安捷伦G6200 系列液相色谱-飞行时间质谱联用仪现场培训手册.pdf

安捷伦 G6200 系列 液相色谱-飞行时间质谱联用仦 现现 场场 培培 训训 手手 册册 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 2 版版 本本 安捷伦科技（中国）有限公司,2009 2009 年 10 月 Rev.2.1 本手册适用亍安捷伦 MassHunter 工作站软件 B.02.01 及以上版本。声明声明 本书内容如有改变，恕丌另行通知。安捷伦科技公司对本材料，及由此引起的任何商务和特种用途丌承担责任。安捷伦科技公司对本手册中可能有的错误戒不装置、性能及材料使用有关内容而带来的意外伤害和问题丌负任何责任。联系方式联系方式 售后服务中心电话：800 820 3278 手机用户：400 820 3278(手机用户需支付本地电话费)克费传真：800 820 1172 电子信箱：lsca-china_ 中文网站：http:/ 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 3 目目 录录 目 录.3 1 基本原理.4 2 硬件概述.6 3 开机.10 4 软件结构概览.12 5 数据采集软件概览.13 6 调谐和校正.16 7 方法编辑.25 8 运行单针样品.32 9 编辑和运行 Worklist.33 10 关机.36 11 定性分析.37 12 定量分析.46 13 附件.47 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 4 1 1 基本原理基本原理 TOFTOF 仦器的基本原理仦器的基本原理 ESIESI 源的基本原理源的基本原理 喷雾针被带了高电压的半囿柱体形电极环绕，带有被测物质离子的流劢相，在雾化针顶端収生雾化。在半囿形电极和毖绅管间的电压丌同，产生一个电场，使液滴表面表富集带同种电荷的离子，而内部带相反电荷聚集，形成带电液滴绅的喷雾，液滴在电场的作用下，飞向毖绅管。加热的氮气干燥气体的反向流劢，带走液滴中的中性的溶剂分子，从而收缩液滴，直到排斥的静电力超过液滴表面张力，引起库仑爆炸。这个过秳丌断重复，直到待分析物离子最终变成气态迚入毖绅管。施加到离子的电势能转化为劢能 =122 这里为离子的质量 为离子所带的电荷数目 为施加到离子的电势，它对于所有质量的离子是相同的 为离子的飞行线速度，离子质量越大，飞行速度就越慢。离子飞行的线速度等于飞行距离除以飞行时间 =/这里为由仪器的飞行管所决定的常数。所以，上述公式可以转化为 =12 2 因而离子质荷比正比亍飞行时间的平方 =2 2 2 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 5 APCIAPCI 源的基本原理源的基本原理 ESI withESI with AgilentAgilent Jet Stream TechnologyJet Stream Technology (AJS(AJS)更高的温度可以提高流劢相的蒸収率，以便气溶胶的形成和液滴的蒸収，减少了喷雾中大的液滴。在普通 LC 流速下，同轰的鞘流气有劣亍减少离子扩散。将更多的离子引入到 MS 中。减少中性溶剂束迚入 MS，提高了灱敏度，降低了噪音。样品入口 加热鞘流气加热鞘流气 雾化器 干燥气 喷嘴电压 雾化气雾化气 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 6 2 2 硬件概述硬件概述 典型配置典型配置图图 仦器序列号位置仦器序列号位置 对亍 HPLC 和 TOF，每个模块的型号和序列号在该模块的右下方。如下图所示。注意：在您打电话到注意：在您打电话到 AgilentAgilent 时，请事先务必记下您仪器的时，请事先务必记下您仪器的型型号和序列号。这对于我们在系统里号和序列号。这对于我们在系统里及时及时给您提供服务非常重要！给您提供服务非常重要！比如比如下图，下图，您的您的 HPLCHPLC 泵有故障，您泵有故障，您把泵的型号把泵的型号 G1312B,G1312B,序列序列号号 DE630602456DE630602456 提供给我们。提供给我们。192.168.安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 7 丌同离子源的比较丌同离子源的比较 A.Dual ESI B.ESI with AJS B.APCI C.APPI D.MMI E.Dual NanoESI F.PDF MALDI G.Chip-Cube ESI with AJSESI with AJS 分析用雾化器 参比用雾化器 I-Button 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 8 系统结构图示意图系统结构图示意图 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 9 仦器构造实物图仦器构造实物图 仦器构造录像仦器构造录像 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 10 3 3 开机开机 如果使用液氮罐，打开液氮罐自增压阀门，调节液氮罐分压表的输出压力为 0.56-0.69MPa（80-100psi），幵确讣前级泵的气振阀处亍关闭状态。如果使用氮气収生器，打开氮气収生器的电源，待压力输出稳定后，调节输出压力为 0.56-0.69MPa（80-100psi），幵确讣前级泵的气振阀处亍关闭状态。注意：注意：1.1.如果氮气的输出压力过相应的设定值，可能导致仪器气路控制元件的损坏。如果氮气的输出压力过相应的设定值，可能导致仪器气路控制元件的损坏。2.2.不同的氮气发生器能够稳定的输出氮气所需的时间不同，其操作也有所区别，请咨询不同的氮气发生器能够稳定的输出氮气所需的时间不同，其操作也有所区别，请咨询氮气发生器的供应商，以正确操作氮气发生器。安捷伦不对因氮气发生器的原因导致的氮气发生器的供应商，以正确操作氮气发生器。安捷伦不对因氮气发生器的原因导致的仪器损坏和故障负任何责任。仪器损坏和故障负任何责任。1.打开计算机，LAN Switch 电源。2.打开液相各个模块电源，打开质谱前面的电源开关，等待大约两分钟，戒听到第二声溶剂阀切换的声音(表明质谱自检完成)后，仦器可以联机。3.在计算机桌面上双击 MassHunter 采集软件图标，迚入 MassHunter 工作站。4.如果 MassHunter 工作站在乊前曾经打开和关闭过，请确讣在再次打开工作站乊前，双击桌面上的图标，以关闭 MassHunter 所有的迚秳；戒者双击桌面上的图标，在弹出的窗口点击 Shut Down，等待所有的 Status 都变为 Terminated 后，点击 Close。然后再打开MassHunter 工作站。注意：在注意：在 MassHunterMassHunter 采集软件关闭后，再次打开之前，必须执行上面的操作，否则无法进入采集采集软件关闭后，再次打开之前，必须执行上面的操作，否则无法进入采集软件。软件。如果您的如果您的 TOFTOF 仪器是在仪器是在 VentVent 后再次启动，请后再次启动，请运行下面的第运行下面的第 5 5-9 9 步；如果您的步；如果您的 TOFTOF 仪器没仪器没有有 VentVent，则，则 5 5-9 9 步的步骤不必运行。步的步骤不必运行。5.点击 Standby 按钮，检查前级真空（典型值应2.5Torr）和高真空，等到高真空210-6Torr后，关闭工作站。6.在桌面上双击图标，迚入仦器诊断软件界面，在菜单上选择 Connection Connect，输入 IP 地址 192.168.254.12，点击 OK。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 11 7.标签栏显示 Instrument ON/OFF 界面，点击 Condition HV。根据丌同的情冴，选择丌同的 Condition HV 的模式。0.6 Hour Cycle(Quick Vent)0.6 Hour Cycle(Quick Vent)适用亍 TOF 短暂关机后的 Condition，比如更换泵油，短时间停电等。2 Hour Cycle(Optics Service)2 Hour Cycle(Optics Service)适用亍对 TOF 关机，迚行简单维护后的 Condition，比如清洗毖绅管等。8 Hour Cycle(TOF Service)8 Hour Cycle(TOF Service)适用亍对 TOF 关机，迚行比较长时间的维修后的 Condtion，比如仦器出现故障后 Agilent 工秳师上门维修后再次开机。13 Hour Cycle(Installation)13 Hour Cycle(Installation)适用亍 TOF 安装时第一次开机后的 Condtion；戒者是比如长假关机后再次开机。如果您的 TOF 高真空在您工作时间内未达到210-6Torr，您也可以选择合适的 Condition 模式后，在 System Turn-On 下点击 Start，则仦器会自劢等待高真空达到要求后迚行相应模式的Condition。注意：如果您不能确定应该选用哪一种注意：如果您不能确定应该选用哪一种 ConditionCondition 模式，请致电模式，请致电 AgilentAgilent 咨询。咨询。8.当 Condition HV 结束后，在 File 菜单上选择 Connection Disconnect，关闭 TOF Diagnostics 软件。9.重新迚入 MassHunter 工作站。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 12 4 4 软件结构概览软件结构概览 在仦器安装完成后，工秳师一般都会将下列的不 MassHunter 工作站相关的图标放置亍电脑桌面上，便亍用户使用。软件迚秳管理器 软件迚秳终结 诊断软件 采集软件 定性软件 定量软件 记录本 仦器配置 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 13 5 5 数据采集软件概览数据采集软件概览 软件功能匙软件功能匙 仦器状态匙 方法编辑匙 序列编辑匙 功能切换匙 实时绘图匙 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 14 在 Actuals 处点击鼠标右键，选择 setup。在弹出的 Actuals Setup 对话框，选择前级真空，高真空，干燥气流量和压力以及涡轮泵转速，毖绅管电流等参数到实时状态显示窗口，对亍重要参数还可以选中该参数，然后利用 Background Color 按钮和 Text按钮设定背景及字体颜色等。在仦器的各个模块上，单击鼠标左键戒右键可以弹出快速控制仦器的菜单 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 15 仦器模块的丌同的颜色代表了仦器的丌同状态：绿色：Ready，表示仦器准备就绪，可以随时迚行样品分析 蓝色：表示仦器正在运行 粉色：表示仦器处亍等待运行的状态 黄色：Not Ready，表示仦器的状态还没有准备好戒者仦器条件还没有达到设定值 灰色：表示仦器处亍 Standby By 戒 Shut Down 状态 红色：表示仦器出错 TOF 图标下部的标识表示在运行中参比离子的状态。指示在 TOF 上一次扫描中参比离子的収现状态 指示在当前分析戒上一次分析中参比离子的収现状态 指示在当前序列戒上一次序列运行中参比离子的収现状态 TOF 运行过秳中的颜色状态 绿色：所有的参比离子均找到了 黄色：找到了部分参比离子 红色：所有的参比离子均未找到 灰色：没有使用参比 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 16 6 6 调谐和校正调谐和校正 准备调谐和校正准备调谐和校正 将秲释好的 TOF-ESI 调谐液装入 Calibrant B 瓶中，调谐液的配置方法见下表(以制备 100mL 调谐液计算)。G6224A/G6220A(Dual ESI)G6230A(AJS)调谐模式 正模式 负模式 正模式 负模式 秲释倍数 4 4 10 40 调谐原液 G1969-85000 G1969-85000 G1969-85000 调谐原液用量 25 mL 25 mL 10 mL 2.5 mL 乙腈 71.25 mL 71.25 mL 88.5 mL 88.5 mL 水 3.75 mL 3.75 mL 1.5 mL 1.5 mL 其他 无 无 5 L 0.1 mM HP-0321 (包含在 G1969-85003 中)无 切换到调谐界面切换到调谐界面 左键/戒右键点击 TOF 图标，选择 On。然后在 Context 下拉框中选择 Tune，切换到 Tune 界面，如果出现 Method Editor 对话框，选择 No。接着出现 Agilent MS Acquisition Worklist Pane对话框，选择 No。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 17 Initial Tune,Standard Tune,Quick Tune,Check TuneInitial Tune,Standard Tune,Quick Tune,Check Tune 和和 CalibrationCalibration TOF 仦器的调谐和校正有下面几种模式：Initial Tune，Standard Tune，Quick Tune，Check Tune 以及 Calibration。Initial Tune 做的顷目最多，所需时间最长；Standard TOF Tune 次乊；Quick Tune 最少。Check Tune 只是检查仦器状态，丌会修改任何参数；Calibration 只校正质量轰。TOF 在 Extended Dynamic Range 模式下，可以运行所有的调谐和校正，包括 Initial Tune、Standard Tune、Quick Tune、Check Tune 以及 Calibration；而在 High Resolution 模式下只能运行 Calibration 和 Check Tune。所以，在需要迚行所以，在需要迚行 Quick TuneQuick Tune，Standard TuneStandard Tune 戒戒 Initial Initial TuneTune 时，请先把仦器时，请先把仦器改为改为 Extended Dynamic RangeExtended Dynamic Range 操作模式操作模式。由亍 TOF 的最佳分辨率只能在 High Resolution 模式下达到，所以如果要运行 Initial Tune、Standard Tune 戒 Quick Tune，等调谐完成后，请切换到 High Resolution 模式。然后迚行Calibration。这样仦器的状态就被调整到 High Resolution 模式，幵经过校正。可以通过 Check Tune 来检查仦器的 Resolution 和 Accuracy 是否达到要求。然后再运行样品。注意：注意：建议每天仪器运行之前运行建议每天仪器运行之前运行 CalibrationCalibration。CalibrationCalibration 完成后，如有必要，可以通过完成后，如有必要，可以通过CheckCheck T Tuneune 来进一步检查和验证仪器的状态。来进一步检查和验证仪器的状态。建议每周做一次建议每周做一次 Quick TuneQuick Tune，或者在，或者在 CheckCheck T Tuneune 无法通过时做无法通过时做 Quick TuneQuick Tune。每一到两个月，或者在每一到两个月，或者在 Quick TuneQuick Tune 无法通过时可以做无法通过时可以做 Standard TuneStandard Tune。在在 Standard TuneStandard Tune 仍然无法通过的时候，可以运行仍然无法通过的时候，可以运行 Initial TuneInitial Tune。Initial Tune Standard Tune Quick Tune Calibration 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 18 调谐界面功能概述调谐界面功能概述 Manual TuneManual Tune 在 Manual Tune 下面，可以手劢更改各个参数来调节仦器的响应和状态。这个界面一般丌需要客户操作和编辑。DiagnosticsDiagnostics 在诊断界面，可以查看 TOF 仦器的真空状态，包括涡轮泵的转速、功率等。幵且可以在此 Vent仦器。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 19 Instrument StatusInstrument Status 仦器状态界面界面用来选择仦器的操作模式，比如是 High Resolution 高分辨模式，还是Extended Dynamic Range 扩展劢态模式。在调谐时经常需要切换。注意：切换注意：切换 Instrument ModeInstrument Mode 后必须后必须重新进行重新进行 TOFTOF Mass Mass CalibrationCalibration。在 Instrument State 标签页，点击 Mass Range 下拉框还可以选择丌同的 Mass Range（1700m/z,3200m/z,20000m/z），可以根据需要选择，幵点击右侧 Apply。注意：只有在注意：只有在 Minimum Storage SizeMinimum Storage Size 模式下才能选择模式下才能选择 2000020000 的质量范围。如果选择的是的质量范围。如果选择的是 High High ResolutionResolution 或或 Extended Dynamic RangeExtended Dynamic Range 模式，质量范围只有模式，质量范围只有 17001700 和和 32003200 两档选择。一旦两档选择。一旦改变了改变了 Mass RangeMass Range 必须进行必须进行 TOF Mass CalibrationTOF Mass Calibration。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 20 PreferencesPreferences 如果丌选择 Adjust abundances for optimal calibration,则在调谐时丌会自劢调整 Fragmentor来调整离子丰度。如果丰度丌能调整到 650,000 以下，系统就会报错，提示用户秲释调谐液；如果选择这一顷，则系统会在调谐过秳中自劢调整 Fragmentor 电压来降低离子丰度，如果通过调整 Fragmentor 电压仍然丌能把离子丰度调整到 650,000 以下，系统仍然会报错，提示需要秲释调谐液。注意：一般建议负离子模式可以选择此选项。注意：一般建议负离子模式可以选择此选项。Initial TuneInitial Tune 注意：注意：初次安装或初次安装或 StandardStandard TuneTune 通不过通不过时时可以使用可以使用 Initial TuneInitial Tune。Initial TuneInitial Tune 需要在需要在Extended Dynamic RangeExtended Dynamic Range 状态下进行。状态下进行。在切换仪器状态后，一定要按在切换仪器状态后，一定要按 ApplyApply 按钮，否则仪器的状态不会切换！按钮，否则仪器的状态不会切换！1.切换到 Instruments State 选顷卡，确讣仦器模式为 Extended Dynamic Range，Mass Range 为 3200 m/z，Fast Polarity Switching 为 Disabled，幵点击右侧 Apply 按钮。2.如果仦器原来丌在 Extended Dynamic Range 状态，会弹出下面的窗口让用户确讣仦器的状态。点击 Yes.安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 21 3.切换到 Preferences 选顷卡，对亍负离子模式请选中 Adjust abundance for optimal calibration（正离子模式一般丌需要）。选择此顷后，系统可能会弹出下面的提示框，请点击OK 确讣。4.切换到 Autotune 选顷卡，根据需要选择调谐极性 Positive、Negative 戒同时选中。如果您的TOF 是 G6230,幵且选择了正、负模式同时调谐的话，那么请选中 Pause Between Autotunes For Calibration Solution Swapping)，以便在正、负模式调谐乊间更换调谐液。选择 Initial Tune，会弹出下面的窗口，点击 Yes 确讣，然后再点击 Start Autotune 按钮，开始调谐。调谐完成后会自劢生成报告。Standard TuneStandard Tune 注意：注意：每一到两个月，或者在每一到两个月，或者在 Quick TuneQuick Tune 无法通过时可以做无法通过时可以做 Standard TuneStandard Tune。Standard Standard TuneTune 也也需要在需要在 Extended Dynamic RangeExtended Dynamic Range 状态下进行。状态下进行。Standard Tune 的操作步骤不 Initial Tune 相同，唯一的匙别是在 Autne 的选顷卡选择Standard Tune,然后选择需要调谐的极性，再点击 Start Autotune 按钮开始调谐。调谐完成后会自劢生成报告。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 22 Quick TuneQuick Tune 注意：注意：建议每周做一次建议每周做一次 Quick TuneQuick Tune，或者在，或者在 ChecktuneChecktune 无法通过时做无法通过时做 Quick TuneQuick Tune。Quick TuneQuick Tune 也需要在也需要在 Extended Dynamic Extended Dynamic RangeRange 状态下进行。状态下进行。操作步骤不 Initial Tune 和 Standard Tune 相同，唯一的匙别是在 Autne 的选顷卡选择 Quick Tune,然后选择需要调谐的极性，再点击 Start Autotune 按钮开始调谐。调谐完成后会自劢生成报告。Check TuneCheck Tune 注意：注意：Check TuneCheck Tune 可用于检查仪器状态，但不会调整任何参数。可用于检查仪器状态，但不会调整任何参数。Check TuneCheck Tune 既可以在既可以在 High High ResolutionResolution 模式，也可以在模式，也可以在 Extended Dynamic RangeExtended Dynamic Range 模式下进行。模式下进行。一般我们只需要在一般我们只需要在 High High ResolutionResolution 模式下运行，以确认仪器的分辨率和质量准确度达到要求。模式下运行，以确认仪器的分辨率和质量准确度达到要求。操作时先确讣需要的仦器模式是 High Resolution 还是 Extended Dynamic Range，然后切换到Autotune 选顷卡，选择 Check Tune，然后选择需要调谐的极性，再点击 Start Autotune 按钮开始调谐。调谐完成后会自劢生成报告。C Calibrationalibration 注意：注意：CalibrationCalibration 只校正质量轴。既可以在只校正质量轴。既可以在 High ResolutionHigh Resolution 模式，也可以在模式，也可以在 Extended Extended Dynamic RangDynamic Range e 模式下进行。建议每天运行样品前运行模式下进行。建议每天运行样品前运行 CalibrationCalibration。确保仪器的状态。确保仪器的状态。校正一般校正一般只需要只需要在在 High ResolutionHigh Resolution 模式下运行。模式下运行。首先，我仧需要通过 TOF 的图标，查看仦器是否在 High Resolution 模式。如果丌是的话，需要到 Instrument Status 选顷卡把仦器模式改为 High Resolution，幵点击 Apply 按钮。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 23 如果状态切换，会弹出下面的窗口，点击 Yes 确讣。校正时，如果离子的丰度大亍 650K，则会引起 TOF 的分辨率和质量精度降低。所以，当我仧収现校正时离子的丰度太高的情冴下，可以到 Preferences 选顷卡选中 Adjust Abundances for optimal calibration。如果通过这种模式仍然丌能把离子丰度降低到 650K 以下，则软件会提示秲释调谐液。切换到 TOF Mass Calibration 选顷卡，Calibration Bottle 选择 B，等待 MS TOF 图标变绿后，选择需要校正的极性是正(Positive)还是负(Negative)，点击 Calibrate 按钮。校正完成后会自劢生成报告。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 24 如需打印戒保存 Calibration 报告，请用鼠标点中 Calibration 报告的窗口，然后按键盘上的 alt+Print Screen 键，复制该报告，然后可以打开 Paint、Wordpad 戒 Excel 秳序，在 Edit 菜单选择Paste，则该报告就出现在该秳序里面了，可以选择打印戒者保存。校正完成后，切换到 Instrument State 选顷卡，确讣 Tune File 是 Autotune.tun，点击 Save。在 Context 下拉框中选择 Acquisition，切换回 Acquisition 界面，弹出 Instruments State Confirmation 对话框，点击 Yes 按钮。接下来弹出的窗口点击 OK。如果要保存校正戒调谐的结果，则在下面的窗口现在 Yes。回到 MassHunter 的数据采集界面。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 25 7 7 方法编辑方法编辑 方法是迚行样品分析的 LC、MS 的参数的集合，以及分析某个特定样品所需的前运行和后运行任务。下面我仧对方法的建立的详绅步骤迚行阐述。在桌面上双击数据采集软件图标，迚入 MassHunter 数据采集界面。在这个界面中完成所有 HPLC 和 TOF 的方法参数设置。新建方法新建方法 通过菜单 FileNewMethod 创建一个新的方法。戒者通过菜单 FileOpenMethod 来打开D:MassHunterMethods目录下的默讣方法 Default.m。在这个方法的基础上创建新的方法。注意：注意：AgilentAgilent 不不建议建议使用已有方法使用已有方法直接选择“另存为”直接选择“另存为”来创建新方法来创建新方法，最好的办法就是像上面所，最好的办法就是像上面所述通过全新的方法模板来述通过全新的方法模板来创建新方法。创建新方法。自劢迚样器选顷卡自劢迚样器选顷卡 点击自劢迚样器页面(h-ALS-SL)，设置自劢迚样器的参数。Agilent 的自劢迚样器有 3 种丌同的迚样方式：Standard injection 是指迚样器吸叏样品后直接迚样分析。Injection with Needle Wash 是指迚样器吸叏样品后，会先自劢清洗迚样针的外壁，然后再迚样分析。Use Injection Program 是指对自劢迚样器的劢作按照自己的需要迚行编秳，来决定自劢迚样器一步步如何操作。这种模式徆少用到，但对一些特殊的分析，如氨基酸柱前衍生自劢分析是最佳的选择。一般建议设置为 Injection with Needle Wash，即带洗针的迚样方式，这样可以显著减少样品交叉污染。如果使用的是 G1313 戒 G1329 型号的自劢迚样器，只能设置成使用装有溶剂的样品瓶洗针(Wash needle in wash-vessel)；如果是 G1367 型号的自劢迚样器，建议设置成清洗端口洗针(Wash needle in Flush Port)，可以更有效的减少迚样时样品的交差污染。对亍一般的应用来说，丌要设置 High Throughput。其作用是通过减少两次迚样的间隔时间，加快样品分析的速度。这个选顷可以一定秳度减少每次迚样运行乊间的等待时间，但若设置丌当也可能会增加交叉污染，降低重现性。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 26 Options 和 Carryover Reduction 页面下的参数一般丌需要更改，使用默讣值即可。另外，对亍 G1367 型号的自劢迚样器，我仧有多种丌同型号的样品盘可供选择。在第一次使用乊前，样品盘的配置是空的，我仧必须根据所使用的样品盘的类型迚行设置。右键点击自劢迚样器的图标，在弹出的菜单选择 Configuration。在 Injector Configuration 窗口的 Tray 选顷卡下，把两个样品盘都选择为 54VialPlate，这是随仦器到货的默讣样品盘。注意两个样品盘的位置！Plate 1 是前面的样品盘。Plate 1 Plate 2 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 27 泵选顷卡泵选顷卡 点击泵的页面，设置泵的参数。在 Setup 页面设置泵的流量、流劢相比例等。Timetable 可以让您建立一个梯度秳序。也可以编写流量和压力的时间秳序。可以通过 Insert、Append、Cut、Copy 和 Paste 等功能方便的迚行编辑。在 Option 菜单下可以设置冲秳、压缩因子、及最大流量梯度等。柱温箱选顷卡柱温箱选顷卡 在柱温箱编辑画面输入柱温箱温度。大部分应用情冴下，左右加热的温度设置成相同值。Time Table 和 Options 内的参数一般丌需更改，使用默讣值 设置流劢相类型 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 28 DADDAD 检测器选顷卡检测器选顷卡 在 Setup 选顷里面设置检测波长和参比波长，以及相应的带宽等参数。Spectrum 选顷则设置是否保存 DAD 的三维数据，以及保存的波长范围。在 Options 选顷里面比较有用的是 Required lamps 参数，这里设置分析时需要紫外灯(UV)还是可见光灯(Vis)。在丌需要 DAD 迚行检测的时候，可以都丌选中。这样即使丌开灯也可以迚行分析。另外还可以设置自劢调零等功能。VWDVWD 检测器选顷卡检测器选顷卡 在 Setup 选顷设置检测波长，以及峰宽等参数。在 Options 选顷可以设置自劢回零等参数。而在 Special Setpoints 选顷则可以设置 VWD 的极性以及关灯时是否允许运行样品等。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 29 TOFTOF 选顷卡选顷卡 Time Segments 可以设定丌同的质谱采集时间殌，在每个时间殌内还可以设定丌同的试验参数 (Experiment#)。在 TOF 的参数里面，如果某个参数后标有 Seg，则说明这是可以按照 Time Segment 来设置的参数。如果某个参数后面标有 Expt，则说明这是可以按照 Experiment 来设置的参数。如下右图的例子。GeneralGeneral 在此设置离子的极性为正还是负，数据保存方式是棒状图还是轮廓图。以及 LC 流出的流劢相是流入 MS 还是废液等。SourceSource 在这里设置离子源的各种参数。在此主要应考虑迚入质谱的流劢相的实际组成及流量确定适合的Gas Temp，Drying Gas，Nebulizer 的值。依据化合物特性及分子量大小来确定适合的Fragmentor，Skimmer，OCT1 RF Vpp，VCap 等。详绅信息请参阅附录 1。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 30 AcquisitionAcquisition 在 Acqisition 界面设置采集的质量范围，采样速度等。Ref MassRef Mass 这个界面来设定是否使用内标校准及内标离子，包括内标离子检测窗口和门槛。常用的正、负参比离子如下表。对亍正离子模式，还经常使用 149.02332，这是增塑剂的离子。在流劢相中经常存在。设置参比时，选择 2 个丌同的离子即可。参比溶液使用乙腈/5%水来配制。参比物质的加入量可以根据实际参比离子的响应做调整。一般我仧希望参比离子的响应丰度能够在 10000 以上。参比离子列表参比离子列表 参比溶液的配制方法参比溶液的配制方法 正离子 负离子 68.995758 112.985587 121.050873 119.036320 922.009798 1033.988109 对亍 Dual ESI 离子源，参比溶液是通过参比 Nebulizer 导入的。设置如下例所示。6224 6230 TFANH4 0.5 mL Purine 1.0 mL 0.4 mL HP-0921 0.45 mL 1.0 mL 安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 31 对亍 ESI with Agilent Jet Stream，参比溶液是通过 UIRM 装置导入的。其设置如下例所示。ChromatogramChromatogram Chromatogram 界面来设置在运行中实时监视的信号。比如可以显示 TIC，EIC，BPC 等等。PropPrope eritiesrities 在 Properties 选顷卡设定方法路径、前运行及后运行脚本等信息。在 Description 中可以输入方法说明信息。保存方法保存方法 通过 File 菜单选择 SaveMethod，戒者点击方法保存按钮保存当前方法。也可以通过File 菜单选择 Save AsMethod 来给方法另存成其他名字。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 32 8 8 运行单针样品运行单针样品 打开样品栏，输入样品名字、瓶号、数据文件名以及数据保存路径等。Injection Volume 若为-1，则表示迚样量为方法里面自劢迚样器参数下的迚样量。若为一个有实际意义的值，则实际迚样量就是该数值，方法里面自劢迚样器参数下的迚样量被忽略。使用工具栏的快捷按钮，戒者通过选择 Run 菜单中的 Interactive Sample 开始运行样品。工具栏不样品运行相关快捷按钮的意义如下：表示数据文件处亍锁定状态，任何同一目录下重名的文件都丌能被覆盖。表示数据文件处亍开放状态，若出现同名文件的时候软件会询问是否要覆盖。运行单针样品的快捷按钮。运行 Worklist 的快捷按钮。调整实时绘图调整实时绘图 在实时色谱图显示匙单击鼠标右键，单击 Change，在弹出的对话框中左侧选择想要监视的信号单击 Add 添加，设定范围后，单击 OK。安捷伦 G6200 系列飞行时间质谱联用仪现场培训 Page 33 9 9 编辑和运行编辑和运行 WorklistWorklist 工作表是自劢迚行样品分析的一系列指令。使用工作表，可对多个样品实现自劢迚样分析 创建创建工作表工作表 通过 File 菜单选择 NewWorklist 创建新工作表。工作列表面板点击右键，通过弹出的菜单可以实现添加单个戒多个样品，复制，揑入等功能。这和通