醇沉法提取普洱茶茶多糖的研究.pdf

试 验 研 究 醇沉法提取普洱茶茶多糖的研究 刘亚林，孙志 良，张冬英 z 施兆鹏 刘 中华(湖南农业大学动物科技学院：湖南农业大学蔡学教育部重点实验室 长沙4 1 0 1 2 8)摘要本文以云南普洱茶为研究对象，以水为溶刺，在一定条件下提取茶多糖。提 取液用乙醇进行沉淀，选取沉淀荆用量、沉淀时间和离心时间三个因素做单因素实验，然 后通过正交实验方法确定了乙醇沉淀法的最佳工艺。关键词普洱茶茶多糖醇沉 普洱茶原产于云南澜沧江流域，是世界n 卜 有相当影响的 名茶。普洱茶属于后发酵茶，为六大茶类中的黑茶类，是采用 云南大叶种晒青毛茶为原料，经“渥堆”，干燥等工序加工而 成。自 唐宋以来，由于其神奇功效，历经千年而不衰。近年来的 研究表明，茶多糖具有防辐射、抗凝血、降血糖、降血脂及增强 免疫力等多种生物功能，因而成为茶叶中极具开发利用价值 的又一生物活性成分。目前茶多糖的提取方法主要有乙醇沉 淀法，丙酮沉淀法和C T A B沉淀法等，本实验主要对云南普洱 茶茶多糖提取过程中乙醇沉淀法进行研究，以期得到最佳工 艺条件。1材料与仪器 普洱茶(云南普洱县产)；4 5 0 4 M P微量电子天平；U V 一 7 5 4分光光度计；电热恒温水 浴锅；L D 5 1 0台式离心机，F Z 1 0 2植物粉碎机。2实验方法 2 1普洱茶多糖的提取工艺流程 茶叶一取样一磨碎(过 4 O 一 5 O目筛)一温水浸提-*9 5 乙 醇沉淀一离心得沉淀物一无水乙醇、丙酮、无水乙醚交替搅拌 洗涤 2次一将沉淀溶解后定容一蒽酮比色法测 O D 6 2 0值 2 2乙醇沉淀的条件选择 用浸提温度为 8 O ，浸提时间为 4 5 mi n，液固比为 1 0：1 水溶性多糖的水溶液。浸提次数为 1次，得到浸提液，选用 乙 醇做沉淀剂，在其他条件相同的情况下，在不同的乙醇加入量(浸提液：9 5 乙醇分别为 1：2、1：3、1：4、1：5、1：6)、不同 沉淀时间(1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、1 0 h)、不同离心时 间(5 m i n、1 0 m i n、1 5 m i n、2 0 m i n)的实验条件下得到茶多糖沉淀，将沉淀 溶解后定容，并用蒽酮比色法测 O D 6 2 0 值。2 3正交实验 在单因素实验基础上，选择 乙醇加入量、沉淀时间、离心 时间为研究对象，按照(3 )的正交表进行正交实验，找出最 佳条件。3结果与分析 3 1单因素实验 3 1 1沉淀剂加入量对提取茶多糖的影响 2 0 0 5 t g j4 由图 1可知，随 着沉淀剂 加入 量 的 增加，茶多糖 的沉淀 量也相应的增加，在 水醇 比 1：31：4 之间有一 明显的增 加后趋于平稳，这说 明在这一 区间段沉 淀效果较理想。03 6 03 6 03 4 晶 0 3 3 善0 _ 3 2 0 31 0 3 02 9 1：02 1：03 1：04 1：06 1：06 水醇比 图 1 乙醇加入量对茶多糖沉淀量的影响 3 1 2沉淀时间对提取茶多糖的影响 l 2 4 6 8 l 0 图2 沉淀时间对茶多糖沉淀量的影响 从图 2可以看出，沉淀时间为 1 h时，茶多糖的沉淀量最 大，随着沉淀时间的延长，茶多糖的沉淀量反而降低，说明沉 淀时间在 1 h 左右较好。3 1 3离心时间对提取茶多糖的影响 0 3 4 0 3 3 5 o 0 3 3 茧0 3 2 5 0 03 2 0 3 1 5 0 3 1 5 l 0 l 5 2 0 图 3 1爵 心时间对茶多糖沉淀量的影响 由图 3可知，离心 5 mi n时，茶多糖沉淀量最大，随着时间 的增加，沉淀量逐渐减少。因此，离心时间为 5 mi n 较好。3 2正交实验 在单因素宴验基础上，做(3 3)的正交表如表 1。弘 ；号 维普资讯 http:/ 富硒茶的研究 常硕其张亚莲周浩(湖南省茶叶研究所长沙4 1 0 1 2 5)试 验 研 究 摘要 本文综述了富硒茶研究中硒在茶树体内的分布规律。茶叶中硒 含量及硒的形态，硒对茶树生长发育过程 中生理生化的影响，硒对茶叶品质 的影响，以及决定富硒茶的主要 因子和茶叶富硒的不同途径的研究成果，为 更合理、更科学地开发富硒萘提供理论依据。关键词茶树富硒有机硒 硒是人和动物重要的微量元素，是构成高等动物体生物 代谢不可缺少的谷胱甘肽过氧化物酶的组成部分。人体缺硒 会导致克山病、大骨节病等，而补硒有益于运动机体提高免疫 力I l J。国际硒学会推荐成人硒 E l 摄入量 6 0 4 0 0 g，中国营养学 会推荐 E l 摄入量 5 0 2 0 0 g。最近中国营养学会的营养调查结 果表明，中国成人每 日的硒摄入量仅 2 6 3 2 g。人体缺硒，在 补硒过程中食用亚硒酸钠容易造成硒中毒，因此寻找合适的，天然的富硒食品已成为人们关注的焦点。茶树是一种能集硒 的作物，能将吸收的无机态硒转化为有机态硒。因此研究开发 富硒茶极具现实意义。1硒在篆树体内的含量及分布规律 一般茶叶含硒量不高(约 O 1 g，g)，高硒地区茶叶含硒 量平均为 1 4 9 2 8 g g，最高为6 5 IL g g。茶树含硒量因器官和 树龄有一定的关系，茶叶中含硒量以老叶最多。依次为果壳 老枝 嫩叶 根系和种子，表明茶叶中的含硒量会随新梢的 老化而增加闭。许春霞等通过土施硒肥对茶叶含硒量的试验表 明：茶叶不同部位硒含量依次为根 2 年生枝 新叶 老叶3 1。典型富硒植物印度芥菜在溶液培养时加入 2 O IL M S e C N 一，l f I lI 。l r 一。1 “-。1 I _ I l”1 1-。|_-0 0 _ J h -l r i q 裹1 正交实验结果裹 沉淀时间为 1 5 h，离心时间5 ra i n。试验号 Ai 一 沅 B而(1I)哥 面 C 03 4 3 5 0 3 ll 8 5 0 2 45 0 0 3 4 7 0 0 3 3 2 0 0 3 4 9 0 0 3 5 5 0 0 _ 3 5 1 5 0 _ 3 I 5 各列极差 R的大小，说明该列相应的因素在实验中对指 标作用的大小，极差大的因素往往是重要的因素，极差小的因 素往往是不重要的因素。由正交实验表可看出，水醇比、离心 时间、沉淀时间的极差依次减少。表明乙醇加入量对普洱茶多 糖提取的影响最大。其次是离心时问，沉淀时间影响较小；其 中以处理组和 A B 为普洱茶多糖乙醇沉淀法的最佳工艺条 件，即水醇比1：5，沉淀时间为 1 5 h，离心时间 5 m i n。4讨论与结论 4 1醇沉法获取普洱茶多糖的最佳工艺条件为水醇比 1：5。4 2本实验中乙醇加入量对普洱茶多糖提取的影响最大。这与 任健等研究的结果有所出入，笔者认为这可能与茶多糖含量 的检测方法及材料不同有关。4 3茶多糖具有降血糖，降血脂多种生理功能，是一项很有前 景的天然药物。目前关于绿茶茶多糖和乌龙茶茶多糖有过不 少报道，而普洱茶茶多糖的研究报道甚少。普洱茶由于其神奇 的功效而闻名中外，又因为“渥堆”独特的加工工艺而与众不 同。因此。深入研究普洱茶及其茶多糖，对预防疾病促进健康 及充分开发利用茶叶资源都有重要的意义。参考文献【1】周志，汪兴平茶 多糖分离提取技术研究食品与发酵工业，2 0 0 2，2 8(2)：8 3 8 4 【2】陈海霞等，茶多糖不同提取工艺的比较研究 食品工业科技，2 0 0 1，2 2(2)：1 8-1 9 【3】任健，杨志宏等，醇沉法提取茶多糖的研究 山东食品发酵，2 0 0 4，1 3 2(1)：3 3-3 5 4 江和源，郑高利 茶多糖降小鼠血糖功能的实验研究 食品科学，2 0 0 4，2 5(6)：1 6 6-1 6 9 5 15 何国藩，林月婵等 普洱茶对人血压心率度脑血流图的影响 中国茶 叶，1 9 9 5(3)：2 7 2 8 6 16 粱名志 漫谈古今神奇普洱茶药效 云南茶叶，1 9 9 6(1 2)：7-1 0 【7 1 Ge e n g s A Mo l e c u l a r c l o n i n g a n d a n a l y s i s o f s t r i c t o s i d i n e b e t a D g l u c o s i d a s e,a n e n z y mei nt e r p e n oi d i n d o l e b i o s y n t h e s i s i nC h a m t h u s r o s e u gJ 1 JBi o l C h e m，2 0 0 0 2 7 5(5)：3 0 5 1 3 0 5 6 2 o o 5 年第4 期：)；，：，。：姗姗姗哪 2 3 O O O O ”：2 柏 跎 叭 n L，：“2 n n 卯 二 二 二：二 二 ，=8“n c；c；c；一 2 3 4 5 6 7 8 9 刚 贴 R 维普资讯 http:/