Agilent 1100∕1200系列HPLC 液相色谱基本维护故障诊断讲座.pdf

液相色谱维护色谱基本维护故障诊断交流讲座2009-4-12Month#,200XPage 1安捷伦科技安捷伦科技液相色谱基本维护液相色谱基本维护故障诊断交流讲座故障诊断交流讲座云南昆明2008年1月8日Page 2Agilent 1100/1200Agilent 1100/1200系列系列HPLC HPLC 工作原理工作原理日常维护日常维护故障诊断故障诊断技术支持服务流程技术支持服务流程安捷伦科技有限公司安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部生命科学与化学分析仪器部1100/1200 HPLC Maintenance&Troubleshooting1100/1200 HPLC Maintenance&TroubleshootingPage 3作为一种高精密度的分析设备，细菌或藻类、气体和很微小的固体颗粒都会对HPLC系统造成损害。所有我们经常碰到的高效液相的问题，其实最终都可以从这几种有害的物质中找到原因，所以，如果大家在平时的使用中能够有意识的注意避免这几种物质在系统中的出现，一定可以避免大部分问题的发生维护常识维护常识Page 41 细菌或藻类：细菌或藻类：如果纯水（如果加入无机盐类，会加速）静置或摆放时间超过了7天，其中就会产生细菌或藻类。危害：这些细菌会堵塞溶剂过滤器，堵塞真空脱气机的滤膜微孔，损坏系统中的阀（泵，自动进样器），污染流通池,造成噪音干扰。检查办法：将各个通道进入泵的接口处拧松，如果没有液体自然流出（虹吸作用），表示该通道的溶剂过滤器被细菌或藻类堵塞。防止办法：1：不要使用摆放时间超过一周以上的纯水，如果一定要摆放纯水超过一周，在其中加入一定量的有机相或叠氮化钠。2:长期关机(超过一周)前，一定要把所有通道用甲醇冲干净，特别注意脱气机有四个通道。3)如果发现装水的瓶中有挂液的现象,要去掉水后,用有机相淋洗后,放到110的恒温箱中烘半个小时以上灭菌处理：1.如果溶剂过滤器堵塞，可以放入35%的浓硝酸中消解。2 及时 更换purge阀过滤白头。（如果在purge阀松开，流量为5ml/min（如排气时）压力超过10bar。）3 如有必要，更换进口主动阀滤芯4.使用IPA冲洗系统。Page 52 气体气体高效液相系统中有压力的变化，还有溶剂间的混合，这些都会改变气体在溶剂中的溶解度，使其逸出危害：在泵中会引起压力的变化，使流量根本没有或不准，在自动进样器中会使进样量不准，在检测器中会由于气泡的光学效应形成波浪状噪音干扰，在柱子中会占据吸附点，使柱效下降。检验方法：用滤纸背景，检查从比例阀到进口主动阀应该没有任何微小气泡；如果检测器表现有规律的噪音，泵压力有规律的波动，可以考虑有气泡防止方法：至少每周对流动相进行超声波脱气，开机后脱气，使用在线真空脱气机处理办法：用异丙醇冲洗系统，将气泡带出。可以不过柱后用较大流量。对于检测器中的气泡，可以通过堵放的方法导出。Page 63 固体微粒固体微粒使用不好的流动相或者流动相没有过滤，样品处理不当或者没有过滤，都会把固体微粒带到系统中。危害：如果进入系统的流动相中或者样品中有固体微粒，会磨损阀，污染流通池。防止办法：对使用的流动相，包括缓冲盐，都要进行过滤，对样品也要过滤。检测方法：如果柱压力突然变高，有较大杂质峰，检测器有不规则的超常噪音，保留时间有规律的变化（一般变小）可以考虑固体微粒污染。处理方法：异丙醇冲洗，拆开管路清洗，反冲。Page 71100/1200 HPLC 1100/1200 HPLC 维护维护和诊断和诊断1.1.在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)2.2.四元二元四元二元/单元泵单元泵(G1311A/G1312A/G1310A)G1311A/G1312A/G1310A)3.3.自动进样器自动进样器(G1313A)G1313A)4.4.二极管阵列检测器二极管阵列检测器(G1315B)G1315B)5.5.可变波长紫外检测器（可变波长紫外检测器（G1314A)G1314A)Page 8Agilent 1100/1200系列系列HPLCPage 91100/1200HPLC系统介绍系统介绍Page 10Agilent 1100/1200Agilent 1100/1200在线脱气机在线脱气机-(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)Page 11工作原理工作原理Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)Page 12脱气机工作原理脱气机工作原理Page 13使用使用Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机在线脱气机须知须知溶剂溶剂棕色玻璃瓶会避免藻类的生长。棕色玻璃瓶会避免藻类的生长。经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。经常过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管。避免使用下述可腐蚀钢铁的避免使用下述可腐蚀钢铁的 溶剂：溶剂：碱金属卤化物及其酸溶液(如：碘化锂、氯化钾等)。高浓度无机酸，如硝酸、硫酸.可能含有过氧化物的色谱纯醚(如THF、二氧六环、二丙基乙醚)。这些在 使用前必须用干燥氧化铝过滤除去过氧化物。含强络合剂的溶液(如EDTA，乙二胺四乙酸)。四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机在线脱气机-在线脱气机在线脱气机(G1322A/G1379A)G1322A/G1379A)Page 14防止堵塞溶剂过滤器防止堵塞溶剂过滤器污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至 7)中尤其如此。下 列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液 建议不超过两天。如果应用许可，在溶剂中加人0.00010.001 M的叠氮化钠。避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。用氩气置换流动相上层的空气。Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护,故障诊断故障诊断Page 15Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护,故障诊断故障诊断检查溶剂过滤器检查溶剂过滤器拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm此时溶剂会因为重力流此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。查看过滤器是否变色查看过滤器是否变色临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常清洁溶剂过滤器清洁溶剂过滤器将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸（35）的烧杯里浸一小时。用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。将过滤器重新装好。建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统可能会严重堵塞系统注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统可能会严重堵塞系统Page 16Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？如何简单判断脱气机脱气是否正常？2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？堵塞？Page 17Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护在线脱气机日常维护Question?1.如何简单判断脱气机脱气是否正常？如何简单判断脱气机脱气是否正常？打开打开Purge阀，设定泵的流速阀，设定泵的流速2ml/min，提提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱起当前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞？堵塞？关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。Page 18Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 四元泵四元泵(G1311A)G1311A)Page 19Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 四元泵工作原理四元泵工作原理Page 20泵工作原理泵工作原理Page 21Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 泵头泵头(Pump Head)Pump Head)结构图结构图Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 泵泵Page 22Agilent 1100/1200 泵头(Pump Head)结构图Pump head screwsPage 23泵头结构图泵头结构图1.宝石活塞杆2.活塞外框架(包括弹簧)3.支持环4.石墨密封垫5.泵腔6.入口主动阀7.出口单向阀8.塑料锁定螺栓9.冲洗阀10.泵头固定螺丝Page 24Agilent 1100/1200 单元泵和四元泵的阀单元泵和四元泵的阀PTFE Frit:01018-22707密封金垫密封金垫塑料盖帽塑料盖帽出口单向阀出口单向阀入口主动阀入口主动阀过滤芯过滤芯冲洗阀冲洗阀密封金垫密封金垫塑料盖帽塑料盖帽PTFE过滤芯过滤芯Page 25Agilent 1100/1200Agilent 1100/1200系列密封垫冲洗系列密封垫冲洗Seal Wash (Seal Wash (可选可选)当流动相中盐浓度当流动相中盐浓度0.010.01M M时，可以时，可以减小密封垫的磨损。减小密封垫的磨损。对于对于Agilent 1100/1200Agilent 1100/1200系列泵为可系列泵为可选件。选件。用用10%10%异丙醇水溶液冲洗异丙醇水溶液冲洗WasherSupport seal Support seal assemblyassemblySealAgilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 系列泵系列泵Page 26带有带有Seal Wash的泵头结构图的泵头结构图3.Seal Wash支撑环支撑环4.Seal Wash密封垫密封垫 0905-11755.冲洗管冲洗管6.Seal Wash垫圈垫圈7.Seal Wash密封压片密封压片8.泵头密封垫泵头密封垫 5063-6589Page 27如何更换溶剂出口过滤芯如何更换溶剂出口过滤芯Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护Page 28严重污染的溶剂出口过滤芯严重污染的溶剂出口过滤芯Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护Page 29如何更换活塞杆密封圈如何更换活塞杆密封圈Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护Page 30当盐溶液和有机溶剂混合时，盐溶液可能与有机溶剂完全混溶，而不会出现 沉淀。但是在梯度阀的混合点，但是在梯度阀的混合点，重力作用使盐颗粒 沉淀下来。通常，阀的A通道用于水相/盐溶液，而泵的B通道用于有机溶剂。如果使用的是这样的配置，盐将落回到盐溶液中，并被溶解。当泵使用 的不同配置（例如，D-盐溶液，A-有机溶剂）时，盐可能会落到有机溶剂 中，从而出现问题。Agilent 1100/1200四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到下面的 口上，有机溶剂接到上面的梯度阀口上。有机溶剂通道最好直接在盐溶液通 道的上面。建议定期用水冲洗所有MCGV通道，以去除在阀口上可能出现的盐 沉淀。多通道梯度阀（多通道梯度阀（MCGV）操作要点操作要点Page 31更好地使用四元泵更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接 在底部得梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上。有机通道最好 在盐溶液通道得上面。建议用水定期冲洗所有MCGV通道除去可能在 阀口析出得盐结晶。操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30ml，对微脱气机10ml）冲洗 真空脱气机,特别是当 泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂 时。防止溶剂过滤器堵塞及长菌，当虑器表面有黑色或黄色污染层说明虑器发生了堵塞，请立即清洗或更换之。定期检查排液阀的虑芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5ml/min，若压力大于10bar,则须立即更换。Agilent Agilent 四元二元四元二元/单元泵日常维护单元泵日常维护Page 32Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 系列泵的使用须知系列泵的使用须知更好地使用泵更好地使用泵当使用低流速时（不高于0.2 ml/min）检查所有1/16英寸接头有无渗漏（用压力测试或漏液测试）。每当更换泵密封垫时 排液阀虑芯也应更换。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统。当需要长时间使 用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损。更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于 正相密封垫。Page 33Agilent 1100/1200 系列泵的使用须知当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10异丙醇，并将其流速调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。10异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。当泵头安装有冲洗附件而不开启当泵头安装有冲洗附件而不开启10异丙醇，会使密封垫及活塞杆的寿命减短异丙醇，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。Page 34Agilent 1100/1200 系列泵的使用须知密封垫磨合操作密封垫磨合操作：1.以异丙醇作为溶剂并将其管道直接连接到主动阀(四元泵需一接头，部件号01001847）。2.连接阻尼管（部件号50222159）于排液阀的出口，阻尼管的另一端置于废液瓶中。3.打开排液阀，并用异丙醇以2ml/min的流速冲洗系统10分钟。4.关闭排液阀，设置流速使压力达到350bar，并使系统在此压力下保持15分钟。5.关闭泵，缓慢打开排液阀释放压力，重新连接管路，然后冲洗系统中的异丙醇。注意，只有反相密封垫（注意，只有反相密封垫（50636589）才需此操作而正相密封垫（）才需此操作而正相密封垫（09051420）因其）因其最高只耐受最高只耐受200bar,所以此操作会损害它。所以此操作会损害它。Page 35更换排液阀滤芯Page 36Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？如何简单判断比例阀是否内漏？2.何时应该更换何时应该更换Purge阀内的过滤白头？阀内的过滤白头？3.泵压力不正常可能由那些原因引起？泵压力不正常可能由那些原因引起？Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 泵的日常维护泵的日常维护Page 37Question?1.如何简单判断比例阀是否内漏？如何简单判断比例阀是否内漏？设定泵使用一个单独通路（设定泵使用一个单独通路（A），），打开打开Purge阀，流阀，流速速5ml/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（开液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。着流动，正常时均不应流动。2.何时应该更换何时应该更换Purge阀内的过滤白头？阀内的过滤白头？使用纯水作流动相，打开使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速阀，流速5ml/min，观察系统压力，如果超过观察系统压力，如果超过10bar，应该更换。应该更换。3.泵压力不正常可能由那些原因引起？泵压力不正常可能由那些原因引起？气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用比例阀混合时盐浓度太高比例阀混合时盐浓度太高Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 系列泵的日常维护系列泵的日常维护Page 38Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器自动进样器(G1313A)G1313A)Page 39Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器工作原理自动进样器工作原理Page 40Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器工作原理自动进样器工作原理Page 41Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器工作原理自动进样器工作原理Page 42Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器工作原理自动进样器工作原理Page 43自动进样器工作原理自动进样器工作原理Page 44Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器结构自动进样器结构Page 45Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器结构自动进样器结构Page 46Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器结构自动进样器结构Page 47Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护1 定期检查各传动杆是否足够润滑，必要时先用酒精棉球擦拭干净后再给这些杆涂抹少量液体润滑油，脏的传动杆使阻力增大从而造成自动进样器在取样过程中由于马达过热导致出错。检查取样爪子的绿色胶套时否损坏，如果是请更换之，否则会使样品放置位置不正确而导致如针，针座等损坏。用酒精棉签擦拭针座防止灰尘污染堵塞针与针座。若场地确实灰尘较多，建议购买自动进样器门，棕色门还可以帮助防止见光敏感的样品。Page 48Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器常见故障自动进样器常见故障漏液漏液针座磨损针座磨损转子磨损转子磨损进样量不准进样量不准转子磨损转子磨损计量泵故障计量泵故障抽样速度太快抽样速度太快机械臂移动故障机械臂移动故障-抓不准样品瓶抓不准样品瓶传感器故障传感器故障周围环境差周围环境差样品瓶不标准样品瓶不标准Page 49Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护更换转子密封圈更换针及针座Page 50更换针座更换针座Page 51更换针更换针Page 52更换转子密封圈更换转子密封圈Page 53Agilent 1100 手动进样器（G1328A,G1328B)Page 54Agilent 1100 手动进样器操作原理Page 55Agilent 1100 手动进样器操作原理Page 56Agilent 1100 手动进样器使用须知为了防止虹吸应注意使第五第六号放空管的出口与进样口保持在同一平面Page 57Question?1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护自动进样器日常维护Page 58Question?1.样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？了尽量避免堵塞，可以采取什么措施？在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位置。置。Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护自动进样器日常维护Page 59Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护Question?2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？Page 60Agilent 1100/1200 自动进样器日常维护Question?2.怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损？将第四号管（排液的细塑料管）提起，正常情况下应没有液体滴出，如有则转将第四号管（排液的细塑料管）提起，正常情况下应没有液体滴出，如有则转子垫圈已磨损。子垫圈已磨损。色谱现象：压力不稳，保留时间面积重复性差，残留严重。色谱现象：压力不稳，保留时间面积重复性差，残留严重。Page 61Agilent 1100/1200 柱温箱器使用注意事项及日常维护Page 62Agilent 1100/1200 柱温箱器使用注意事项及日常维护连接的管路尽量短，防止热扩散及峰增宽。如果使用小体积分析柱以及流速小于0.2ml/min时建议使用左边的柱温箱(左边体积较少,3ul).除非特殊应用，建议将两边温度设置一样。并确保关好前盖。Page 63Agilent 1100/1200 柱温箱器使用注意事项及日常维护Question如果加热块堵塞怎么办？如果加热块堵塞怎么办？Page 64Agilent 1100/1200 柱温箱器使用注意事项及日常维护Question.如果加热块堵塞怎么办？如果加热块堵塞怎么办？用一管连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。用一管连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。Page 65Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器紫外检测器(G1315B)G1315B)Page 66Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理紫外检测器工作原理Page 67二极管阵列检测器与可变波长检测器对比示意图二极管阵列检测器与可变波长检测器对比示意图VWD检测器检测器DAD检测器检测器SourceEntranceslitConcavegratingDiode-arraydetectorFlowcellSourceEntranceslitExitslitFlowcellDetectorConcavegratingPage 68马马达达狭狭缝缝Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理紫外检测器工作原理可变的光进口狭缝系统可变的光进口狭缝系统这一微型狭缝系统是利用硅的机械性能和总体布局微型加工技术以及精确的 制作功能加工而成，它把所需的光学性能狭缝和光栅集中组合到一起，成为一个简单、紧凑的元件。狭缝宽度直接由仪器上的微处理器来控制，并 可用为设定分析方法的一个实验参数。光栅光栅用一个凹面全息光栅来实现分光和光谱成像，光栅把入射光束全部分散成组 成它的波长，然后把它反射到二极管阵列上。二极管阵列二极管阵列二极管阵列由1024个光电二极管和一个位于陶瓷基座上的电路组成，在 190-950 nm范围内取样间隔 1 nm。Page 69Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器工作原理紫外检测器工作原理灯灯紫外区域采用有通光狭缝的氘灯作光源，低压氘气体的等离子体能发出 190nm到大约800 nm的光。可见光（VIS）和近红外光采用低噪音钨灯得 到，其发射出的光谱范围为470-950 nm。消色差透镜（光源透镜）消色差透镜（光源透镜）消色差透镜接受氘灯及钨灯发出的光，将其聚焦后通过流通池。氧化钬滤光片氧化钬滤光片当进行波长校准时，氧化钬滤光片用电力驱动进入光路。流通池底座窗口流通池底座窗口流通池底座窗口部件把氧化钬滤光片和流通池分开。流通池室流通池室光学单元有一个流通池室，使流通池易于放入光学单元，采用相同的快捷安 装系统可以把各种流通池装入光学单元，在检查检测器的光电性能时，拿走 流通池能消除流通池带来的影响。Page 70Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器性能优化紫外检测器性能优化使用较宽的带宽有降低噪声的优点，能在整个波长范围内降低噪声和使用4 nm带宽相比采用30 nm带宽，基线噪声降低约2.5倍。而信号值是4-nm 带宽的75%，在此例中信噪比增大2倍。Page 71Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器性能优化紫外检测器性能优化Page 72Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器性能优化紫外检测器性能优化Page 73Agilent 1100/1200 Agilent 1100/1200 紫外检测器性能优化紫外检测器性能优化Page 74Agilent 1100/1200 紫外检测器性能优化峰宽（响应时间）峰宽（响应时间）响应时间是说明在流通池中光吸收产生突变后出现检测器信号的快慢，检测器采用数值滤波器使响应时间与色谱图中峰宽相适应，这一滤波器不影响峰面积和峰的对称性，正确设定此滤波器会大大减小基线噪声（见图9），但会使峰高略有下降。另外这一滤波器能降低数据的速度，优化色谱的积分和显示，能最大限度地减少存储色谱和光谱的磁盘空间。Page 75Agilent 1100/1200 紫外检测器性能优化表6 列出检测器对滤波器的选择。为获得最佳效果，把峰宽设定为接近于色 谱图中窄峰的宽度，此时响应时间约为峰宽的1/3，这样会使峰高降低 5%，峰的加宽不到5%。在检测器中峰宽设定减小会引起峰高增加9.5的流动相，以防腐蚀流通池石英窗，避免使用可能析晶的流动相，防止流通池堵塞10.VWD 40bar DAD 120bar MWD 120bar FLD 20bar RID 5barRID、FLD永远是最后一个检测器11.注意不同厂家接头问题，防止渗漏或毁坏色谱柱和接头Agilent 1100/1200 HPLCAgilent 1100/1200 HPLC日常维护日常维护Page 106HPLC常用的色谱柱接头常用的色谱柱接头0.090 in.0.130 in.0.090 in.0.170 in.SwagelokWatersParkerRheodyneValcoUptight0.090 in.0.080 in.Troubleshooting LC Fittings,Part II.J.W.Dolan and P.Upchurch.LC/GC Magazine 6:788(1988)Agilent 1100/1200 HPLCAgilent 1100/1200 HPLC日常维护日常维护总结总结Page 107Agilent 1100/1200 HPLCAgilent 1100/1200 HPLC日常维护日常维护总结总结毛细管的区分Blue 0.25 mmColori.d.Red 0.12 mmGreen 0.17 mmPage 108Agilent 1100/1200 HPLCAgilent 1100/1200 HPLC日常维护日常维护总结总结压力测量压力测量Page 109EMF早期维护预警早期维护预警维护信息预报维护信息预报(EMF)EMF)在维修时要更换磨损和受力的元件。在理想的情况下，零部件更换频率由仪器的使用强度和分析条件所决定，而不决定于预先设定的时间间隔。维护信息预报（EMF）的特点是可以监控仪器中特殊元件的使用，并且在超 过预先设定的时间后立即把信息反馈给用户，在用户界面上可以看到提示的 信息，提醒用户按计划进行维修。Agilent 1100/1200 HPLCAgilent 1100/1200 HPLC日常维护日常维护总结总结Page 110Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断1100/1200 指示灯的意义指示灯的意义.电源指示灯电源指示灯：位于每个模块的左下方。把电源打开后，该灯会亮绿色。如果把电源打开后，此灯不亮，请检查是否有电源输入。在确认有电源的情况下，请与安捷伦联系。Page 111指示灯状态指示灯状态仪器仪器LED状态显示状态显示电源开关显示电源开关显示Off(power off)Ready(power on)Not ReadyRunErrorResidentBlinkBlackBlackYellowGreenRedYellow blinking通过通过LED显示仪器六种状态：显示仪器六种状态：Page 112Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断状态指示灯状态指示灯：位于各自模块的右上方。状态指示灯的颜色：呈黄色：该仪器在未准备好状态(Not-ready)或正在自检。呈绿色：该仪器正在运行，采集数据(Run)。无颜色：该仪器已准备好等待运行(Pre-run)。呈红色：该仪器检测到有故障发生，仪器在错误状态(Error).Page 113Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断通常仪器在开机后状态显示：脱气机：无颜色。脱气机在开机后应很快就能达到准备好的状态，且在正常情况下，该灯常灭。显示内部真空足够且密封性好。泵：显黄色，等待开泵。自动进样器：自检正常后应无颜色，等待进样命令。柱温箱：显黄色，等待开启控温命令。Page 114Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断通常仪器在开机后状态显示：检测器.VWD:显黄色，等待开灯命令。DAD 与之相同。FLD:无颜色，因为荧光检测器在不亮灯的情况下可做化学发光检测，记住要做荧光检测一定要开灯。RID:显黄色，等待purge 参比池命令，RID一定要冲洗样品池和参比池直至两者光强度一致后才能准备好。Page 115Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断当仪器出现错误并亮红灯时怎样检查提示信息。当仪器出现错误并亮红灯时怎样检查提示信息。一一 首先检查脱气机是否也亮红灯。首先检查脱气机是否也亮红灯。若是，请按正常程序关机然后检查脱气机后面是否有一遥控线(与标有remote的接口连接)。若有，将之卸下然后单独再开脱气机，观察约8分钟后是否再现红色，如果是则脱气机有问题。否则脱气机应无问题。二二 若脱气机不亮红灯只有其它模块显红灯。若脱气机不亮红灯只有其它模块显红灯。在工作站中分别左键单击各个红色的图标然后选择Not ready information(如果图标上无此选项，请单击菜单View然后再单击其下的Full menu)。根据第一点做法直至找出错误信息不是不是提示shutdown的模块及其信息，根据此信息就可以查看可能导致此错误原因。若不明白此提示信息，请将其记录下来并与安捷伦联系。Page 116Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断常见的错误信息及其解决方法：常见的错误信息及其解决方法：Shutdown:表示该模块并无问题，是由于其它模块出现错误而导致它也亮红色。比如其它模块漏液或脱气机出错等。Leak:表示该模块发生漏液，此时无需关机，请检查该模块的漏液传感器周围是否有液体。如果是，先用纸将之吸干后点击system on再检查液体从何而来。如果不是，请与安捷伦联系，这种情况很可能是仪器内部元件有问题。造成漏液的主要原因：1 色谱柱未拧紧，多数发生再更换柱后。这时柱温箱会显示Leak。注意，柱温箱的漏液传感器在两加热块之间的中间位置。请用吸水纸确认，因为有时单用眼观察不易察觉。2 连接管路两端未拧紧，或连接管路断裂。Page 117Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断3 进样阀漏液，如自动进样器转子垫圈磨损造成漏液。4 泵漏液，开泵后将手伸入泵底部，可感到漏液。5 冷凝水的形成，如果使用柱温箱的降温功能，可能会有冷凝水生成从而使柱温箱显示漏液。这种情况下可取消柱温箱的检漏功能(在工作站中的instrument菜单下选择more column thermostat然后选择取消柱温箱的检漏功能).6 流动池漏液。Page 118Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断Lamp current 和UV lamp ignited failed.可能原因：1 灯已严重老化。请在工作站中的diagnosis界面中查看灯的使用累积时间(viewdiagnosisEMF选择检测器).通常普通氘灯能用1000小时或以上，而长寿命氘灯能用2000小时或以上.2 灯连线未接好。3 检测器的主板和或电源损坏。注意，更换灯后建议将灯的使用时间回零：注意，更换灯后建议将灯的使用时间回零：在diagnosis中单击检测器图标，然后选择show module details 再单击右边的带有扳手的图标选择maintenance logbook entry，在项目中选择lamp replace,点ok然后在随后的提示中回答yes即可。Page 119Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断系统压力过高。系统压力过高。1 首先拧开排液阀，以纯水作流动相并设流速为5ml/min若压力超过10bar，应先更换排液阀的虑芯。2 若排液阀的虑芯没有堵塞，卸下色谱柱，然后用一两通代替色谱柱，以水作流动相设流速为1ml/min。通常压力不会超过20bar,否则系统可能有堵塞。3 若上述的压力超过20bar,我们可按照从后到前的原则，也就是说先卸下进流动池的连接管接头，开泵后，若压力正常则流动池堵塞若仍不正常可将这段管另一端也卸下，开泵后再观察压力情况。同样道理，我们就可以找到堵塞的地方。容易堵塞的地方：流动池入口管；自动进样器的针及针座；柱温箱容易堵塞的地方：流动池入口管；自动进样器的针及针座；柱温箱Page 120Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断系统压力过低，不稳定或没液流。系统压力过低，不稳定或没液流。首先拧开排液阀，设流速12ml/min后开泵，观察有无液流，若有再仔细观察液流是否有倒吸现象如不能确定可用量筒测量流速的准确性。如上述无液流，或流速不准多数为主动阀阀芯或主动阀故障，或泵有严重漏液。怎样是大致判断主动阀抑或其阀芯故障？可用以下方法：当泵运转时用手指轻捏主动主体，正常的主动阀能感到有节奏的脉动，如果没有，主动阀有问题。如果有则可以将主动阀阀芯取出进行超声波清洗，如仍有问题，可更换阀芯。注意，千万不注意，千万不要把整个主动阀放入超声波清洗这样会损坏主动阀。要把整个主动阀放入超声波清洗这样会损坏主动阀。若上述流速准确但拧紧排液阀后压力不稳定，请仔细检查有无漏液。(通常漏液地方：各接口包括色谱柱，泵，进样阀等)Page 121Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断保留时间不稳定。保留时间不稳定。首先观察保留时间是否有规律的变化，并同时观察压力是否稳定若压力稳定而保留时间呈有规律变化，多数是色谱柱未平衡好，特别是含有盐的流动相，需较长的时间去平衡。若压力稳定而保留时间无规律变化，请检查溶剂过滤头及真空腔是否有堵塞。再平衡色谱柱足够时间，如仍然不佳，可更换一色谱柱。若压力不稳定，请检查造成压力不稳定的因素，如：漏液，排液时间不足够，盐浓度过高导致盐析，主动阀比例阀内漏，等。Page 122Agilent 1100/1200 HPLC故障诊断峰面积重现性不好。峰面积重现性不好。首先观察压力是否