肠杆菌科鉴定(全).ppt

肠杆菌(gnjn)科南京医科大学临床(lnchun)检验系赵旺胜第一页，共八十七页。一.分布9版伯杰鉴定细菌手册(shuc)分为24个属，108个种现增加到31个属,常见的15个属1.占临床分离菌总数50%2.占G-杆菌总数80%3.占败血症50%4.占尿路感染70第二页，共八十七页。二.临床意义l有些菌属对人类有明显的致病作用有些菌属对人类有明显的致病作用(zuyng)1、鼠疫耶耳森菌-引起烈性传染病2、埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶耳森菌属可导致腹泻、食物中毒.伤寒l有些菌属与医院感染有关有些菌属与医院感染有关1、肺炎2、脑膜炎3、菌血症4、各种部位的感染l多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌第三页，共八十七页。n与人类感染与人类感染(gnrn)有关的肠杆菌科细菌有有关的肠杆菌科细菌有31个菌个菌属，其中临床标本中常见的菌属有属，其中临床标本中常见的菌属有15种种 克雷伯菌属克雷伯菌属 爱德华菌属爱德华菌属 邻单胞菌属邻单胞菌属 变形杆菌属变形杆菌属 普罗威登斯菌属普罗威登斯菌属 沙门菌属沙门菌属 耶尔森菌属耶尔森菌属 志贺菌属志贺菌属 沙雷菌属沙雷菌属 肠杆菌属肠杆菌属 埃希菌属埃希菌属 哈夫尼亚菌属哈夫尼亚菌属 枸橼酸杆菌属枸橼酸杆菌属 摩根菌属摩根菌属 多源菌属多源菌属 第四页，共八十七页。三.微生物特性(txng)n1.G-杆菌，多数有鞭毛、菌毛n2.发酵葡萄糖，兼性厌氧n3.氧化酶阴性4.4.还原还原(hun yun)(hun yun)硝酸盐为亚硝酸盐硝酸盐为亚硝酸盐5.5.触酶（）触酶（）6.6.营养条件不高，第五页，共八十七页。拉丝拉丝(l s)试验试验涂片涂片(t pin)：G-b氧化酶试验氧化酶试验(shyn)非发酵菌、弧菌非发酵菌、弧菌+肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌肠杆菌科细菌、不动、嗜麦芽菌双糖试验双糖试验FO不动、嗜麦芽不动、嗜麦芽肠杆菌科细菌肠杆菌科细菌苯丙苯丙,葡盐葡盐,枸枸,硝硝,赖赖,鸟鸟,氨氨对对,山山,肌肌,侧侧,吲哚吲哚 硝酸盐还原硝酸盐还原+嗜麦芽嗜麦芽不动不动四四、鉴鉴定定流流程程图图第六页，共八十七页。种属鉴定种属鉴定(jindng)科的特征科的特征(tzhng)硝酸盐还原硝酸盐还原(hun yun)葡萄糖发酵葡萄糖发酵氧化酶氧化酶 触酶触酶属间鉴定特征属间鉴定特征属内种间鉴定特征属内种间鉴定特征血清学分型血清学分型报告细菌种名报告细菌种名报告细菌血清型报告细菌血清型概概述述分子生物学鉴定分子生物学鉴定第七页，共八十七页。五、肠杆菌(gnjn)科的初步分群n可用苯丙氨酸和葡萄糖酸盐试验(shyn)将肠杆菌科分为四大组第八页，共八十七页。菌属名苯丙氨酸葡萄糖酸盐变形杆菌属+普鲁维登斯菌属+摩根氏菌属+塔特姆菌属+克雷伯菌属+肠杆菌属+多源菌属+沙雷菌属+西地西菌属+哈夫尼亚菌+埃希菌属志贺菌属沙门(shmn)菌属枸橼酸杆菌属爱德华菌属耶尔森菌属克卢瓦菌属兰恩氏菌属+第九页，共八十七页。六.苯丙氨酸阳性(yngxng)组的各属鉴别n试验变形杆菌属普鲁维登菌属摩根氏菌属塔特姆属nH2S+-n枸橼酸盐+/-+-n靛基质(j zh)+/-+-第十页，共八十七页。1.变形杆菌属内各种(zhn)的鉴别试验普通变形杆菌奇异变形杆菌潘氏变形杆菌产粘液(zhny)变形杆菌靛基质+-鸟基酸-+-木糖+-第十一页，共八十七页。2.普鲁维登菌属各种(zhn)的鉴别试验产碱斯图雷极普鲁维登斯菌普鲁维登斯菌普鲁维登斯菌侧金盏花醇+-+甘露醇+-第十二页，共八十七页。生化反应生化反应雷氏雷氏斯氏斯氏产碱产碱拉氏拉氏海氏海氏吲哚吲哚(yn du)产生产生+-肌醇肌醇 +-V海藻糖海藻糖-+-戊五醇戊五醇+-+-+第十三页，共八十七页。3.摩根菌属种的鉴定(jindng)试验试验(shyn)摩根摩根菌 摩根菌(生物1群)赖氨酸赖氨酸 -+动力动力 +-第十四页，共八十七页。4.塔特姆菌属的鉴定(jindng)苯丙氨酸H2S枸橼酸盐鸟氨酸靛基质(jzh)+-第十五页，共八十七页。+_+苯丙氨酸+H2S枸橼酸盐靛基质鸟氨酸靛基质侧金盏花醇甘露醇普通变形杆菌奇异变形杆菌潘氏变形杆菌产碱普鲁维登斯菌雷极普鲁维登斯菌斯图普鲁维登斯菌摩 根 菌塔特姆菌.苯丙氨酸阳性(yngxng)组菌属鉴别索引图5-第十六页，共八十七页。七.葡萄糖酸盐阳性(yngxng)组各属鉴别试验克雷伯菌属沙雷菌属肠杆菌属 哈夫尼亚菌属多源菌属动力-+DNA酶-+-鸟氨酸-+-枸橼酸盐+-+第十七页，共八十七页。u原克雷伯菌属（原克雷伯菌属（klebsiella）有）有5个种，个种，2个亚种个亚种肺炎肺炎(fiyn)克雷伯菌（克雷伯菌（K.pneumoniae）产酸克雷伯菌（产酸克雷伯菌（K.oxytoca）解鸟氨酸克雷伯菌（解鸟氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica）植生克雷伯菌（植生克雷伯菌（K.planticola）土生克雷伯菌（土生克雷伯菌（K.terrigena）分分 类类克克雷雷伯伯菌菌属属臭鼻亚种臭鼻亚种鼻硬结鼻硬结(yngji)亚种亚种解鸟氨酸柔特勒解鸟氨酸柔特勒(t l)菌（菌（R.ornithinolytica）植生柔特勒菌（植生柔特勒菌（R.planticola）土生柔特勒菌（土生柔特勒菌（R.terrigena）柔特勒菌属柔特勒菌属(Raoultella)This proposal is base on 16S rDNA and rpoB gene sequencing and carbon assimilation studies.第十八页，共八十七页。培养培养(piyng)特征特征 血琼脂上菌落较大，呈血琼脂上菌落较大，呈黏液状，以接种环挑取黏液状，以接种环挑取时易拉成丝时易拉成丝在肠道培养基上呈发酵乳在肠道培养基上呈发酵乳糖小菌落糖小菌落在液体培养基内生长混浊、在液体培养基内生长混浊、浓厚、可见浓厚、可见(kjin)菌膜，管菌膜，管底有粘性沉淀物底有粘性沉淀物 K.pneumoniae 菌落菌落(jnlu)(jnlu)（血平（血平板）板）克克雷雷伯伯菌菌属属第十九页，共八十七页。1.克雷伯菌属各种(zhn)的鉴别试验产酸克雷伯菌肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌靛基质+甲基红+丙二酸盐+第二十页，共八十七页。克雷伯菌和柔特勒克雷伯菌和柔特勒(t l)菌种间鉴定菌种间鉴定表表生化反应生化反应肺炎肺炎克雷克雷伯菌伯菌产酸产酸克雷克雷伯菌伯菌解鸟解鸟氨酸氨酸柔特柔特勒菌勒菌植生植生柔特柔特勒菌勒菌肺炎肺炎克雷克雷伯菌伯菌臭鼻臭鼻亚种亚种肺炎肺炎克雷克雷伯菌伯菌鼻硬鼻硬结亚结亚种种土土生生柔柔特特勒勒菌菌脲酶脲酶+-吲哚产生吲哚产生-+-(-)(-)-鸟氨酸鸟氨酸-+-(-)(-)甲基红甲基红-(-)(-)+V VV-P+V V+-+丙二酸盐丙二酸盐+-+枸橼酸盐枸橼酸盐+V V-V V克克雷雷伯伯菌菌属属第二十一页，共八十七页。S.marcescens菌落特征（普通营养菌落特征（普通营养(yngyng)平板）平板）沙沙雷雷菌菌属属第二十二页，共八十七页。S.marcescens菌落特征菌落特征(tzhng)（普通（普通营养平板）营养平板）沙沙雷雷菌菌属属第二十三页，共八十七页。2.沙雷菌属各种(zhn)的鉴别试验粘质沙雷菌液化沙雷菌红色沙雷菌鸟氨酸+阿拉伯糖+第二十四页，共八十七页。分类：现有分类：现有(xin yu)13个种个种2个生物个生物型型u原有原有7个种个种2个生物个生物(shngw)型型产气肠杆菌产气肠杆菌(E.aerogenes)阴沟肠杆菌阴沟肠杆菌(E.cloacae)杰高维肠杆菌杰高维肠杆菌坂崎肠杆菌坂崎肠杆菌泰洛肠杆菌泰洛肠杆菌中间肠杆菌中间肠杆菌聚团肠杆菌聚团肠杆菌河生肠杆菌生物群河生肠杆菌生物群1河生肠杆菌生物群河生肠杆菌生物群2u后增加后增加(zngji)7个菌个菌阿氏肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌何氏肠杆菌溶解肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌超压肠杆菌克沃尼肠杆菌克沃尼肠杆菌考伯肠杆菌考伯肠杆菌帕瑞勒肠杆菌帕瑞勒肠杆菌 肠肠杆杆菌菌属属第二十五页，共八十七页。3.肠杆菌属各种(zhn)的鉴别试验坂崎杆菌阴沟杆菌产气杆菌格高菲杆菌赖氨酸+山梨醇+本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统本菌属的细菌生化反应不典型，常用的商品化鉴定系统(xtng)很难达到很难达到90以上的鉴定正确率以上的鉴定正确率第二十六页，共八十七页。肠杆菌属种间鉴定肠杆菌属种间鉴定(jindng)表表生化反应生化反应产产气气杰杰高高维维帕帕瑞瑞勒勒聚聚团团河生，河生，生物群生物群1 1癌癌生生阪阪崎崎何何氏氏阴阴沟沟克克沃沃尼尼中中间间考考伯伯阿阿氏氏河生，河生，生物群生物群2 2溶溶解解超超压压赖氨酸脱赖氨酸脱羧酶羧酶+-山梨醇山梨醇+-V V-+VP试验试验+V VV V+-+七叶苷七叶苷+V V+-V V+V V+蜜二糖蜜二糖+V VV V+-+-+-+蔗糖蔗糖+V V+-+V V+-+-精氨酸脱精氨酸脱氢酶氢酶-+V V+-+V VV V+-鸟氨酸脱鸟氨酸脱羧酶羧酶+-V V+-V V+核糖醇核糖醇+-V V-鼠李糖鼠李糖+V V+-+-甲基甲基-D-葡萄糖葡萄糖苷苷+-V V-+V VV V-+黄色素黄色素-V V-+-V V-肠肠杆杆菌菌属属第二十七页，共八十七页。4.哈夫尼亚菌属鉴定(jindng)n葡萄糖酸盐枸橼酸盐棉子糖n+n5.多源菌属种的鉴定试验(shyn)聚团多源菌弥散多源菌赖氨酸-鸟氨酸-水扬苷+-第二十八页，共八十七页。5.葡萄糖酸盐阳性菌属鉴别(jinbi)双岐索引图+-+葡萄糖酸盐+侧金盏花醇赖氨酸鸟氨酸赖氨酸鸟氨酸靛基质枸橼酸盐山梨醇丙二酸盐阴沟肠杆菌产酸克雷伯菌山梨醇肺炎克雷伯菌产气肠杆菌红色沙雷菌多源肠杆菌鼻硬结克雷伯菌臭鼻克雷伯菌哈夫尼亚菌山梨醇格高菲肠杆菌阿拉伯糖贩崎肠杆菌阴沟肠杆菌粘质沙雷菌液化沙雷菌第二十九页，共八十七页。八.苯丙氨酸葡萄糖酸盐阴性(ynxng)组的各属鉴别试验沙门菌属志贺菌属埃希菌属枸橼酸杆菌属耶尔森菌属爱德华菌属甘露醇+ONPG+动力+枸橼酸盐+/+赖氨酸+第三十页，共八十七页。枸枸橼橼酸酸杆杆菌菌属属分分 类类枸橼酸杆菌属（枸橼酸杆菌属（Citrobacter）包括）包括(boku)11个种个种弗劳地枸橼酸杆菌弗劳地枸橼酸杆菌(gnjn)(C.freundii)差异枸橼酸杆菌（差异枸橼酸杆菌（C.diversus）库斯枸橼酸杆菌库斯枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌(C.amalonaticus)（C.koseri）布拉吉枸橼酸杆菌布拉吉枸橼酸杆菌 （C.braakii）雷登枸橼酸杆菌雷登枸橼酸杆菌 （C.rodentium）塞拉克枸橼酸杆菌塞拉克枸橼酸杆菌 （C.sedlakii）魏克曼枸橼酸杆菌魏克曼枸橼酸杆菌 （C.werkmanii）扬哥枸橼酸杆菌扬哥枸橼酸杆菌 （C.youngae）吉乐枸橼酸杆菌吉乐枸橼酸杆菌 （C.gillenii）穆利枸橼酸杆菌穆利枸橼酸杆菌 （C.murliniae）法玛丽枸橼酸杆菌法玛丽枸橼酸杆菌 （C.farmeri）第三十一页，共八十七页。1.枸橼酸杆菌属各种(zhn)的鉴别试验费劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌鸟氨酸+侧金盏花醇+注意：很多鉴定系统注意：很多鉴定系统(xtng)的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类的数据库中不包括枸橼酸杆菌属新种名称和分类资料资料第三十二页，共八十七页。枸橼酸杆菌枸橼酸杆菌(gnjn)种间鉴定表种间鉴定表生化反应生化反应弗弗劳劳地地穆穆利利杨杨格格吉吉乐乐魏魏克克曼曼无无丙丙二二酸酸盐盐法法玛玛丽丽布布拉拉吉吉库库斯斯赛赛拉拉克克雷雷登登鸟氨酸脱羧酶鸟氨酸脱羧酶-+丙二酸盐利用丙二酸盐利用-+-+尿素水解尿素水解V VV V+-+V VV VV V+卫矛醇发酵卫矛醇发酵-+-V VV V+-KCN生长生长+-+-蔗糖发酵蔗糖发酵+V V-V V-+-V V-D阿拉伯醇发阿拉伯醇发酵酵-+-蜜二糖发酵蜜二糖发酵+V V-V V-+-+-枸枸橼橼酸酸杆杆菌菌属属第三十三页，共八十七页。2.爱德华菌属各种(zhn)的鉴别试验迟缓爱德华菌保科爱德华菌鲶鱼爱德华菌H2S+甲基红+第三十四页，共八十七页。3.埃希菌属种的鉴别(jinbi)试验大肠埃希菌大肠埃希菌（不活泼株）葡萄糖产气+动力+第三十五页，共八十七页。致泻性致泻性E.coli分为分为(fn wi)5类：类：肠毒素型大肠埃希菌肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)肠致病性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌(EPEC)肠侵袭型大肠埃希菌肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)肠出血型大肠埃希菌肠出血型大肠埃希菌(EHEC)肠凝聚型大肠埃希菌肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC)埃埃希希菌菌属属临床意义临床意义(Clinical Significance)E.coli以肠道外感染以肠道外感染(gnrn)多见，主要有泌尿系统感染多见，主要有泌尿系统感染(gnrn)E.coli中的致病菌株能引起中的致病菌株能引起(ynq)各种类型的腹泻，各种类型的腹泻，根据其不同的血清型别、毒力和临床症状根据其不同的血清型别、毒力和临床症状第三十六页，共八十七页。鉴定鉴定(jindng)要点要点u不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆，需相互不活跃大肠埃希菌与志贺菌易混淆，需相互(xingh)鉴别鉴别 醋酸钠醋酸钠葡萄糖葡萄糖铵利用铵利用粘质酸盐粘质酸盐产酸试验产酸试验大肠埃希菌大肠埃希菌志贺菌属志贺菌属埃埃希希菌菌属属大肠埃希菌大肠埃希菌 在中国兰平板上为蓝色菌落在中国兰平板上为蓝色菌落(jnlu)大肠埃希菌大肠埃希菌 在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落在伊红美蓝平板上为紫黑色菌落大肠埃希菌大肠埃希菌 在麦康凯和在麦康凯和SS平板上为红色菌落平板上为红色菌落第三十七页，共八十七页。第三十八页，共八十七页。第三十九页，共八十七页。培养培养(piyng)特征特征 u兼性厌氧菌兼性厌氧菌u营养要求不高营养要求不高u菌落菌落(jnlu)呈中等大小、呈中等大小、无色、半透明、光滑无色、半透明、光滑u在在SS平板上，因产生平板上，因产生H2S可形成黑色中心的可形成黑色中心的菌落菌落伤寒伤寒(shnghn)沙门菌菌落形态（沙门菌菌落形态（SS平平板）板）四四沙沙门门菌菌属属第四十页，共八十七页。u常用血清：常用血清：O多价血清（含多价血清（含AF群）群）O、H、Vi抗原抗原(kngyun)因子血清因子血清 方方法法：从从临临床床标标本本中中分分离离到到菌菌株株经经纯纯培培养养后后，符符合合沙门沙门 菌属生物学特性，则菌属生物学特性，则 采用采用A-F多价血清初步确定是否为多价血清初步确定是否为Salmonella 1.如如阳阳性性，即即用用O因因子子血血清清分分群群；再再用用第第一一相相H因因子子血清定型，也可用第二相辅助定型血清定型，也可用第二相辅助定型 2.如阴性：如阴性：应考虑是否有应考虑是否有Vi抗原抗原?血清学分型血清学分型加加热热(ji r)或或传传代代去除去除(q ch)Vi抗原抗原凝集：做凝集：做O多价和单价凝集多价和单价凝集不凝集：可能为不凝集：可能为AF以外以外沙沙门门菌菌属属第四十一页，共八十七页。第四十二页，共八十七页。如是双相菌，进一步用复合血清1、2、5检查(jinch)第2相抗原。群菌型抗原1相2相A甲型副伤寒1,2,12aB乙型副伤寒1,4,12b1.2鼠伤寒1,4,12i1.2C1丙型副伤寒6,7(Vi)C1.5C1猪霍乱6,71.5D伤寒1,9(Vi)d肠炎1,9,12g,m都柏林1,9,12(Vi)g,pE火鸡3,10e,h1.w山夫顿3,15e,h1.bF河伯丁1,3,19g,t第四十三页，共八十七页。u兼性厌氧菌兼性厌氧菌u营养要求不高营养要求不高u普通平板：中等普通平板：中等(zhngdng)(zhngdng)大小、半透明、光滑大小、半透明、光滑u鉴别培养基：乳糖不发鉴别培养基：乳糖不发酵的菌落酵的菌落培养培养(piyng)特性特性菌落形态菌落形态(xngti)（麦康凯平（麦康凯平板）板）志志贺贺菌菌属属第四十四页，共八十七页。种属鉴定种属鉴定(jindng)u菌属特征菌属特征 u发酵发酵(f jio)葡萄糖产酸不产气葡萄糖产酸不产气u赖氨酸（）赖氨酸（）uH2S（）（）u尿素（尿素（）u动力（动力（）志志贺贺菌菌属属第四十五页，共八十七页。5.志贺菌属的鉴定(jindng)n先用志贺多价血清与菌种凝集，如多价血清凝集为志贺菌，多价里不包含(bohn)鲍氏C16-20再进一步用因子血清凝集而定群。亚群和种血清型痢疾A110福氏B1a,1b,2a,2b,3a,3b,4a,4b,5,6鲍氏C1C15宋氏D第四十六页，共八十七页。6.耶尔森菌属各种(zhn)的鉴别试验鼠疫耶耳森菌假结核耶耳森菌小肠耶耳森菌弗氏耶耳森菌中间耶耳森菌鸟氨酸-+鼠李糖-+-+密二糖-+-+第四十七页，共八十七页。第四十八页，共八十七页。7、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐阴性组菌属鉴别(jinbi)双歧索引图+苯 丙 氨 酸、葡 萄 糖 酸 盐 -甘露醇ONPG枸橼酸盐动 力H2S侧金盏花醇赖氨酸沙门菌属志贺菌属迟缓爱德华菌甲基红异型枸橼酸杆菌鸟氨酸葡萄糖产气耶尔森菌属丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌费劳地枸橼酸杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌（不活泼株）保科爱德华菌鲶鱼爱德华菌第四十九页，共八十七页。第五十页，共八十七页。肠杆菌鉴定肠杆菌鉴定(jindng)(jindng)选用多少生化反应管选用多少生化反应管为好为好：苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、赖氨酸、鸟氨酸、氨基酸对照、苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、赖氨酸、鸟氨酸、氨基酸对照、枸橼酸盐、硝酸盐、侧金盏花醇、山梨醇、甘露醇、枸橼酸盐、硝酸盐、侧金盏花醇、山梨醇、甘露醇、ONPGONPG、靛基质、双糖（靛基质、双糖（H H2 2S S）第五十一页，共八十七页。九、兰恩氏菌属的鉴定(jindng)苯丙氨酸葡萄糖酸盐枸橼酸盐靛基质+第五十二页，共八十七页。十.西地西菌属各种(zhn)的鉴别试验戴氏西地西菌拉氏西地西菌奈氏西地西菌鸟氨酸 +-山梨醇 -+第五十三页，共八十七页。十一.克卢瓦菌属各种(zhn)的鉴别试验抗坏血酸克卢瓦菌冷半月克卢瓦菌赖氨酸 +-第五十四页，共八十七页。十二.API鉴定(jindng)系统(20E)菌液制成0.5麦氏浊度(zhud),加入20E板条,第五十五页，共八十七页。第五十六页，共八十七页。火一样(yyng)的热情 浪一样(yyng)的冲劲第五十七页，共八十七页。十三肠杆菌科某些(muxi)菌株的特殊性质第五十八页，共八十七页。1.变形杆菌菌落呈迁延(qinyn)性生长第五十九页，共八十七页。2.克雷伯菌自身(zshn)菌落可拉出丝来第六十页，共八十七页。3.多源聚团菌在M-H平板上产生(chnshng)黄色第六十一页，共八十七页。n4.沙雷菌M-H平板上产生铁锈(tixi)红色第六十二页，共八十七页。5.宋内志贺菌无色不透明菌落第六十三页，共八十七页。6.菌落溶血(rnxu)的大肠杆菌第六十四页，共八十七页。7.能产生(chnshng)H2S的菌株变形杆菌爱德华菌伤寒(shnghn)沙门菌费劳地枸橼酸杆菌大肠杆菌第六十五页，共八十七页。8.如是(rsh)大肠杆菌就应该是赖氨酸阳性枸橼酸阴性靛基质(jzh)阳性侧金花醇阴性第六十六页，共八十七页。9.如是(rsh)二类菌95%枸橼酸试验(shyn)阳性靛基质阴性第六十七页，共八十七页。10.超广谱-内酰胺酶（ESBLS）1983年世界首例报道，最初在肺炎克雷伯菌中检出。长期大量使用第三代头孢菌素后产生(ch(ch nshng)nshng)此酶，由-内酰胺酶突变（内酰胺酶突变（CTMCTM，SHVSHV）而来。）而来。可通过质粒传导，主要由大肠杆菌和克雷伯菌属产生第六十八页，共八十七页。ESBL的筛选与确证的筛选与确证(qu zhn)试验试验第六十九页，共八十七页。、第七十页，共八十七页。n邻邻单单胞胞菌菌属属(Plesiomonas)只只有有(zhyu)一一个个菌菌种种，即即类志贺邻单胞菌类志贺邻单胞菌(P.shigelloides)n该该菌菌属属以以前前归归属属于于弧弧菌菌科科，后后根根据据基基因因特特征征认认为为与与肠肠杆杆菌菌科科细细菌菌有有更更密密切切的的关关系系，而而归归属属于于肠肠杆杆菌科菌科邻邻单单胞胞菌菌属属分分 类类第七十一页，共八十七页。与气单胞菌属、弧菌与气单胞菌属、弧菌(h jn)属鉴别属鉴别菌种菌种氧化氧化酶酶鸟氨鸟氨酸脱酸脱羧酶羧酶纤维纤维二糖二糖TCBS生长生长O/129 敏感试验敏感试验邻单胞菌邻单胞菌+-+气单胞菌属气单胞菌属+-弧菌属弧菌属+-+邻邻单单胞胞菌菌属属第七十二页，共八十七页。同志们好好第七十三页，共八十七页。十四.大肠杆菌(dchnnjn)的特点1.侵袭力K抗原菌毛2.肠毒素LT引起(ynq)腹泻ST第七十四页，共八十七页。大肠杆菌(dchnnjn)的特点引起腹泻(fxi)的五类菌:肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)-旅行者腹泻,水样便肠致病性大肠埃希菌(EPEC)-婴儿腹泻,水泻粘液便肠侵袭性型大肠埃希菌(EIEC)-类似菌痢,脓血粘液便肠出血型大肠埃希菌(EHEC)-水源食源性污染,血便,典型的是O157:H7,引起溶血性尿毒综合症肠凝聚型大肠埃希菌(EaggEC)-慢性腹泻,水样便,无LT和ST第七十五页，共八十七页。大肠杆菌(dchnnjn)的特点对多种糖对多种糖产酸产气产酸产气,吲哚吲哚、甲基红、甲基红、VP VP、枸橼酸盐、枸橼酸盐(IMVC)+-(IMVC)+-五种致病性大肠杆菌要用特异性血五种致病性大肠杆菌要用特异性血清凝集加以清凝集加以(jiy)(jiy)鉴别鉴别第七十六页，共八十七页。十五.沙门(shmn)菌属的特点所有动物可分离到沙门菌,有2000多血清可引起人类(rnli)胃肠炎、败血症、伤寒第七十七页，共八十七页。沙门(shmn)菌属的特点伤寒菌口小肠淋巴结血液(肝脾骨髓)胆囊(dnnng)肠腔Ag+Ab)排出体外第七十八页，共八十七页。S-R变异:菌落(jnlu)光滑-粗糙H-O变异:失去鞭毛位相变异:H抗原双相-一相V-W变异:失去Vi抗原沙门(shmn)菌属的特点第七十九页，共八十七页。沙门(shmn)菌属的特点伊红美兰(EMB)平板菌落(jnlu)无色不透明麦康凯(MAC)平板-菌落无色透明SS平板-菌落无色不透明孔雀绿平板-强选择培养基第八十页，共八十七页。沙门(shmn)菌属的特点肥达反应(fnyng)O H A B C 1:801:1601:801:801:80第八十一页，共八十七页。十六.志贺菌属的特点(tdin)急性菌痢-发烧,腹痛,脓血便,痢疾志贺菌引起的菌痢死亡率高达(od)20%慢性菌痢-反复发作二个月第八十二页，共八十七页。志贺菌属与大肠埃希菌区别:动力阴性,赖氨酸阴性,分解葡萄糖不分解乳糖志贺菌属与伤寒沙门(shmn)菌区别:动力阴性H2S阴性,能于志贺菌因子血清凝集志贺菌属的特点(tdin)第八十三页，共八十七页。本章(bnzhn)重点1.超广谱-内酰胺酶（ESBLs）2.能产生硫化氢的菌有哪些 3.常引起人类腹泻(fxi)的菌有哪些 4.疑为沙门菌,但其与OAF多价血清不凝如何处理 5.肠杆菌科致病力最强的是哪株菌 6.在致腹泻性肠道杆菌中，死亡率最高的是哪种菌 7.伤寒为什么在初愈时会出现肠穿孔大出血 8.G-B、OX-、苯丙、葡盐、侧盏金花醇、赖氨酸、鸟氨 酸、山梨醇、靛基质、药敏试验结果为：亚胺培南敏感、庆大霉素敏感、头孢唑啉耐药、氨曲南耐药、头孢他啶耐药、头孢他啶/帮酸敏感。请鉴定此菌。第八十四页，共八十七页。第八十五页，共八十七页。u常用常用(chn yn)血清：血清：O多价血清（含多价血清（含AF群）群）O、H、Vi抗原因子血清抗原因子血清 方方法法：从从临临床床标标本本中中分分离离到到菌菌株株经经纯纯培培养养后后，符符合合沙沙门门 菌属生物学特性，则菌属生物学特性，则 采用采用A-F多价血清初步确定是否为多价血清初步确定是否为Salmonella 1.如如阳阳性性，即即用用O因因子子血血清清分分群群；再再用用第第一一相相H因因子血清定型，也可用第二相辅助定型子血清定型，也可用第二相辅助定型 2.如阴性：如阴性：应考虑是否有应考虑是否有Vi抗原抗原?血清学分型血清学分型加加热热(ji r)或或传传代代去除去除(q ch)Vi抗原抗原凝集：做凝集：做O多价和单价凝集多价和单价凝集不凝集：可能为不凝集：可能为AF以外以外沙沙门门菌菌属属第八十六页，共八十七页。内容(nirng)总结肠杆菌科。多数菌属是肠道正常菌群，也是条件致病菌。血琼脂上菌落较大，呈黏液状，以接种环挑取时易拉成丝。在液体培养基内生长混浊、浓厚、可见菌膜，管底有粘性沉淀物。沙门菌属。E.coli以肠道外感染多见，主要有泌尿系统感染。方法：从临床(ln chun)标本中分离到菌株经纯培养后，符合沙门 菌属生物学特性，则。再用第一相H因子血清定型，也可用第二相辅助定型。再用第一相H因子血清定型，也可用第二相辅助定型。1,2,12。1,9,12(Vi)第八十七页，共八十七页。