T_CI 088-2023 褐藻酸寡糖.pdf

ICS 65.120CCSB50/59团体标准T/CI 088-2023褐藻酸寡糖Alginate oligosaccharide2023-6-30发布2023-6-30实施中国国际科技促进会发 布CI1前言本文件按照 GB/T1.1-2020标准化工作导则第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则起草。本文件包含一项专利（ZL201710298634.3）具体内容由中国海洋大学负责解释。本文件由青岛海兴源生物科技有限公司提出。本文件由中国国际科技促进会归口。本文件起草单位：青岛海兴源生物科技有限公司、威海迪普森生物科技有限公司、中国海洋大学、南京益纤生物科技有限公司、青岛和海生物科技有限公司、国科联盟（北京）国际信息科学研究院。本文件主要起草人：牟海津、姚闽、朱琳、张斌、朱常亮、王建磊、陈飞扬、辜自强、李东钰、赵芳萱。本文件为首次发布。2褐藻酸寡糖1 范围本文件规定了褐藻酸寡糖的术语和定义、生产工艺、技术要求、试验方法、检验规则等。本文件适用于以海带、马尾藻、铜藻、羊栖菜等褐藻或褐藻多糖为原料，经粉碎（或不粉碎）、降解、分离、浓缩（或不浓缩）、灭菌、干燥（或不干燥）等工序制得的饲料用褐藻酸寡糖。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 603化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T 5917.1饲料粉碎粒度测定 两层筛筛分法GB/T 6435饲料中水分的测定GB/T 6438饲料中粗灰分的测定GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB 10648饲料标签GB/T 13079饲料中总砷的测定GB/T 13080饲料中铅的测定 原子吸收光谱GB/T 13091饲料中沙门氏菌的测定GB/T 14699.1饲料 采样中华人民共和国兽药典第二部 2321 铅、镉、砷、汞、铜测定法3 术语和定义褐藻酸寡糖由-L-古罗糖醛酸（-L-guluronic acid，简称 G）和-D-甘露糖醛酸（-D-mannuronic acid，简称 M）通过 1,4 糖苷键连接成的寡糖。4 生产工艺原料粉碎（或不粉碎）降解分离浓缩（或不浓缩）添加（或不添加）辅料灭菌干燥（或不干燥）包装检验合格入库。35 技术要求5.1 辅料要求可添加麦芽糊精、抗结剂、增稠剂等辅料，所添加辅料应符合国家相关标准的规定。5.2 感官要求感官要求应符合表 1 的规定。表 1 感官要求项目要求褐藻酸寡糖液态褐藻酸寡糖色泽具有黄色、棕色、褐色等海藻特征的色泽具有黄色、棕色、褐色等海藻特征的色泽气味具有海藻应有的气味，无异味具有海藻应有的气味，无异味状态均匀粉末或颗粒，无肉眼可见杂质液态，无肉眼可见杂质5.3 理化指标理化指标应符合表 2 的规定。表 2 理化指标项目指标褐藻酸寡糖液态褐藻酸寡糖褐藻酸寡糖含量（以半乳糖醛酸计），%50.010.0固形物含量，%-15.0pH-5.01.0粗灰分，%30.010.0水分，%20.0-粒度（80 目标准筛通过率），%99.0-总砷，mg/kg3.01.5铅，mg/kg5.03.05.4 微生物指标微生物指标应符合表 3 的规定。表 3 微生物指标项目指标褐藻酸寡糖液态褐藻酸寡糖沙门氏菌（/25g）不得检出不得检出6 试验方法4本文件所用试剂和水，除特殊注明外，均指分析纯试剂和符合 GB/T 6682 中规定三级水，色谱分析中所用水均为符合 GB/T 6682 中规定的一级水。溶液按照 GB/T 603 配制。6.1 感官取适量试样置于洁净的白色盘（瓷盘或同类容器）中，观察色泽、状态和杂质，闻其气味。6.2 理化指标6.2.1 褐藻酸寡糖含量按附录 A 规定的方法测定。6.2.2 pH值的测定6.2.2.1 仪器和设备酸度计：精度 0.01 pH，备有玻璃电极和甘汞电极（或复合电极）。6.2.2.2 分析步骤按仪器使用说明书调试和校准酸度计。称取 100 mL 试样，置于烧杯中，用酸度计检测其 pH。6.2.3 粗灰分按 GB/T 6438 规定的方法测定。6.2.4 水分按 GB/T 6435 规定的方法测定。6.2.5 粒度按 GB/T 5917.1 规定的方法测定。6.2.6 总砷方法 1：按 GB/T 13079 规定的方法测定。方法 2：按中华人民共和国兽药典规定的方法测定。6.2.7 铅方法 1：按 GB/T 13080 规定的方法测定。方法 2：按中华人民共和国兽药典规定的方法测定。6.3 微生物指标按 GB/T 13091 规定的方法测定。57 检验规则7.1 批次以同一班次、同一品种、同一工艺的产品为一个批次。7.2 采样按 GB/T 14699.1 进行。7.3 检验7.3.1 出厂检验每批产品应进行出厂检验，褐藻酸寡糖的检验项目包括感官要求、褐藻酸寡糖含量、粗灰分、水分、粒度。液态褐藻酸寡糖的检验项目包括感官、褐藻酸寡糖含量、固形物含量、粗灰分、pH。7.3.2 型式检验型式检验为全项目检验，每年不得少于一次。如有下列情况时，应进行型式检验：a)主要原、辅材料，配方，生产工艺或设备发生较大改变时；b)停产半年以上再恢复生产时；c)出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时；d)国家有关部门监督检验与抽查时。7.4 判定规则7.4.1 所检项目全部合格，判定为该批次产品合格。7.4.2 检验结果中有任何指标不符合本文件规定时，可自同批产品中重新加倍抽样进行复检。复检结果中有一项指标不符合本文件规定时，即判定该批产品不合格。8 标签、包装、运输、贮存和保质期8.1 标签按 GB 10648 执行。8.2 包装应采用符合国家相关标准的、无毒的包装材料。8.3 运输产品在运输过程中应防止日晒雨淋、包装破损，严禁与有毒、有害物质混装、混运。8.4 贮存6产品应贮存于避光、干燥处，避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。密闭保存。8.5 销售和召回销售和召回应符合相关国家标准和有关规定。7附录附录 A A(规范性)褐藻酸寡糖含量的测定褐藻酸寡糖含量的测定A.1 方法原理褐藻酸寡糖在酸性条件下可以水解生成糖醛酸，糖醛酸在强酸条件下与间羟基联苯（3-phenylphenol）发生缩合反应，生成紫红色衍生物，在波长 525 nm 处和一定浓度范围内，该衍生物的吸收值与糖醛酸浓度呈线性关系。A.2 试剂和溶液A.2.1 间羟基联苯A.2.2 浓硫酸A.2.3 四硼酸钠A.2.4 氢氧化钠A.2.5 半乳糖醛酸标准品，97.0%（m/m）A.2.6 半乳糖醛酸标准溶液准确称取半乳糖醛酸 0.010 g，置于 100 mL 烧杯中，用 25 mL 双蒸水溶解后转移至 100 mL 容量瓶中，用 25mL 双蒸水洗涤烧杯内壁，并入到容量瓶中，重复此步骤2 次，最后用双蒸水定容至 100mL，制得0.100g/L 半乳糖醛酸标准溶液。A.2.7 120 mM四硼酸钠-硫酸溶液准确称取十水合四硼酸钠 4.576 g，置于 100 mL 烧杯中，用 50 mL 浓硫酸溶解后转移至 100 mL 容量瓶中。用 20 mL 浓硫酸洗涤烧杯内壁，并入到容量瓶中，重复此步骤 2 次，最后用浓硫酸定容至 100mL，制得 120 mM 四硼酸钠-硫酸溶液。A.2.8 0.5%氢氧化钠溶液称取 0.5 g 氢氧化钠，溶于 100 mL 蒸馏水中。A.2.9 0.15%间羟基联苯溶液称取间羟基联苯 0.15 g，溶于 100 mL 0.5%氢氧化钠溶液中，置于棕色瓶中，阴暗处保存。A.3 仪器和设备A.3.1 分光光度计8A.3.2 恒温水浴锅可控温度在 0-120。A.4 测定步骤A.4.1 半乳糖醛酸标准曲线制作取 10 mL 带螺旋盖试管，分别加入半乳糖醛酸标准溶液 0、0.10、0.20、0.30、0.40 mL，再分别用双蒸水补充到总体积为 0.4 mL，混匀，得到浓度为 0、25、50、75、100 g/mL 的半乳糖醛酸梯度溶液。将溶液置于冰水浴中，在每个试管中缓慢加入 120 mM 四硼酸钠-硫酸溶液 2.40 mL，加盖，混匀。将试管浸入沸水浴中加热，准确煮沸 20 分钟（自水浴重新煮沸起计时），用自来水冷却，室温放置 10 min左右。在每个试管中加入 80 L 0.15%间羟基联苯溶液作为显色剂，混匀，室温放置 10 min，以双蒸水为空白，在 525 nm 波长处比色测定吸光度。以吸光度为纵坐标、每毫升半乳糖醛酸梯度溶液中的糖醛酸含量（微克数）为横坐标，制得标准曲线。A.4.2 待测样品中糖醛酸含量测定准确称取固体样品 0.050 g（液态样品称取 0.250 g）（样品质量，记为 m，单位 g），置于 100 mL烧杯中，用 25 mL 双蒸水溶解后转移至 1000 mL 容量瓶中，用 25 mL 双蒸水洗涤烧杯内壁，并入到容量瓶中，重复此步骤2 次，最后用双蒸水定容至1000 mL，制得 0.050g/L 样品溶液。取该样品溶液0.40mL加入 10mL 带螺旋盖试管中，置于冰水浴中，缓慢加入四硼酸钠-硫酸溶液2.40mL，加盖，混匀。将样品溶液与标准溶液试管一起浸入沸水浴中加热，准确煮沸 20 min（自水浴重新煮沸起计时），用自来水冷却，室温放置10min 左右。在每个试管中加入80L 0.15%间羟基联苯，混匀，室温放置10min，以双蒸水为空白，在525nm 波长处比色测定吸光度。以吸光度查标准曲线，得每毫升样品溶液的糖醛酸含量（微克数，记为C）。注：半乳糖醛酸只有在浓硫酸中才可使其显色，且颜色深浅与浓硫酸浓度和纯度有关。故在测定样品和制作标准曲线时，应使用同规格、同批号的浓硫酸，以保证其浓度、纯度一致；每次样品测定应同时进行标准曲线的制作。A.5 结果与计算褐藻酸寡糖的质量分数X1（%），按下式计算：1=103 106 100式中：C-从标准曲线查得每毫升样品溶液的糖醛酸含量，g；m-称取的样品质量，g；9103-1L 体积换算为1000mL；106-g 换算为g。A.6 允许差两次平行测定结果相对偏差不超过5%。