微柱凝胶技术与凝聚胺技术对...病患儿输血前检验的价值差异_郑荣刚.pdf

128Clinical Research,Mar.2023,Vol.31 No.03作者简介：郑荣刚，男，主管技师，本科。研究方向：检验、输血。临床化验与检查微柱凝胶技术与凝聚胺技术对 ABO 新生儿溶血病患儿输血前检验的价值差异郑荣刚(南阳市中心血站 献血服务科，河南 南阳 473000)摘要：目的 探析 ABO 新生儿溶血病患儿在输血前分别进行微柱凝胶技术(MGT)、凝聚胺技术(MPT)检验的临床价值。方法 选取南阳市中心医院于 2019 年 1 月至 2021 年 2 月间收治的 40 例确诊为 ABO 新生儿溶血病患儿，将所纳入患儿的血样分为 5 份 ABO 同型红细胞制剂，同时用 MGT、MPT 技术将主侧交叉配血试验，对两种技术下所得检测数据进行比较。结果 所有患儿血清交叉配血次数为 227 次，在血清检测及放散液检测方面 MPT 技术不合格率显著低于 MGT 技术，差异有统计学意义(P 0.05)。在血清和放散液交叉配血试验中，两种检测技术的一致性差异有统计学意义(P 0.05)。结论 对收治 ABO 新生儿溶血病患儿在进行输血治疗前用 MGT 技术检验，其灵敏度及准确度均令人满意，考虑到患儿本身的免疫学及生理特征，通过不同方式联合检查完成抗原抗体排查，全面提升检验的准确性及输血治疗安全性。关键词：新生儿溶血病；微柱凝胶技术；凝聚胺技术；输血前检验中图分类号：R272.1文献标志码：B DOI：10.12385/j.issn.2096-1278(2023)03-0128-03The Difference in the Value of Microcolumn Gel Technology and Polybrene Technology in Pre-Transfusion Testing of Children with ABO Hemolytic Disease of the NewbornZHENG Ronggang(Department of Blood Donation Service,Nanyang Central Blood Bank,Nanyang Henan 473000,China)Abstract:Objective To explore the clinical value of microcolumn gel technique(MGT)and polybrene technique(MPT)tests before blood transfusion in children with ABO neonatal hemolytic disease.Methods A total of 40 children with ABO neonatal hemolytic disease admitted to Nanyang Central Hospital from January 2019 to February 2021 were selected,and the blood samples from the included children were divided into 5 ABO isotype red blood cell preparations simultaneously with MGT and MPT techniques.The primary side crossmatch test was used to compare the test data obtained under the two techniques.Results The frequency of serum cross-matching in all children was 227 times.The unqualified rate of MPT technology was significantly lower than that of MGT technology in serum detection and effusion detection,and the difference was statistically significant(P 0.05).In the cross-matching test of serum and effusion fluid,the consistency difference between the two detection techniques was statistically significant(P 0.05).Conclusion The sensitivity and accuracy of MGT technology to test the children with ABO neonatal hemolytic disease before blood transfusion treatment are satisfactory.Considering the immunological and physiologic characteristics of the children themselves,the antigen antibody screening was completed through different joint examinations,so as to comprehensively improve the accuracy of the test and the safety of blood transfusion treatment.Key Words:hemolytic disease of the newborn;microcolumn gel technique;polybrene technique;pre-transfusion test母婴妊娠结局中，因为两者血型难以吻合而产生的胎儿/新生儿合并免疫性溶血疾病是常见的不良结局，此类患儿中又以ABO新生儿溶血病所占比例相对较高1。目前对ABO新生儿溶血病主要通过输血方案进行治疗2。在 ABO 新生儿溶血患儿中，其主要血型是 A 型或者 B型，母体大多为 O 型，因此对新生儿进行常规输血治疗有极高概率会导致溶血反应恶化。为了避免输血时没有进行同型输血而导致溶血反应恶化，在输血治疗前确认其安全性是临床关注的重点，因此在对患儿输血前进行检验有重要价值。微孔板凝聚胺技术(MPT)、微柱凝胶技术(MGT)从 20 世纪末进入到国内并被应用于交叉配血检验3-4，前者因其操作要求简单且可在短时间内得到结果，受到临床的青睐，后者则是大部分技术相对先进国家使用的实验室红细胞血型血清学检测手段，具有敏感度高、检出率准确可靠的优势，同时在检验时无需太多标本5-6。本文研究目的在于探析 ABO 新生儿溶血病患儿在输血前分别进行 MGT、MPT 检验的临床价值。现将结果报道如下。1资料与方法1.1一般资料选取南阳市中心医院于 2019 年 1 月至 2021 年 2 月间收治确诊为 ABO 新生儿溶血病患儿 40 例。所有患儿均存在血清胆红素指标异常升高，合并黄疸症状，在黄疸症状得到改善后出现严重贫血，所有患儿母体血型均为 O 型，当前患儿 RhD 血型检测提示为阳性。患儿中男19 例，女 21 例；年龄 1 5d，平均(2.310.54)d；体质量 2.43 3.26kg，平均(3.070.13)kg。本研究得到院内伦理委员会通过，同时取得患者或家属知情同意。纳入标准：所有患儿确认无相关药物过敏反应；无129临床研究 2023 年 03 月第 31 卷第 03 期精神疾病家族史；无心脏疾病家族史。排除标准：临床资料缺失；合并其它严重疾病；家属明确表示拒绝配合研究。1.2检测方法所用凝聚胺试剂来自珠海贝索生物技术有限公司；所用微柱凝胶检测卡来自长春博讯生物技术公司；所用免疫微柱孵育器及卡式离心机来自 Diana 公司。所有纳入患儿在完成血液样本收集后离心 10min，转速 2000r/min，对血清和红细胞分离后用 0.9%氯化钠溶液洗涤红细胞，完成 3%细胞悬液配置，然后对所得悬液进行血清学 3 项检测。在 1mL 红细胞悬液中加入等体积 0.9%氯化钠溶液，水浴处理 7min，温度设置为56，离心 3min，转速 2000r/min，收集放散液。而后开始对血清、放散液进行微柱凝胶技术(MGT)、凝聚胺技术(MPT)主侧交叉配血处理，相关操作步骤严格按照国家规定标准。凝聚胺技术(MPT)：收集纳入研究对象患儿的血液标本及标准同型红细胞血液标本，在试管当中按照顺序放入配型红细胞悬液(1滴)、血清/红细胞放散液(2滴)、低离子介质(0.7mL)，摇晃均匀，然后加入聚凝胺溶液(2滴)，离心 10s 后将上层清液清除，摇晃试管以确认是否出现红细胞凝集的情况，如果未出现凝集现象则继续重复上述各项操作；如果出现凝集现象，则加入重悬液(2滴)，摇晃均匀，观察情况。微柱凝胶技术(MGT)：在纳入研究对象患儿的血液标本应用微柱凝胶试剂卡标记，然后放到凝胶试管当中，进行为时 5s 离心，观察情况。1.3观察指标对所纳入患儿血清学 3 项检测观察情况进行比较，分析血清交叉配血和直接抗人球蛋白试验的结果，最终直接比较两种输血前检验手段的临床价值。1.4统计学方法使用统计学软件 SPSS26.0 进行分析，计量资料使用sx 及四位分数 M(QR)表示，采用 Studentst-test进行检验，分类数据使用表示，应用 2检验进行分析，P 0.05 表示差异有统计学意义。采用 Kappa 一致性检验不同配血方式数据。2结果2.1两组血清试验检测结果比较所有纳入患儿在完成 3 项试验检测之后均符合确诊ABO 新生儿溶血病，直接抗人球蛋白试验检测有 21 例提示为阳性，血清游离抗体试验检测有 34 例提示为阳性，红细胞抗体释放试验所有患儿均提示为阳性。见表 1。表1两组血清试验检测结果比较直接抗人球蛋白试验血清游离抗体试验红细胞抗体释放试验A 型B 型结果判断+136确诊+-+11确诊+-00确诊+-00可疑-+-00可疑-+22确诊-+78确诊2.2两组交叉配血情况比较所有患儿血清交叉配血次数为 227 次，MPT 技术血清检测及放散液检测不合格率均显著低于 MGT 技术，差异有统计学意义(Kappa=0.325，P 0.05)。见表 2。表 2两组交叉配血情况比较直接抗人球蛋白试验配血次数血清 MPT血清 MGT放散液 MPT放散液 MGT+/-+/-+/-+/-+(21)18062/4619/8959/4917/91-(19)11+51/684/11538/812/1172.3两组 MGT、MPT 配血情况比较在血清和放散液交叉配血试验中，两种检测技术的一致性差异有统计学意义(Kappa=0.210，P 0.05)。见表 3、表 4。表3两组MGT、MPT配血情况比较血清 MGT血清 MPT合计+-[phone]合计15212227表4放散液MGT、MPT配血结果放散液 MGT放散液 MPT合计+-[phone]合计182092273讨论近年来，我国的 ABO 新生儿溶血病发病率呈现出明显升高趋势，该病发病机制起始于胎儿在父体方继承了不存在于母体方的抗原，而母体方抗体以胎盘为渠道进入到胎儿体内，抗体抗原两者产生对抗而诱发相关免疫反应并直接导致红细胞受损7。新生儿溶血病患儿初期会有贫血、黄疸、水肿等表现，随着病情恶化发展会出现胆红素脑病，严重威胁患儿生命。对 ABO 新生儿溶血病患儿早期准确诊断并据此展开对应治疗干预，对于保障患儿生命与健康成长有重要价值8。目前对收治 ABO 溶血病新生儿主要采取输血方案以改善病情影响，因患儿体内有母源溶血性 IgG 抗体，在进入到新生儿体内有部分被游离在血清中，有部分则和红细胞产生结合反应并直接依附在红细胞上面，在对ABO 新生儿溶血病患儿在诊断时主要采取“3 项试验”的方式，即游离血清试验、直抗球蛋白试验及抗体放散试验9，在本次研究中直接抗人球蛋白试验检测有 21 例提示为阳性，血清游离抗体试验检测有 34 例提示为阳性，红细胞抗体释放试验所有患儿均提示为阳性，确认了 3种试验方式的诊断价值，这与相关研究10-11内容相接近，对此类患者需要3种试验方式相结合以确保诊断准确性。130Clinical Research,Mar.2023,Vol.31 No.03对患儿在输血治疗前，医护人员需对其进行交叉配血试验，以确保患儿体内的溶血性抗体和供血红细胞两者之间不会存在不相容的情况，这不但会影响输血治疗的效果甚至可能引发其他严重不良反应，增加治疗难度。以往主要使用盐水法与酶法，前者灵敏度不足常有漏检情况，后者得出结果所需时间较长容易因错过治疗时机而产生不良后果12。在相关研究中，对新生儿溶血病患儿输血治疗前进行红细胞抗体释放试验，可满足临床检测需求，在交叉配血试验过程选择患儿血清、红细胞放散液作为标本，能够更好地了解患儿自身溶血性抗体与供血红细胞之间表达产生不相容的相关特征。MPT、MGT 两种试验技术都于 20 世纪末进入到实验室并逐渐应用于进行交叉配血检验。MPT 是国内相对常用的新生儿交叉配血试验手段，试验原理为将胺本身所带有的正电荷凝聚起来并和红细胞相结合，从而降低存在于红细胞表面的电荷数，诱发红细胞产生非特异性凝集，加入枸橼酸钠葡萄糖溶液以中和凝聚胺正电荷，将非特异性凝聚红细胞散开，但特异性抗原抗体凝集难以散开，方便于掌握抗原。整体而言具有操作简单，得到结果时间短等优势，但如果抗体浓度较低的情况下容易因为阴性而出现漏检。MGT 技术作为红细胞血型血清学试验手段，具有标本少、特异性突出及灵敏度高等优势，临床主要被应用于输血前的血清学检查。其检测原理在于将满足血清学检测条件的稀释液通过配置并得到符合浓度需求的凝胶，微管柱灌注，红细胞在离心力作用下通过柱子时会因为微柱当中的凝胶颗粒分子筛特性，截留存在凝聚情况的红细胞，而单个红细胞则可顺利通过，以此明确各个凝集的反应状态。MGT 能够直接观察，无需借助相关器械辅助，在检验过程中将稀释液配置成为凝胶开始进行微管灌注，离心操作以刺激微柱当中凝胶颗粒的分子筛，将凝集的红细胞保留起来，沉淀在凝胶底部的判定为阴性，而分散于凝胶上层或者中段区域的为阳性，此外该试验方式还能够重复使用，稳定性良好，但需要注意的是整体操作所需时间较长，对于急性患儿群体并不适用，且不能识别存在于红细胞上面的不完全抗体，相对于凝聚胺技术，微柱凝胶技术的准确性明显更高。本次研究中对纳入收治的 40 例患儿进行血清交叉配血，MPT 技术在血清检测及放散液检测的不合格率均显著高于 MGT 检测方式，其中血清 MPT 检测共有 113次不合格，而放散液 MPT 检测共有 97 次不合格，血清MGT 检测不合格次数有 23 次，放散液 MGT 检测不合格次数有 19 次，差异有统计学意义(P 0.05)，这与相关研究13-15内容数据相符合。相关研究16-20对 MGT 和MPT 两者的检测结果进行一致性检验，发现两种交叉配血方式不具备良好的一致性。综上所述，对收治 ABO 新生儿溶血病患儿在进行输血治疗前用 MGT 技术检验其灵敏度及准确度均令人满意，但该技术临床还存在一定的局限性，诸如检查所需时间相对较长，如果患者属于急诊配血的则难以应用，且对于红细胞当中的不完全抗体也难以有效检测，因此不能够直接取缔 MPT 检测技术，两种方式应该合理选择并应用。在输血检验之前可以适当增加直接抗人球蛋白试验辅助，考虑到患儿本身的免疫学及生理特征，灵活选择检测方式以达到互补的效果，通过不同方式联合检查完成抗原抗体排查，全面提升检验的准确性及输血治疗安全性。参考文献：1王丽.微柱凝胶技术与凝聚胺技术在ABO新生儿溶血病输血前检测中的阳性检出率比较J.中国民康医学,2021,33(4):111-112.2郭玉红.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用J.健康必读,2021(18):203-204.3康利宝,霍彩虹.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用效果观察J.贵州医药,2021,45(2):292-293.4柯美玲.微柱凝胶技术对ABO新生儿溶血病输血的影响J.中国卫生标准管理,2021,12(11):115-118.5孙伟杰,初慧,王依彩.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用分析J.中国实用医药,2020,15(24):145-147.6钱姣,高秦盈,程淑凤,等.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用价值J.临床医学研究与实践,2020,5(34):130-131,134.7潘柳燕.分析微柱凝胶技术(MGT)在ABO新生儿溶血病(HDN)患儿输血检验中的应用效果J.家有孕宝,2021,3(2):27.8朱莉,田静,武慧慧,等.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用价值J.大医生,2021,6(7):1-3.9杨鑫,甘新宇,黎欢,等.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用分析重点探寻J.饮食保健,2021(33):262-263.10张士跃.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用分析J.检验医学与临床,2020,17(1):126-128.11李冰雪,刘思岐.微柱凝胶技术在ABO血型不合新生儿溶血病诊断及输血前检验中的应用J.河南医学研究,2020,29(31):5913-5915.12陈建萍,李琼芳,董伟群.ABO系统新生儿溶血病患儿采用凝聚胺技术与MGT在交叉配血中的检验价值J.人人健康,2021(5):72-73.13杨东昌.微柱凝胶技术应用于ABO新生儿溶血病患儿输血前检验的临床价值J.中国实用医刊,2021,48(5):69-72.14陈大勇.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病输血检测中的应用研究J.中国医疗器械信息,2020,26(22):14-16.15严云青,王志良.微柱凝胶技术用于ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用价值J.康颐,2021(19):171-172.16万虹,刘娟,黄灿.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用效果J.养生保健指南,2020(46):43.17徐晓玲,殷明刚,刘智勇.ABO-HDN患儿输血前采用微柱凝胶技术检验的临床价值J.首都食品与医药,2021,28(24):95-97.18陈建萍,李琼芳.MGT法对新生儿ABO溶血病输血前交叉配血时间的影响J.医学理论与实践,2019,32(23):3886-3887.19汪雁.MGT法对新生儿ABO溶血病输血前交叉配血时间的影响J.特别健康,2020(17):140-141.20周朝霞,杨小红.不同抗体效价检测方法评估新生儿溶血病及其参考值的确认J.湖南师范大学学报(医学版),2019,16(4):37-39.