2022-2022学年高中生物课时作业4微生物的实验室培养新人教版选修.doc

课时作业4　微生物的实验室培养
1．某研究小组从有机废水中别离微生物用于废水处理。以下表达正确的选项是(　　)
A．培养基分装到培养皿后进行灭菌
B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D．培养过程中每隔一周观察一次
解析：在配制培养基过程中，通常先灭菌后倒平板，A错；转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线，B正确；接种后的培养皿应放入培养箱中进行培养，一般不需光照，C错；培养过程中应该每天或隔天定时观察，每隔一周观察一次时间太长，D错。
答案：B
2．在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是(　　)
A．作为碳源，为酵母菌提供能源物质
B．作为碳源，用于酵母菌合成代谢产物
C．作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸
D．作为氮源，用于酵母菌合成代谢产物
答案：C
3．要从多种细菌中别离某种细菌，培养基要用(　　)
A．固体培养基
B．液体培养基
C．加青霉素的培养基
D．参加高浓度食盐的培养基
解析：固体培养基主要用于微生物别离、鉴定等。液体培养基用于工业生产，参加青霉素的选择培养基能抑制细菌、放线菌的生长，从而别离得到酵母菌和霉菌，参加高浓度食盐可抑制多种细菌的生长，可别离得到金黄色葡萄球菌。此题没说明别离哪种细菌，故应用固体培养基。
答案：A
4．下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是(　　)

硝化细菌
乳酸菌
根瘤菌
衣藻
A
能源
NH3
乳酸
N2
光能
B
碳源
CO2
糖类等
糖类等
CO2
C
氮源
NH3
N2
N2
NO3－
D
代谢类型
自养需氧型
异养厌氧型
自养需氧型
自养需氧型
解析：此题综合考查了不同微生物的代谢类型及营养要求。从能源来看，乳酸菌需糖类等有机物供能；从氮源看，乳酸菌需要NH4＋、NO3－；从代谢类型看，根瘤菌为异养需氧型；从碳源看，硝化细菌与衣藻需CO2，乳酸菌和根瘤菌需要糖类等有机物。
答案：B
5．关于灭菌和消毒的不正确理解是(　　)
A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒和灭菌实质上是相同的
C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药物法
答案：B
6．对培养基、培养皿、接种环，实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是(　　)
①化学消毒　 ②灼烧灭菌　 ③干热灭菌　
④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌　 ⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥　　　　　 B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤
解析：培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌到达迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。
答案：A
7．以下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。以下操作方法正确的选项是(　　)
A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析：此题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。
答案：D
8．获得纯洁培养物的关键是(　　)
A．将用于微生物培养的器皿、接种用具进行灭菌
B．接种纯种细菌
C．适宜环境条件下培养
D．防止外来杂菌的入侵
解析：获得纯培养都是围绕防止外来杂菌污染进行的。可以从两方面进行：一是无菌操作，二是获得纯种，其中一最关键。
答案：D
9．下表培养基配方中，能作为选择培养基的是(　　)，能作为鉴别培养基的是(　　)，能作为固体培养基的是(　　)
原料
A
B
C
D
蛋白胨
10 g
10 g
10 g
10 g
乳糖
5 g
5g
5g
5g
蔗糖
5g
5g
5g
5g
K2HPO4
2 g
2g
2g
2g
伊红
0.4 g

美蓝
0.065 g

琼脂

20 g

NaCl

20 g
蒸馏水
1 000 mL
1 000 mL
1 000 mL
1 000 mL
解析：由表中内容看出，D组培养基中参加了较多的NaCl，培养基中参加某些化学物质可促进所需微生物的生长，抑制不需微生物的生长，因此应属选择培养基。A组培养基中参加了伊红和美蓝，可用以鉴定大肠杆菌，因此属鉴别培养基。而B组培养基中参加琼脂，能作为固体培养基。又从表中各数据看，所有物质均有严格的量的要求及种类的要求，因此配制培养基应遵循三大原那么，即“目的明确〞“营养均衡，有严格浓度配比〞且要“调整好pH〞。
答案：D A B
10．发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括(　　)
A．根据微生物对碳源需要的差异，使用不同碳源的培养基
B．根据微生物中缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子
C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中参加不同比例的核酸
D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中参加不同的抗生素
解析：由于不同的微生物对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求不同，可以根据微生物的生长需求来配制特殊的培养基以获得单一纯种，也可以根据其对抗生素的敏感性不同，参加不同的抗生素来获得单一纯种。
答案：C
11．现有两种固体培养基，其配制时所加的成分如下表：

成分
KHSO4
MgSO4·
7H2O
NaCl
CaSO4·
2H2O
CaCO3
葡萄
糖
纯淀粉
甲培
养基
含量
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
0.5%
0.5%
2%
乙培
养基
含量
0.02%
0.02%
0.02%
0.01%
0.5%
－
－
　用这两种培养基分别去别离土壤中的两种微生物，你认为它们(　　)
A．甲培养基适于别离自养型自生固氮菌；乙培养基适于别离异养型自生固氮菌
B．甲培养基适于别离酵母菌；乙培养基适于别离真菌
C．甲培养基适于别离异养型自生固氮菌；乙培养基适于别离自养型自生固氮菌
D．甲培养基适于别离异养型共生细菌；乙培养基适于别离异养型共生固氮菌
解析：根据所提供的甲、乙两种培养基的成分分析，两者之间的主要差异是：甲培养基有葡萄糖和淀粉作为有机碳源和能源，也有少量的无机碳源(CaCO3)；乙培养基无有机碳源和能源。两者之间的共同点是：都不含氮源。说明这两种培养基分别适于培养异养型自生固氮微生物和自养型自生固氮微生物。
答案：C
12．以下有关细菌培养的表达，正确的选项是(　　)
A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
B．在培养基中参加青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
解析：此题意在考查有关细菌培养的知识。菌落就是由单个细菌或同种细菌繁殖成的具有一定形态结构等特征的子细胞群体，所以单个菌落只含一种细菌；在培养基中参加青霉素可以抑制细菌的生长而促进真菌的生长；破伤风杆菌的异化代谢类型属于厌氧型，通入氧气会抑制其生长；半固体培养基中可以观察细菌的运动。
答案：D
13．(2022年高考·课标全国卷Ⅲ)答复以下与细菌培养相关的问题。
(1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨〞“葡萄糖〞或“NaNO3〞)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是______________________。硝化细菌在没有碳源的培养基上________(填“能够〞或“不能〞)生长，原因是__________________。
(2)用平板培养细菌时一般需要将平板________(填“倒置〞或“正置〞)。
(3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________________。
(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
解析：(1)细菌培养时常用牛肉膏蛋白胨培养基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素，蛋白胨能提供碳源、氮源、维生素，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO3不能为微生物提供碳源。不同细菌生长繁殖所需要的最适pH是不同的，应该根据培养细菌的不同来调节培养基的pH。硝化细菌是化能自养型细菌，可以空气中的CO2为碳源，因此在没有碳源的培养基上能够生长。(2)在平板培养基上培养细菌时，一般需将平板倒置，这样可以防止皿盖上的水珠落入培养基。(3)不同种类的细菌所形成的菌落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定的特征，不同种细菌在一定培养条件下表现出各自稳定的菌落特征，可以作为菌种鉴定的重要依据。(4)使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处理，以免污染环境。
答案：(1)蛋白胨　不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同　能够　硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源
(2)倒置
(3)在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征
(4)灭菌
14．下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表，据此答复：
成分
牛肉膏
蛋白胨
NaCl
H2O
含量
0.5 g
1 g
0.5 g
100 mL
(1)蛋白胨在培养基中的作用是
__________________________________________。
(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是________。
(3)表中各成分含量确定的原那么是________。
(4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是
_______________________________________________________
______________________________________________________。
(5)从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌污染的方法是_______________________________________________________
______________________________________________________。
(6)在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是
______________________________________________________。
解析：蛋白胨中有大量的蛋白质降解而成的多肽类等物质，因而在培养基中提供碳源、氮源和生长因子。微生物菌落的形成是在固体培养基上，所以此培养基还需加琼脂。营养成分含量必须依据所培养微生物的需要而定。配好后，必须先调pH，再分装，整个过程要严格无菌操作。
答案：(1)提供碳源、氮源、生长因子
(2)琼脂(凝固剂)
(3)依据所培养微生物对各营养成分的需要量
(4)调整pH
(5)高压蒸气灭菌、灼烧接种环、酒精擦洗灭菌、在火焰旁接种、棉塞塞试管口等
(6)扩大接种面积
15．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的别离等工作。答复以下问题：
(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取假设干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为____________。
(2)该小组采用平板划线法别离水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是
________________________________________________________________________。
(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一局部进行静置培养，另一局部进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
解析：(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取假设干灭菌后的空平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：
×M(×稀释倍数)
＝×100＝3.8×107/L。
(2)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是：通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到菌落。
(3)由题图可知B图为平板划线法接种的结果(菌落相对均匀分布)。
(4)震荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，促进好氧型微生物的生长；另外震荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。
答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格　3.8×107
(2)灼烧　将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
(3)B
(4)溶解氧　营养物质
16．(2022年高考·江苏卷)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据以下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中别离筛选酚降解高效菌株。请答复以下问题：
(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。
(2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以到达富集酚降解菌的目的。假设上图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与别离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加________。
(3)右图为连续划线法示意图，在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。
(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反响，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________。
管号
1
2
3
4
5
6
苯酚浓度(mg/ L)

1
如果废水为50 mg/ L 苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，那么需将残留液稀释__________(填序号：①5 　②10　 ③20)倍后，再进行比色。
解析：(1)富集培养基中蛋白胨、苯酚都是含C的有机物，可作为碳源。(2)欲富集酚降解菌，需随转接次数增加逐渐增加培养基中苯酚的含量；假设接种培养后平板上菌落过于密集，那么应进一步稀释后再进行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落计数与别离；平板培养基是固体培养基，除含有水、营养物质(碳源、氮源、无机盐等)外，还需添加琼脂作为凝固剂。(3)利用连续划线法接种时，最后的划线区域(③)中，菌体的密度较小，容易获得单菌落。(4)因系列浓度梯度中6号比色管中苯酚浓度为1 mg/L，故1～5号比色管中的苯酚浓度应分别为0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L；根据题意，废水为50 mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，要使稀释后的苯酚残留液浓度介于0～1 mg/L，需将残留液稀释20倍左右。
答案：(1)蛋白胨、苯酚　(2)增加　稀释涂布　凝固剂
(3)③　(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8　③
17．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。答复以下问题：
(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。
(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。
(3)为了筛选出高效菌株，可比拟单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。
(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以防止周围环境中微生物的污染。
解析：(1)欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其他碳源，这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基。(2)别离纯化菌种时，接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基外表形成单个的菌落，以便于纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)和高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌技术要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行，以防止周围微生物的污染。
答案：(1)原油　选择
(2)平板划线法　稀释涂布平板法
(3)强
(4)干热灭菌　高压蒸汽灭菌　火焰