胶体电泳讲义.pdf

实验教案 实验教案(氢氧化铁溶胶的制备和电势的测量)(氢氧化铁溶胶的制备和电势的测量)目的：略目的：略 原理：略 原理：略 仪器药品：略 仪器药品：略 实验步骤：实验步骤：1，氢氧化铁溶胶的制备：在 250 ml 烧杯中放入磁子和 150 ml 去离子水，放到煤气灯上加热至沸，一边用玻璃棒搅拌，一边慢慢一滴一滴加入 7-8 ml 10%氯化铁溶液，加完后继续沸腾 5 分钟，得到红棕色的氢氧化铁溶胶。放置冷却。2，半透膜的制备：用小烧杯迅速取 20 ml 火棉胶，倒入 250 ml 洁净、干燥的锥形瓶，小心转动，使火棉胶在瓶壁上形成均匀薄层，最后将多余火棉胶倒出。因为火胶棉粘度大，易干燥，所以转动速度应较快。然后将三角瓶倒置在铁圈上，让剩余的液体流尽，并让乙醚蒸发，直至用手指触摸火胶棉，没有粘德感觉(注意，小心腐蚀皮肤！)。因为乙醚的存在，上述操作必须在通风橱中进行操作。然后加入蒸馏水，浸洗几分钟。水倒掉后，再瓶口剥开膜，顺势加入蒸馏水，旋转浸润各个部分，将完整的半透膜拿下来。检验是否有漏，如有，擦干相应部位，用玻棒蘸火胶棉少许进行修补。3，溶胶透析纯化：在搅拌器上放 1000 ml 的大烧杯，加磁子和预热的蒸馏水。制好的溶胶放入透析袋中，用线栓好袋口，放入烧杯中，让磁子搅拌。最初三次每隔 20 分钟换一次水，之后每隔 30 分钟换一次。检查是否有氯离子和铁离子存在，如果有，继续透析。在结束实验前，保证胶体电导率小于 30 uS/cm,倒入烧杯，置于指定的位置。4，溶胶的电泳：首先确定纯化的胶体的电导率，希望小于 30 uS/cm。然后用蒸馏水或 KCl制备辅助液，调节其电导率与溶胶一致。清洗电泳管，依次用蒸馏水洗，胶体润洗。管壁一定要洗净，才能使电泳界面清晰，保证电泳效果。从中间漏斗加入胶体，到刻度 4 cm 处。然后，用滴管小心地往两边的电泳管中加刚调节好的辅助液，动作要轻，顺着管壁加，初始时要左右平衡地滴加，2 cm 后可以少许快些，多些，最终希望看到非常清晰的胶体界面。渗透液加到 8 cm 刻度处比较好。清洗电极，插到两个电泳管中，电极上不要有气泡，不要深入液面太多。将电极与电源（电源电压预先调节到 100 V，有滞后，动作要缓慢）连接，观察胶体液面的移动，以每分钟移动 2 mm 为宜。在界面清晰后，打开停表，准确记录时间和移动距离，2 mm 记录一个数据，记录 6 个数据。测完后关闭电源。用绳子测量两电极之间的距离，最后计算电动电势。5，胶体聚沉实验：在 3 支大试管中分别取 2ml 胶体溶液，分别逐滴加入KCl,K2SO4,K3Fe(SCN)6溶液，观察胶体的聚沉现象，记录结果，并进行分析。实验记录和数据处理：实验记录和数据处理：1，记录胶体及透析液的电导率。2，记录电泳各时刻，胶体迁移的距离。3，胶体迁移的方向，确定胶体所带电荷。4，测量两个电极间的距离。5，做时间-距离直线图，利用斜率计算电势。注意书中给出的公式中实际上等于0。注意事项：注意事项：1，制备溶胶一定要耐心，需要铁离子水解充分。所以滴加速度要慢，搅拌要充分。另外，千万不要因为水的蒸发，而在制好胶体后加水。2，做半透膜的三角瓶一定要干燥。制备半透膜最好一次成功。加水不能太早或太迟。3，透析袋不要放的太低，以免被转子打破或蜗旋力太大弄破袋子。开始的时候，换水要勤一些。每一组同学为下一组准备的胶体的质量，由下一组同学判定。不合格影响本次实验成绩。4，电泳管一定要洗干净，否则无论如何小心都得不到清晰的界面。5，最开始加透析液速度要慢，要耐心。可以左一滴右一滴的加。千万注意不要有震荡，遇到这样的情况，一定要马上停下来，等稳定后再加。界面形成后，可以稍微快些。6，电泳前，电极要进行活化，即插在辅助液中通电要出现明显的气泡，否则电阻过大，电流过小，无法进行电泳。7，电导仪的使用方法：预热 15 分钟，然后根据电导参数进行校正。测量时，电极用去离子水洗后，再用待测溶液淋洗，然后测量溶液电导。同样，使用后用水充分淋洗，然后浸泡在二次水中。两台电导仪有差别，请不要混用。