Agilent 1200 LC 液相色谱仪现场培训教材（适用工作站版本B.04.01）.pdf

http:/ 8008203278 BookVer:1.0.1 Agilent 1200 LC Agilent 1200 LC AgilentChemstationB.04.01(中文中文)现场培训教材 现场培训教材 安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.011Agilent1200 液相现场培训手册一、目录二、培训目的.3三、培训准备.31.仪器准备.32.溶剂准备.3四、方法建立.31.开机准备.32.数据采集方法编辑.5?G1310A(单元泵).5?G1312A，G1312BXL(二元泵)/G1311A(四元泵).7?G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器).8?G1367B/C/D(高性能自动进样器).9?G1328A(手动进样器).11?G1316A,G1316BXL(柱温箱).11?G1314A/B/D/E,G1314CXL(可变波长紫外检测器).13?G1315B/D,G1315CXL(二极管阵列检测器)/G1365B/D,G1365CXL(多波长紫外检测器).15?G1362A(示差检测器).17?G1321A(荧光检测器).19?G4218A(蒸发光散射检测器).233.数据分析方法编辑.25?谱图优化.25?积分参数优化.25?校正.27?打印报告.28?光谱.295.进样.35?单针进样.35?序列进样.36http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.012Agilent1200 液相现场培训手册五、关机.381.关闭检测器的灯.382.冲洗系统.383.封存色谱柱.384.关闭电脑.395.关闭模块.39六、RRLC(快速液相)注意事项.39七、Agilent1200 保养维护.40八、Agilent1200 常见问题解决方法.42 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.013Agilent1200 液相现场培训手册二、培训目的 培训目的?基本了解 1200LC 硬件操作。?掌握化学工作站的开机，关机，参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。三、培训准备 培训准备 1.1.仪器准备：Agilent 1200 仪器准备：Agilent 1200?G1310A(单元泵)；G1312A，G1312B XL(二元泵)；G1311A(四元泵)?G1313A(标准型自动进样器)；G1329A/B(自动控温自动进样器)；G1367B/C/D(高性能自动进样器)?G1328A(手动进样器)?G1316A,G1316B XL(柱温箱)?G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器)?G1315B/D,G1315C XL(二极管阵列检测器)?G1365B/D,G1365C XL(多波长紫外检测器)?G1362A(示差检测器)?G1321A(荧光检测器)?G4218A(蒸发光散射检测器)?色谱柱：Zorbax Eclipse XDB-C18 150 x 4.6 mm,5um column(P/N 993967-902/5063-6600)2.2.溶剂准备：溶剂准备：?色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇。?二次蒸馏水 四、方法建立 方法建立 Agilent 方法建立包括：数据采集方法(仪器设置方法)以及数据分析方法(积分方法、校正方法等)两部分，下面分述这两部分的方法建立以及序列模板建立。1.1.开机准备开机准备：?启动计算机：启动计算机：打开计算机电源，登陆 windows 操作系统?启动液相：启动液相：打开 Agilent 1200 各模块电源。待 Agilent 1200 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，双击“仪器 1 联机”图标，或者“开始-所有程序-Agilent Chemstation-仪器 1 联机”?开启工作站：开启工作站：工作站打开，点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。打开仪器控制视图：选择“视图-系统视图”，即可显示仪器控制视图，选择“视图-样品视图”，即可显示样品信息视图 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.014Agilent1200 液相现场培训手册 模块右上角状态灯颜色说明：无色，未开电源或者模块准备就绪 黄色，模块未准备就绪 绿色，正在进样分析 红色，模块出错 所有模块红色，仪器有漏液 工作站图形颜色说明：绿色，模块准备就绪 黄色，模块未准备就绪 蓝色，正在进样分析 红色，出错或者不能联机 灰色,此模块没启用?配置流动相：配置流动相：将流动相装入溶剂瓶中。设置溶剂瓶参数，在溶剂瓶图形上单击鼠标左键，出现图形，点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积?冲洗流动相管路：冲洗流动相管路：旋开溶液排空阀。左键单击泵图标，点击“设置泵”，设置“流速”为http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.015Agilent1200 液相现场培训手册3ml/min(脱机机为 G1379A/B)或者 5ml/min(脱气机为 G1322A)，对于G1311A(四元泵)分别将 A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为 100%(点击中灰色按钮，即可开启“%”设置框，输入需要设置的数值百分比后，单击右侧的空白框，A 相即可自动配置为 100%-(%B+%C+%D)的百分比)，冲洗；对于 G1312A/B(二元泵)，冲洗 A、B 两个通道；对于 G1310A(单元泵)，冲洗一个通道即可?开启模块：开启模块：单击每个模块右下角的按钮，可以单独启动模块、或者。单击检测器按钮灯未点亮，检测器图形为黄色或者单击“启动”按钮，启动全部模块，检测器灯也将点亮?监视基线：监视基线：点击按钮或者“视图-在线信号”打开“在线图谱”。点击“改变”按钮，选择“可选信号”中需要监视的信号，“添加”到“选定信号中”。调整“窗口”中“X 周范围”，如需要画“0”点基线，请选择“画零线”。调整 Y 轴“Y 轴范围”与“偏移量”或者选择“Y 轴自动调整”来选择合适的监视图形?平衡色谱柱、进样分析：平衡色谱柱、进样分析：关闭溶液排空阀(确认泵流量为 1ml/min)，监视压力基线等待平稳后，可以进样采集分析 2.2.数据采集方法编辑数据采集方法编辑：?G1310A(单元泵单元泵)：?设置泵 左键单击泵图标，出现，点击“设置泵”或者点击“仪器”的下拉菜单中选取“设置泵”后进入泵的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.016Agilent1200 液相现场培训手册 流速-设置泵的流速，在“压力限-上限”200 时，流速设置范围为：05.00ml/min；在“压力限-上限”溶剂”中，通过独立的安捷伦 LC 诊断软件对单个溶剂进行泵校正?G1311A(四元泵)溶剂-溶剂 B、C 和 D 的百分比可以设置为 0 到 100%之间的任何值。“溶剂 A”通常输送剩余的量：100%-(%B+%C+%D)时间表-“溶剂 B/C/D”为非“关闭”状态时，“时间表”的参数“%B”、“%C”、“%D”为黑色可以编辑，否则为灰色不可编辑状态?G1313A(标准型自动进样器标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器自动控温自动进样器)：?设置进样器 左键单击自动进样器图标，出现，点击“设置进样器”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置进样器”后进入进样器的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.019Agilent1200 液相现场培训手册 标准进样-简单的进样，在“进样量”字段中制定进样量。进样量取决于自动进样器的配置设置 洗针进样-可以指定进样包括在抽取样品后，将针移动到针座之前进行针清洗，在“清洗瓶针清洗”字段中指定装有清洗溶剂的位置(瓶)使用进样器程序-可以使用当前的进样器程序，将显示当前进样器程序中的行数。选择“编辑”可以显示“进样器程序”，以进行编辑 最优化-请参看在线帮助?G1329A/B(自动控温自动进样器)保存温度-保存自动调温控制的自动进样器的温度设置?G1367B/C/D(高性能自动进样器高性能自动进样器)：设置进样器请参看 G1313A(标准型自动进样器)的配置方法，下面介绍G1367B/C/D(高性能自动进样器)参数设置不同之处?设置进样器 左键单击自动进样器图标，出现，点击“设置进样器”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置进样器”后进入进样器的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0110Agilent1200 液相现场培训手册 停止时间-一般设置为“与泵一致”即可 自动延迟体积减小-用于进样开始后将自动进样器的流路从主路自动切换到旁路。这样可以减少延迟体积。可以通过设置“辅助功能”组中“样品冲洗因子”来完成分析过程中阀切换到旁路的时间点 启用重叠进样-在完成当前进样时准备下一次进样，以提高样品通量。选择“冲洗样品后”，新的样品在前一个样品进样冲洗结束后开始抽取；选择“min 之后”，那么可以在一定时间段后开始抽取(0.0 到 100min)最小化的交叉污染-指定在重叠进样模式下抽取新样品之前阀自动切换三次(旁路-主路-旁路)洗针组-仅当在“进样”组中选择了“洗针进样”时，针清洗组中的参数才可用。选择“冲洗口”并指定以秒为单位的时间(0.0100.0s)。通过将针留在冲洗口中以使用当前流动相冲洗针 进样阀清洗-可以在重叠进样或者样品冲洗结束时切换进样阀。“设置”指定阀切换时间，具体方法请参考在线说明?自动调温器 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0111Agilent1200 液相现场培训手册左键单击自动进样器图标，出现，点击“自动调温器”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多进样器”后进入“样品自动调温器”的参数设置菜单 温控箱-打开和关闭温度控制 温度-设置温度或者关闭温度控制，限值：4.040.0 度 打开电源时-在一起打开时，选择“开启温控箱”可以开启温度控制?G1328A(手动进样器手动进样器)：?在设置“运行控制-样品信息”后，将手动进样阀扳至“load”状态进样(将样品装入到定量环内)。对于 7725i 或者 3725(i)手动进样阀，样品进样量为定量环体积的 50%以下或者满定量环进样，对于 7750(i)或者3750(i)手动进样阀，只能满定量环进样，否则进样量不准确。进样后，将手动进样器扳至“inject”状态，工作站自动开始记录采集数据。?分析完成后，将手动进样阀扳至“load”状态，用定量环的 5 倍体积左右的甲醇清洗定量环，再在“inject”状态下清洗排空管路。清洗进样口，防止残留样品污染下次进样?G1316A,G1316BXL(柱温箱柱温箱)：http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0112Agilent1200 液相现场培训手册左键单击柱温箱图标，出现，点击“设置柱温箱”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置柱温箱”后进入柱温箱的参数设置菜单 温度-控制柱温箱温度。限值：-5.0 到 80.0 度(G1316A)或者-5.0 到 100.0度(G1316B)。柱温箱只能冷却到比环境温度低 10 度的温度 与检测池相同(G1316B)-可将温度设置为与配置检测器的池温度。只有在配置了 G1315C/D DAD SL 或者 G1365C/D MWD SL 的情况下，才会启用此选项 停止时间-设置柱温箱停止分析的时间。一般设置为“与泵一致”即可?更多信息 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0113Agilent1200 液相现场培训手册 可进行分析-在任何温度下，选项可以指定是否开始分析与柱温箱温度无关；当温度在设定值之内，可以指定仅当温度位于指定的温度范围内时才开始分析?G1314A/B/D/E,G1314CXL(可变波长紫外检测器可变波长紫外检测器)：?设置可变波长紫外检测器 左键单击可变波长紫外检测器图标，出现，点击“设置 VWD 信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置 VWD 设置信号”后进入可变波长紫外检测器的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0114Agilent1200 液相现场培训手册 波长-设置 VWD 检测波长 峰宽-设置为色谱图中的预期的最窄峰。峰检测器将忽略比峰宽设置窄很多或者宽很多的所有峰 停止时间-设置 VWD 停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可 当 VWD 与其他检测器一起工作时，关闭检测器的灯，分析将停止。如果希望关闭检测器的灯时也能进行分析，请在“设置 VWD 信号-更多信息-特殊设置值(设置)”中选择“当灯关闭时也进行分析”?控制 左键单击可变波长紫外检测器图标，出现，点击“控制”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多 VWD”中选取“控制”后进入可变波长紫外检测器的控制菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0115Agilent1200 液相现场培训手册 灯-控制检测器灯的开关 开灯-选择，则在打开电源的同时也点灯。为了延长灯的寿命，建议不选此项，以便在冲洗系统或者其他不需要检测器工作的情况下节省灯的消耗?G1315B/D,G1315CXL(二极管阵列检测器二极管阵列检测器)/G1365B/D,G1365CXL(多波长紫外检测器多波长紫外检测器)：?设置二极管阵列检测器 左键单击二极管阵列检测器图标，出现，点击“设置 DAD 信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置 DAD 设置信号”后进入二极管阵列检测器的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0116Agilent1200 液相现场培训手册 信号-样品：检测到的样品吸光度所对应的波长。参比波长对应的吸光度将从样品波长对应的吸光度中扣除；带宽：样品波长的带宽。带宽决定了检测吸光度的波长范围通常小于 20nm，例如，样品波长为 254nm，样品带宽为 20nm，则从 244 到 264nm 的波长范围检测吸光度；参比：参比吸光度对应的波长。参比波长可以补偿由于基线吸光度中的变化(例如，由于梯度洗脱中溶剂组成的变化)而引起的波动；带宽：参比波长的带宽通常设定为小于 100nm。G1315A/B 二极管阵列检测器可以存储 5个信号；G1315C/D 二极管阵列检测器可以存储 8 个信号 停止时间-设置 DAD 停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可 光谱-存储：定义了在信号 A 上提取并保存光谱的点。“无”，未提取光谱；“顶点+基线”，在风的顶点和基线处提取光谱；“顶点+斜率+基线”，在峰的顶点、基线、上升斜率和下降斜率提取光谱；“峰中的全部”，提取峰内的所有光谱；“每个一条光谱”，选择“全部”，将连续提取光谱，但是只每个一条光谱存储一条光谱，其他光谱将被弃用，这样可以减少必要的数据存储量；“全部”，根据“峰宽”设置连续提取光谱。每个峰宽采集八条光谱，一条光谱的采集时间略少于峰宽除以 8，即大于或者等于 0.01s 且小于或等于 2.55s 范围-定义光谱存储的波长范围。从 190nm 到 950nm 步长-定于光谱存储的波长分离度。从 0.10nm 到 100.00nm 阈值-预期的最小峰高度。峰检测器忽略低于阈值的所有峰且不保存光谱。限值：0.001 到 1000.00mAU，步长为 0.001mAU 狭缝-设置检测器的光学带宽；狭缝越窄，仪器的光学带宽就越小，但其灵敏度也越低。光学带宽越小，光谱的分离度就越高 温度控制-G1315C/D 二极管阵列检测器的光学设备的温度控制http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0117Agilent1200 液相现场培训手册。保持光学设备在一个恒定的温度可以提高不稳定高温环境下的基线稳定性?设置多波长紫外检测器 多波长紫外检测器的设置于二极管阵列检测器相类似，但是没有“光谱”部分选项 G1365A/B 多波长紫外检测器可以存储 5 个信号；G1365C/D 多波长紫外检测器可以存储 8 个信号?G1362A(示差检测器示差检测器)：?设置示差检测器 左键单击示差检测器图标，出现，点击“设置 RID 信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置 RID 信号”后进入示差检测器的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0118Agilent1200 液相现场培训手册 光学部件温度-设置光学设备温度。限值：高出环境 5 度到 55 度之间，建议为高出环境 5 度，以提高基线稳定性 极性-设置 RID 信号的极性。由于分析物和洗脱液的特性，即使在一个运行内示差折光检测器也可以显示负峰和正峰。从“正极性”或“负极性”数据中选择需要的“信号极性”自动循环-选择在运行后是自动循环排出物(打开)还是直接将其排除到 RID 的废液口(关闭)停止时间-设置 RID 停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可 峰宽-设置为色谱图中的预期的最窄峰。峰检测器将忽略逼峰宽设置窄很多或者宽很多的所有峰?控制 左键单击示差检测器图标，出现，点击“控制”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多 RID-控制”后进入示差检测器的参数“控制”菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0119Agilent1200 液相现场培训手册 加热器-可以打开 RID 加热器，控制光学设备温度。限值：高出环境 5度到 55 度之间，建议为高出环境 5 度，以提高基线稳定性 再循环阀-“打开”可以打开排出物的循环；“关闭”，打开 RID 的废液出口 清洗参比池-“打开”，在溶剂发生变化或者参比池被污染时交换参比池的内容物 打开电源时-打开电源是即“打开加热器”?G1321A(荧光检测器荧光检测器)：?设置荧光检测器 左键单击荧光检测器图标，出现，点击“设置 FLD 信号”或者点击“仪器”的下拉菜单“设置 FLD 信号”后进入荧光检测器的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0120Agilent1200 液相现场培训手册 激发-激发波长。限值：200 到 700nm，步长 1nm。“零级”：氙气灯发出的光全部 光谱照射流通池。每种化合物可以吸收其具有特性波长的光，然后最大限度的发射荧光。这将增加该设置中固有的杂散光级别，并降低灵敏度(信噪比)发射-发射波长。限值：280 到 900nm，步长 1nm。“零级”：将单色器至于零级位置，是样品发射的所有光都被反射到检测器 点击“全部”，设置荧光多波长和光谱选项 停止时间-设置 FLD 停止分析时间。一般设置为“与泵一致”即可 时间表-“PMT”：是指光电倍增管增益。在高浓度下使用较低设置。“PMT 增益”高可以提高信号值，但 PMT 寿命短，选择“测试”按钮以获取给予噪音的倍增器增益建议值；“基线”：设置信号基线初始位置 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0121Agilent1200 液相现场培训手册 使用其他波长和使用其他发射-只等三个附加激发波长或者发射波长 采集光谱-如果选择多个激发波长或发射波长，还可以选择采集光谱。“无”：未提取光谱；“顶点”：在峰顶点采集光谱；“峰中的全部”：采集峰中的所有光谱；“全部无信号”：所有闪烁均用于光谱采集。所有已采集波长的平均值显示在通道 A 中 PMT-是指光电倍增管增益。在高浓度下使用较低设置。“PMT 增益”高可以提高信噪比，选择“测试”按钮以获取给予噪音的倍增器增益建议值?点击“特殊设定”，设置 FLD 特殊设定 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0122Agilent1200 液相现场培训手册 打开“磷光检测”模式时，将激活“延迟”和“门”两个参数 延迟-设置 FLD 开始检测之前的等待时间，在此期间内灯会闪烁。限值：0 到 5000.0us，步长为 0.01us 闸门-可以设置灯闪烁后的检测时间。限值：20.0 到 5000.0us 步长为0.01us 荧光扫描范围-荧光扫描可以收集单个任务重的发射光谱信息和激发光谱信息。适合于检测单个化合物特性或检查洗脱液的浓度。激发：波长限值：200 到 700nm，步长为 1 到 20nm，发射：波长限值：280 到 900nm，步长为 1 到 20nm。要开始荧光扫描，点 FLD 图标并选择“使用荧光扫描”，也可以在“仪器-更多 FLD”子菜单重执行 基线行为-选择当波长或 PMT 增益发生改变后基线如何变化，“添加”：可以将极限重置为先前的基线位置；“自由”将不进行调整；“零”：将基线重置为运行开始时的基线位置 拟合光谱范围-调整光谱范围，使激发波长和发射波长之间始终保持至少 25nm 的差值。这样可以确保不会由于激发波长和发射波长距离太近而检测到一级散射光 灯-“仅在运行时打开”：指定灯在运行时间内打开，并在运行结束后关闭；“节电模式”：以低频率、低电流模式运行，这样可以在损害灵敏度的情况下延长灯的寿命；如果配有多个检测器，不想将 FLD 用于下次分析，选择“灯关闭后启用分析”；“灯能量参比”：可以使用参比二极管对灯闪烁之间的强度变化进行补偿，以提高信噪比?控制 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0123Agilent1200 液相现场培训手册左键单击荧光检测器图标，出现，点击“控制”或者点击“仪器”的下拉菜单“更多 FLD-控制”后进入荧光检测器的“控制”菜单?G4218A(蒸发光散射检测器蒸发光散射检测器)：点击“仪器”的下拉菜单中选取“设置 Agilent LT-ELS”后进入 ELSD 的参数设置菜单 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0124Agilent1200 液相现场培训手册?Method Parameters Temperature-ELSD 漂移管的温度，可设置的范围为 20-100，但最低要比室温高 5 Gain-可以输入从1 到12，数值每增加1 就会使灵敏度增加2倍，Gain 值推荐使用 6 或 7 Offset-可以输入-999 到 1000mV，使得基线不同于 0mV。Sampling Time-可让您选择用于分析的色谱峰的响应时间(以毫秒/赫兹为单位)Filter-其数值是优化信噪比和峰型的，off 为未过滤，数值为 0.5 至10。?Limit check Monitor pressure value to be和Monitor temperature value to be with+/-分别是气体压力和漂移管温度满足方法开始的范围?Shutdown Turn off light source after run和Close gas valve after run可以是方法运行结束后关闭LED灯和氮气，延长灯的寿命和节省氮气 注意：我们建议方法运行后保持温度和氮气30分钟，使检测器被吹干后再关机，这样有利于仪器的维护和保养。?Stop time 可以单独设置 ELSD 的运行时间或是与泵一致?Post time http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0125Agilent1200 液相现场培训手册使下一个分析延迟开始，例如使梯度洗脱后柱子有足够的时间来平衡?Autozero Autozero before run-每次分析前自动归零?Autozero after gain change Free-当 gain 改变时，不做 Autozero Autozero-每次 gain 改变时都要做 Autozero Append-当 gain 改变时，基线保持不变?Time Table 在方法中创建一个时间表，在不同时间中执行不同的 Temp、Gain、Offset 和 Filter Insert-插入 Edit-编辑 Delete-删除 点击“仪器”的下拉菜单中选取“更多(M)Agilent LT-ELSD”-“Control”后进入 ELSD 的控制菜单。在这个界面中可以控制 LED 灯和气阀的开关，并有手动Autozero 选项 3.3.数据分析方法编辑：数据分析方法编辑：从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面从“文件”菜单中选择“调用信号”选项，选中您的数据文件名，点击确定，数据被调出?谱图优化：谱图优化：?从“图形”菜单中选择“信号选项”，如下图所示：?从“范围”中选择“全量程”或“自动量程”及合适的显示时间或选择“自定义量程”手动输入 X、Y 坐标范围进行调整，点击“确定”。反复进行，直到图的显示比例合适为止。选中化合物的名称前的空白框?选择“图形-新建标注”或者点击即可在工作站窗口右边打开图形编辑菜单，可以在色图谱中任意位置添加文字、图形等内容?选择“图形-信号选项”中选择“化合物名称”即可将命名的化合物名称添加到当前的色谱图中?积分参数优化:积分参数优化:http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0126Agilent1200 液相现场培训手册积分事件参数详细介绍，请参看“了解您的工作站”的用户手册?自动积分方法，从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“最小峰面积”，“最小峰高”。从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。点击左边图标，将积分参数存入方法，点击为不保存退出。点击进行积分，点击则由工作站自动查找适合当前谱图的积分参数积分。最后，选择“方法-保存方法/方法另存为”或者按下保存数据分析方法?手动积分方法，选择“积分-积分事件”或点击-，选择“手动积分事件”，如需更改，更改自动积分方法后，按保存并关闭“积分事件”。按删除指定峰，选择(手动积分：绘制峰基线并积分；手动积分：绘制负峰的基线并积分；手动积分：切线撇去一个峰并积分；手动积分：手动分裂已积分的峰)对峰进行手动积分。手动积分完成后，按保存(手动积分：将当前显示的图谱事件保存到相应数据文件中)。选择“积分-更新方法中的手动积分事件”，保存手动积分方法；选择“积分-应用http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0127Agilent1200 液相现场培训手册方法中的手动积分事件”，将手动积分方法应用到当前谱图中；选择“积分-删除方法中的手动积分事件”，将从当前方法中删除手动积分事件。最后，选择“方法-保存方法/方法另存为”或者按下保存数据分析方法?校正：校正：为“标准样品”建立校正曲线(工作曲线/标准曲线)注意：在色谱图正确积分后才可进行校正?设置校正设置：从“文件”菜单中选择“调用信号”选项，选中您的标样数据文件名，点击确定，数据被调出。选择“校正-校正设置”或者点击-设置校正参数 参考峰/其他峰-分钟栏留空，修改“%”以改变确认保留时间范围内的峰都被认为是参考/其他峰 含量单位-填写样品含量单位 选择缺省校正曲线方法，“确定”退出。?建立校正表：选择“校正-新建校正表”或者点击。出现“新建校正表”菜单，“确定”即可。出现“校正表”表格，在图谱中选择需要校正的色谱峰，后在表格中“化合物”中填写化合物名称，“含量”中填写色谱峰对应物质含量。右侧“校正曲线”即可实时更新校正曲线图，并标注 RSD 和相关系数。“确定”保存退出。最后，选择“方法-保存方法/方法另存为”或者按下保存数据分析方法 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0128Agilent1200 液相现场培训手册?添加校正级别：调用新的标样数据文件后，选择“校正-添加级别”或者点击，如上述方法添加新的校正级别?添加校正峰：调用新的标样数据文件选择需要添加的峰后，选择“校正-添加峰”或者点击，在“添加峰”的菜单中填写需要添加到校正表中那个级别，含量即可将峰添加到校正表中，保存方法即可 通过“添加峰”可以将不同色谱图中需要校正的峰添加到同一个校正表中，保存在同一个方法文件里?打印带校正表的报告：选择“报告-设定报告”，在“定量”中设定“外标法”，“报告格式”为“完整报告”后，打印报告即可 在“设定报告-信号选项”中选择“化合物名称”即可将命名的化合物名称添加到打印的色谱图中?打印报告:打印报告:?选择“报告-设定报告”选项，进入如下画面。点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变。选择“类型”，点击“确定”?从“报告”菜单中选择“打印，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上。则点击“报告”底部的“打印”按钮 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0129Agilent1200 液相现场培训手册?在方法菜单中，选择“运行时选项表”，确认“数据分析选项”也被选中，点击“确定”。点击“保存”按钮，存储修改的方法。此方法包含校准表，建立完毕?光谱：光谱：?G1315B/D,G1315C XL(二极管阵列检测器)查看光谱：从“文件”菜单中选择“调用信号”选项，选中您的数据文件名，点击确定，数据被调出。选择“光谱-”“选择光谱”：通过游标定位到信号中的任何位置，显示一个光谱；“选择峰顶点光谱”()：选择峰顶点强度最高的光谱；“选择平均光谱”()：得到峰中许多光谱的平均光谱；“选择峰光谱”：选择并显示峰光谱的峰组中所有光谱或者点击。选择“光谱-选择参比光谱 1/2”或点击：可以补偿流动相和基质化合物光谱吸收所带来的影响。可以选择两个参比光谱，在每个选定光谱的这些时间段内内插参考光谱 查看等吸收图：选择“光谱-等吸收线图”可以查看当前色谱图的 2D吸收等高谱图 查看 3D 图：选择“光谱-3D 图”可以查看当前色谱图的 3D 吸收全扫描图 峰纯度检查：选择“光谱-选择峰纯度”或点击后，在选择待考察峰，显示峰纯度图形报告 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0130Agilent1200 液相现场培训手册 如果峰的纯度值大于设定的纯度阈值，则色谱图中会用绿色框标记此峰，否则为红色框 查看峰的峰纯度信息：在色谱图中选中要查看峰纯度的峰，点击按钮，弹出峰的峰纯度信息。在“峰光谱”中可以查看“差异”、“比较”、“参比”等光谱图 查看选定峰的光谱图：点击按钮，可以查看选定峰的等吸收线图或者 3D 图 如何设定“光谱选项”或，请参考“了解您的工作站”用户手册 如何使用谱库搜索：建立谱库 选择“光谱-谱库-新建谱库”，保存谱库在任意文件夹(默认为：c:chem32speclibs)。填写“谱库表头”信息，后选择“光谱-保存谱库/谱库另存为”或者 添加条目 选择需要添加的色谱峰，出现此峰光谱图，选择“光谱-添加条目”或者，编辑相应物质名称等信息内容。选择“编辑波表”，打开“波表编辑器”，选择“自动”。如需要添加或者替换、删除请选择相应按钮编辑，“确定”保存退出。点击“添加”将此条目添加到库中，“确定”保存退出 管理条目 选择“光谱-谱库-管理条目”或者。http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0131Agilent1200 液相现场培训手册选择需要编辑的物质信息条目进行编辑 打开谱库 选择“光谱-谱库-打开谱库”或者打开需要的谱库 编辑检索模板 选择“光谱-谱库-编辑检索模板”或者。在“左窗口”与“右窗口”设置认定峰保留时间范围，“阈值”设置一下的峰将被忽略，“确定”保存退出 库检索 打开需要检索的色谱图数据，打开谱库。选择色谱图中需要检索的峰，选择“光谱-谱库-检索光谱”或者，将出现“光谱偏差”图和“谱库检索结果”报告。匹配度范围从 0 到 1000?G1321A(荧光检测器)在“方法和运行控制”界面，选择“仪器-更多 FLD”中“单荧光等高图”、“3D 荧光图”查看 FLD 3D 数据文件 4.4.建立全新完整方法向导建立全新完整方法向导：?新建完整方法：新建完整方法：选择“方法-新建方法”后，点击“方法-编辑完整方法”编辑新方法 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0132Agilent1200 液相现场培训手册选择“方法信息”、“仪器/采集”、“数据分析”,“数据分析”也可以在“数据采集后”后再加入方法中 写入方法注释，而后按照数据采集方法编辑与数据分析方法编辑中所述内容，根据具体的仪器配置完成下面步骤的设置。如下图所示：?设置泵参数 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0133Agilent1200 液相现场培训手册?设置自动进样器参数?设置检测器参数 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0134Agilent1200 液相现场培训手册?设置柱温箱参数?信号细节可以留空不选?设置积分方法 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0135Agilent1200 液相现场培训手册?设置报告方法?保存方法：保存方法：选择“方法-保存方法/方法另存为”?保存即时改变的方法：保存即时改变的方法：通过在线改变数据采集或者在线/离线改变数据分析参数而变更方法，可以通过选择“方法-保存方法/方法另存为”或者保存新的参数到现在的方法中或者另存为新方法?调用方法：调用方法：通过选择“方法-调用方法”或者调用已有的方法。方法一经调用便立即生效 5.5.进样：进样：?单针进样：单针进样：选择“运行控制-样品信息”。查看单针，点击 http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0136Agilent1200 液相现场培训手册 路径-选择数据文件存储路径 选择手动或者前缀/计数器-命名数据文件名 样品位置-设置样品位置，直接填写数字即可，不需要写“样品瓶”运行方法-保存样品信息并运行方法 确定-保存样品信息，后“运行控制-运行方法”?序列进样：序列进样：利用自动进样器自动批量进样。查看序列，点击?选择“序列-新建序列模板”，选择“序列-序列参数”http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0137Agilent1200 液相现场培训手册 如单针进样方法设置序列参数 在调用新方法后等待-序列进样时更改某个样品方法后平衡色谱柱时间 后序列命令/宏-在运行序列后运行命令：LAMPALL OFF关闭检测器灯；PUMPALL OFF关闭泵;STANDBY系统待机;SHUTDOWN.MAC关闭系统?选择“序列-序列表”http:/ 8008203278 AgilentChemstationVer:B.04.0138Agilent1200 液相现场培训手册 样品瓶-填写样品瓶位置，G1313A(标准型自动进样器),G1329A/B(自动控温自动进样器),G1367B/C/D(高性能自动进样器)样品名称-填写样品名称 方法名称-点击，出现下拉框，选择方法 进样次数/瓶-填写每