不规则抗体与输血安全.ppt

广广州州血血液液中中心心(zhngxn)输输血血研研究究所所 田田兆兆嵩嵩输血前检验应重视的几个输血前检验应重视的几个(j)(j)问题问题1第一页，共六十九页。n输血前要做三项检查：输血前要做三项检查：血型鉴定；血型鉴定；抗体筛选；抗体筛选；交叉配血试验。交叉配血试验。目的有二：目的有二：使输入的血液成分使输入的血液成分(chng fn)有效存活；有效存活；不会引起受血者的红细胞发生破坏。不会引起受血者的红细胞发生破坏。三者有互补三者有互补(h b)(h b)作用，缺一不可。作用，缺一不可。2第二页，共六十九页。n在在检检验验医医学学中中，没没有有几几项项检检验验像像输输血血前前检检验验一一样样，临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。临床医生几乎完全依赖其结果的正确性。输输血血前前检检验验的的每每一一个个环环节节均均可可能能发发生生差差错错，标标本本搞搞错错最为常见。最为常见。给患者输入不相容的血液成分导致严重给患者输入不相容的血液成分导致严重(ynzhng)不良后果：不良后果：急急性性溶溶血血反反应应：多多由由ABO血血型型不不相相容容输输血血引引起起，人人为为差差错是其主要原因；错是其主要原因；迟迟发发性性溶溶血血反反应应：多多由由ABO以以外外血血型型不不相相容容输输血血所所致致，输血前检验不规范是其主要原因。输血前检验不规范是其主要原因。3第三页，共六十九页。安安全全输输血血从从源源头头上上抓抓起起就就应应重重视视如如何何获获取取正确的血液正确的血液(xuy)标本；标本；一一旦旦受受血血者者的的血血标标本本张张冠冠李李戴戴，安安全全输输血血的所有防范措施都将化为泡影。的所有防范措施都将化为泡影。减减少少这这种种错错误误的的有有效效方方法法是是给给每每一一位位住住院院患者手腕上系上一个腕带（腕环）；患者手腕上系上一个腕带（腕环）；各各种种各各样样的的塑塑料料腕腕带带在在国国外外已已广广泛泛使使用用，国内已有不少医院开始使用。国内已有不少医院开始使用。一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本4第四页，共六十九页。应应制制定定严严格格的的“血血标标本本的的采采集集与与送送检检管管理理制度制度”，并做到医、护、技人人皆知：，并做到医、护、技人人皆知：患患者者在在采采集集血血标标本本后后又又转转科科或或转转床床，需需要要输输血血(sh xu)时时应应重重新新采采集集血血标标本本（有有腕腕带带可可例例外）；外）；未未配配戴戴腕腕带带而而又又不不知知血血型型的的患患者者，应应遵遵循循两次采集血标本的规定；两次采集血标本的规定；一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本5第五页，共六十九页。检检验验科科做做血血常常规规时时做做正正定定型型，输输血血时时由由血血库复查正定型，加做反定型；库复查正定型，加做反定型；或或者者备备血血时时由由血血库库做做血血型型(xuxng)鉴鉴定定，输输血血时时重重新新采采集集血血标标本本做做血血型型(xuxng)鉴鉴定定及及交交叉叉配配血试验。血试验。如如果果两两次次血血标标本本血血型型不不一一致致，或或血血标标本本血血型型与与申申请请单单上上的的血血型型不不一一致致，则则应应重重新新采采集集血标本。血标本。一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本6第六页，共六十九页。采采集集血血标标时时必必须须认认真真核核对对受受血血者者身身份份(shn fen)，只只有有申申请请单单上上的的资资料料与与患患者者腕腕带带的的资资料料完完全一致才能采集血标本。全一致才能采集血标本。使使用用条条形形码码的的医医院院，应应在在采采血血后后将将标标有有患患者者信信息息的的条条形形码码标标签签贴贴在在试试管管上上并并与与腕腕带带资资料核对。料核对。一、重视血液一、重视血液(xuy)(xuy)标本标本7第七页，共六十九页。采采集集血血标标本本时时应应要要求求(yoqi)患患者者回回答答自自己己的的姓姓名名，意意识不清应通过亲属确认患者身份。识不清应通过亲属确认患者身份。不得使用来源不明或无人对其来源负责的血标本。不得使用来源不明或无人对其来源负责的血标本。血血标标本本采采集集后后必必须须在在离离开开床床边边之之前前在在标标本本上上标标明明患患者者姓姓名名、住住院院号号及及标标本本采采集集日日期期（国国外外要要求求标标明明出生日期）。出生日期）。专专用用试试管管上上有有两两个个相相同同的的号号码码条条，在在采采集集标标本本后后立立即即将将另一个号码条贴在输血申请单上。另一个号码条贴在输血申请单上。一、重视血液一、重视血液(xuy)(xuy)标本标本8第八页，共六十九页。一一位位医医护护人人员员不不得得同同时时采采集集两两位位或或两两位位以以上上患患者者的的血血标标本本，以以避避免免将将血血样样注注入入到到错错误误的试管中。的试管中。最最好好由由采采血血者者和和患患者者在在申申请请单单上上签签名名(qin mng)，共同确认血标本的正确性。，共同确认血标本的正确性。一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本9第九页，共六十九页。贴贴有有标标签签的的血血标标本本连连同同输输血血申申请请单单经经核核对对(h du)后后由由医医护护人人员员送送输输血血科科（血血库库），双双方方核核对对(h du)后后签签名名确确认认。不不得得由由非非医医护护人人员员送送标标本本（护护工工送送标标本本必必须须经经过过培培训训、考考核核并并授授权）。权）。输输血血科科（血血库库）工工作作人人员员在在检检验验前前必必须须确确认认试试管管上上的的标标签签与与申申请请单单上上的的资资料料一一致致，如如有有疑疑问问，应应重重新新采采集集血血标标本本。不不得得电电话话询询问问后就擅自修改错误的标签及申请单。后就擅自修改错误的标签及申请单。一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本10第十页，共六十九页。血标本要做到八不收：血标本要做到八不收：血标本无标签血标本无标签(bioqin)或填写不清不收；或填写不清不收；血标本与申请单所填项目不符不收；血标本与申请单所填项目不符不收；血标本量少于血标本量少于3ml不收；不收；血血标标本本被被稀稀释释不不收收（如如从从输输液液管管获获取取血血标标本本，应应以以生生理理盐盐水水冲冲注注，并并将将首首先先抽抽取取的的5ml血血液液弃去）；弃去）；一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本11第十一页，共六十九页。血血标标本本溶溶血血不不收收（溶溶血血性性疾疾病病例例外外，为为防防止止(fngzh)对对溶溶血血结结果果误误判判为为阴阴性性，建建议议反反定定型型及及交交叉叉配配血血的的细细胞胞中中加加入入EDTA，以以阻阻断断补补体体激激活活途径）；途径）；用用肝肝素素治治疗疗者者的的血血标标本本未未用用鱼鱼精精蛋蛋白白对对抗抗使使之凝结不收；之凝结不收；一、重视血液一、重视血液(xuy)(xuy)标本标本12第十二页，共六十九页。非医护人员送标本不收；非医护人员送标本不收；用用右右旋旋糖糖酐酐等等大大分分子子物物质质治治疗疗后后采采集集(cij)的的血血标标本本未未作作标标记记说说明明不不收收（如如已已标标记记说说明明应应将将红红细胞洗涤）。细胞洗涤）。一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本13第十三页，共六十九页。献献血血者者的的血血标标本本必必须须从从与与血血袋袋相相连连的的塑塑料料管中获得。管中获得。血血清清和和血血浆浆原原则则上上均均可可用用于于输输血血前前检检验验，但但血血清清更更好好。原原因因是是血血浆浆中中有有时时可可出出现现细细小小纤纤维维蛋蛋白白(xin wi dn bi)包包裹裹红红细细胞胞的的凝凝块块，与与凝凝集反应不易区分。集反应不易区分。一、重视血液一、重视血液(xuy)(xuy)标本标本14第十四页，共六十九页。国国外外认认为为必必须须使使用用不不抗抗凝凝或或者者EDTA抗抗凝凝的的血血标标本本。如如果果用用血血浆浆标标本本，必必须须通通过过检检测测弱弱抗抗体体来来评评估估其其有有效效性性，确确保保临临床床有有意意义义的的抗抗体不被漏检。体不被漏检。配配血血用用的的血血标标本本必必须须是是输输血血(sh xu)前前3天天之之内内的的（我我国国规规定定），或或血血标标本本能能代代表表患患者者当当前前免疫学状态的。免疫学状态的。一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本15第十五页，共六十九页。国国外外对对有有输输血血(sh xu)史史患患者者的的标标本本采采集集要要求求（见表（见表1）表表1 标本采集要求标本采集要求一、重视血液一、重视血液(xuy)(xuy)标本标本前次输血时间采集血标本时间314天输血前24h内1528天输血前72h内29天3个月输血前1周内16第十六页，共六十九页。当当患患者者反反复复输输血血，不不需需要要每每天天采采集集血血标标本本，但但要要每每隔隔3天天进进行行一一次次抗抗体体筛筛选选试试验验，随随时时了解是否有新的不规则抗体产生。了解是否有新的不规则抗体产生。不不用用溶溶血血的的血血标标本本，因因为为(yn wi)血血清清中中的的游游离离血红蛋白可蒙蔽抗体引发的溶血现象。血红蛋白可蒙蔽抗体引发的溶血现象。一、重视血液一、重视血液(xuy)(xuy)标本标本17第十七页，共六十九页。标标本本保保存存不不当当会会溶溶血血、细细菌菌污污染染、补补体体(bt)失失活以及不规则抗体效价降低。保存要求见表活以及不规则抗体效价降低。保存要求见表2表表2 标本保存要求标本保存要求一、重视一、重视(zhngsh)(zhngsh)血液标本血液标本18254-30EDTA抗凝全血48h7d不允许血清或血浆不允许7d6个月18第十八页，共六十九页。常常规规ABO血血型型鉴鉴定定应应包包括括正正反反定定型型，二二者者起起到到互互相相验验证证和和质质控控的的作作用用。我我国国已已规规定定常常规规血血型型鉴鉴定定还还应应包包括括Rh（D）定定型型。反反定定型型要用试管法，不用玻片法。要用试管法，不用玻片法。ABO正正定定型型采采用用单单克克隆隆抗抗-A、抗抗-B血血型型试试剂剂(shj)，抗抗-B试试剂剂(shj)不不应应该该与与获获得得性性B抗抗原原反应。反应。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型19第十九页，共六十九页。采采用用A和和B试试剂剂细细胞胞进进行行反反定定型型检检测测。新新生生儿儿和和以以前前做做过过反反定定型型可可省省略略。依依据据记记录录而而省省略略反反定定型型存存在在一一定定风风险险，因因为为第第一一次次标标本本有有可能采错。可能采错。只只有有(zhyu)正正反反定定型型结结果果相相符符才才能能正正确确判判定定ABO血血型型。单单纯纯正正定定型型O型型不不可可靠靠，单单纯纯反反定型定型AB型也不可靠。型也不可靠。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型20第二十页，共六十九页。正反定型不一致正反定型不一致(yzh)，需进一步鉴定：，需进一步鉴定：在在正正定定型型试试剂剂中中增增加加抗抗-A1、抗抗-AB及及抗抗-H：抗抗-AB用用来来确确认认弱弱A和和弱弱B抗抗原原（这这种种抗抗-A和和抗抗-B的的混混合合物物与与弱弱A和和弱弱B亲亲和和力力强强，发生强烈反应）；发生强烈反应）；二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型21第二十一页，共六十九页。抗抗-A1用用来来鉴鉴定定(jindng)A亚亚型型（A型型中中A1和和A2这这两两种种亚亚型型占占99.99%，A1约约占占80%，A2约约占占20%，抗，抗-A1与与A2不反应）；不反应）；抗抗-H用用于于鉴鉴定定亚亚型型及及孟孟买买型型（亚亚型型细细胞胞上上有有较较多多的的H抗抗原原，与与抗抗-H反反应应较较强强，而而孟孟买型红细胞上无买型红细胞上无H抗原）。抗原）。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型22第二十二页，共六十九页。在血型鉴定中有若干因素可导致错误结果：在血型鉴定中有若干因素可导致错误结果：人为因素有：人为因素有：试剂不标准、失效或污染；试剂不标准、失效或污染；操作中加错样本或试剂；操作中加错样本或试剂；离心速度不足或过度；离心速度不足或过度；细胞与血清细胞与血清(xuqng)比例不当，结果判断错误等；比例不当，结果判断错误等；人工判读结果有可能发生书写错误。人工判读结果有可能发生书写错误。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型23第二十三页，共六十九页。客观因素有：客观因素有：因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱；因某种疾病（如白血病）导致抗原减弱；红红细细胞胞发发生生多多凝凝集集现现象象或或产产生生(chnshng)类类B物物质质（如细菌感染）；（如细菌感染）；抗抗体体效效价价低低（如如婴婴幼幼儿儿、老老年年人人、低低免免疫疫球球蛋白血症等）；蛋白血症等）；血清中有意外抗体，某些药物干扰等。血清中有意外抗体，某些药物干扰等。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型24第二十四页，共六十九页。n反反定定型型对对ABO亚亚型型的的发发现现特特别别有有帮帮助助。原原因因是是亚亚型型患患者者红红细细胞胞上上A或或B抗抗原原很很弱弱，通通过过正正反反定定型型易易于于发发现现二二者者结结果果不不一一致，从而引起警惕。致，从而引起警惕。n出现异常结果的处理办法出现异常结果的处理办法(bnf)：正反定型不一致应重新检测；正反定型不一致应重新检测；重重新新检检测测时时应应使使用用洗洗涤涤红红细细胞胞。为为预预防防差差错错事事故故发发生生，建建议议使使用用原原始始标标本本重重新新配配制制红红细细胞胞悬悬液液而而不不用用以以前前配配好好的红细胞，同时应做自身对照。的红细胞，同时应做自身对照。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型25第二十五页，共六十九页。如如果果重重新新检检测测结结果果仍仍然然异异常常，请请资资深深工工作作人人员协助。员协助。当当检检测测结结果果与与以以往往记记录录不不一一致致时时，应应重重新新采采集血标本集血标本(biobn)再一次检测。再一次检测。如如果果一一时时无无法法找找到到正正反反定定型型结结果果不不一一致致的的原原因因，患患者者又又需需紧紧急急输输血血，此此时时可可输输注注Rh（D）同型的同型的O型红细胞（正反定型相符）。型红细胞（正反定型相符）。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型26第二十六页，共六十九页。nRh（D）血型鉴定原则）血型鉴定原则(yunz)：对受血者常规只测对受血者常规只测Rh（D）抗原；）抗原；对对献献血血者者不不仅仅要要检检测测Rh（D）抗抗原原，在在初初筛筛为阴性时必须进一步确定是否为弱为阴性时必须进一步确定是否为弱D；弱弱D针针对对受受血血者者而而言言为为Rh（D）阴阴性性，而而对对献血者而言则为献血者而言则为Rh（D）阳性；）阳性；二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型27第二十七页，共六十九页。当当Rh（D）定定型型结结果果有有疑疑问问时时，在在确确认认之之前前应当作阴性对待；应当作阴性对待；目目前前各各种种单单克克隆隆抗抗-D检检测测部部分分D或或弱弱D时时差差异异较较大大，建建议议使使用用两两种种以以上上不不同同厂厂家家(chn ji)的的试试剂有助于弱剂有助于弱D的定型。的定型。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型28第二十八页，共六十九页。n紧紧急急情情况况下下血血型型鉴鉴定定时时，必必须须做做正正定定型型及及阴阴阳性对照阳性对照(duzho)（见表（见表3），或者正反定型。），或者正反定型。表表3 阴性阴性/阳性对照表阳性对照表二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型试剂试剂阳性阳性对对照照细细胞胞阴性阴性对对照照细细胞胞抗抗-AAB抗抗-BBA抗抗-DD阳性阳性D阴性阴性29第二十九页，共六十九页。n当当患患者者(hunzh)体体内内含含有有高高效效价价的的冷冷自自身身抗抗体体或或冷冷凝凝集集素素时时。采采用用温温的的盐盐水水洗洗涤涤细细胞胞有有助助于于血血型鉴定。型鉴定。n日日常常工工作作中中需需要要定定期期做做阳阳性性/阴阴性性对对照照，使使用用自自动动化化检检测测设设备备时时，应应在在常常规规检检测测中中加加入入对对照照标标本本；采采用用手手工工操操作作时时应应每每一一批批次次做做阳阳性性/阴性对照。阴性对照。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型30第三十页，共六十九页。n在在可可能能的的情情况况下下，最最好好每每天天在在使使用用定定型型试试剂剂前作阳性前作阳性/阴性对照，以检测其活性。阴性对照，以检测其活性。n在在观观察察定定型型结结果果时时，既既要要观观察察有有无无(yu w)凝凝集集，也也要要观观察察凝凝集集强强度度，这这有有助助于于A、B亚亚型型、类类B等的发现。等的发现。二、坚持二、坚持(jinch)正反定型正反定型31第三十一页，共六十九页。n对对受受血血者者作作抗抗体体筛筛选选的的目目的的是是检检出出有有临临床床意意义义的的抗抗体体，并并可可在在配配血血前前有有足足够够的的时时间间来来选选择择缺缺乏乏相相应应抗抗原原的的相相配配合合的的血血液液(xuy)，避避免免盲盲目目配血。配血。n方方法法是是用用受受检检者者血血清清与与试试剂剂红红细细胞胞起起反反应应，以发现在以发现在37有临床意义的抗体。有临床意义的抗体。三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选32第三十二页，共六十九页。n抗抗体体筛筛选选试试验验用用的的筛筛选选细细胞胞(xbo)(xbo)通通常常以以2 23 3个个单单人人份份的的O O型型红红细细胞胞(xbo)(xbo)组组成成一一套套筛筛选选细细胞胞(xbo)(xbo)试剂。试剂。n抗抗体体筛筛选选用用试试剂剂红红细细胞胞必必须须含含有有1818种种抗抗原原，所所表表达达的的抗抗原原以以纯纯合合子子基基因因所所表表达达的的抗抗原原为为佳佳，随机获得的随机获得的O O型红细胞易造成抗体漏检。型红细胞易造成抗体漏检。三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选33第三十三页，共六十九页。n抗抗体体筛筛选选试试验验的的方方法法很很多多，国国外外以以间间接接抗抗球球蛋蛋白白法法为为金金标标准准，国国内内中中小小医医院院多多采采用用(ciyng)(ciyng)凝凝聚胺法，大医院多采用聚胺法，大医院多采用(ciyng)(ciyng)微柱凝胶技术。微柱凝胶技术。n微微柱柱凝凝胶胶法法是是简简单单、有有效效检检测测不不规规则则抗抗体体的的方法，但无法排除无临床意义抗体的干扰。方法，但无法排除无临床意义抗体的干扰。n抗抗体体筛筛选选用用的的红红细细胞胞一一定定要要保保存存在在44环环境境中，以防红细胞上抗原丢失。中，以防红细胞上抗原丢失。三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选34第三十四页，共六十九页。n抗抗体体筛筛选选试试验验并并非非能能检检出出所所有有有有临临床床意意义义的的抗体。原因有二：抗体。原因有二：一是低频抗原的抗体可能被忽略；一是低频抗原的抗体可能被忽略；二二是是以以往往所所产产生生的的抗抗体体已已降降至至难难以以检检出出的的水水平。平。n以往的抗体鉴定记录以往的抗体鉴定记录(jl)(jl)有重要参考价值。有重要参考价值。三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选35第三十五页，共六十九页。n国国外外对对所所有有受受血血者者常常规规作作抗抗体体筛筛选选试试验验，并并认认为为抗抗体体筛筛选选是是检检测测不不规规则则抗抗体体最最可可靠靠、最最敏敏感的方法。感的方法。n我我国国规规定定凡凡遇遇下下列列情情况况之之一一必必须须做做抗抗体体筛筛选选试验：试验：交叉配血不合交叉配血不合(bh)(bh)时；时；对对有有输输血血史史、妊妊娠娠史史或或短短期期内内需需要要接接受受多多次次输血者。输血者。三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选36第三十六页，共六十九页。n如如抗抗体体筛筛选选试试验验阳阳性性，缺缺乏乏谱谱细细胞胞鉴鉴定定其其特特异异性时，可送有条件的单位鉴定。性时，可送有条件的单位鉴定。n抗体鉴定试验包括：抗体鉴定试验包括：自自身身(zshn)(zshn)细细胞胞检检查查：确确定定患患者者血血清清内内是是否否有有自自身身(zshn)(zshn)抗体或自身抗体或自身(zshn)(zshn)抗体与同种抗体并存；抗体与同种抗体并存；三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选37第三十七页，共六十九页。使使用用试试剂剂谱谱细细胞胞：谱谱细细胞胞一一般般是是由由8 81616单单人人份份的的已已知知血血型型表表型型的的O O型型红红细细胞胞配配套套组组成成，具具有有(jyu)(jyu)各种不同的抗原成分；各种不同的抗原成分；根根据据谱谱细细胞胞的的反反应应格格局局一一般般可可以以鉴鉴定定常常见见的的抗抗体。体。n国国外外认认为为采采用用一一组组谱谱细细胞胞进进行行抗抗体体鉴鉴定定有有一一定定的的局局限限性性，有有可可能能漏漏检检常常见见的的组组合合抗抗体体。采采用用两组谱细胞可以提高检出组合抗体的能力。两组谱细胞可以提高检出组合抗体的能力。三、做好抗体三、做好抗体(kngt)筛选筛选38第三十八页，共六十九页。n输输血血(sh(sh xu)xu)前前必必须须严严格格交交叉叉配配血血，这这是是防防止止输输血血(sh(sh xu)xu)前前检检验验程程序序中中发发生生差差错错的的最最后后一一道道“安安全岗全岗”。n所所谓谓“严严格格”是是指指所所采采用用的的方方法法必必须须能能检检出出ABOABO不不相相容容及及ABOABO系系统统之之外外的的有有临临床床意意义义的的抗抗体体（IgGIgG抗体）。抗体）。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血39第三十九页，共六十九页。n交叉配血的方法有：交叉配血的方法有：主侧交叉：由患者血清和供者红细胞组成；主侧交叉：由患者血清和供者红细胞组成；次次侧侧交交叉叉：由由患患者者红红细细胞胞和和供供者者血血清清（浆浆）组组成成（由由于于我我国国尚尚未未对对供供者者进进行行抗抗体体筛筛选选，故故次侧交叉是有必要的，尤其是输全血时）；次侧交叉是有必要的，尤其是输全血时）；自自身身对对照照：由由患患者者自自身身血血清清和和患患者者自自身身红红细细胞胞组组成成（自自身身对对照照有有助助于于分分析析解解释释交交叉叉配配血血试试验验(shyn)(shyn)中出现的阳性结果）。中出现的阳性结果）。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血40第四十页，共六十九页。n交交叉叉配配血血的的方方法法有有盐盐水水法法、酶酶法法、抗抗球球蛋蛋白白法、凝聚胺法等，各有优缺点：法、凝聚胺法等，各有优缺点：盐水法：简便、快捷、价廉，但有局限性：盐水法：简便、快捷、价廉，但有局限性：盐盐水水法法只只能能检检出出ABOABO、P P、LewisLewis、MNMN等等系系统统的的抗抗体体，此此类类抗抗体体属属天天然然抗抗体体，属属IgMIgM球球蛋蛋白白。IgMIgM是是五五聚聚体体，分分子子(fnz)(fnz)量量大大，分分子子(fnz)(fnz)长长度度长长，能在盐水中出现可见的凝集反应；能在盐水中出现可见的凝集反应；四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血41第四十一页，共六十九页。盐盐水水法法不不能能检检出出RhRh、KellKell、KiddKidd、DuffyDuffy等等系系统统的的抗抗体体，此此类类抗抗体体由由免免疫疫(miny)(miny)产产生生，属属IgGIgG球球蛋蛋白白。IgGIgG是是单单聚聚体体，分分子子量量小小，分分子子长长度短，不能在盐水中起凝集反应。度短，不能在盐水中起凝集反应。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血42第四十二页，共六十九页。交交叉叉配配血血不不能能只只用用盐盐水水法法，还还要要选选用用能能有有效效检出检出IgGIgG抗体的方法，这些方法有：抗体的方法，这些方法有：酶酶法法：对对RhRh系系统统较较为为敏敏感感，但但会会改改变变某某些些血血型型系系统统的的抗抗原原构构型型，加加之之(ji(ji zh)zh)不不易易保保存存，应应用用受限；受限；抗抗球球蛋蛋白白法法是是检检测测IgGIgG抗抗体体最最可可靠靠的的方方法法，但操作繁琐。但操作繁琐。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血43第四十三页，共六十九页。凝凝聚聚胺胺法法对对KellKell系系统统之之外外的的大大多多数数血血型型系系统统敏感度高，且操作简便敏感度高，且操作简便(jinbin)(jinbin)，快速。，快速。微微柱柱凝凝胶胶试试验验（卡卡式式配配血血）灵灵敏敏度度高高，特特异异性性强强，结结果果直直观观，能能自自动动化化操操作作，还还能能保保存存，缺缺点点是是价价格格昂昂贵贵、耗耗时时长长、可可出出现现假假阳阳性性，有有条件的医院可采用。条件的医院可采用。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血44第四十四页，共六十九页。欧欧美美国国家家常常用用抗抗体体球球蛋蛋白白法法或或微微柱柱凝凝胶胶法法，因因为为白白种种人人中中约约有有9%9%是是KellKell（K K）阳阳性性，而而凝凝聚胺对聚胺对KellKell系统不敏感。系统不敏感。我我国国中中小小医医院院适适合合用用凝凝聚聚胺胺法法，因因为为凝凝聚聚胺胺对对RhRh系系统统特特别别(tbi)(tbi)敏敏感感，在在我我国国以以RhRh系系统统引引起起的的迟迟发发性性溶溶血血性性输输血血反反应应最最为为常常见见，而而汉汉族族人人几乎几乎100%100%为为K K抗原阴性，通常不考虑抗抗原阴性，通常不考虑抗-K-K。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血45第四十五页，共六十九页。n凝聚胺试验原理凝聚胺试验原理凝凝聚聚胺胺（PolybrenePolybrene）是是一一种种阳阳离离子子聚聚合合物物，溶溶解解后后能能产产生生很很多多正正电电荷荷，可可中中和和红红细细胞胞表表面面(biomin)(biomin)负负电电荷荷，引引起起红红细细胞胞非非特特异异性性凝凝聚聚，这这种凝聚是可逆的；种凝聚是可逆的；如如果果是是抗抗体体致致敏敏的的红红细细胞胞在在凝凝聚聚胺胺作作用用下下发发生凝集，这种凝集是不可逆的；生凝集，这种凝集是不可逆的；四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血46第四十六页，共六十九页。在在凝凝聚聚胺胺试试验验中中，首首先先让让红红细细胞胞和和血血清清在在低低离离子子介介质质中中孵孵育育，促促进进抗抗体体与与红红细细胞胞抗抗原原结结合合，然然后后加加入入凝凝聚聚胺胺使使红红细细胞胞凝凝聚聚，再再加加入入枸枸橼橼酸酸钠钠重重悬悬液液（枸枸橼橼酸酸根根带带负负电电荷荷）中中和和凝凝聚聚胺胺正正电电荷荷，恢恢复复红红细细胞胞表表面面(biomin)(biomin)的的负负电荷；电荷；重重悬悬后后如如果果是是非非特特异异性性凝凝聚聚，则则由由于于红红细细胞胞表表面面负负电电荷荷的的排排斥斥作作用用，红红细细胞胞散散开开，结结果果为为阴阴性性；若若是是由由于于抗抗原原抗抗体体引引起的特异性凝集则不会散开，结果为阳性。起的特异性凝集则不会散开，结果为阳性。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血47第四十七页，共六十九页。n凝聚胺试验的注意事项凝聚胺试验的注意事项加加入入重重悬悬液液后后，应应尽尽快快观观察察结结果果，最最好好在在1min1min内内，最最长不要超过长不要超过3min3min，以免弱反应消失；，以免弱反应消失；凝凝聚聚胺胺溶溶液液若若放放玻玻璃璃瓶瓶中中太太久久作作用用会会变变弱弱，所所以以必必须须保保存在黑色塑料瓶中；存在黑色塑料瓶中；凝凝聚聚胺胺是是一一种种(y(y zhn)zhn)抗抗肝肝素素药药物物，所所以以使使用用含含肝肝素素的的血血标标本要稍稍多加一些凝聚胺来中和肝素。本要稍稍多加一些凝聚胺来中和肝素。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血48第四十八页，共六十九页。n主侧交叉配血不相合的原因：主侧交叉配血不相合的原因：患者或供者患者或供者ABOABO血型定型不正确血型定型不正确(zhngqu)(zhngqu)；患患者者血血清清中中存存在在同同种种抗抗体体与与供供者者红红细细胞胞上上的的相应抗原起反应；相应抗原起反应；四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血49第四十九页，共六十九页。患患者者血血清清中中存存在在自自身身抗抗体体，与与供供者者红红细细胞胞上上的相应抗原起反应；的相应抗原起反应；患患者者血血清清中中白白蛋蛋白白与与球球蛋蛋白白比比例例(bl)(bl)不不正正常常引引起的缗钱状假凝集；起的缗钱状假凝集；血浆扩容剂的影响或试剂被污染等。血浆扩容剂的影响或试剂被污染等。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血50第五十页，共六十九页。n主主侧侧（+）、自自身身（-）、抗抗体体筛筛选选（-），可可能能原原因因是：是：患者或供者患者或供者ABOABO血型错误；血型错误；（重新定型（重新定型(dng xng)(dng xng)，检查患者亚型、输血史及移植史），检查患者亚型、输血史及移植史）患者血清中有抗体，但筛选细胞上无相应抗原；患者血清中有抗体，但筛选细胞上无相应抗原；（对患者进行抗体鉴定）（对患者进行抗体鉴定）供者红细胞已被致敏。供者红细胞已被致敏。（对供者做直接抗球蛋白试验）（对供者做直接抗球蛋白试验）四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血51第五十一页，共六十九页。n主主侧侧（+）、自自身身（-）、抗抗体体筛筛选选（+），可能原因是：可能原因是：患患者者血血清清中中的的同同种种(tn(tn zhn)zhn)抗抗体体与与供供者者红红细细胞胞上相应抗原起反应。上相应抗原起反应。（对对患患者者进进行行抗抗体体鉴鉴定定，选选择择无无对对应应抗抗原原的的血血液输注。）液输注。）四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血52第五十二页，共六十九页。n主侧（主侧（+）、自身（）、自身（+）、抗体筛选（）、抗体筛选（+），可能原因是：），可能原因是：患者血清中可能同时存在自身抗体和同种抗体；患者血清中可能同时存在自身抗体和同种抗体；（对患者血清自身吸收及抗体鉴定，用吸收后血清配血）（对患者血清自身吸收及抗体鉴定，用吸收后血清配血）白蛋白白蛋白/球蛋白比值不正常球蛋白比值不正常（盐水添加试验解决缗钱状假凝集）（盐水添加试验解决缗钱状假凝集）血浆扩容剂（如右旋糖酐）的影响；血浆扩容剂（如右旋糖酐）的影响；（洗涤细胞，或等待扩容剂消失后重新抽取标本）（洗涤细胞，或等待扩容剂消失后重新抽取标本）污染污染（使用洁净的器具（使用洁净的器具(qj)(qj)和符合要求的试剂）和符合要求的试剂）四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血53第五十三页，共六十九页。n交交叉叉配配血血实实验验中中，离离心心力力、离离心心时时间间不不当当，可造成假阴性或假阳性结果。可造成假阴性或假阳性结果。n恒温水浴箱温度不正确也会造成错误结果。恒温水浴箱温度不正确也会造成错误结果。n对对于于高高效效价价O O型型血血清清出出现现前前带带现现象象时时，应应当当用用EDTAEDTA盐盐水水适适当当稀稀释释，以以阻阻止止补补体体C C1 1引引起起的的凝凝集。集。n出出现现溶溶血血(rn(rn xu)xu)或或部部分分溶溶血血(rn(rn xu)xu)应应判判为为阳阳性性结结果（标本本身溶血果（标本本身溶血(rn xu)(rn xu)例外）。例外）。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血54第五十四页，共六十九页。n含含有有冷冷凝凝集集素素的的患患者者交交叉叉配配血血时时可可采采用用3737生生理理盐盐水水洗洗涤涤(xd)(xd)3 3次次，如如还还显显弱弱凝凝集集，再再用用4242或或4545盐水洗盐水洗1 1次再配血。次再配血。n温温抗抗体体型型的的自自身身免免疫疫性性溶溶血血性性贫贫血血患患者者血血清清中中的的游游离离抗抗体体有有时时很很难难吸吸收收完完全全，导导致致配配血血困困难难。在在排排除除同同种种抗抗体体的的情情况况下下可可选选择择凝凝集集反反应应弱的同型血液输注，亦可输注弱的同型血液输注，亦可输注O O型洗涤红细胞。型洗涤红细胞。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血55第五十五页，共六十九页。n某某些些紧紧急急情情况况下下需需要要快快速速配配血血，建建议议血血清清（血血浆浆）与与细细胞胞比比例例为为2:12:1，细细胞胞悬悬液液浓浓度度为为2%2%3%3%。同同时时离离心心前前孵孵育育2 25min5min，有有利利于于检检测弱的测弱的ABOABO抗体。抗体。n婴婴儿儿输输注注O O型型血血或或ABOABO同同型型血血，应应当当采采用用(ciyng)(ciyng)母亲的血清（血浆）进行交叉配血。母亲的血清（血浆）进行交叉配血。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血56第五十六页，共六十九页。n在在任任何何情情况况下下，一一定定要要选选择择ABOABO和和RhRh（D D）同同型型的的血血液液(xuy)(xuy)。如如果果同同型型血血不不够够用用，可可以以输输注注O O型型相相合合的的添添加加剂剂红红细细胞胞（红红细细胞胞悬悬液液、悬悬浮浮红红细胞），这种红细胞所含血浆量很少。细胞），这种红细胞所含血浆量很少。nABAB型型血血液液不不能能满满足足供供应应，可可选选择择A A型型或或B B型型红红细胞，尽量不用细胞，尽量不用O O型，型，O O型红细胞以备它用。型红细胞以备它用。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血57第五十七页，共六十九页。nRhRh（D D）阴阴 性性 血血 不不 够够 用用，可可 以以 选选 择择(xunz)(xunz)RhRh（D D）阳阳性性血血，但但有有生生育育能能力力的的妇妇女不能用。女不能用。n在在大大量量输输血血时时如如果果输输的的是是同同型型相相合合的的添添加加剂剂红红细细胞胞（未未输输全全血血），供供者者之之间间可可以以不不做做交交叉叉配配血血试试验验。若若是是输输了了ABOABO不不同同型型的的相相合合红红细细胞胞，以以后后要要尽尽快快输输注注与与患患者者同同型型的的红红细细胞胞，不不要要坚坚持一直应用持一直应用ABOABO不同型的相合红细胞。不同型的相合红细胞。四、严格四、严格(yng)交叉配血交叉配血58第五十八页，共六十九页。病例讨论病例讨论例例1：王某，女，王某，女，44岁，因乳腺癌岁，因乳腺癌1年前作根治术。年前作根治术。手术期间患者输手术期间患者输A型全血型全血400ml，无不良反应。术后，无不良反应。术后曾化疗曾化疗8次。此次入院次。此次入院(r yun)进行第进行第9次化疗。血常规：次化疗。血常规：红细胞红细胞 4.121012/L，血红蛋白，血红蛋白125g/L，白细胞，白细胞 3.3109/L，血小板，血小板 60109/L。59第五十九页，共六十九页。血型血型“A”。因白细胞和血小板偏低，为了能顺利进。因白细胞和血小板偏低，为了能顺利进行第行第9次化疗，给患者输当天新鲜全血次化疗，给患者输当天新鲜全血400ml，输血，输血过程无任何反应。化疗顺利。输血后第过程无任何反应。化疗顺利。输血后第7天血红蛋白天血红蛋白降为降为90 g/L。再输新鲜全血。再输新鲜全血400ml，输后约，输后约20分钟，分钟，患者觉腰痛，继而患者觉腰痛，继而(j r)出现畏寒、头痛、恶心、体温出现畏寒、头痛、恶心、体温39，尿呈酱油样。经及时抢救，患者转危为安。，尿呈酱油样。经及时抢救，患者转危为安。60第六十页，共六十九页。例例1复查血型及交叉配血试验复查血型及交叉配血试验一、患者血型：一、患者血型：“A”（CCDee)；供者血型：供者血型：“A”(CCDEe)二、交叉配血试验：二、交叉配血试验：盐水介质不发生凝集反应；盐水介质不发生凝集反应；抗球蛋白和酶介质中，主侧发生强凝集反应抗球蛋白和酶介质中，主侧发生强凝集反应 ，次侧无凝集反应。，次侧无凝集反应。三、抗体鉴定：三、抗体鉴定：患者血清中存在抗患者血清中存在抗