人教版222动物细胞融合与单克隆抗体.pptx

2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体一、动物细胞融合一、动物细胞融合1.1.概念：概念：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。又叫细胞杂交胞的过程。又叫细胞杂交 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。息的单核细胞，称为杂交细胞。不同不同DNA的的两个细胞两个细胞融合融合有丝分裂有丝分裂两个完整的杂两个完整的杂交细胞交细胞灭活的病毒灭活的病毒？这是什么？这是什么？用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程2.2.过程：过程：.原理：原理：细胞膜的流动性。细胞膜的流动性。.诱导方式：诱导方式：物理法：物理法：振动、离心、振动、离心、振动、离心、振动、离心、电激电激化学法：化学法：聚乙二醇（聚乙二醇（聚乙二醇（聚乙二醇（PEGPEGPEGPEG）生物法：生物法：灭活的病毒灭活的病毒使远缘杂交成为可能；使远缘杂交成为可能；主要用途：主要用途：制备单克隆抗体制备单克隆抗体3.3.意义和应用：意义和应用：二、单克隆抗体二、单克隆抗体1.1.传统制备抗体的方法传统制备抗体的方法向动物体向动物体内反复注内反复注射某种抗射某种抗原原 动物动物产生产生抗体抗体从动物从动物血清中血清中分离抗分离抗体体特点：产量低、纯度低、特异性差特点：产量低、纯度低、特异性差2.2.制备过程：制备过程：诱导诱导其融合的方法有哪些其融合的方法有哪些融合融合后培养液中有哪几种细胞后培养液中有哪几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法抗的方法4、优点：、优点：特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高、可大量制备、可大量制备三、单克隆抗体的应用三、单克隆抗体的应用、可用于作为诊断试剂、可用于作为诊断试剂、可用于疾病治疗和运载药物、可用于疾病治疗和运载药物1、动物细胞融合过程、动物细胞融合过程2、单克隆抗体制备过程、单克隆抗体制备过程存在两次筛选：第一次用选择培养基选出杂交瘤细胞第二次筛选能产生抗体的杂交瘤细胞练习：练习：1 1、只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（、只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）A APEGPEG B B灭活的病毒灭活的病毒 C C电刺激电刺激 D D离心离心练习：练习：2 2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A A、经过免疫的、经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B B、不经过免疫的、不经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 C C、经过免疫的、经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D D、不经过免疫的、不经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞练习：练习：3 3、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（实验步骤中错误的是（）A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞淋巴细胞B用纤维素酶处理用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞胞C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体练习：练习：4.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融淋巴细胞自身融 合细胞合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 A B C D 注射抗原的目的是什么？注射抗原的目的是什么？使小鼠产生免疫反应，获得相应的使小鼠产生免疫反应，获得相应的B淋淋巴细胞巴细胞物理方法：离心、振动、电刺激物理方法：离心、振动、电刺激化学方法：聚乙二醇（化学方法：聚乙二醇（PEG）生物方法：灭活的病毒生物方法：灭活的病毒最常用的方法是：灭活的病毒诱导最常用的方法是：灭活的病毒诱导最常用的试剂是：聚乙二醇最常用的试剂是：聚乙二醇融合后培养液中有哪几种细胞？融合后培养液中有哪几种细胞？B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、BB融合细胞、骨髓瘤骨髓瘤融合细胞、B骨髓瘤融合细胞（即杂交瘤细胞）和细胞多聚体