不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究.pdf

!5!E$!中国食品卫生杂志%&()*)+,-.(/0,11,2&3 4 )()56!7 年第 58 卷第 7 期论著不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究宋雁!5!贾旭东!崔文明!张倩男!李永宁!雍凌!李宁!_ 国家食品安全风险评估中心 卫生部食品安全风险评估重点实验室北京$!6665!#5_ 中国疾病预防控制中心北京$!66686$摘$要!目的$比较#种不同剂量和不同方式给予环磷酰胺诱导正常小鼠免疫抑制的#种方法!选择合适的免疫抑制动物模型以评价受试物的免疫毒性%方法$选择雌性 X/0 X Z 小鼠!设!个对照组#每日灌胃蒸馏水$和#个环磷酰胺组#灌胃组每天#6 A J UJX k&腹腔注射!组每天#6 A J UJX k&腹腔注射 5 组!先连续注射 7 S!后每周注射一次!注射剂量为 E6 A J UJX k&腹腔注射 7 组!试验结束前 5#G 一次性注射 566 A J UJX k$!试验周期为 76 S%观察不同剂量及不同途径给予环磷酰胺后对小鼠免疫病理学体液免疫细胞免疫非特异性免疫等各项免疫指标的影响%结果$#个环磷酰胺组的小鼠免疫器官重量外周血白细胞计数及其淋巴细胞百分比血清免疫球蛋白水平外周血 X淋巴细胞百分比脾空斑形成细胞数5#G 小鼠足跖厚度变化脾:淋巴细胞和 X淋巴细胞增殖能力较对照组均有不同程度下降!全血中性粒细胞百分比均高于对照组%环磷酰胺灌胃组和注射!组可刺激全血(O细胞百分比较对照组明显升高!而注射 5 组和 7 组的:G 细胞百分比和%2#m%2 Em值均高于对照组!其差异分别具有统计学意义#Aq 69 68$%此外!环磷酰胺灌胃组和注射!组还可引起动物体重下降肝脏相对重量降低血清谷丙转氨酶血糖甘油三酯的改变%对于试验所测定的大部分指标!注射 5 组和注射 7 组之间比较差异无统计学意义#Ai 69 68$%结论$环磷酰胺的#种给予方式均可诱导动物免疫抑制!但于试验结束前 5#G 一次性腹腔注射566 A J UJX k 环磷酰胺为最合适的免疫抑制动物模型造模方法%关键词!环磷酰胺&免疫抑制&免疫病理学&体液免疫&细胞免疫&非特异性免疫&小鼠中图分类号!.!88&j 867$文献标识码!/$文章编号!66#E#8D56!7#67 65!E 6E收稿日期!56!7 65!b基金项目!社会公益项目5666768#6D#$转基因重大专项56!5X/O 6!X 66#作者简介宋雁$女$博士生$研究方向为卫生毒理学$)A F B W T K CJ L F C7666aT B CF _ Z K A通信作者李宁$女$研究员$研究方向为卫生毒理学$)A F B W W B CB CJ pD8a!D7_ Z K A?&.(-)*2&)3 2 3-),8&+*.#&2#()3 2 2*&.&$3/2*$#,3$0%$*+3)3 A-%2-$&2 3 2&+,%,/&(8&2(8-.*$3*.*,3*K CJ3 F C$+B F;HSK CJ$%HB kM CA B CJ$I GF CJj B F CCF C$0 B 3 K CJ CB CJ$3 K CJ0 B CJ$0 B(B CJO M L0 F PK?F Q K?LK R 1 K K S*F R M Q L.B T U/T T M T T A M CQ K R VB CB T Q?LK R&M F W Q G$%GB CF(F Q B K CF W%M CQ M?R K?1 K K S*F R M Q L.B T U/T T M T T A M CQ$X M B Y B CJ!6665!$%GB CF#9 0 2 )-,%:0;3,*3$:KZ K A F?MR K H?A M Q GK ST R K?SM M W K B CJB A A HCM T H?M T T M S A K HT MA K SM W T B CSHZ M S PLZ L Z W K GK T GF A B SM%=#B Q G SB R R M?M CQ SK T M TF CS F L T$F CS Z GK K T MQ GMF?K?B F Q MF CB A F W A K SM W K R B A A HCK T H?M T T B K C Q KM F W HF Q MQ GMB A A HCK Q K B Z B Q LK R FT HPT Q F CZ M _=3 8&$2$:GMR M A F W MX/0 X ZA B Z M M?MF T T B J CM S Q KR B MJ?K HT%Q GMZ K CQ?K W J?K H B Q G SB T Q B W W M S F Q M?SF B W LJ F F J M&%=J F F J MJ?K H B Q G#6 A J UJX k S PLJ F F J M&%=B !J?K H B Q G#6 A J UJX k SPLB CQ?F M?B Q K CM F W W LB CY M Z Q B K C B#&%=B 5 J?K H B Q G E6 A J UJ X k S B C Q GMR B?T Q Q G?M M SF L T PLB F CS K CZ M F M M U B C Q GMR K W W K B CJM?B K S&%=B 3 2#/2:GMB A A HCMK?J F C M B J GQ T$Q GMCHA PM?K R W M HZ K Z L Q MF CS Q GMM?Z M CQ F J MK R W L A GK Z L Q M T B C M?B GM?F W PW K K S$J/F CS J 4W M M W TB C T M?HA$Q GMM?Z M CQ F J MK R XZ M W W TB C M?B GM?F W PW K K S$Q GMW F NHMR K?A B CJZ M W W TB C T W M M C$5#G R K K Q F S Q GB Z UCM T TZ GF CJ M$0=*F CS%K C/B CSHZ M S T W M CK Z L Q M?K W B R M?F Q B K C B C R K H?Z L Z W K GK T GF A B SMJ?K HT M?MT B J CB R B Z F CQ W LW K M?Q GF CQ GK T MB C Z K CQ?K W J?K H Aq69 68#_:GMM?Z M CQ F J M TK R CM HQ?K GB W TB C M?B GM?F W PW K K S B C R K H?Z L Z W K GK T GF A B SMJ?K HT M?MT B J CB R B Z F CQ W LGB J GM?Q GF C Q GK T MB C Z K CQ?K W J?K H Aq 69 68#_&K M M?$Q GMM?Z M CQ F J MK R(OZ M W W T B C M?B GM?F W PW K K SB 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5$主要仪器与试剂%,5恒温培养箱(酶联免疫检测仪(流式细胞仪(生物显微镜环磷酰胺江苏恒瑞医药股份有限公司#绵羊红细胞北京兰伯瑞生物技术有限责任公司#$1 :%标记的抗小鼠%2 7 抗体(/=%标记的抗小鼠%2!抗体(=)标记的抗小鼠%2#抗体(/=%标记的抗小鼠%2#抗体(=)标记的抗小鼠%2 E 抗体(红细胞裂解液(小鼠%X/细胞因子试剂盒均来自 X 2公司#$小鼠免疫球蛋白)0 */试剂盒4 M CkF L公司#等!9 5$方法!9 59!$试验分组分为 b 个免疫组$每个免疫组设 8 个试验组$即!个对照组每日灌胃蒸馏水#和#个环磷酰胺组分别为环磷酰胺灌胃组$每日灌胃剂量为#6 A J UJX k&环磷酰胺腹腔注射!组$每日注射剂量为#6 A J UJX k&环磷酰胺腹腔注射5 组$先连续注射7 S$后每周注射一次$注射剂量为 E6 A J UJX k&环磷酰胺腹腔注射 7 组$试验结束前 5#G 一次性注射剂量为 566 A J UJX k#动物经适应性饲养 7 S 后按体重随机分组$每组!6 只动物$按组分笼饲养$自由进食和饮水 试验周期为 76 S!9 59 5$测定指标动物喂养 76 S 后测定各项指标 免疫 组%血液学(体重和脏器重量的测定&免疫 组%血清免疫球蛋白(对有丝分裂原 0=*的反应(对有丝分裂原%K C/的反应(O细胞活性测定&免疫 组%脾空斑形成细胞试验&免疫 n组%血生化(全血免疫细胞表型分析(O细胞活性测定&免疫 n组%血清溶血素的测定&免疫 n 组%迟发型变态反应&免疫 n 组%巨噬细胞功能测定!9 59 59!$一般毒性指标和免疫病理学指标小鼠体重及脏器系数%每周称取 5 次动物体重$以调整灌胃量$并记录试验结束时动物体重眼眶内眦静脉放血处死动物后$迅速取脏器并称重 称取肝脏(肾脏(脾脏(胸腺和淋巴结包括颈部淋巴结(腋下淋巴结和肠系膜淋巴结#重量$并计算其脏体比血液学指标%动物处死前眼眶内眦静脉取血$)2:/O5抗凝血$测定白细胞计数kX%#(淋巴细胞0 3 V#及其百分比(单核细胞V,(#及其百分比(中性粒细胞()-:#及其百分比(嗜酸性粒细胞),*#及其百分比(嗜碱性粒细胞X/*#及其百分比(红细胞计数.X%#(血红蛋白&4 X#(红细胞压积&%:#(平均红细胞压积V%n#(平均红细胞血红 蛋 白 V%&#(平 均 红 细 胞 血 红 蛋 白 浓 度V%&%#(红细胞宽度.2 k#(血小板=0:#(凝血酶原消耗试验=%:#(平均血小板压积V=n#(血小板宽度=2 k#!556$!中国食品卫生杂志%&()*)+,-.(/0,11,2&3 4 )()56!7 年第 58 卷第 7 期血生化指标%动物处死前眼眶内眦静脉取血$#666?A B C离心!6 A B C$分离血清 测定谷丙转氨酶/0:#(谷草转氨酶/*:#(总蛋白:=#(白蛋白/0 X#(碱性磷酸酶/0=#(血糖 4 0-#(尿素氮X-(#(肌 酐%.)#(胆 固 醇%&,#(甘 油 三 酯:4#(钙%F#(钾O#(钠(F#外周血淋巴细胞表型分析%动物处死前眼眶内眦静脉取血$)2:/!反应孔 加 靶细 胞和效 应 细 胞 各!66!W 于-形 D 孔板$靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各!66!W$靶细胞最大释放孔加靶细胞和59 8e:?B Q K C 溶 液 各!66!W$每 样 做 7 个 平 行 孔7b c(8e%,5培养#G 培养结束后$!866?A B C 离心 8 A B C$每孔吸取上清!66!W 置于平底D 孔板中$同时加入 0 2&基底液!66!W$室温避光反应 7 A B C后$每孔加入 86!W!A K W 0的&%W 溶液终止反应用酶标仪在#6 CA波长处测定各孔的,2值 用下列公式计算%(O细胞活性e#f 反应孔,2值 g 靶细胞自然释放孔,2值#最大释放孔,2值 g靶细胞自然释放孔,2值#h!66e)D*!9 7$统计学分析采用*=*!b9 6 统计软件对试验数据进行单因素方差分析或非参数检验5$结果59!$一般毒性指标和免疫病理学指标59!9!$对小鼠体重及脏器系数的影响由表!可见$第!(5(7(#周$环磷酰胺灌胃组(注射!组和注射 5 组动物体重均出现不同程度下降$虽然注射 5 组在第!周体重下降最为明显$并且不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究!宋雁$等!55!$!$表!$环磷酰胺对小鼠每周体重的影响#CD*#:F PW M!$)R R M Z Q TK R%=K C M M UW LPK SL M B J GQ B C A B Z M组别第 6 周第!周第 5 周第 7 周第#周对照组!9 b l 69 b!9 5 l 69 EP$Z$S569 5 l!9 6P$Z$S569 6 l!9 5P$Z$S569 6 l!9 7P$Z环磷酰胺灌胃组!9 E l!9#!D9 D l!9#F$S$M!b9 E l!9 DF$M!b9 D l!9 7F$M!E9!l!9 DF$M环磷酰胺注射!组!9 E l 69!D9 l!9 EF$S$M!E9 6 l!9 8F$M!b9 7 l!9 8F$M!b9 b l!9 bF$M环磷酰胺注射 5 组!9 5 l!9 6!89!l 59!F$P$Z$M!b9 D l!9 bF$M!b9 D l!9#F$M!E9 E l!9#环磷酰胺注射 7 组!9#l!9 7!9 D l!9!P$Z$S!9 E l 69 P$Z$S569!l!9 5P$Z$S569 6 l!9 6P$Z注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 68较灌胃组和注射!组差异均具有统计学意义Aq69 68#$但其第#周体重较对照组差异无统计学意义Ai 69 68#而注射 7 组在试验周期内体重变化较对照组差异不具有统计学意义Ai69 68#$并且均高于其他给药组由表 5!和 5 5 可见$终体重%灌胃组和注射!组动物终体重下降最为明显$较对照组(注射 5 组和注射 7 组差异均具有统计学意义 Aq69 68#肝脏%灌胃组和注射!组的肝脏相对重量与对照组比较差异具有统计学意义Aq69 68#$且注射!组的肝脏相对重量最大 肾脏%注射!组的肾脏绝对重量明显下降$与对照组(注射 5 组和注射 7 组比较均具有统计学意义Aq 69 68#灌胃组的肾脏相对重量最大$较对照组差异有统计学意义Aq69 68#脾脏%#个给药组的脾脏绝对重量均低于对照组$差异具有统计学意义Aq69 68#$注射 5 组和注射 7组的脾脏相对重量与对照组比较差异具有统计学意义Aq69 68#$且注射 7 组的两项指标均最低胸腺%#个给药组的胸腺绝对和相对重量与对照组比较差异均有统计学意义Aq69 68#$灌胃组和注射!组胸腺的绝对和相对重量较低 淋巴结%除注射 7 组淋巴结绝对重量较对照组差异有统计学意义Aq 69 68#外$其他各组之间绝对和相对重量差异均无统计学意义Ai 69 68#表 5!$环磷酰胺对小鼠终体重和主要器官重量的影响#C l*#:F PW M5!$)R R M Z Q TK R%=K C R B CF W PK SL M B J GQ F CS K?J F C M B J GQ TB C A B Z M组别终体重J#肝脏肾脏绝对重量J#相对重量e#绝对重量J#相对重量e#对照组!E9 8 l 69 P$Z69 b!l 69 6D#79 EED l 69 5D5P$Z69 555 l 69 6!#Z!9 56!l 69 6bDP环磷酰胺灌胃组!D9 6 l!9 DF$S$M69 b68 l 69 66#9#!#l 69 7!F69 56b l 69 6!8!9 76#l 69 D87F环磷酰胺注射!组!89 5 l 69 EF$S$M69 b#6 l 69!86#9!6 l!9!5!F$S$M69!7 l 69 6!8F$S$M!9 5bb l 69!6b环磷酰胺注射 5 组!b9 8 l!9 5P$Z69 b86 l 69 688#9 55 l 69#67Z69 5!D l 69 5!7Z!9 5#6 l 69!DD环磷酰胺注射 7 组!b9 D l 69 P$Z69 b6E l 69#5b#9 67D l 69 5!8Z69 5!D l 69 6!8Z!9 55E l 69 6b#注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 68表 5 5$环磷酰胺对小鼠终体重和主要器官重量的影响#C l*#:F PW M5 5$)R R M Z Q TK R%=K C R B CF W PK SL M B J GQ F CS K?J F C M B J GQ TB C A B Z M组别脾脏胸腺淋巴结绝对重量J#相对重量e#绝对重量J#相对重量e#绝对重量J#相对重量e#对照组69 6b!l 69 6!bP$Z$S$M69 7E5 l 69 6E#S$M69 67#l 69 6!6P$Z$S$M69!E!l 69 68bP$Z$S$M69 66 l 69 66#M69 6#l 69 657环磷酰胺灌胃组69 6#E l 69 6!5F$M69 76#l 69 6b#M69 66E l 69 667F$S$M69 687 l 69 6!8F$S$M69 66b l 69 66869 6#8 l 69 65环磷酰胺注射!组69 6#b l 69 6!DF69 76b l 69!6EM69 66 l 69 668F$S$M69 68E l 69 67EF$S$M69 66D l 69 66769 6#5 l 69 6!b环磷酰胺注射 5 组69 6#b l 69 655F69 5b!l 69!7bF69 656 l 69 66DF$P$Z69!l 69 675F$P$Z69 66D l 69 66769 678 l 69 6!D环磷酰胺注射 7 组69 67#l 69 66DF$P69!l 69 67!F$P$Z69 65!l 69 66bF$P$Z69!E l 69 6#!F$P$Z69 668 l 69 667F69 676 l 69 6!D注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 6859!9 5$对血液学指标的影响由表 7!(7 5 和 7 7 可见$#个环磷酰胺给予组动物的 kX%(0 3 V百分比()-:百分比较对照组差异均具有统计学意义Aq69 68#其中$灌胃组的 kX%最 低$注 射 7 组 的 0 3 V 百 分 比 最 高 而()-:百分比最低 灌胃组(注射!组和注射 5 组的 X/*百分比(V%&%和.2 k 水平较对照组差异均具有统计学意义Aq 69 68#注射!组=0:水平明显升高$而 0 3 V百分比降低较明显$与对照组比较差异均具有统计学意义Aq 69 68#59!9 7$对血生化指标的影响由表#!和#5 可见$环磷酰胺注射!组动物血!555$!中国食品卫生杂志%&()*)+,-.(/0,11,2&3 4 )()56!7 年第 58 卷第 7 期$表 7!$环磷酰胺对小鼠血液学指标的影响#C l*#:F PW M7!$)R R M Z Q TK R%=K C GF M A F Q K W K J LF?F A M Q M?TB C A B Z M组别kX%h!6 0#.X%h!6!5 0#&4 XJ 0#&%:e#V%nR 0#V%&J#V%&%J 0#对照组b9#8 l!9 E!P$Z$S$M9 Db l!9!E!889 l!E9 8#89 l 89 8#b9 8 l 69 b!D9!l 69 7779 E l b9 EP$Z$S环磷酰胺灌胃组59 b8 l 69 E6F$S9 D6 l!9 D7!b69 b l 59#b9 5 l b9 b#9 5 l!9 6!b9 E l 69 7D!9 5 l!89 7F$S$M环磷酰胺注射!组79!#l!9!DF!69!E l!9 86!b89!l 579!#9 7 l b9 5#E9 8 l!9#!b9 7 l 69 b78D9!l 9 8F环磷酰胺注射 5 组#9#E l 59 5DF$P!69 68 l!9!8!D9 6 l 569 5#E9 5 l 89 E#E9 6 l!9 7!D9 l 69 7869#l!9 EF$P环磷酰胺注射 7 组79 E!l!9 EF!69 b6 l 59!bD9 7 l 7b9 7869 b l 9#b9 8 l 69!D9#l 69#7#D9 7 l!69 EP注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 68表 7 5$环磷酰胺对小鼠血液学指标的影响#C l*#:F PW M7 5$)R R M Z Q TK R%=K C GF M A F Q K W K J LF?F A M Q M?TB C A B Z M组别.2 ke#=0:h!6 0#=%:e#V=nR 0#=2 ke#对照组!79 7#l 69 77P$Z$Sb!79 E l E9 6Z69!E l 69 6759#b l 69 7M!b9 bE l 69 b5环磷酰胺灌胃组!89 5E l 69 E!F$S$Mb8E9 8 l 5!9 669 56 l 69 6b59 8E l 69#8!b9 5b l 69 ED环磷酰胺注射!组!#9 b l 69 EDF$ME679 l!D#9 7F69 55 l 69 6D59 b8 l 69#D!b9#l 69 D7环磷酰胺注射 5 组!#9 58 l 69 6F$Pb59 5 l 5#E9 b69 5!l 69 6#59 Db l 69#D!b9 7 l 69 Db环磷酰胺注射 7 组!79 D7 l 69 7P$ZDEb9#l!689 E69 56 l 69 6859 EE l 69 7DF!b9 D l 69 E8注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 68表 7 7$环磷酰胺对小鼠血液学指标的影响#C l*#:F PW M7 7$)R R M Z Q TK R%=K C GF M A F Q K W K J LF?F A M Q M?TB C A B Z M组别0 3 VV,()-:h!6 0#e#h!6 0#e#h!6 0#e#对照组89#6 l!9!EP$Z$S$Mb59 bb l E9!EP$Z$S$M69 76 l 69 55Z$S$M#9 7b l#9 87!9 b#l!9 6559!5 l E9 D5P$Z$S$M环磷酰胺灌胃组!9!#l 69 5EF$M#79 l!79 65F$M69 56 l 69 6bMb9 b8 l 79#ES$M!9#!l 69 bDS#E9!l!89!F环磷酰胺注射!组69 Eb l 69#6F$M759 56 l!D9#bF$M69!E l 69!6F$b9 5D l#9 7#S$M!9 D5 l!9!869 5D l 559 E8F环磷酰胺注射 5 组59 68 l 59 6bF$#!9 8!l!89 7F$M69!#l 69 6EF$79#!l 59 5EP$Z59 5E l 69 bEP$M8#9 b5 l!79 E5F$M环磷酰胺注射 7 组59#!l!9 E!F$P$Z8E9 65 l!E9!EF$P$Z$S69 6E l 69!5F$P59 E l#9 8!P$Z!9 75 l 69 8S7E9 5E l!9!8F$S组别),*X/*h!6 0#e#h!6 0#e#对照组69 6!l 69 6769 78 l 69#769 66 l 69 6669 7 l 69!P$Z$S环磷酰胺灌胃组69 66 l 69 6669 6#l 69 6869 66 l 69 6669!l 69!5F环磷酰胺注射!组69#b l!9#8!69!l 7!9 8D69 66 l 69 6669 6 l 69!6F$S$M环磷酰胺注射 5 组69 6!l 69 6769 56 l 69 5#69 66 l 69 6669!D l 69!F$Z环磷酰胺注射 7 组69 66 l 69 6669#5 l 69!D69 66 l 69 6669 76 l 69#6Z注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 68清/0:水平升高最明显$较对照组差异具有统计学意义Aq 69 68#$并且其 4 0-水平也高于对照组和其他 7 个给药组$差异均具有统计学意义Aq 69 68#灌胃组(注射!组和注射 5 组动物血清:=(/0 X水平较低$与对照组比较差异有统计学意义Aq 69 68#$但注射 7 组的两项指标较对照组均无明显变化 灌胃组和注射!组血清:4水平低于对照组(注射 5 组和注射 7 组$差异均具有统计学意义Aq 69 68#表#!$环磷酰胺对小鼠血生化指标的影响#C l*#:F PW M#!$)R R M Z Q TK R%=K C Z W B CB Z F W Z GM A B T Q?LF?F A M Q M?T B C A B Z M组别/0:-0#/*:-0#:=J 0#/0 XJ 0#/0=-0#4 0-A A K W 0#对照组5b9 6 l 79 Z!#E9 D l 59 6D89 DD l 89 5bP$Z$S79!l!9 b8P$Z$S!69 b l!89 559#l!9!7Z环磷酰胺灌胃组7!9 l!79!8!9!l 7E9!889 EE l#9 5EF$M789 b5 l!9 7F$ME9 E l!E9 759 78 l!9 7!Z环磷酰胺注射!组7b9 D l!89 EF$S!D79#l 79#889 8E l 89 b!F$M7#9 E!l 59 7EF$Mb9 l 579 E!9 7b l 69 8bF$P$S$M环磷酰胺注射 5 组589 l b9 7Z!889 b l#9 E8b9 5D l 89 8#F$M7D9 D#l 59 7EF!6#9 D l 569 759#8 l 69 Z环磷酰胺注射 7 组779 b l!69 b!D89#l 7!9 5D89 D5 l 79#P$Z$S7E9 77 l!9 DbP$Z!#9 D l!69 E59 D6 l!9 67Z注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 68不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究!宋雁$等!557$!表#5$环磷酰胺对小鼠血生化指标的影响#C l*$A A K W 0#:F PW M#5$)R R M Z Q TK R%=K C Z W B CB Z F W Z GM A B T Q?LF?F A M Q M?T B C A B Z M组别X-(%.)%&,:4(FO%F对照组E9 D#l!9 75859 86 l!59 b59 6D l 69 5b!9!6 l 69 5#P$Z!59!l b9 5D9 l!9 8!9#l 69!环磷酰胺灌胃组9 EE l 59 b88!9#D l!89 7859 76 l 69 7769 b#l 69#7F$S$M!789#l!D9 5D9 7 l 69 b!9 7 l 69!环磷酰胺注射!组9 68 l!9 6b#59 5#l 89 E!S$M59 57 l 69 8#69 Db l 69 56F$S$M!5E9#l!79!D9 8 l 69 8!9 7 l 69!环磷酰胺注射 5 组9 D5 l 59!89 E l!b9 7#Z59 68 l 69 58!9 67 l 69!P$Z!59 l!79 5D9 7 l 69!9 7 l 69!环磷酰胺注射 7 组E9 bE l!9!78D9#b l!89 DZ59 56 l 69 5#!9!#l 69 56P$Z!789#l!D9 8D9 8 l 69 7!9#l 69!注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷酰胺注射5 组比较$Aq 69 68&M表示与注环磷酰胺射 7 组比较$Aq 69 6859!9#$小鼠外周血淋巴细胞表型分析结果由表 8 可见$与对照组相比$#个环磷酰胺给予组小鼠外周血:淋巴细胞%2 7m%2!g#(O细胞%2 7g%2#m#(:G 细 胞%2 7m%2#m#和:T细 胞%2 7m%2 Em#百分比均不同程度升高&而外周血 X淋巴细胞%2 7g%2!m#百分比有所下降$且较对照组差异均有统计学意义Aq 69 68#其中$注射 5 组和注射 7 组的外周血:淋巴细胞(:G 细胞百分比$以及灌胃组和注射!组的(O细胞百分比升高较明显$与其他试验组比较差异均具有统计学意义Aq 69 68#&除注射 7 组外$其他 7 个给药组:T 细胞百分比较对照组差异均有统计学意义Aq 69 68#注射 5 组和注射 7 组%2#m%2 Em比值与对照组比较明显升高$差异具有统计学意义Aq 69 68#表 8$环磷酰胺对外周血淋巴细胞分型的影响#C l*#:F PW M8$)R R M Z Q TK R%=K C GM CK Q L B ZF CF W L T B T K R M?B GM?F W PW K K S W L A GK Z L Q M TB C A B Z M组别%2 7m%2!ge#%2 7g%2!me#%2 7g%2#me#%2 7m%2#me#%2 7m%2 Eme#%2#m%2 Em对照组89 8 l E9 DP$S$M789!l E9 bP$Z$S$M#9!l!9 6P$Z#9 b l E9 DS$M9 E l!9 6P$Z$S89!l!9 6S$M环磷酰胺灌胃组D9 l!D9 6F$S$M69!l 69 7F$M5#9 D l!89 8F$S$M8E9 8 l!#9 5S$M!9#l 79#F89#l!9 DM环磷酰胺注射!组DD9#l!89 8S$M59 b l#9 DF579#l!89 bF$S$M879 D l!89 DS$M!59 E l 69 F$M#9 5 l!9 5S$M环磷酰胺注射 5 组ED9!l!69 6F$P$Z59 l 59 FD9 7 l 79 bP$Zb#9 5 l 9 DF$P$Z!9 l 59 7F$MD9#l!9 7F$Z环磷酰胺注射 7 组E#9 D l b9 F$P$Zb9 8 l E9#F$P89#l 59 P$Zb#9 5 l E9 EF$P$Z!69#l!9 Z$Sb9 8 l 59!F$P$Z注%F表示与对照组比较$Aq 69 68&P 表示与环磷酰胺灌胃组比较$Aq 69 68&Z表示与环磷酰胺注射!组比较$Aq 69 68&S 表示与环磷