第十六章-DNA的生物合成.doc

姓名______________学号________________ 成绩_____________
第十六章 DNA的生物合成

一、是非题
1. DNA 复制时，引发体结合在滞后链模板上，具有识别起始位点的功能，并可沿模板链 3’→5’ 方向移动。
2. DNA 聚合酶 III 全酶具有非对称结构的双活性部位，可同时负责前导链和滞后链的复制。
3. T4DNA 连接酶不仅能连接双链中的单链缺口，还能进行 DNA 双链的平接。
4. DNA 分子是由两条链组成的，其中一条链作为前导链的模板，另一条链作为滞后链的模板。
5. 端粒酶是一种核酶。
6. DNA 连接酶和拓扑异构酶的催化都属于共价催化。
7. SSB 能降低 DNA 的 Tm。
8. 癌细胞的端粒酶活性高，而正常的分化细胞的端粒酶活性则很低。
9. DNA 的滞后链的复制是先合成许多冈崎片段，最后再将它们一起连接起来形成一条连续的链。
10. DNA 聚合酶 I 不是参与大肠杆菌 DNA 复制的主要聚合酶，因此它的任何突变不可能是致死型的突变。

二、选择题
⒈ 有关 DNA 复制的酶，下列叙述错误的是（ ）
A、 大肠杆菌 DNA 复制酶 I 的功能比聚合酶 II 及聚合酶 III 的功能齐全
B、组成大肠杆菌 DNA 聚合酶 III 核心酶的亚基有α、ε、θ，其中θ亚基有提高复制保真性的功能
C、真核生物 DNA 聚合酶有α、β、γ、δ和ε五种，其中 DNA 聚合酶γ与线粒体 DNA 复制有关
D、DNA 拓扑异构酶通过改变 DNA 的 L 值（连环数）即改变其拓扑异构结构
E、解螺旋酶的功能是解开DNA 双链
2． 关于拓扑异构酶，下列叙述错误的是（ ）
A、TopII 能使 DNA 一条链发生断裂和再连接，反应无需能量，TopI 能使 DNA 两条链同时发生断裂和再连接
B、原核生物 TopI 只能消除负超螺旋，对正超螺旋无作用，真核生物 TopI 对正负超螺旋均能作用
C、TopI 和 TopII 广泛存在于原核生物和真核生物中
D、TopII 可引如负超螺旋，消除复制叉前进时出现的扭曲张力，有利于 DNA 双链解开； E、TopI 主要同转录有关，TopII 同复制有关
3． 参与真核细胞线粒体 DNA 复制的 DNA 聚合酶是（ ）
A、DNA聚合酶α
B、DNA聚合酶β
C、DNA聚合酶γ
D、DNA聚合酶δ
E、DNA聚合酶ε
4． PCNA（分裂细胞核抗原）是真核细胞哪一种 DNA 聚合酶的辅助蛋白？（ ）
A、DNA聚合酶α
B、DNA聚合酶β
C、DNA聚合酶γ
D、DNA聚合酶δ
E、DNA聚合酶ε
5．真核细胞中与引发酶通常紧密结合在一起的 DNA 聚合酶是（ ）
A、DNA聚合酶α
B、DNA聚合酶β
C、DNA聚合酶γ
D、DNA聚合酶δ
E、DNA聚合酶ε
6．识别大肠杆菌 DNA 复制起始区的蛋白质是（ ）
A、DnaA 蛋白；B、DnaB 蛋白；C、DnaC 蛋白；D、DnaE 蛋白；E、DnaG 蛋白
7． 在一个复制叉之中，以下哪一种蛋白质的数量最多？（ ）
A、DNA 聚合酶；B、引发酶；C、SSB；D、DNA 解链酶；E、DNA 拓扑异构酶
8．参与 DNA 复制的几种酶的作用次序是（ ）
A、DNA 解链酶→引发酶→DNA 聚合酶→DNA 连接酶→切除引物的酶
B、DNA 解链酶→引发酶→DNA 聚合酶→切除引物的酶→DNA 连接酶
C、引发酶→DNA 解链酶→DNA 聚合酶→ DNA 连接酶→切除引物的酶
D、DNA 解链酶→引发酶→切除引物的酶→DNA 连接酶→DNA 聚合酶
E、DNA 聚合酶→引发酶→DNA 解链酶→DNA 连接酶→切除引物的酶；
9．将两段寡聚脱氧核苷酸片段 5’-ACCACGTAACGGA-3’和 5’-GTTAC-3’与 DNA 聚合酶一起加到含有 dATP、dGTP、dCTP、dTTP 的反应混合物之中，预测反应的终产物被渗入的各碱基的比例是（ ）
A、2C：1T；B、1G：1T；C、3G：2T；D、3G：3T：2C；E、5T：4G：3C：1A
三、填空题
⒈ DNA 复制时，碱基配对受到双重核对，是由 和 完成的。
⒉ 真核和原核生物 DNA 连接酶分别要求 和 提供能量。
⒊ 在 DNA 复制叉处，解旋酶的移动方向是 ，rep 蛋白移动方向是 。
⒋ 真核生物染色体 DNA 复制有 个起点，因此是 ，原核生物 DNA 复制有 个起点是 。
⒌ 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 是一种多功能酶，其主要功能是 、 和 。
⒍ 大肠杆菌 DNA 复制时，有解链有关的酶和蛋白质因子有 、 和 。
⒎ 大肠杆菌在DNA复制过程中切除RNA引物的酶是 ，而真核细胞DNA复制过程中切除RNA 引物的酶是 或 。
⒏ 大肠杆菌 DNA 复制的起始区被称为 ，在此区域富含 碱基对，这将有利于 过程。
⒐ 大肠杆菌中 酶和 酶的缺乏可将大肠杆菌体内冈崎片段的堆积。
⒑ 使用 酶或 酶可将大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 水解成大小两个片段，其中大片段被称为 酶，它保留 和 活性，小片段则保留 催化活性。
⒒ 参与大肠杆菌 DNA 复制的主要聚合酶是 ，该酶在复制体上组装成 二聚体，分别负责 链和 链的合成，已有证据表明滞后链的模板在复制中不断形成 结构。
四、名词解释
⒈ 复制子；⒉ 复制体；⒊ DNA 复制引发体；⒋ 冈崎片段；⒌ 半保留复制；⒍ 半不连续复制；⒎ 端粒和端粒酶
五、问答题
⒈ 简述原核生物 DNA 复制过程及在此过程中主要参与酶和蛋白质的作用。
⒉ DNA 复制的准确性是如何实现的？
⒊ 为什么到目前为止还没有发现在所有温度下都缺乏 5’→3’的外切酶活性的 DNA 聚合酶 I 的突变株？

答案
一、是非题
1.错 2.对 3.对 4.错 5.错 6.对 7.对 8.对 9.错 10.错
二、选择题
1.B 2.A 3.C 4.C 5.A 6.A 7.C 8.B 9.C
三、填空题
⒈ DNA 聚合酶的选择作用、3’→5’外切酶作用；⒉ ATP、NADH；⒊ 5’→3’、3’→
5’；⒋ 多、多复制子、1、单复制子；⒌ 5’→3’聚合作用、5’→3’外切酶、3’→5’ 外切酶；⒍ 解螺旋酶、SSB、拓扑异构酶；⒎ DNA 聚合酶 I、RNaseI、MF1；⒏ Ori、 A-T、解链；⒐ 连接酶、聚合酶 I；⒑ 胰蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、Klenow、3’→5’核酸外切酶、DNA 聚合酶、5’→3’外切酶；⒒ DNA 聚合酶 III、环（Loop）
四、名词解释
1．基因组能独立进行复制的单位，包含控制复制的起点和复制的终点。
2．在 DNA 的复制叉上，分布着各种各样与复制有关的酶和蛋白质因子构成的复合物称为复制体，随复制的进程复制体结构发生变化。
3．DnaB 六聚体在 DnaC 的帮助结合到解链区，利用水解 ATP 产生的能量进行解螺旋，同时 SSB 结合到单链 DNA 上,拓扑异构酶消除解链产生的扭曲张力，形成前引发复合体。
4．DNA 复制过程中，滞后链合成的不连续的较短片断。
5．以双链 DNA 分子的每一条链为模板，按照碱基配对的原则，合成出两个与原 DNA 分子碱基顺序完全一样的新 DNA 分子，其中每个子代分子的一条链来自亲代 DNA，另一条链则是新合成的。
6．当 DNA 复制时，一条链是连续的，另一条链是不连续的。
7．端粒：真核生物线形染色体两个末端具有的由许多成串短的重复序列组成的特殊结构，其功能为稳定染色体末端结构，防止染色体末端连接,并可补偿滞后链5’末端在消除RNA引物后造成的空缺，一条富含G，另一条富含C。
端粒酶：催化端粒 5’-末端外加重复单位，蛋白质和 RNA 的复合物，RNA 起模板作用,功能维持端粒的一定长度，实际上是一种逆转录酶。
五、问答题
1．见讲义。
2．(1)DNA 聚合酶的选择作用和 3’→5’外切酶的校对作用；
(2)复制叉的复杂结构进一步提高了复制的准确性；
(3)修复系统可以检查出错配碱基和 DNA 的各种损伤并加以修正。
3．DNA 聚合酶Ⅰ所具有的 5’→3’外切酶活性作用是在大肠杆菌 DNA 复制过程中切除
RNA 引物，当此活性丧失后，合成的 RNA 引物不能被有效的切除，造成冈崎片断的积累，新合成的 DNA 无法形成连续的链，这样的突变株是无法繁殖生存的，因此还没有发现。