Waters-e2695分离单元操作员指南.pdf

Waters e2695 分离单元分离单元操作员指南操作员指南修订版修订版 A版权所有版权所有 Waters Corporation 2008保留所有权利保留所有权利Bnew.book Page i Tuesday,September 16,2008 12:38 PMii版权声明版权声明 2008 WATERS CORPORATION。在美国和爱尔兰印刷。保留所有权利。未经出版商的书面允许，不得以任何形式转载本文档或其中的任何部分。本文档中的信息如有更改，恕不另行通知，且这些信息并不作为 Waters Corporation 的承诺。Waters Corporation 对本文档中可能出现的任何错误不负任何责任。本文档在出版时被认为是完整并且准确的。任何情况下，对与使用本文档有关或因使用本文档而导致的偶发或继发的损害，Waters Corporation 不负任何责任。商标商标Waters、Millennium 和 Alliance 是 Waters Corporation 的注册商标，Empower、LAC/E、PerformancePLUSS、SAT/IN 和“THE SCIENCE OF WHATS POSSIBLE”是 Waters Corporation 的商标。Phillips 是 Phillips Screw Company 的注册商标。PEEK 是 Victrex plc 的注册商标。Sealtight 是 Upchurch Scientific,Inc.的商标。其它注册商标或商标均为其各自所有者的专有资产。Bnew.book Page ii Tuesday,September 16,2008 12:38 PMiii客户意见或建议客户意见或建议Waters 的技术交流部门恳请您告诉我们您在该文档中所遇到的任何错误或向我们提出改进建议。请协助我们了解您最希望从文档中获得什么内容，让我们可以不断改进其准确性及可用性。我们会认真对待收到的每条客户意见。您可以通过 tech_ 与我们联系。Bnew.book Page iii Tuesday,September 16,2008 12:38 PMiv联系联系 Waters如果您就使用、运输、移除或丢弃 Waters 的任何产品有更高要求或技术问题，请联系 Waters。可以通过 Internet、电话或传统邮件联系我们。安全注意事项安全注意事项用于 Waters 仪器及设备的某些试剂和样品可能会产生化学、生物和放射性危险。必须了解您使用的所有物质的潜在危险。始终遵守“优良实验室规范”，并咨询所在组织的安全代表。安全忠告安全忠告请参阅附录 A 查看警告和注意事项综合列表。Waters 联系信息联系信息联系方式信息联系方式信息InternetWaters 的 Web 站点包括全球范围内 Waters 所在地的联系信息。请访问 ，然后单击Waters Division（Waters 分部）Regional/GlobalContacts（区域/全球联系人）。电话和传真地址 电话：[phone] 传真：[phone]在世界其它国家或地区，请致电或发传真至 Waters Web 站点上公布的号码。传统邮件上海市浦东新区张东路1387号41栋01室Bnew.book Page iv Tuesday,September 16,2008 12:38 PMv操作本设备操作本设备操作 Waters e2695 分离单元时，请遵循本节介绍的标准质量控制(QC)程序和指导原则。开发方法时，请遵照 American Journal of Medical Technology（美国医疗科技期刊）(1978)44 卷第 1 期 3037 页上的“Protocol for the Adoption of Analytical Methods in theClinical Chemistry Laboratory”。此方案包含实现系统性能和方法性能所需的完善操作步骤和方法。符号对象与目的符号对象与目的本指南的使用对象为需要对“Waters e2695 分离单元”执行安装、操作、维护和/或故障排除操作的人员。本指南规定了 Waters e2695 分离单元的开箱、安装、使用、维护和故障排除步骤。其附录中还介绍了规格、备件及溶剂注意事项。e2695 分离单元的设计用途分离单元的设计用途Waters e2695 分离单元可用于体外诊断性检验，以分析多种化合物，包括诊断指示剂和疗效监测性化合物。符号定义符号定义欧盟授权代表确认生产的产品符合所有对其适用的欧盟指令供体外诊断使用Bnew.book Page v Tuesday,September 16,2008 12:38 PMvi生物危害性生物危害性分析生理性液体时，请采取所有必要的预防措施，并将所有标本作为具有潜在传染性的样本进行处理。预防措施如 CDCNIH Manual（CDCNIH 手册）(1984)的“CDC Guidelineson Specimen Handling”（CDC 样本处理原则）所述。校正校正要校正 LC 系统，请遵照可接受的使用至少五个标准样生成标准曲线的校正方法。标准样的浓度范围必须覆盖 QC 样本、典型标本和非典型标本的全部范围。要校正质谱仪，请参阅正在校正的仪器的操作员指南的校正部分。质量控制质量控制定期运行三个 QC 样本，分别代表正常水平以下、正常水平和正常水平以上的化合物。确保QC 样本的结果在允许范围内，并在每天、每次测试时都评估其精确度。QC 样本的结果超出范围时搜集的数据可能无效。在确定仪器的运行状态令人满意之前，请勿报告这些数据。分析来自复杂基质（如土壤、组织、血清/血浆、全血及其它来源）的样品时，请注意基质组分可能对 LC/MS 结果产生不良影响、增强或抑制离子化。为将此类基质效应降至最低，Waters 建议采用以下措施：进行仪器分析之前，通过适当的样品预处理（例如蛋白质沉淀、液/液萃取(LLE)或固相萃取(SPE)）消除基质干扰。尽可能使用与基质一致的校正液和质量控制样品校验方法的准确性和精确度。使用一种或多种内标化合物，最好是同位素标记的分析物。ISM 分类：分类：ISM 第第 1 组，组，A 类类该分类已经根据 CISPR 11 工业、科学与医学（Industrial Scientific and Medical，ISM）仪器要求用于 Waters e2695 分离单元。第 1 组产生有意生成的和/或使用的传导性耦合射频频率能量，它是设备本身实现其内部功能所必须的。A 类产品适用于商业（非居住）位置，并且可以直接与低压电源网络相连。根据欧盟体外诊断设备指令 98/79/EC，Waters e2695 分离单元获得了 CE认证。Bnew.book Page vi Tuesday,September 16,2008 12:38 PMviiIVD 授权代表信息授权代表信息IVD 授权代表授权代表Waters Corporation(Micromass UK Limited)已在位于 MarketTowers,1 Nine Elms Lane,London,SW8 5NQ 的英国药物及保健产品管理局(MHRA)注册。参考号为 IVD000167。Waters Corporation(Micromass UK Ltd.)Floats RoadWythenshaweManchester M23 9LZUnited Kingdom电话：[phone]传真：[phone]联系人：质量经理Bnew.book Page vii Tuesday,September 16,2008 12:38 PMviiiBnew.book Page viii Tuesday,September 16,2008 12:38 PM目录1版权声明版权声明.ii商标商标.ii客户意见或建议客户意见或建议.iii联系联系 Waters.iv 安全注意事项.i-iv 安全忠告.iv操作本设备操作本设备.v 符号.v 对象与目的.v e2695 分离单元的设计用途.v 生物危害性.vi 校正.vi 质量控制.vi ISM 分类：ISM 第 1 组，A 类.i-viIVD 授权代表信息授权代表信息.vii IVD 授权代表.vii1 Waters e2695 分离单元介绍分离单元介绍.1-1分离单元概述分离单元概述.1-2 HPLC 系统配置.1-3 色谱功能的控制.1-3 溢出保护.1-4 记录保持功能.1-4 电源.1-4溶剂管理系统概述溶剂管理系统概述.1-4 溶剂管理系统中的流路.1-5 溶剂混合.1-5 溶剂瓶托盘.1-5 灌注/排放阀.1-6 柱塞密封清洗系统.1-6 无灌注保护.1-6 首选的柱塞单次输送体积.1-6 串联真空脱气器.1-7目录目录Bnew.book Page 1 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-2样品管理系统概述样品管理系统概述.1-8 流路.1-8 正常流动.1-8 进样.1-9 样品转盘配置.1-9 样品瓶的存在.1-9 注射器装置.1-9操作配置操作配置.1-11 System Controller（系统控制器）模式.1-11 No Interaction（无交互）模式.1-12 Remote Control（远程控制）模式.1-13选项和附件选项和附件.1-16 色谱柱加热器.1-16 色谱柱加热器/冷却器.1-16 样品加热器/冷却器.1-16 注射器.1-16 样品定量环.1-16 色谱柱选择阀.1-172 安装安装 e2695 分离单元分离单元.2-1安装概述安装概述.2-2场地要求场地要求.2-3固件和软件要求固件和软件要求.2-4开箱开箱.2-5连接电源连接电源.2-5连接管路和附件连接管路和附件.2-7 安装检测器滴盘.2-7 安装溶剂供给管路.2-8 安装脱气器排放管路.2-9 建立废液管路连接.2-9 安装针头清洗和柱塞密封清洗容器.2-10 连接色谱柱.2-11 连接色谱柱选择阀.2-12 连接检测器.2-16信号连接信号连接.2-17 I/O 信号连接.2-19 数字信号连接.2-22Bnew.book Page 2 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-3添加硬件选件添加硬件选件.2-24 安装可选的样品定量环.2-24 安装色谱柱加热器和色谱柱加热器/冷却器.2-26 安装注射器.2-263 e2695 分离单元的操作前准备分离单元的操作前准备.3-1打开分离单元的电源打开分离单元的电源.3-2 启动诊断测试.3-2 Main（主）屏幕.3-2操作概述操作概述.3-3 屏幕显示概述.3-3 使用小键盘.3-5 在参数字段中输入值.3-6配置分离单元配置分离单元.3-8 设置配置参数.3-8 配置操作模式.3-14准备溶剂管理系统准备溶剂管理系统.3-20 准备溶剂容器.3-21 对溶剂脱气.3-21 灌注柱塞密封清洗泵.3-22 灌注溶剂管理系统.3-22准备样品管理系统以供操作准备样品管理系统以供操作.3-23 清除系统.3-23 灌注针头清洗泵.3-24 调整密封包.3-25 加载样品转盘.3-26分离单元的操作准备过程分离单元的操作准备过程.3-27 准备新或干分离单元以供操作.3-27 准备空闲或已关闭电源的分离单元以供操作.3-27 将缓冲溶剂改为有机溶剂.3-28关闭分离单元的电源关闭分离单元的电源.3-28 冲洗流路.3-28 关闭电源.3-294 前面板控制前面板控制.4-1日常启动日常启动.4-2 重新初始化系统.4-2Bnew.book Page 3 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-4加载样品瓶加载样品瓶.4-2 移除样品转盘.4-2 加载样品瓶.4-3 加载样品转盘.4-3 运行期间添加新的样品瓶.4-3监视监视 HPLC 系统系统.4-4执行导引功能执行导引功能.4-8 干灌注系统.4-10 运行 System Prep（系统准备）.4-11 湿灌注系统.4-13 清除 2410 和 410 参比流动池.4-14 平衡系统.4-15 平衡色谱柱.4-15 样品进样.4-165 自动运行自动运行.5-1 System Controller（系统控制器）或 No Interaction（无交互）模式.5-2 通过 Empower 或 Millennium 软件控制.5-2 通过 MassLynx 软件控制.5-2在独立模式下执行自动运行在独立模式下执行自动运行.5-3 运行样品组.5-3 查看样品组.5-4 从样品模板执行运行.5-6 运行期间修改样品组.5-6 停止运行.5-7在在 Empower 或或 Millennium 软件控制下执行自动运行软件控制下执行自动运行.5-8在在 MassLynx 控制下执行自动运行控制下执行自动运行.5-9 使用 MassLynx 软件执行自动运行.5-96 创建方法、样品组和样品模板创建方法、样品组和样品模板.6-1 分离方法.6-2 样品组.6-2 样品模板.6-2创建和编辑分离方法创建和编辑分离方法.6-3 创建分离方法.6-5 编辑分离方法.6-6 复制和编辑分离方法.6-6 锁定和解锁分离方法.6-6Bnew.book Page 4 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-5设置分离方法参数设置分离方法参数.6-7 设置 Mobile Phase（流动相）屏幕参数值.6-7 设置样品参数值.6-13 设置自动样品器参数值.6-14 设置色谱柱参数值.6-16 设置 I/O 参数值.6-17 设置检测器参数.6-21创建和编辑样品组创建和编辑样品组.6-29 功能.6-30 链接样品组中的行.6-32创建样品模板创建样品模板.6-337 维护维护.7-1维护注意事项维护注意事项.7-2 安全和处理.7-2 正确的操作程序.7-2 重新初始化系统.7-2 备件.7-2维护溶剂管理系统维护溶剂管理系统.7-3 概述.7-3 拆卸泵头、密封清洗装置及柱塞.7-5 关于更换柱塞密封的说明.7-6 更换密封清洗装置密封.7-8 清洗和更换柱塞.7-10 更换入口止回阀阀芯.7-12 更换串联过滤器.7-13维护样品管理系统维护样品管理系统.7-15 更换下部针头清洗玻璃料.7-17 更换进样器针头及密封包.7-22 清洗样品室.7-288 诊断测试和故障排除诊断测试和故障排除.8-1 正确操作.8-2安全和处理安全和处理.8-2使用错误日志使用错误日志 .8-3执行主要诊断测试执行主要诊断测试.8-3 退出 Diagnostics（诊断）屏幕.8-4 灌注柱塞密封清洗泵.8-5Bnew.book Page 5 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-6 执行压缩检查.8-5 灌注针头清洗泵.8-7 调整密封.8-7 服务实用程序诊断测试.8-9执行其它诊断测试和功能执行其它诊断测试和功能.8-9 执行电机和阀的诊断测试.8-10 传感器诊断功能.8-13 静态渗漏测试.8-14 阀渗漏测试.8-15 泵头拆卸与更换功能.8-16 输入和输出测试.8-17 小键盘测试.8-18 显示屏测试.8-18 样品转盘测试.8-18 样品加热器/冷却器测试.8-19 样品加热器/冷却器除霜功能.8-19 色谱柱加热器或色谱柱加热器/冷却器测试.8-20 重建进样阀功能.8-21 创建 GPV 测试方法.8-21 检验固件校验和.8-21故障排除故障排除.8-22 常规故障排除提示.8-22 何时联系“Waters 技术服务”.8-23 排除色谱故障.8-23 硬件问题故障排除.8-27A 安全忠告安全忠告.A-1警告符号警告符号.A-2 特定任务的危险警告.A-2 应用于特定仪器、仪器组件和样品类型的警告.A-3注意符号注意符号.A-4应用于所有应用于所有 Waters 仪器的警告仪器的警告.A-5电气和搬运符号电气和搬运符号.A-6 电气符号.A-6 搬运符号.A-7B 规格规格.B-1物理规格物理规格.B-2Bnew.book Page 6 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-7环境规格环境规格.B-2电气规格电气规格.B-3溶剂管理规格溶剂管理规格.B-4样品管理规格样品管理规格.B-5仪器控制和通信规格仪器控制和通信规格.B-6C 备件备件.C-1溶剂管理系统备件溶剂管理系统备件.C-2样品管理系统备件样品管理系统备件.C-3分离单元备件分离单元备件.C-4样品瓶和小容量插入物样品瓶和小容量插入物.C-4D 溶剂注意事项溶剂注意事项.D-1介绍介绍.D-2 干净溶剂.D-2 溶剂质量.D-2 溶剂容器.D-2 准备清单.D-2 水.D-3 缓冲剂.D-3 四氢呋喃(THF).D-3 GPC 溶剂和密封选择.D-3溶剂兼容性溶剂兼容性.D-4 应避免使用的溶剂.D-4 要使用的溶剂.D-4溶剂混溶性溶剂混溶性.D-6 如何使用混溶性编号（M 编号）.D-8缓冲溶剂缓冲溶剂.D-8泵头高度泵头高度.D-8溶剂粘度溶剂粘度.D-8流动相溶剂脱气流动相溶剂脱气.D-9 气体溶解度.D-9 真空脱气法.D-10Bnew.book Page 7 Tuesday,September 16,2008 12:38 PMD-8波长选择波长选择.D-10 常见溶剂的 UV 截止值.D-10 混合流动相.D-11 常见溶剂的折射率.D-12索引索引.索引索引-1Bnew.book Page 8 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-11Waters e2695 分离单元介绍分离单元介绍内容主题页码内容主题页码分离单元概述1-2溶剂管理系统概述1-4样品管理系统概述1-8操作配置1-11选项和附件1-16Bnew.book Page 1 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-2Waters e2695 分离单元介绍分离单元概述分离单元概述Waters e2695 分离单元是一个集成的溶剂和样品管理平台。集成了两个传统的高效液相色谱(HPLC)组件（一个溶剂管理系统和一个样品管理系统），从而有利于执行所有重要的分离功能。Waters 的 e2695 分离单元可用于各种具有不同选项的配置。这些选项如第 1-16 页上的“选项和附件”中所述。Waters e2695 分离单元（正视图）分离单元（正视图）色谱柱加热器/冷却器模块注射器门前面板显示屏和小键盘溶剂输送盘门溶剂调整盘门样品室门检测器滴盘溶剂瓶托盘Bnew.book Page 2 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM分离单元概述1-3HPLC 系统配置系统配置为了兼容各种 HPLC 系统配置，本分离单元支持 RS-232、IEEE-488、Ethernet 和 I/O 连接。它可以按以下方式实现其功能：作为简单的独立 HPLC 系统的输入/输出和定时信号源 在包括以下仪器的 HPLC 独立系统中，作为 IEEE-488 系统控制器：Waters 2414、2410 或 410 折射率检测器Waters 2414、2410 或 410 折射率检测器，以及 Waters 2487 双波长或 Waters 486 可调吸光度检测器Waters 2487 双波长或 Waters 486 可调吸光度检测器 作为由 Empower、Millennium32 或 MassLynx 软件控制的、使用 IEEE-488 通信的HPLC 系统的一个组件 作为由 Empower 软件控制并使用以太网通信的 HPLC 系统的一个组件 作为由非 Waters 数据系统控制的、使用 RS-232 通信的 HPLC 系统的一个组件色谱功能的控制色谱功能的控制设定方法后，分离单元可以控制以下功能：溶剂成分 流量 柱塞密封清洗流量 针头清洗流量 样品进样 串联真空脱气 外部事件 IEEE-488 接口总线上的检测器的操作 色谱柱加热/冷却（如果已安装）样品加热/冷却（如果已安装）分离单元可以控制影响色谱分离的参数。可以将这些参数的值设定为随方法变化，而不用在每次运行前设置仪器。Bnew.book Page 3 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-4Waters e2695 分离单元介绍溢出保护溢出保护分离单元的所有流体处理区域均可盛装溢出液。溢出溶剂排放到位于前面板下的废液管连接器。在分离单元顶部放置检测器时，顶盖的滴盘为分离单元提供了渗漏保护。溶剂瓶托盘可存储四个 1 升的溶剂容器和一个 250 毫升的清洗溶剂容器，还为溢出液提供了 2 升的渗漏保护。记录保持功能记录保持功能分离单元自动记录以下信息：系统错误 为每次运行设定的操作条件可在连接的打印机上打印此信息，或使用 RS-232 端口将其传输到外部设备。电源电源分离单元出厂时配有一个 600 瓦(W)的电源。此电源为可选的样品加热器/冷却器提供了即时的兼容性。电源具有短路保护。它不使用外部备用保险丝，并通过关闭仪器，然后重新打开电源进行重置。溶剂管理系统概述溶剂管理系统概述溶剂管理系统混合溶剂，并通过一条无脉冲、低扩散的流路将溶剂从容器瓶输送到样品管理系统。系统包括一段连续流路、两个独立驱动的柱塞和两个止回阀，以获得最佳的液流控制。Synchronized Composition Control(SCC)根据选定的流量、组份和活塞体积确定梯度比例阀(GPV)动作频率。Bnew.book Page 4 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM溶剂管理系统概述1-5溶剂管理系统中的流路溶剂管理系统中的流路1.串联真空脱气器对溶剂进行脱气。2.梯度比例阀混合溶剂。3.混合的溶剂经入口止回阀流入主活塞室，而收集器活塞在压力下将溶剂输送到系统压力传感器。4.在收集器室排空之前，主活塞室中的溶剂被预压缩至略低于系统压力传感器指示的压力。5.收集器活塞室排空时，主活塞在压力下将溶剂输送经过主压力传感器。它将重新注入收集器活塞室，并在压力下将溶剂输送经过系统压力传感器，从而维持经过系统的恒定流量。从步骤 3 开始，重复此循环。6.系统压力传感器测量操作压力。软件比较初级泵头压力和系统压力，并调节预压缩步骤，从而平衡压力并提供顺畅、无波动的液流。7.溶剂从系统压力传感器出口流向灌注/排放阀，并流入串联过滤器。8.溶剂从串联过滤器流入样品管理系统。溶剂混合溶剂混合梯度比例阀(GPV)可将四种溶剂按任意组合与比例进行混合。它产生可预计的梯度段，与溶剂的可压缩性和系统返压无关。溶剂的选择和比例分配在溶剂输送系统的低压（吸入）一侧进行。溶剂在各活塞室中继续进行混合。溶剂瓶托盘溶剂瓶托盘溶剂瓶托盘可容纳四个 1 升的容器和一个 250 毫升的清洗容器，并可盛装 2 升溢出液。如第 1-2 页所示，溶剂瓶托盘的尺寸与分离单元顶部的滴盘顶部相适合。主活塞室灌注/排放阀系统压力传感器收集器活塞室止回阀止回阀梯度比例阀溶剂 A溶剂 B溶剂 D溶剂 C主压力传感器串联过滤器Bnew.book Page 5 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-6Waters e2695 分离单元介绍灌注灌注/排放阀排放阀灌注/排放阀在设计上可以连接注射器，并且可以通过溶剂管理系统吸取溶剂。柱塞密封清洗系统柱塞密封清洗系统密封清洗溶剂润滑柱塞，并冲洗掉从每个活塞室高压侧强行通过柱塞密封的所有溶剂或干盐。清洗密封可延长其寿命。柱塞密封清洗系统的运行方式如下柱塞密封清洗系统的运行方式如下1.柱塞密封清洗溶剂从容器流向螺线管清洗泵，然后流到初级泵头中主柱塞密封后面的腔体内。2.溶剂从泵头流入收集器泵头中柱塞密封后面的腔体内。3.溶剂从收集器泵头流入废液。溶剂管理系统输送溶剂时，柱塞密封清洗泵将根据指定的时间间歇性地循环输送清洗溶剂。无灌注保护无灌注保护因为溶剂容器排空而无法灌注，从而使得操作压力在 50 个溶剂输送循环内持续低于 172 千帕（1.7 巴，25 psi）时，分离单元将停止运行。首选的柱塞单次输送体积首选的柱塞单次输送体积分离单元的离散、可设定单次输送体积可提供最佳的液流输送和溶剂混合。但是，通过改写缺省的（预设置的）130 微升单次输送体积，可提高特定应用的性能。为此，选择 25 微升、50 微升或 100 微升的首选单次输送体积，如下表所示。对于需要进行额外混合的溶剂，如三氟乙酸 TFA 梯度溶剂，较大的单次输送体积可能更有效。与静态或动态混合不同，这种额外混合不会增加延迟体积。可选的单次输送体积流量范围（毫升可选的单次输送体积流量范围（毫升/分）单次输送体积（微升）分）单次输送体积（微升）0.050-0.530250.531-1.230501.231-3.0301003.031-5.000130Bnew.book Page 6 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM溶剂管理系统概述1-7串联真空脱气器串联真空脱气器PerformancePlus 串联真空脱气器在设计上结合了可变速、可持续运行的真空泵和内部体积较低的脱气器室。结果是从空闲状态或在溶剂变化后恢复操作时，缩短了仪器灌注和平衡时间，并将延迟降至最低。脱气器的真空泵是专门为 HPLC 流动相的薄膜脱气而设计的。持续运行的泵在高速下可迅速抽为真空，在低速下可保持真空度不变。脱气器注意事项脱气器注意事项脱气效果取决于溶剂气体的多少以及溶剂在其真空室内停留的时间长度。如果因为溶剂在真空室内停留的时间较短而使溶剂流量增加，脱气效果将下降。采用 0.000 至 5.000 毫升/分的正常分析流量，脱气器可除去大部分溶解气体。因为流量大于 5.000 毫升/分时可执行干灌注和湿灌注，因此必须在零流量下将溶剂短时间（灌注后）暴露于脱气器真空中（请参阅第4-13 页上的“平衡串联真空脱气器中的溶剂”）。真空脱气器压力传感器真空脱气器压力传感器分离单元配备有绝对压力传感器(APT)，它不会受海拔或气压变化的影响。下表列出了配有APT 的分离单元的属性。绝对压力传感器属性项目绝对压力传感器绝对压力传感器属性项目绝对压力传感器显示的单位千帕、巴、psia所显示单位的符号正理论最大真空度（以海平面的 1 个大气压为基础）0 psia操作范围（使用缺省的真空压力阈值）22.1 至 0 千帕（0.2 至 0 巴，3.2 至 0 psia）（如果压力超出范围，压力字段将显示星号(*)。）“典型”值9.7 到 13.8 千帕（0.1 到 0.14 巴，1.4 到 2.0 psia）多个真空度显示较小的数值Bnew.book Page 7 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-8Waters e2695 分离单元介绍样品管理系统概述样品管理系统概述样品管理系统可容纳和放置样品瓶，并将样品注入溶剂流。系统的五个样品转盘可容纳 24个样品瓶，总共可容纳 120 个样品瓶。样品瓶为 2 毫升的工业标准样品瓶，瓶盖为卡口盖、钳口盖或旋盖。托架将样品转盘旋转到样品室的进样站。流路流路溶剂、样品和针头清洗溶剂的流量由样品管理系统的四个阀进行控制。如下图所示，这些阀标记为 V1 至 V4。可在 Status（状态）屏幕中监视各个阀的位置。（请参阅第 4-4 页上的图“状态屏幕的第二个页面”。）样品管理系统中的流路样品管理系统中的流路样品管理系统中的流路根据执行的功能而变化。正常流动正常流动正常流动期间，V1 打开，从而允许溶剂在两个路径中流动：95%的溶剂流经 V2 主体、样品定量环压力传感器、样品定量环和针头。针头位于流体位置，溶剂流出针头端口，经密封包流出到色谱柱。5%的溶剂经限流器和密封包，流出到色谱柱。大气注射器针头清洗阀(V4)限流器废液样品瓶样品入口阀(V1)溶剂管理系统的入口废液阀(V3)注射器阀(V2)样品定量环压力传感器样品定量环密封包中的针头针头清洗出口至色谱柱的出口针头清洗容器针头清洗泵Bnew.book Page 8 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM样品管理系统概述1-9进样进样进样循环分三个连续的步骤执行：隔离样品定量环和正常液流 关闭 V1、V2 和 V3，然后打开 V4，开启针头清洗泵，针头移动到“密封”位置。然后打开 V2 和 V3 以排放样品定量环的压力，并平衡定量环和大气压。样品吸取 关闭 V3，关闭针头清洗泵，针头伸入样品瓶中。抽回注射器柱塞，将样品从样品瓶吸入样品定量环。样品不进入注射器。样品注入 关闭 V2，打开 V3，针头移至流体位置，对样品定量环加压。打开 V1，让溶剂返回正常液流。溶剂将样品推出样品定量环，经针头流出到色谱柱。注射器返回原位，将吸取的溶剂排入废液，然后关闭 V3。样品转盘配置样品转盘配置每个样品转盘以颜色和字母进行区分，并在样品转盘托架上占据一个唯一的位置。如果尝试进样时某个样品转盘位于错误的位置，分离单元将显示一条警告（请参阅第 3-8 页上的“设置配置参数”）。每个样品瓶可执行 99 次进样，可补偿样品瓶中针头的深度以获得较小的样品体积、较小的进样体积或补偿样品瓶瓶底厚度的变化（请参阅第 C-4 页上的“分离单元样品瓶和小容量插入物”）。在样品瓶中使用小体积插入时，可能也需要进行补偿。样品室的溢出液和冷凝液将引入前面板下的废液连接。可在进样时将样品转盘装入托架。装入样品转盘时，开门传感器可防止托架自动向前移动（请参阅第 3-26 页上的“加载样品转盘”）。样品瓶的存在样品瓶的存在针头移至“吸取”位置前，发光二级管装置将搜索样品瓶。如果设定的样品瓶位置没有样品瓶，此搜索可防止空气意外注入溶剂流。请参阅第 3-8 页上的“设置配置参数”中的Verify vial presence（检验样品瓶是否存在）参数。注射器装置注射器装置为了便于使用，注射器装置置于前面板门的后面（请参阅第 1-10 页）。分离单元使用标准的 250 微升注射器；作为选项，可以安装 25 微升或 2500 微升的注射器。有关更换注射器的步骤，请参阅第 7-18 页上的“更换注射器”。请注意，分离单元的序列号位于注射器安装平台上。Bnew.book Page 9 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-10Waters e2695 分离单元介绍注射器装置注射器装置?注射器序列号Bnew.book Page 10 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM操作配置1-11操作配置操作配置分离单元可以按三种通用控制模式下操作：System Controller（系统控制器）No Interaction（无交互）Remote Control（远程控制）System Controller（系统控制器）和 No Interaction（无交互）都是独立模式。System Controller（系统控制器）模式（系统控制器）模式在此独立模式下，分离单元用作 HPLC 系统控制器。在 System Controller（系统控制器）模式下，可以手动或自动执行运行。对于手动运行，通过分离单元的前面板输入参数值和选项。对于自动运行，使用分离方法、样品组和/或样品模板对分离单元进行控制。有关使用前面板控制运行的信息，请参阅第 4 章，“前面板控制”。有关创建和存储分离方法、样品组和样品模板的步骤，请参阅第 6 章，“创建方法、样品组和样品模板”。根据系统组件，可通过以下方式将分离单元连接到其它组件：用于 Waters 检测器的 IEEE-488（数字）信号连接 I/O（模拟）信号连接（硬线电缆）用于打印机或积分仪的 RS-232（数字）信号连接按照第 4 章，“前面板控制”中的步骤，以 System Controller（系统控制器）模式下控制HPLC 系统。要求：要求：在 System Controller（系统控制器）模式下，分离单元不能通过以太网通信控制其它仪器/检测器。仅当分离单元配置为远程控制时，才能使用以太网通信（请参阅第 1-13页上的“Remote Control（远程控制）模式”）。用于系统控制器操作的数字信号连接用于系统控制器操作的数字信号连接下图所示为典型的 HPLC 系统配置，其中分离单元（System Controller（系统控制器）模式）仅使用 IEEE-488 和 RS-232 数字信号连接对 HPLC 系统组件进行控制。Bnew.book Page 11 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM1-12Waters e2695 分离单元介绍HPLC 系统的数字信号控制系统的数字信号控制在 System Controller（系统控制器）模式下，分离单元可以控制 IEEE-488 总线上的三个检测器通道（两个 UV 检测器通道和一个 RI 检测器通道）。可使用以下检测器：Waters 2414、2410 或 410 示差折光检测器 Waters 2487 双波长或 486 可调吸光度检测器（最多两个通道的任意组合）在此类系统中，在分离方法的检测器表中指定检测器参数。运行期间，分离单元在指定的时间向检测器发送命令（如，更改波长或更改灵敏度）。有关设置检测器表的详细信息，请参阅第 6-21 页上的“设置检测器参数”。分离单元不处理检测器数据。检测器结果和其它系统数据将直接发送到数据采集系统、积分仪或图表记录器。除 IEEE-488 控制的检测器外，还可使用 RS-232 和 I/O 连接对其它不支持 IEEE-488 接口总线的组件进行控制。有关进行数字信号连接的详细信息，请参阅第 2-22 页上的“数字信号连接”。No Interaction（无交互）模式（无交互）模式在此独立模式下，分离单元使用其后面板上的输入/输出(I/O)连接对 HPLC 系统中的非IEEE-488 设备进行控制。此模式将从 IEEE-488 和以太网接口总线断开分离单元。请在要暂停与连接的 Empower 系统或 Millennium 工作站的通信，并从其前面板操作系统组件时使用此模式。用于用于 No Interaction（无交互）模式的输入（无交互）模式的输入/输出输出(I/O)信号连接信号连接下图显示了 HPLC 系统配置的示例，其中分离单元通过 I/O 信号连接对 HPLC 组件进行控制。e2695 分离单元Waters 2487 双波长 UV 检测器Waters 2414/2410 RI 检测器打印机IEEE-488 连接器 RS-232 电缆IEEE-488 连接器Bnew.book Page 12 Tuesday,September 16,2008 12:38 PM操作配置1-13HPLC 系统的系统的 I/O 信号控制信号控制在此类系统中，使用其前面板对每个 HPLC 组件分别进行设置。使用其后面板上的 I/O 连接器将组件连接到分离单元。运行期间，来自分离单元的 I/O 信号将触发所有 HPLC 组件中的同步事件或定时事件。分离单元不处理检测器数据。检测器结果和其它系统数据将直接发送到数据采集系统、积分仪或图表记录器。有关进行 I/O 信号连接的详细信息，请参阅第2-19 页上的“I/O 信号连接”。Remote Control（远程控制）模式（远程控制）模式在远程控制模式下，分离单元和其它 HPLC 系统组件通过以下数据系统之一进行控制：Empower 色谱数据软件 Waters Millennium 色谱管理器 用于质谱仪的 Waters MassLynx 质谱软件 非 Waters 数据系统的 RS-232 通信 外部自动样品器（例