血清LCN2、Apelin...对老年男性骨质疏松预测价值_张爱萍.pdf

疫吸附治疗多发性肌炎和皮肌炎疗效的随机对照研究 J 临床药物治疗杂志，2018;16(3):46-9，80.12张铭明，张锐，杨小珂，等.特发性炎性肌病患者酶谱指标，炎症指标，自身抗体水平分析 J 检验医学与临床，2020;17(6):731-5.13汤一榕，陈仁利，朱丽秀，等.甲氨蝶呤联合小剂量糖皮质激素治疗类风湿关节炎的疗效及对外周血中 Tfh 细胞和炎性因子的影响 J 贵州医药，2018;42(12):1414-6.14Keyer G，Zierz S，Kornhuber M.Treatment of adult idiopathic inflam-matory myopathies with conventional immunosuppressive drugs:re-sults of a retrospective study J Z heumatol，2018;78(2):183-9.15朴冰，何伟，魏烨平，等.甲氨蝶呤联合糖皮质激素治疗皮肌炎患者的安全性研究 J 实用皮肤病学杂志，2015;8(5):345-7.16Damoiseaux J，Vulsteke JB，Tseng CW，et al Autoantibodies in idio-pathic inflammatory myopathies:clinical associations and laboratoryevaluation by mono-and multispecific immunoassays J Autoimmunev，2019;18(3):293-305.17uperto N，Pistorio A，Oliveira S，et al Prednisone versus prednisoneplus ciclosporin versus prednisone plus methotrexate in new-onset ju-venile dermatomyositis:a randomised trialJ Lancet，2016;387(10019):671-8.18牛东燕，梁卓文，杨元花.小剂量甲泼尼龙联合甲氨蝶呤和羟氯喹治疗系统性红斑狼疮的临床疗效及安全性分析 J 药物评价研究，2018;41(4):611-4.2021-12-26 修回(编辑李思萦)血清 LCN2、Apelin-13水平对老年男性骨质疏松预测价值张爱萍1刘爱华1惠文鹏2(1 济南市第四人民医院(山东第一医科大学第三附属医院)，山东济南250000;2 山东省第二人民医院)摘要 目的探讨老年男性血清中脂质运载蛋白(LCN)2 和脂肪细胞因子(Apelin)-13 对骨质疏松(OP)的预测价值。方法2018 年 1 月至 2020 年 6 月到济南市第四人民医院检查的老年男性 256 例，根据骨密度(BMD)测定结果，分为 OP组 93 例和对照组(非 OP)163 例。通过测定并比较两组型胶原交联羧基末端肽(CTX)、型前胶原氨基端延长肽(PINP)、全段甲状旁腺素(iPTH)、血钙(Ca)、血磷(P)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及胱抑素(Cys)-C;采用酶联免疫法检测血清中 LCN2 及 Apelin-13 的水平。采用 Pearson 相关考察各参数与 BMD 关系;多因素 Logistic 回归确定危险因素;并通过绘制受试者工作特征(OC)曲线分析 LCN2 和 Apelin-13 对 OP 的预测价值。结果OP 组年龄、CysC、CTX、PINP 显著高于对照组，而 BMD、OC、血清 LCN2 及 Apelin-13 显著低于对照组(P0.05)。Pearson 相关显示，BMD 与老年男性的 CTX、PINP 呈显著负相关(均 P0.001)，与 OC、血清 LCN2 及 Apelin-13 呈显著正相关(均 P0.01)。Logistic 回归显示，年龄、CTX、PINP、OC、血清 LCN2 及 Apelin-13 均是影响老年男性发生 OP 的独立危险因素。OC 曲线显示，血清 LCN2 的临界值为 50.46 ng/L，其OC 曲线下面积(AUC)为 0.806，预测的敏感度为 76.8%，特异性为 77.4%;血清 Apelin-13 的临界值为 968.42 pg/mg，AUC为 0.854，预测的敏感度为 82.9%，特异性为 81.6%。确诊为 OP 的 90 例患者经红外灸疗仪治疗后的 LCN2、Apelin-13、BMD水平明显高于治疗前。结论血清 LCN2、Apelin-13 与老年男性发生 OP 相关，可作为 OP 的预测指标及康复治疗的疗效指标。关键词 脂质运载蛋白 2;脂肪细胞因子(Apelin)-13;骨质疏松;骨密度中图分类号 681 文献标识码 A 文章编号 1005-9202(2023)03-0587-05;doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2023.03.022通信作者:惠文鹏(1980-)，男，硕士，副主任医师，主要从事骨质疏松研究。第一作者:张爱萍(1966-)，女，副主任医师，主要从事骨科疾病诊断与治疗研究。骨质疏松(OP)是最常见的全身性骨骼疾病，其特征是骨量减少，骨组织微结构退化，导致骨脆性增加，易患骨质疏松骨折1。据统计，每年有数百万的骨折病例，考虑到人口老龄化，预计将在未来几年稳步增加，使 OP 成为全球性健康经济问题2。OP早期无明显症状，而当骨骼出现疼痛、脆性，体型发生改变时，疾病已相当严重，患者预后相对较差3。因此，早期诊断无疑会利于 OP 患者的治疗和预后。近年来，医学检验技术得到广泛应用，为 OP 诊断提供新的可能。脂质运载蛋白(LCN)2 属于分泌型糖蛋白之一，与代谢异常类疾病密切相关4，研究发现 OP 患者血液中 LCN2 异常表达，而 LCN2 基因下调后，会显著影响干细胞的成骨分化能力5。脂肪细胞因子(Apelin)是人类 G 蛋白受体内源性配体的成员，而 Apelin-13 是 Apelin 家族中研究最多的成员之一，是糖尿病和肥胖等代谢紊乱性疾病的有益靶点6，7。吴继芳等8以 2 型糖尿病患者为研究对象，发现 Apelin-13 会影响其 OP 发生。可见，LCN2和 Apelin-13 均有望成为预测 OP 发生的潜在标志物。本研究检测血清 LCN2 和 Apelin-13 水平，分析二者用于老年男性 OP 早期诊断的价值。785张爱萍等血清 LCN2、Apelin-13 水平对老年男性骨质疏松预测价值第 3 期1对象和方法1.1研究对象选取 2018 年 1 月到 2020 年 6 月到济南市第四人民医院检查的老年男性 256 例，按照设定的入排标准严格筛选，收集其病史、年龄、身高、体重等基本信息，并进行常规检查，参考世界卫生组织(WHO)推荐方法诊断 OP。入选标准:(1)年龄60 周岁;(2)无甲状腺、糖尿病等其他影响骨代谢相关疾病;(3)无脏器功能严重受损相关疾病;(4)检测前半年内未服用激素类药物。本研究经医院伦理委员会审批，获得了所有患者的书面同意。年龄 60 88 岁，平均(73.4310.24)岁。所有患者行骨密度(BMD)测定，结果 93 例确诊为 OP，纳入为 OP 组，其他 163 例为非 OP 病例，纳入为对照组。1.2试剂与仪器B 超型 BMD(古野电气株式会社);Cobas e601 电化学发光免疫分析仪(瑞士罗氏公司);BK400 全自动生化分析仪(山东博科生物产业有限公司);酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(上海纪宁实验有限公司);低速自动平衡离心机(北京北利时代公司)。1.3研究方法1.3.1BMD 测定负责 BMD 测量的人员为经过培训的专科技术人员。测量前必须先通过测量标准体模，以确保仪器测量结果的准确性;测量时，调整患者体位以适应不同位置 BMD 测量;双侧股骨一般选取股骨颈、大转子、粗隆间进行检测，腰椎骨则选取 L1-L4 腰 椎 前 后 位 进 行 检 查。采 用 OSTEO-COE3 双能 X 线 BMD 检测仪进行测定，可通过仪器自带软件进行结果计算和分析。参照 WHO 标准9进行评价，通常用 T-Score(T值)表示，代表测得的受试者 BMD 值与同种族和性别健康成年人的骨峰值之比:BMD 正常:T 值1.0标准差(SD);骨量减少:1.0 SDT 值2.5SD;OP:T 值2.5 SD。OP 病例为 OP 组，骨量减少和 BMD 正常病例纳入为对照组。1.3.2血指标检测所有患者禁食至少 8 h，清晨空腹条件下，采集所有患者静脉血，采用 Cobas e601电化学发光免疫分析仪检测型胶原交联羧基末端肽(CTX)、型前胶原氨基端延长肽(PINP)、全段甲状旁腺素(iPTH)及骨钙素(OC)水平;血钙(Ca)、血磷(P)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及胱抑素(Cys)C 用 BK400 全自动生化分析仪检测，采用 ELLSA 法并严格按照说明检测血清 LCN2 及Apelin-13 的水平。1.3.3红外线治疗对确诊为 OP 的患者采用 CQ-61 型红外线治疗仪(重庆航天火箭电子技术有限公司)治疗。连接电源，将电源开关植入开启状态，时间设定为20 min。患者取舒适体位，暴露治疗部位，将灯头中心对准患者左侧足三里部位，按启动开始治疗;治疗结束后再以相同方法重新将灯头中心对准患者神阙穴位，再治疗20 min。治疗结束后，切断电源。隔日治疗 1 次，3 个月为 1 个疗程，连续治疗2 个疗程，治疗前后测定血清 LCN2、ApeLin-13、BMD的水平。1.4统计学方法采用 SPSS 25.0 软件进行 t 检验、2检验、Pearson 相关分析、Logistic 回归分析;并通过绘制受试者工作特征(OC)曲线分析 LCN2、Apelin-13 对 OP 的预测价值。2结果2.1两组一般资料比较两组年龄、CysC 及 BMD差异显著(P0.05)，而体重指数(BMI)、Ca、P、ALT及 AST 无显著差异(P0.05)。见表 1。表 1两组一般资料比较(xs)组别n年龄(岁)BMI(kg/m2)Ca(mmol/L)P(mmol/L)ALT(mmol/L)AST(mmol/L)CysC(mg/L)BMD(g/cm2)OP 组9376 2192825203012 280141180162369923231510111160410 93013对照组16371 8481625092562 250131160 14228270422 769871050341 15017t 值3 9180 3101 7271 04307880301219311 611P 值0 0010 7570 0850 2980432076300300 0012.2两组骨代谢及血清学指标水平比较与对照组相比，OP 组 CTX、PINP 明显高于对照组，OC、血清LCN2 及 Apelin-13 明显低于对照组(均 P0.001)，但两组间 iPTH 无明显差异(P0.05)。见表 2。2.3BMD 与各参数的相关分析BMD 与老年男性的 CTX(r=0.438，P 0.001)、PINP 呈 负 相 关(r=0.326，P0.001)，与 OC(r=0.319，P0.001)、血清 LCN2(r=0.368，P0.001)及 Apelin-13 呈正相关(r=0.451，P0.001)。885中国老年学杂志 2023 年 2 月第 43 卷表 2两组骨代谢及血清学指标水平比较(xs)组别nCTX(pg/ml)PINP(ng/ml)iPTH(mIU/L)OC(g/L)LCN2(ng/L)Apelin-13(pg/ml)OP 组935521683 1468 12163640368 4126611248 066188459218443对照组1633866274 3034 78100439788 0235817557 689171 29852205 45t/P 值11107/00011783/0 0010547/0.5855121/00019994/000117582/0 0012.4多因素 Logistic 回归分析以是否发生 OP 为因变量，年龄(60 岁=1，60 岁=0)、Cys-C(1.1 mg/L=1，1.1 mg/L=0)、CTX(600 pg/ml=1，600 pg/ml=0)、PINP(58 ng/ml=1，58 ng/ml=0)、OC(1.0 g/L=1，1.0 g/L=0)、LCN2(50.46 ng/L=1，50.46 ng/L=0)、Apelin-13(968.42 pg/ml=1，968.42 pg/ml=0)为自变量进行多因素 Logistic 分析。结果发现年龄、CTX、PINP、OC、血清 LCN2 及 Apelin-13 均是影响老年男性发生OP 的影响因素(P0.05)，见表 3。表 3Logistic 回归预测危险因素变量SEWald2值P 值O(95%CI)年龄0.880.414.6090.0322.416(1.080 5.406)CTX0.840.317.5470.0062.319(1.273 4.226)PINP0.970.444.8090.0282.645(1.109 6.309)OC1.230.584.5080.0340.292(0.094 0.910)LCN21.120.465.9200.0150.326(0.132 0.804)Apelin-13 1.160.427.7160.0050.313(0.138 0.711)2.5血清 LCN2、Apelin-13 预测老年男性 OP 发生的 OC 曲线以发生 OP 赋值为1，未发生 OP 赋值为 0，绘 制 预 测 OP 发 生 的 OC 曲 线。以50.46 ng/L作为血清 LCN2 的临界值，结果其 OC曲线下面积为 0.806，预测的敏感度为 76.8%，特异性为 77.4%;以 968.42 pg/ml 作为血清 Apelin-13的临界值，结果其 OC 曲线下面积为 0.854，预测的敏感度为 82.9%，特异性为 81.6%。见图 1。图 1血清 LCN2、Apelin-13 预测老年男性 OP 发生的 OC 曲线2.6红外灸疗仪治疗前后 OP 患者血清 LCN2、Apelin-13 水平变化OP 患者治疗后血清 LCN2、Apelin-13 水 平 分 别 为(56.43 6.01)ng/L，(1 121.23189.81)pg/L，BMD 为(1.080.13)g/cm2，治疗后的 LCN2、Apelin-13、BMD 水平明显高于治疗前(均 P0.05)。3讨论OP 常易引起骨折发生，常见于脊椎、股骨、肱骨、皮下骨、骨盆和肋骨，OP 发病率在老年人中显著增加，其引起的骨折与跌倒密切相关10。大约30%的 65 岁以上的老年人每年跌倒一次，其中近10%的患者每年跌倒超过两次以上11。跌倒不仅导致患者个人医疗成本的增加，也会导致长期社会经济成本上升，特别是健康医疗保险。来自德国的数据显示，OP 引起骨折的治疗每年花费大约 110 亿欧元成本10。普遍认为妇女绝经后易患 OP，但男性也存在着巨大的患病风险，据统计，男性 OP 患者超过 50 岁后，约 22%会出现骨折12。不同于女性OP，男性骨量丢失相对缓慢，症状更不明显，临床诊断难度更大13。因此，找到早期预测发生 OP 的生物标志物，有助于易感人群提前预警，减少骨质流失并降低骨折风险。本研究可见年龄对 OP 的发生具有重要影响，而 OP 组 CysC 的升高，可能与其抑制骨吸收功能有关14，董旋等14研究发现，CysC 与 2 型糖尿病患者发生 OP 有关，可能参与调整其骨骼稳态，但本研究相关性分析，并未发现 CysC 与老年男性 BMD 的存在明显相关性，其机制仍需更深入研究予以确认。骨组织处于不断转换的新陈代谢过程，旧骨被破骨细胞吸收，而成骨细胞不断产生等量的新骨，在此过程中，骨代谢指标起着重要的调节功能，早已在 OP临床诊断方面发挥重要作用15。在众多的骨转换指标中，PINP 是型胶原的代谢产物，其含量可反馈成骨细胞合成能力，且不易受激素的影响，其水平增高提示骨代谢疾病加重，用于 OP 具有敏感性和特异性高的特点;CTX 是能够反映破骨细胞活性的有效标志物，在多种代谢性疾病中发现 CTX 水平升高;OC 是骨基质进行矿化的必要物质，其水平升高，985张爱萍等血清 LCN2、Apelin-13 水平对老年男性骨质疏松预测价值第 3 期常见于高转化 OP，但在年龄、女性绝经等条件下，其水平表现各异16。本研究说明 BMD 更低的 OP 病例血清中 CTX、PINP 水平升高，这与上述描述相符;而 BMD 与 OC 呈正相关，说明老年男性的 OC 会有所下降，罹患 OP 的风险更高。然而，尽管这些标志物在诊断 OP 领域引入了创新，但仍存在缺乏规范的参考人群数据库、质量控制标准化不足等不足，故研究可以单独或与现有指标结合使用的新型标志物，对于 OP 临床诊断实践和转化研究意义重大3。LCN2 是脂质运载蛋白超家族的一员，由小分子蛋白组成，其特征是存在 3 个保守基团，具有与有机配体结合的能力，和特定的细胞表面受体或可溶性大分子形成复合物17。LCN2 生物作用强大，除与糖、脂代谢相关外，还可以通过控制食欲而影响脂肪增长，从而间接影响骨代谢，因为脂肪代谢与骨代谢本就存在密切联系，脂肪组织可通过旁分泌和内分泌调节骨代谢18。另外，循环系统中的 LCN2 主要来源于骨，成骨细胞中 LCN2 的表达水平接近白色脂肪细胞的 10 倍19，Mosialou 等20研究表明，成骨细胞来源的 LCN2 通过诱导胰岛素分泌维持葡萄糖稳态，提高葡萄糖耐受性和胰岛素的敏感性。本研究提示 LCN2 可反映老年男性 BMD 变化情况，与其骨代谢存在一定相关性，可能通过影响 BMD 而发挥保护作用，该结论与王炜等4研究结果相一致。LCN2 可能具有抑制形成破骨细胞并维持骨量稳定的作用，对于老年男性，LCN2 低表达，其对破骨细胞的作用相对较弱，发生 OP 风险可能增加。Apelin 为 77 个氨基酸组成的不成熟的单肽，是孤儿受体血管紧张素受体 AT1 相关受体蛋白的内源性配体，并且可以进一步衍生出 Apelin-36、Ape-lin-13 等多种活性分子，其中 Apelin-13 是信号转导中最活跃和研究最充分的变体21。研究表明，Ape-lin-13 对于骨骼组织生长具有重要的调节功能。Han 等22研究发现，敲除小鼠的 Apelin-13 基因后，其骨膜、骨髓面积明显减少，loxl3、loxl4 等胶原相关基因及 Wnt/-catenin 信号通路均明显下调，推测其BMD 调节作用可能与 Wnt/-catenin 信号通路有关。还有动物实验表明，增加 Apelin-13 浓度可使大鼠骨折愈合时间提前，可能与诱导 I 型胶原的表达有关23。本研究提示通过检测血清中 Apelin-13 也可反应 OP 病变程度，该结论与范晓霞等24结论相符。Apelin-13 可能通过表达，促进生成型胶原，借助 Wnt/-catenin 信号通路发挥作用，但相关报道相对较少，仍待更进一步研究确认其作用机制。当然，老年男性患者发生 OP 的影响因素很多，如生活方式、饮食结构、运动多少及疾病状态等25，本研究可见，血清 LCN2 及 Apelin-13 对于 OP 均表现出较强的预测价值，可作为新的标志物用于老年男性 OP 的预测。本研究说明 LCN2、Apelin-13 与 OP 密切相关，可作为康复治疗的疗效指标来评估治疗效果。4参考文献1Compston JE，Mcclung M，Leslie WD.OsteoporosisJ Lancet(London，England)，2019;393(10169):364-76.2卢艳慧，李春霖.老年2 型糖尿病合并骨质疏松的临床进展 J 中华糖尿病杂志，2020;12(6):353-6.3Materozzi M，Merlotti D，Gennari L，et al The potential role of mi-NAs as new biomarkers for osteoporosis J Int J Endocrinol，2018，6:1-10.4王炜，叶山东，钱立庭，等.脂质运载蛋白 2 和老年 2 型糖尿病患者骨密度和骨转换标志物的相关性研究 J 中国骨质疏松杂志，2018;24(6):718-22.5谢远龙，孙文超，谢江涛.人脂质运载蛋白 2 基因调控骨髓间充质干细胞成骨分化和骨质疏松小鼠骨强度 J 中华实验外科杂志，2018;35(5):881-4.6Feng M，Yao G，Yu H，et al Tumor apelin，not serum apelin，is associ-ated with the clinical features and 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患者所面临的重要健康问题，可加重患者肢体功能及活动受限，甚至导致残疾，严重影响老年 KOA 患者健康水平3，4。因此，积极探索老年 KOA 患者发生跌倒的影响因素，并及时采取相关处理措施，对改善患者预后十分有利。本研究旨在探讨老年 KOA 患者跌倒发生状况及其影响因素。1资料与方法1.1一般资料选取 2019 年 6 月至 2020 年 6 月赤峰学院附属医院 108 例老年 KOA 患者。所有患者家属签署知情同意书。纳入标准:(1)KOA 符合骨关节炎诊疗指南(2018 年版)5中相关诊断标准;(2)经 X 线检查显示负重位或站立位软骨下骨硬化或(和)囊性变、关节间隙变窄、关节边缘骨赘形成;(3)膝关节疼痛6 个月。排除标准:(1)既往有膝关节手术史;(2)合并意识障碍;(3)暴力打击或故意性体位改变所致的跌倒;(4)合并脊柱骨关节炎、髋骨关节炎等多关节骨性关节炎;(5)合并运动麻痹、感觉障碍等神经功能障碍。108 例老年KOA 患者中男43 例，女65 例;年龄60 75 岁，平均(67.493.16)岁;体重指数 18 25 kg/m2，平均(21.511.28)kg/m2。本研究经医院伦理委员会审核批准。1.2临床资料收集研究人员制定临床资料调查表，详细记录患者性别、年龄、KOA 病程、体重指数、饮酒史(饮酒时间超过 5 年，且平均每天饮酒量40 g)、吸烟史吸烟指数(每日吸烟量 吸烟年限)200、柯尔莫哥洛夫-斯米诺夫检验(K-L)分级6(级:存在轻微骨赘;级:存在明显骨赘但未累及膝关节间隙;级:膝关节间隙存在中度狭窄;级:患者膝关节间隙存在中度狭窄，且软骨下195高海鹏老年膝关节炎患者跌倒发生的影响因素第 3 期