壳聚糖的脱乙酰度酸碱滴定法测定.doc

脱乙酰度测定

酸碱滴定法测定：
测定原理
壳聚糖的自由氨基呈碱性，可与酸定量地发生质子化反应，形成壳聚糖的胶体溶液，溶液中游离的H+离子用碱进行滴定。这样从用于溶解壳聚糖的酸量与滴定用去的碱量之差，即可推算出壳聚糖自由氨基结合酸的量，从而计算出壳聚糖中自由氨基的含量。

一、 测定方法
1、 水分含量的测定
称取0.3 g壳聚糖样品，在105℃下烘干至恒重，计算失重，即得水分含量。
水分(%)=[(W1-W2)/(W1-W0)]×100
式中，W1为105℃烘干前样品及称样皿质量(g), W2为105℃烘干后样品及称样皿质量(g)
W0为已恒重的称样皿质量(g)。

2、 脱乙酰度的测定
准确称量8g壳聚糖样品(相当于0.2g壳聚糖，样品中壳聚糖含量为25mg/g)，置于250ml锥形瓶中，加入标准 0.1mol/L盐酸溶液20ml。将锥形瓶置于电磁搅拌器座上，在20℃条件下搅拌使样品溶解,再加50ml蒸馏水。加入2-3滴甲基橙-苯胺蓝混合指示剂(1g/1L甲基橙:1g/1L苯胺蓝=1:2,体积比，其中苯胺蓝为水溶性)。用标准0.1mol/L氢氧化钠溶液进行滴定，滴定至溶液由紫红色变为蓝绿色，为滴定终点。
计算公式：
氨基含量=[(C1V1-C2V2)×0.016]/[G×(100 -W)]×100%
式中，C1为酸盐标准溶液的浓度(mol/L)
C2为氢氧化钠标准溶液的浓度(mol/L)
V1为加入的酸盐标准溶液的体积(ml)
V2为滴定用消耗的氢氧化钠标准溶液的体积(ml)
G为样品的重量
W为样品的水分(%)
0.016为1ml的1mol/L盐酸溶液相当的氨基量(g)。
脱乙酰度=[氨基含量(%)]/(9.94%)×100%