222-动物细胞融合与单体克隆抗体2人教版选修三-PPT课件.pptx

1 1、定义：、定义：指用自然或人工方指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。融合成一个细胞的过程。一、动物细胞融合一、动物细胞融合细胞杂交：细胞杂交：不同基因型的细不同基因型的细胞之间的融合就是胞之间的融合就是细胞杂交细胞杂交。杂交细胞：杂交细胞：融合后形成的具融合后形成的具有原来有原来两个或多个细胞遗传两个或多个细胞遗传信息信息的的单核细胞单核细胞成为杂交细成为杂交细胞胞。细胞融合是正常的生命活动细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合两个细胞正在融合 受精作用受精作用-这是一种这是一种自然融合自然融合2、诱导融合的因素诱导融合的因素生物法：生物法：灭活的病毒灭活的病毒诱导融诱导融合合.(.(利用灭活仙台病毒是动物细利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。胞融合所特有的。这是由于病毒这是由于病毒的磷脂外衣与动物细胞的膜十分的磷脂外衣与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。功能。)化学法：化学法：聚乙二醇聚乙二醇PEGPEG诱导融诱导融合合.物理法：物理法：电激电激融合融合病毒颗粒黏病毒颗粒黏 附细胞表面附细胞表面细胞膜连接细胞膜连接细胞膜被细胞膜被 病毒颗粒穿通病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞细胞融合、形成杂种细胞仙台病毒仙台病毒紫外线紫外线灭活灭活丧失感染活性（不感染细胞）丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）保留融合活性（诱导细胞融合）补充：补充：什么是什么是病毒的灭活？病毒的灭活？灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。力，但是并不破坏病毒的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理灭活病毒诱导细胞融合的原理 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。细胞发生融合。不灭活行吗？不灭活行吗？不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。不灭活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。动物细胞融合的原理：动物细胞融合的原理：细胞膜的流动性细胞膜的流动性 把两个不同的动物把两个不同的动物细胞放在一起，用灭活细胞放在一起，用灭活的病毒处理细胞，它们的病毒处理细胞，它们先发生质融合，再出现先发生质融合，再出现核融合，进而形成杂交核融合，进而形成杂交细胞。细胞。融合后的杂交细胞融合后的杂交细胞经过有丝分裂后仍能形经过有丝分裂后仍能形成两个完整的杂交细胞成两个完整的杂交细胞项目项目项目项目动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交原理原理原理原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性和细胞膜的流动性和细胞膜的流动性和细胞膜的流动性和植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性融合前提融合前提融合前提融合前提 分散成单个细胞分散成单个细胞分散成单个细胞分散成单个细胞去除细胞壁去除细胞壁去除细胞壁去除细胞壁诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法 聚乙二醇、离心、振动、聚乙二醇、离心、振动、聚乙二醇、离心、振动、聚乙二醇、离心、振动、电激、电激、电激、电激、灭活病毒灭活病毒灭活病毒灭活病毒聚乙二醇、离心、聚乙二醇、离心、聚乙二醇、离心、聚乙二醇、离心、振动、电激、振动、电激、振动、电激、振动、电激、结果结果结果结果获得杂种细胞或细胞产物获得杂种细胞或细胞产物获得杂种细胞或细胞产物获得杂种细胞或细胞产物 获得杂种植株获得杂种植株获得杂种植株获得杂种植株用途用途用途用途制备单克隆抗体制备单克隆抗体制备单克隆抗体制备单克隆抗体培育作物新品种培育作物新品种培育作物新品种培育作物新品种意义意义意义意义使远缘杂交成为可能使远缘杂交成为可能使远缘杂交成为可能使远缘杂交成为可能克服远缘杂交障碍克服远缘杂交障碍克服远缘杂交障碍克服远缘杂交障碍3.动物细胞融合技术的应用：动物细胞融合技术的应用：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能；突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能；为制造为制造单克隆抗体单克隆抗体开辟了新途径开辟了新途径 使用相应的抗体检测乙肝病毒使用相应的抗体检测乙肝病毒抗原抗原医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？乙肝病毒模式图乙肝病毒模式图乙肝病毒模式图乙肝病毒模式图 凡能够引起机体产生特异性凡能够引起机体产生特异性免疫应答的物质叫做抗原免疫应答的物质叫做抗原。什么是抗原？什么是抗原？例如花粉、病菌、病毒等。有时自身的组例如花粉、病菌、病毒等。有时自身的组织或细胞也会成为抗原，如癌细胞等。织或细胞也会成为抗原，如癌细胞等。二：动物细胞融合的成功应用二：动物细胞融合的成功应用二：动物细胞融合的成功应用二：动物细胞融合的成功应用 单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备抗原决定簇：抗原决定簇：抗原表面具有的某抗原表面具有的某些些特定的化学基团特定的化学基团，能决定抗原特异性能决定抗原特异性，是免疫细胞识别抗是免疫细胞识别抗原的重要依据。原的重要依据。各种抗原的决定簇各种抗原的决定簇数目不同，同一抗数目不同，同一抗原的决定簇可能有原的决定簇可能有多种。多种。什么是抗体？由何种细胞产生？主要分布在哪里什么是抗体？由何种细胞产生？主要分布在哪里?起何作用？起何作用？当机体受到抗原刺激剂后由效应当机体受到抗原刺激剂后由效应B B细胞（浆细细胞（浆细胞）产生的，并且能与该抗原发生胞）产生的，并且能与该抗原发生特异性结合特异性结合的具的具有免疫功能的球蛋白有免疫功能的球蛋白抗体。抗体。抗体分布于血清中，也分布于组织液及外分泌抗体分布于血清中，也分布于组织液及外分泌液中。液中。血清抗体（也称多克隆抗体）血清抗体（也称多克隆抗体）由由血清血清中提取的抗体是由不同淋巴细胞产生的中提取的抗体是由不同淋巴细胞产生的多种抗体的混合物，可达百万种以上，称为多种抗体的混合物，可达百万种以上，称为多克隆多克隆抗体。抗体。特点：特点：产量低、纯度低、特异性差、反应不够灵敏。产量低、纯度低、特异性差、反应不够灵敏。抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯 抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激效应效应B B 抗体抗体（3 3）人们获得抗体的传统方法是）人们获得抗体的传统方法是?将抗原注入动物体将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体然后从动物血清中提取抗体 每一个每一个B B淋巴细胞只分泌一种淋巴细胞只分泌一种化学性质单一，化学性质单一，特异性强的抗体特异性强的抗体。如果利用单个如果利用单个B B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆）淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学化学性质单一性质单一、特异性强特异性强的抗体的抗体单克隆抗体单克隆抗体。问题（问题（4）：）：怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？怎样获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？在体外培养的条件下，一个在体外培养的条件下，一个B B淋巴细胞淋巴细胞能无限增殖形成细胞群吗？能无限增殖形成细胞群吗？什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？什么样的细胞能够在体外无限增殖呢？肿瘤细胞！肿瘤细胞！单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备极富创造性的方案极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的将能够产生特定抗体的B B淋巴细胞淋巴细胞和具有无限增殖能和具有无限增殖能力的力的骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。科勒科勒米尔斯坦米尔斯坦荣获荣获19841984年诺贝尔生理学或医学奖年诺贝尔生理学或医学奖(5)(5)技术思路的重点技术思路的重点技术思路的重点技术思路的重点杂交瘤细胞杂交瘤细胞 HAT筛选筛选McAbMcAb大量培养大量培养PEGPEG诱导细胞融合诱导细胞融合免免免免 疫疫疫疫B 脾脾矿物油矿物油矿物油矿物油骨髓瘤骨髓瘤瘤瘤 问题问题:在培养体系中在培养体系中,有有3 3种细胞种细胞.B.BB B细胞、瘤瘤细胞细胞、瘤瘤细胞,和杂交细和杂交细胞。我们还是拿不到胞。我们还是拿不到McAb,McAb,怎么办怎么办?筛选！筛出杂交瘤细胞。怎么筛选！筛出杂交瘤细胞。怎么筛筛?关关键键一一步步杂交杂交杂交杂交 细胞细胞细胞细胞灭活的病毒等手段灭活的病毒等手段灭活的病毒等手段灭活的病毒等手段小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞经免疫经免疫经免疫经免疫的小鼠的小鼠的小鼠的小鼠提取提取杂交瘤杂交瘤杂交瘤杂交瘤细胞细胞细胞细胞第一次筛选第一次筛选第一次筛选第一次筛选用特定的用特定的选选择性培养基择性培养基（HAT培养基）培养基）第二次筛选第二次筛选第二次筛选第二次筛选能产生特定抗体、培养条件能产生特定抗体、培养条件能产生特定抗体、培养条件能产生特定抗体、培养条件下能无限增殖的杂交瘤细胞下能无限增殖的杂交瘤细胞下能无限增殖的杂交瘤细胞下能无限增殖的杂交瘤细胞体外培养体外培养体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体筛选筛选筛选筛选杂交细胞杂交细胞杂交细胞杂交细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞体外或体内体外或体内体外或体内体外或体内细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养筛选筛选筛选筛选骨髓瘤骨髓瘤骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞细胞细胞诱导细胞融合诱导细胞融合诱导细胞融合诱导细胞融合特异性杂交瘤细胞特异性杂交瘤细胞特异性杂交瘤细胞特异性杂交瘤细胞杂交瘤细胞系杂交瘤细胞系杂交瘤细胞系杂交瘤细胞系提取提取提取提取经过免疫的经过免疫的经过免疫的经过免疫的B B B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞动物动物动物动物细胞细胞细胞细胞融合融合融合融合技术技术技术技术动物动物动物动物细胞细胞细胞细胞培养培养培养培养技术技术技术技术1 1.单单克克隆隆抗抗体体的的制制备备过过程程：特点：既能产生专一特点：既能产生专一特点：既能产生专一特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖抗体又能大量繁殖抗体又能大量繁殖抗体又能大量繁殖特点：特异性强灵敏特点：特异性强灵敏特点：特异性强灵敏特点：特异性强灵敏度高可大量制备度高可大量制备度高可大量制备度高可大量制备注射抗原注射抗原注射抗原注射抗原免疫免疫免疫免疫1.动物特异性免疫动物特异性免疫2.分离分离B淋巴细胞（淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意）。注意B淋巴细淋巴细胞是一个系列。（胞是一个系列。（B1,B2,B3,-Bn）3.细胞融合细胞融合三种融合方式三种融合方式:（BB;BG;GG）4.第一次筛选：在第一次筛选：在“选择培养基培养选择培养基培养”上培养筛选上培养筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞（只有（只有BG杂交瘤细胞存活。但杂交瘤细胞存活。但BG杂交瘤细胞也是一个系列：杂交瘤细胞也是一个系列：如如B1G,B2G-BnG。而。而BB,GG在此培养基上不能存活。）在此培养基上不能存活。）5.第二次筛选：在第二次筛选：在“多孔培养板上多孔培养板上”培养培养杂交瘤细胞系列杂交瘤细胞系列 ，每孔每孔只放一个杂交瘤细胞。只放一个杂交瘤细胞。“克隆化培养克隆化培养”每个杂交瘤细胞，并进每个杂交瘤细胞，并进行行“单一抗体检测单一抗体检测”，“检测阳性检测阳性”的孔内即是所需要的杂交的孔内即是所需要的杂交瘤细胞。瘤细胞。6.选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养体外培养或注射到或注射到小鼠腹腔小鼠腹腔内增殖内增殖。7.提取单克隆抗体。提取单克隆抗体。1、单抗的制备过程要点：、单抗的制备过程要点：3 3 3 3）、为何要进行两次筛选？）、为何要进行两次筛选？）、为何要进行两次筛选？）、为何要进行两次筛选？4 4）、如何进行第）、如何进行第2 2次筛选？次筛选？培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞。培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞。第第1 1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2 2次筛选得次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。问题强化：问题强化：1 1）、本过程利用了哪些原理？）、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2 2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B B细胞融合？细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有不仅具有B B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体本领，因而可以获得大量单克隆抗体已知细胞合成已知细胞合成DNADNA有有 D D 和和 S S 两条途径，其中两条途径，其中D D途径途径能被氨基嘌呤阻断。能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种人淋巴细胞中有这两种DNADNA的合的合成途径，但一般成途径，但一般DNADNA不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请回答：回答：试管中除融合的杂种细胞外，还有试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融种融合细胞合细胞 2 设计一方法（不考虑机械方法），从培养设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说原理。液中分离出杂种细胞，并说原理。培养液中加入培养液中加入氨基嘌呤氨基嘌呤，收集增殖的细胞。，收集增殖的细胞。加入氨基嘌呤后，使加入氨基嘌呤后，使 D D 合成途径阻断，合成途径阻断，仅有仅有 D D 合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞因为可以利用淋巴细细胞融合后的杂种细胞因为可以利用淋巴细胞中的胞中的 S S 途径合成途径合成DNADNA而增殖。而增殖。如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用抗体的细胞，通常用抗体的细胞，通常用抗体的细胞，通常用“有限稀释法有限稀释法有限稀释法有限稀释法”来选择。来选择。来选择。来选择。将杂交瘤细胞稀释，将杂交瘤细胞稀释，将杂交瘤细胞稀释，将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔用多孔细胞培养板培养，使每孔用多孔细胞培养板培养，使每孔用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个细胞不超过一个细胞不超过一个细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些那些那些那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3 3 3 34 4 4 4次，直至次，直至次，直至次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。瘤细胞的克隆化培养。瘤细胞的克隆化培养。瘤细胞的克隆化培养。1、作为诊断试剂作为诊断试剂：在临床生化诊断、病理组织定位、在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比与常规抗体相比,具有具有准确、高效、准确、高效、简易、快速简易、快速特点特点.2、用于治疗疾病和运载药物用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗。主要用于癌症治疗。生物导弹：生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素放射性同位素+化学化学药物或细胞毒素药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。）胞位置，原位杀死癌细胞。）2 2、单克隆抗体的优点：、单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，可大量制备。特异性强，灵敏度高，可大量制备。3 3 3 3、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用、单克隆抗体的应用结合同位素的单抗结合同位素的单抗抗癌药物抗癌药物-生物导弹生物导弹单抗单抗放射放射性同性同位素位素动物细胞工程小结动物细胞工程小结动物细胞培养：动物细胞培养：原理、营养、条件、过程、细胞原理、营养、条件、过程、细胞生长特点、结果、应用生长特点、结果、应用动物细胞融合：动物细胞融合：原理、诱导方法、过程、应用原理、诱导方法、过程、应用单克隆抗体的制备：单克隆抗体的制备：原理、过程、特点、应用原理、过程、特点、应用核移植与克隆动物：核移植与克隆动物：供体、受体、核移植方法、供体、受体、核移植方法、克隆动物的方法、克隆动物的遗传特性、应用克隆动物的方法、克隆动物的遗传特性、应用 动、植物细胞工程的比较：动、植物细胞工程的比较：植物组培技术与动物植物组培技术与动物细胞培养技术、植物体细胞杂交技术与动物细胞细胞培养技术、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术融合技术1在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）确的是（）A结果是相同的结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同诱导融合的手段相同课堂练习课堂练习;2.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞A BC D C3.3.科学家用小鼠骨髓癌细胞与某种细胞融合，得到科学家用小鼠骨髓癌细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓癌细胞融合的是髓癌细胞融合的是 A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞B.B.不经过免疫的不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.不经过免疫的不经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞AC4 4单克隆抗体是指单克隆抗体是指 A A、单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体、单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B B、单个、单个B B淋巴细胞增殖产生的抗体淋巴细胞增殖产生的抗体C C、单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体、单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D D、单个抗体通过克隆化，产生大量抗体、单个抗体通过克隆化，产生大量抗体5.5.下列哪一项属于克隆？下列哪一项属于克隆？A.A.将鸡的某个将鸡的某个DNADNA片段整合到小鼠的片段整合到小鼠的DNADNA分子中分子中 B.B.将抗药菌的某基因引人草履虫的细胞内将抗药菌的某基因引人草履虫的细胞内 C.C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞瘤细胞 D.D.将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系 DB体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌单克隆抗体的实验方案风杆菌单克隆抗体的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中、图中B为为_过程，常用过程，常用_作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继承承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其中中_代以内的的细胞属于细胞株。代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体制备单克隆抗体B细胞细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活病毒灭活病毒双亲细胞双亲细胞分泌抗体分泌抗体无限增殖无限增殖原代原代传代传代506 6：