同种基因重新组合，使敏感 菌成为耐药菌。此方式限于G+细菌和嗜血杆菌属细菌/耐药菌通过噬菌体将耐药基 因转移给敏感菌.一金葡菌中耐药转移的唯一方 式接合(conjugation)/由接合传递的耐药性也称感染性耐药(infections resistense)通过耐药菌和敏感菌菌体的直接接触，由 耐药菌将耐药因子转移给敏感菌.主要见于G-菌中，尤其肠道细菌 中易位(translocation)或转座/耐药基因可自一个质粒转座 到另一个质粒，从质粒到染色 体或从染色体到噬菌体。（三）耐药性发生的机制31.灭活酶或钝化酶的产生*：*2.青霉素结合蛋白改变3.抗生素的渗透障碍04.靶位的改变4.其它1.灭活酶或钝化酶的产生;细菌通过耐药齿子可产生破坏抗生 素或使之失去抗菌作用的酶，使药物 在作用于菌体前即被破坏或失效。:*8内酰胺酶:氨基糖昔类钝化酶:氯霉素乙酰转移酶:红霉素酯化酶内酰胺酶是一群酶，是细菌对屏内酰 胺类抗生素耐药的主要作用机制*水解药物屏内酰胺环使酰胺键断裂而失去抗菌活性分类*根据Ambler分子结构分类法：将6-内酰 胺酶分为A、B、C、D四类根据Bush功能分类法：结合酶的分子 结构、抑制性及水解底物特征进行分类分类*在6菌中，TEM1和SHV-1分别是大肠 杆菌和肺克菌中最主要和最多见酶。属 Bush分类2b组，可水解青霉素和窄谱 头抱菌素。*随着三代头抱菌素的广泛应用，TEM-1 和SHV-1发生突变，形成各种超广谱屏 内酰胺酶(ESBL),介导细菌对青霉 素和一、二、三代头抱菌素及单环菌素 耐药。AmpC 酶*肠杆菌属细菌和铜绿假单胞菌产生，由染色体编码的头抱菌素酶，属于Bush分 类1组。*在自然状态下细菌产酶量少，但阴沟肠 杆菌等在以内酰胺类抗生素的作用下可 诱导产生大量AmpC酶，导致细菌对除 碳青酶烯类以外的所有6.内酰胺类抗生 素耐药。青霉素结合蛋白改变在G+菌中，细菌获得外源性DNA（如 mecA基因），编码产生新的抗生素低亲 和力的青霉素结合蛋白（PBP）或PBP本身 发生修饰导致细菌对6.内酰胺类抗生素 耐药。（前者是MRSA对所有6.内酰胺类 抗生素耐药的原因）2.抗生素的渗透障碍/由于细菌细胞壁的障碍或细 胞膜通透性的改变，使抗生 素无法进入细胞内达到作用 靶位而发挥抗菌效能。抗生素的泵出系统:7以知G骑焉四环素耐药主 要由于其细胞膜上存在能量依赖性 泵出系统，使菌体内药物量减少，此种泵出系统由Tet膜蛋白介导。/此种抗生素泵出系统亦存在于氯 霉素，红霉素和嘎诺酮类耐药菌和 表葡菌中，以及对十四环大环内酯 类耐药的菌株中。3.靶位的改变/有的细菌可以改变靶位酶，使其 不易为抗生素所作用。如：肺链、流感杆菌、脑双、淋球 菌和金葡菌能改变青霉素结合蛋白 的结构或产生一种新的青霉素结合 蛋白，后者与0内酰胺类抗生素的 亲和力降低而导致耐药性。4淇它/细菌可增加对抗菌药物拮抗物的产量而耐药。如：金葡菌对磺胺耐药，对氨苯甲酸(PABA)产量可为敏感菌的2 0 倍。:另外，细菌代谢状态、营养缺陷、1外界环境变化等都可使细菌耐药性增 加。在正常情况下，由染色体介导*的耐药性、耐药菌往往有一定缺陷,但质粒介导产生的耐药菌则与敏感 菌一样，生长繁殖，并可在正 常人和体弱者中引起感染。*八无论质粒或染色体介导的耐药性,一般只发生于少数细菌中，难以与 1k股优劣的敏感菌竞争，故具厄舍 性不大；只有当敏感菌因抗菌药物 的选择性作用而被大量杀灭后，耐 药菌才得以大量繁殖而成为优势菌,并导致各种感染的发生。因此，细菌耐药性的发生和发展 是抗菌药物的广泛应用，特别是无 指征滥用的后果。