DB61T1671-2023肉兔同期发情及人工授精技术规范.pdf

ICS 65.020.30CCS B 43DB61陕西省地方标准DB 61/T 16712023肉兔同期发情及人工授精技术规范Technical Specification for Artificial Insemination and Estrus Synchronization inMeat Rabbit2023-05-25 发布2023-06-25 实施陕西省市场监督管理局发 布DB61/T 16712023I目次前言.II1范围.12规范性引用文件.13术语和定义.14基本要求.25同期发情.26人工授精.37档案管理.5附录 A（资料性）母兔同期发情记录表.6附录 B（资料性）兔人工授精常用器械及药品材料.7附录 C（资料性）公兔精液品质检查记录表.8附录 D（资料性）输精记录表.9DB61/T 16712023II前言本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由陕西省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：商洛市畜牧产业发展中心、西北农林科技大学、洛南县畜牧兽医中心、陕西欧标新星兔业扶贫有限公司、陕西杨凌伊高乐兔业有限公司。本文件主要起草人：余超、孙秀柱、任战军、李象鼎、聂淼、宋新良、屈博、刘泉利。本文件由商洛市畜牧产业发展中心负责解释。本文件首次发布。联系信息如下：单位：商洛市畜牧产业发展中心电话：[phone]地址：陕西省商洛市商州区商中路22号邮编：726000DB61/T 167120231肉兔同期发情及人工授精技术规范1范围本文件规定了肉兔同期发情及人工授精技术基本要求、同期发情、人工授精和档案管理的要求。本文件适用于人工养殖肉兔的同期发情处理和人工授精技术操作。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 3185-2018家兔人工授精技术规程NY/T 5133无公害食品 肉兔饲养管理准则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1肉兔meat rabbit在生产性能上用于生产兔肉的品种（系）。3.2同期发情synchronization of estrus利用激素或光照刺激等，人为控制并调整母兔发情进程，使其在一定时间内集中发情。3.3人工授精artificial insemination采用输精器械为发情母兔配种并使其受孕的过程。3.4精子密度sperm concentration单位体积精液中的精子数，单位为亿个每毫升。来源：NY/T 3185-2018,3.43.5精子活力sperm motility在37 环境下直线前进运动精子占总精子数的百分率。DB61/T 167120232来源：NY/T 3185-2018,3.53.6精子畸形率abnormal sperm percentage单位体积精液中形态异常精子占总精子数的百分率。4基本要求4.1母兔健康无病，体况适中，生长发育良好。4.1.1初产母兔初配年龄：小型品种4.5月龄5月龄，中型品种5月龄6月龄，大型品种6月龄7月龄，巨型品种8月龄9月龄，初配体重一般达到该品种成年体重的75%。4.1.2经产母兔一般不超过15胎次。4.2公兔6月龄以上24月龄以下，符合种用品种特征，性欲旺盛，精液品质优良。4.3饲养管理饲养管理按NY/T 5133的规定执行。4.4人员身体健康、无人畜共患传染病。经过专业技术培训，取得家畜繁育相关资质。5同期发情5.1光照诱导法5.1.1兔舍具备避光性，保证通风良好。5.1.2光源选择220 V的LED灯或灯带。5.1.3光照强度母兔笼内光照强度应大于60 lux。5.1.4光照时间配种前6 d7 d至配种后7 d，光照时间为16 h/d。DB61/T 1671202335.2激素注射法5.2.1激素一般选用孕马血清促性腺激素，宜现取现用。5.2.2注射时间及注射量5.2.2.1配种前 48 h60 h，皮下或肌注孕马血清促性腺激素 30 IU/只50 IU/只。5.2.2.2使用其他激素按使用说明执行。5.3发情鉴定5.3.1母兔的发情周期 7 d15 d，发情持续期 3 d5 d。5.3.2发情母兔通常表现精神兴奋、食欲下降、抚摸温顺、外阴红润。5.3.3发情鉴定以母兔外阴部为大红色为发情标准。发情母兔做好标记，以备输精。5.3.4做好同期发情记录，见附录 A。6人工授精6.1种公兔6.1.1种公兔选择应符合4.2的规定。6.1.2种公兔调教应符合NY/T 3185-2018中4.1的规定。6.2器械与人员6.2.1器械与药品人工授精用的器械及药品材料见附录B。6.2.2器械清洗消毒人工授精所用器械在每次使用后，需用洗涤剂洗刷干净，经清水和蒸馏水各冲洗1遍。假阴道内胎、温度计、输精枪用75%酒精棉球擦拭消毒。玻璃器皿置于恒温干燥箱中160灭菌90 min120 min。输精套管采用臭氧熏蒸消毒。纱布、擦拭布和工作服用消毒药液清洗或采用高压蒸汽消毒。6.2.3精液稀释液应符合NY/T 3185-2018中4.5.3的规定。保存温度4，保存时间不宜超过24 h。6.2.4人员应符合4.4的规定。人工授精操作前应剪短指甲、磨平，着洁净工作衣、帽，穿胶鞋，戴无毒塑料手套。6.3采精DB61/T 1671202346.3.1采精前准备将配制所需量的稀释液，置于水浴锅中预热至35备用。调节好质检用显微镜于200倍400倍视野。6.3.2假阴道组装假阴道组装按NY/T 3185-2018中4.5.2的规定执行。6.3.3采精方法采精方法按NY/T 3185-2018中5.1的规定执行。6.3.4采精频率采精一般做到定点、定时、定人，时间宜选择10：00前或16:00以后，成年公兔每周采精不超过2次，青年公兔每周1次。6.4精液品质检验精液品质检验项目与方法应符合表1的规定。详细记录精液品质检查的各项指标，见附录C。表 1公兔精液品质检验项目与方法编号项目指标方法1外观乳白色或灰白色，均匀一致目测2气味无味或略带腥味，无异味鼻嗅3采精量/mL0.32.5刻度集精管读取4精子活力/%60在200倍400倍显微镜下观察5精子密度/（108个/mL）1血细胞计数板计数或精液密度仪测定6精子畸形率/%20采用伊红或姬姆萨染色后在200倍400倍显微镜下观察或者采用相差显微镜直接观察6.5精液稀释根据精液品质检验和评估结果确定稀释倍数，精液的品质评估及稀释标准应符合表2的规定。精液采集后尽快稀释，放置时间不宜超过15 min。做到等温稀释，根据精液温度调节稀释液温度，二者温差不得超过1。将稀释液沿杯壁缓慢加入精液中，轻轻摇动，混合均匀。高倍稀释时，先低倍稀释（1:1）（1:2），30 s后再加入余下的稀释液。表 2兔精液的品质评估及稀释标准评估结果160 倍显微镜观测精子活力精子密度最大稀释倍数稀释后优秀呈浓云雾状，快速涡旋，无法看到单个精子，见似黑云状。0.7534 亿/mL15活力0.60良好呈云雾状，快速涡旋，偶见单个精子闪现。0.702 亿/mL10合格呈薄云状，快速运动，可见全数单个精子闪现。0.601 亿/mL5不合格不动、运动慢，精子间距大于一个精子头长等情况的。0.60DB61/T 1671202356.6精液分装将精液分装至精液瓶或集精瓶中，标明公兔品种、耳号、精子活力、生产日期、保存有效期、场名等。6.7精液保存和运输精液保持和运输按NY/T 3185-2018中第8章的规定执行。6.8输精6.8.1输精时间6.8.1.1根据发情鉴定，母兔发情后 24 h 内完成输精。6.8.1.2批次化生产中，一般同期发情处理后直接输精。6.8.2输精枪校准与使用6.8.2.1定期对输精枪进行校准，每次输精结束后应将输精枪调整至最大刻度。6.8.2.2输精枪吸取精液前，用精液稀释液冲洗两遍并甩干，输精前排尽枪内空气，调整好输精的刻度。1 只输精套管只用于 1 只母兔。6.8.3输精方法输精方法按NY/T 3185-2018中第9章的规定执行。做好输精记录，见附录D。6.8.4输精次数及输精量一般1次，若2次，间隔 8 h10 h。每次输入0.5 mL1.0 mL精液。7档案管理各项档案记录应及时、准确，定期进行统计分析，至少保留2 y。DB61/T 167120236AA附录A（资料性）母兔同期发情记录表A.1光照诱导法同期发情记录表光照诱导法同期发情记录表见表A.1。表 A.1光照诱导法同期发情人工授精记录表A.2激素注射法同期发情记录表激素注射法同期发情记录表见表A.2。表 A.2激素注射法同期发情记录表组别母兔数补光日期光照时间光照强度结束补光日期发情母兔数发情率技术员备注组别母兔数激素激素有效期注射日期注射时间注射量发情母兔数发情率技术员备注DB61/T 167120237BB附录B（资料性）兔人工授精常用器械及药品材料兔人工授精常用器械及药品材料见表B.1。表 B.1兔人工授精常用器械及药品材料序号名称规格（技术参数）用途备注1干燥箱实验室用干燥、预热和消毒器皿2冰箱冷藏室 04保持试剂和剩余稀释液3恒温水浴锅双孔或四孔等温精液与稀释液4假阴道外壳、内胎兔用组装采精器5集精瓶兔用，带刻度收集精液6显微镜40 倍1600 倍观测精子数、活力和畸形率7载玻片、盖玻片精子活力测定8精子密度仪50 mill/mL1400 mill/mL测定精子密度选用9血球计数板2516测定精子密度选用10计数器0999精子计数11恒温保温箱1618保存精液12温度计0100测量精液、稀释液等温度13天平秤（0.01100）g称量药品14一次性注射器5 mL配制促排卵素等15量筒500 ml量取液体16三角瓶1000 mL配置稀释液17烧杯500 ml精液稀释18玻璃棒稀释液配制或精液稀释19标签纸精液、稀释液标签20连续输精枪兔用输精21输精套管兔用输精22连续注射器兔用注射促排卵素23纱布、擦拭布清洗擦拭24医用手套、灭菌工作服技术人员防护25酒精75%消毒26促排卵素促黄体素释放激素 A3促进母兔排卵27激素孕马血清激素催情28精液稀释液（粉）兔用配制稀释液29生理盐水、葡萄糖配制稀释液30蒸馏水配制稀释液DB61/T 167120238附录C（资料性）公兔精液品质检查记录表公兔精液品质检查记录表见表C.1。表 B.1公兔精液品质检查记录表采精日期采精时间品种公兔耳号采精员颜色气味采精量mL精子活力%精液密度108个/mL精子畸形率%稀释倍数稀释后精子活力%是否合格质检员备注注1：颜色按实际观察的情况填写。注2：气味按“正常”或“异常”判定。注3：精子活力按“%”等级评定。注4：精子密度按“密、中、稀、无”4个等级评定。DB61/T 167120239CC附录D（资料性）输精记录表输精记录表见表D.1。表 C.1输精记录表母兔耳号胎次发情日期第一次输精第二次输精输精员备注公兔耳号输精日期输精时间输精量公兔耳号输精日期输精时间输精量_