活化血浆凝固时间对血小板输注疗效评价的研究.docx

活化血浆凝固时间对血小板输注疗效评价的研究
【摘要】 本研究探讨活化血浆凝固时间对评价血小板输注疗效的价值，用血小板聚集凝血因子分析仪检测了20例血液病患者血小板输注前后APCT的变化，并与血小板计数增加校正指数和实际血小板回收率进行了对比研究。结果表明： 输注1小时、24小时后的APCT均明显缩短，APCT由血小板输注前的(±)秒分别缩短为输注后1小时、24小时的(±)秒、秒,，而正常对照的APCT为(±)秒；按照CCI和PPR的判断标准，有2例为血小板输注无效，其输注1小时、24小时的CCI值分别为7415、2966和6913、4988，PPR值分别为%、% 和%、%。1例PPR均达血小板输注无效标准，而CCI值均显示血小板输注有效；2例PPR均达血小板输注无效标准，而输注1小时的CCI值表示为血小板输注有效，24小时的CCI值表示为血小板输注无效。结论： APCT可以反映血小板数量和质量的变化，也能较全面的评估血小板的输注疗效。
【关键词】 活化血浆凝固时间 血小板输注 血小板
Test of Activated Plasma Clotting Time to Assess Efficacy of Platelet Transfusion
Abstract The study was aimed to investigate the value of activated plasma clotting time (APCT) for estimating the efficacy of platelet transfusion therapy. There were twenty patients with hematological diseases, who received transfusion of platelet, involved in the test. APCT was determined before and after transfusion of these patients, then APCT was contrasted with corresponding CCI and PPR. The results showed that 1 hour and 24 hour APCTs were shortened obviously. APCT before transfusion was (±)seconds, but the 1 hour and 24 hour APCTs were shortened to (±) seconds and (±) seconds respectively (). According to the judging criteria of CCI and PPR (CCI and PPR values at 1 and 24 hours after transfusion are 7500, 5000 and 30%,20% respectively, the transfusion is invalid), two patients received invalid transfusion. Their 1 and 24 hour CCIs were 7415,2966 and 6913,4988 respectively. Their 1 and 24 hour PPRs were %,% and %,% respectively. One patient‘s PPR reached the standard of invalid transfusion, but his CCI showed a valid transfusion he received. Two patients‘ PPR reached the standard of invalid transfusion, but their 1 hour CCI reached the standard of valid transfusion, and their 24 hour CCI reached the standard of invalid transfusion. It is concluded that APCT reflects the variations of quantity and quality of platelet simultaneously, and can evaluate precisely the efficacy of platelet transfusion.
Key word activated plasma clotting time; platelet transfusion; platelet
J Exp Hematol 2007; 15(1):108-111
血小板输血主要是指针对血小板减少或血小板功能异常的患者进行的血小板输注替代性治疗，目的在于止血或预防出血。评价血小板输注疗效的常用指标为血小板计数增加校正指数和实际血小板回收率。这两个指标由于计算较繁琐，并且需反复抽取病人静脉 血进行血小板计数，故极不适于临床应用。血小板止血作用的大小不仅与血小板数量有关，还与血小板的功能密切相关，故寻找一种简便可行的血小板功能试验来作为血小板输注疗效的判断指标十分必要。活化血浆凝固时间是一种新型的血小板功能试验，它反映了血小板的数量和质量的变化［1］，此试验操作简便、快速，非常适合于临床应用。我们检测了20例血液病患者血小板输注前后APCT的变化，并与CCI和PPR进行了对比研究，以评价APCT对判断血小板输注疗效的效果。
研究对象
2006年1月-2006年6月，在东南大学附属中大医院血液科住院的20例输注血小板的患者，男9例，女11例，年龄从15-72岁。20例中骨髓增生异常综合症5例，白血病(M1-M5)化疗后15例。 20例患者均有皮肤、黏膜散在出血点或鼻衄或牙龈出血症状。每次输注1个治疗量10 U的单采血小板，在血小板输注前和输注后1小时、24小时分别抽取患者静脉血，以%的枸橼酸钠抗凝后，测定血小板数和活化血浆凝固时间。同时检测100例单采血小板献血者的APCT，作为正常对照。
主要仪器与试剂
血球计数仪为Sysmex公司产品(型号KX21)。LGPABER血小板聚集凝血因子分析仪为北京世帝仪器公司产品。阳离子没食子酸丙酯溶液为美国ACS公司产品。 mol/L CaCl2溶液自配。
血小板计数增加校正指数的计算［2］
计算公式
CCI = ［PI×W×/N (1011)
×100×F］ ×100%]
式中W=患者体重。 F=矫正系数，脾正常者为,脾大者为,无脾者为。
实际血小板回收率的计算［2］
计算公式
PPR = ［ PI×S (m2)/N (1011)］ ×100%
式中PI=输注后Plt计数-输注前Plt计数。N=输入血小板的绝对数量。S=×身高(cm)+×体重(kg)
　　活化血浆凝固时间测定［3］
将ACD抗凝血在室温或22℃条件下400×g离心8分钟，分离出富含血小板血浆。在100 μl PRP中加入终浓度为150 μmol/L的CPG，37℃预温3分钟后，加入100 μl的CaCl2溶液，计时，测定血浆凝固时间。
统计学处理
用SPSS 统计软件进行结果统计分析，实验数据用均数±标准差表示，两样本均数比较采用配对t检验。
结 果
20例病人输注前的血小板计数为×109/L，且均有皮肤、黏膜散在出血点或鼻衄或牙龈出血症状。在血小板输注1小时、24小时后的血小板计数均有不同程度的提高，出血症状消失， APCT均明显缩短，APCT由血小板输注前的(±)秒分别缩短为输注后1小时、24小时的(±)秒、秒，正常对照的APCT为(±)秒；按照CCI判断血小板输注无效的标准(输注后1小时CCI7500,24小时CCI5000)，有2例为血小板输注无效, 输注后1小时、24小时的CCI值分别为7415、2966和6913、4988，此2例的PPR值也同样符合血小板输注无效的判断标准(输注后1小时PPR30%,24小时PPR20%)，其输注1小时、24小时的PPR值分别为%、% 和%、%。1例PPR均达血小板输注无效标准，而CCI值均显示血小板输注有效；2例PPR均达血小板输注无效标准，而输注后1小时的CCI值表示为血小板输注有效，24小时的CCI值表示为血小板输注无效。结果见附表。
讨 论
目前，研究如何延长采集血小板的保存时间，如何有效检测血小板的功能，以及血小板输注疗效的判断，已成为血小板研究的热点［4，5］。现在临床上，血小板输注疗效主要是通过观察病人临床出血表现是否得到改善、血小板计数升高的情况来判断。用于判断血小板输注疗效的指标主要有血小板计数增加校正指数和实际血小板回收率。以PPR为判断指标，若输注后1小时的PPR30%或输注后24小时的PPR20%，通常考虑为血小板输注无效；以CCI为判断指标，若输注后1小时的CCI7500或输注后24小时的CCI5 000，应考虑血小板输注无效。对于治疗性血小板输注，主要以血小板输注后出血表现得到改善和输注后1小时的血小板计数升高为参考指标，由于血小板参与了止血而被消耗，使输注后24小时后的血小板计数可能升高并不明显，在我们总结的临床资料中就有2例出血病人输注血小板后出血得到了明显改善，输注后1小时的血小板计数明显升高，而输注后24小时的血小板计数升高并不明显，其CCI和PPR值均为血小板输注无效的标准。对于预防性血小板输注的疗效主要观察输注后的血小板计数升高的情况，测定血小板输注后1小时和24小时的血小板计数均十分重要。
CCI和PPR均是观察血小板升高程度的指标，这2项指标是通过检测患者输注血小板1小时或24小时后的血小板计数并经过计算获得。对于血小板输注疗效的判断，两者有时并不一致，甚至会产生相悖的结果。由于CCI是根据体表面进行计算，减少了个体差异的影响，因此CCI对输注疗效的评估比PPR更准确。
输注后血小板数量明显增高与血小板输注效果有直接关系，但单凭血小板数量的变化来评价血小板输注疗效是不全面的。血小板在受者体内发挥止血作用的强弱不但与输注血小板的数量有关，更与其质量，即功能密切相关。判断血小板的输注疗效不能只看血小板数量的增高，更重要是要看输注的血小板在病人体内是否能发挥止血功能，输注的量是否已达到了止血和预防出血的效果。对于治疗性血小板输注，可通过观察病人出血的改善来推断输注血小板的质量，但这需要一定时间才能做出判断。对于预防性血小板输注的患者，以血小板的数量就不能很好的判断输注的血小板在受者体内的止血功能如何。
应用血小板止血效能试验能较全面评判血小板的输注疗效，Salama等［6］应用血小板功能分析仪评价了血小板输注疗效，并与CCI进行了比较。结果表明PFA试验与血小板输注疗效明显相关，而CCI与血小板输注疗效的相关性较差。活化血浆凝固时间能较全面的反应病人血小板数量、功能及凝血因子水平的变化。APCT与活化的部分凝血活酶时间不同，APTT是把接触活化剂和磷脂混合物加入到乏血小板血浆中，经孵育后，由接触活化剂活化凝血因子，磷脂提供凝血催化表面，加入钙离子引起凝血的发生，血浆的凝固时间即为APTT，APTT只反映凝血因子水平的变化； 而APCT是在富含血小板血浆中加入接触活化剂，加入的接触活化剂不但激活凝血因子，同时激活血小板释放磷脂丝氨酸，在钙离子的存在下起动凝血过程，当血小板缺乏或功能不良时会引起APCT延长。我们的实验结果表明，APCT能较好地反映血小板输注后的疗效。
【参考文献】
1Schwartz KA, Schwartz DE, Pittsley RA, et al. A new method for measuring inhibition of platelet function by nonsteroidal antiinflammatory drugs. J Lab Clin Med, 2002;139:227-233
2高峰主编. 输血与输血技术. 北京：人民卫生出版社, 2003:146-150
3Xiao HY, Matsubayashi H, Bonderman DP, et al. Generation of annexin Vpositive platelets and shedding of microparticles with sti mulusdependent procoagulant activity during storage of platelets at 4℃. Transfusion, 2000; 40:420-427
4黄成垠，唐荣才，蔡莉等. 以海藻糖为添加剂冷藏保存血小板悬液的研究. 中国实验血液学杂志，2005；13：904-906
5盛大祥，黄成垠，史广耀等. CPG血小板聚集试验在单采血小板捐献者筛查中的应用. 中国实验血液学杂志，2005；13：1099-1102
6Kretschmer V, Karger R. Platelet function testing to assess effectiveness of platelet transfusion therapy. Transfus Apheresis Sci, 2004; 31:165-166［］μβαγ ±SD