1、出口食品厂卫生细菌检验方法(一) 工器具(包括工作台)细菌污染情况的检验检验项目:A大肠菌群1.培养基:去氧胆酸盐琼脂2.检验方法(1) 取样在100cm2或50 cm2的工器具面积上(冬天取100cm2,夏天取50 cm2),用消毒棉签沾无菌蒸馏水擦拭,然后放入无菌生理盐水中(100cm2的工器具面积放入100ml 的生理盐水中,50 cm2的工器具面积放入50ml 的生理盐水中)充分振摇制成原液(1:1)(2) 接种与培养用无菌吸管分别吸上述原液1ML注入灭菌平皿中,做两个平皿,倒入冷至45左右的培养基约15ML,摇匀凝固后再上层倒入3-5ml培养基旋转平板,复盖于表面37培养18小时,控
2、制菌落密度在每个平皿10个左右阳性率最正确,如果菌落密度大,可以将原液稀释10倍100倍(3) 结果报告:平板上出现的大肠菌群呈深红色,菌落直径大于0.5mm,周围可能有雾状胆盐沉淀,菌落形态有的边缘整齐,呈圆形,扁平,有的边缘不齐,表面 凸起或呈波形,且为玫瑰红色,这是检验为阳性,每平方厘米大肠菌群=测的菌落数*稀释倍数,每1平方厘米大肠菌群不到一个的,可化为每平方米上的个数(二)-操作者手的检验 方法同工器具的检验,用灭菌的棉签揩拭手掌面(手背面不取)将棉签放入已准备好的灭菌生理盐水中,振挡摇匀,吸入平皿中每皿1ml,作两个平皿,37培养18小时,取出计数,计算单位以一只手掌面的大肠菌群个
3、数为报告结果。B.金黄色葡萄球菌1.培养基 (1)生理盐水(2)10Nacl肉汤(3)B-P培养基(4)兔血浆2.检验方法:(1)取样:在100cm2或50 cm2的工器具面积上(冬天取100cm2,夏天取50 cm2),用消毒棉签沾无菌蒸馏水擦拭,然后放入无菌生理盐水中(100cm2的工器具面积放入100ml 的生理盐水中,50 cm2的工器具面积放入50ml 的生理盐水中充分振摇制成原液(1:1)(2)接种与培养 1) 将上述制成的原液取1ml放入灭菌平皿后,倾注15-20ml的BP培养基,361培养 ,462小时2) 或是吸取0.1ml,用L棒涂布于表面干燥的BP琼脂平板,361培养 ,
4、462小时3) 从平板上至少挑取1个可疑的金黄色葡萄球菌的菌落作血浆凝固酶实验(3)报告结果定性报告 如BP琼脂平板的可疑菌落做血浆凝固酶实验为阳性,即报告100 cm2或50 cm2的工器具上金黄色葡萄球菌存在C.细菌总数1.培养基:平板计数琼脂2.检验方法:(1) 取样:同大肠菌群的取样方法(2) 接种与培养:用无菌吸管分别吸上述原液1ML注入灭菌平皿中,做两个平皿,倒入冷至45左右的培养基约15ML,摇匀凝固后,37培养18小时,控制菌落密度在每个平皿10-250个为好,如果菌落密度大,可以将原液稀释10倍100倍(3) 报告结果每平方厘米细菌总数=测的菌落数*稀释倍数,每1平方厘米细菌总数不到一个的,可化为每平方米上的个数,(二) 空气中杂菌数的测定(沉降法)1. 培养基:普通营养琼脂2. 操作方法:将培养基冷至45,倾注入平皿,每皿约15ml,361培养 24小时,检查有无杂菌生长,即无菌的平皿,在车间的前后,左右,中九个点各放置一个平皿,并打开盖暴露5分钟即放在361培养 24小时,计算菌落数3. 计算:每立方米细菌数=50000N/AT式中A-所用平皿面积cm2T-平皿暴露于空气中的时间(分)N-培养后,平皿上的菌落数(三)包装物料细菌总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌的检验方法同上,但是其取样面积都是100cm2。 2005.4.20