1、家兔实验性肺水肿家兔实验性肺水肿实验目的实验目的1.掌握实验性肺水肿的复制方法;2.观察急性肺水肿的表现及其过程;3.结合理论知识分析肺水肿的发生机理。实验步骤实验步骤1.家兔称重后,经耳缘静脉缓慢注入3%戊巴比妥钠(1ml/kg)进行全身麻醉,随后将兔仰卧固定于兔台上,颈部正中切开皮肤切口长57cm,按常规逐层分离颈部组织,游离出气管、右侧颈外静脉;游离出气管、右侧颈外静脉;(将右侧切开之皮肤,用手指在皮肤外面向上顶起,即可见到呈暗紫色的粗大血管的颈外静脉。用止血钳沿血管走行方向钝性分离,分离长度34cm,穿两线备用。)2.建建立立颈颈外外静静脉脉通通道道。插管时先用动脉夹夹住静脉近心端,待
2、静脉充盈后结扎远心端。用眼科剪在靠近远心端结扎处呈45度角剪一小口(约为管径的1/3或1/2),插入充满生理盐水的静脉导管,结扎固定插管,缓慢输入生理盐水(5-10滴/分);(注意排除管道内气体)4.在气管下方穿一线,于中段处作“”形切口,插入气管套管并结扎固定;(甲甲状状软软骨骨下下第第2 2个个软骨环上进行切开软骨环上进行切开)5.于剑突部位剪毛,用钩针在剑突部位插入皮下,将钩针上的缝线固定在张力传感器上(线的松、紧适中),再通过张力换能器描记呼吸;(注注意意:实实验验后后缝缝针针和和张张力力传传感感器器不不要要卸卸下下来来,仍然留在仍然留在BL-420BL-420上。上。)6.打开BL-
3、420生物机能实验系统,观察并记录动物正常的呼吸,并用听诊器听肺部的呼吸音,然后经静脉导管输入生理盐水(输入总量按100ml/kg计算,输液速度为180-200滴/分),待滴注接近完毕时经通管推注肾上腺素(0.9ml/kg);7.实验过程中记录动物的呼吸,并用听诊器听肺部有无湿性罗音出现,当证明肺水肿出现时,则夹住气管,处死动物,打开胸腔,用用线线在在气气管管分分叉叉处处结结扎扎以以防防止止肺肺水水肿肿液液流流出出,在结扎处以上切断气管,小心将心脏及其血管分离(勿损伤肺),把肺取出,用滤纸吸去肺表面的水分后秤重,计算肺系数,然后肉眼观察肺大体改变。切开肺脏,注意观察有无粉红色泡沫样液体流出。肺
4、肺系系数数计计算算:肺系数=肺重量(g)/体重(kg)(正常家兔肺系数为4-5)注意事项注意事项 1.颈外静脉壁薄,易损伤出血,分离时应仔细行钝性分离,忌用剪刀剪切。在插管过程切忌硬插,以免刺破血管。2.输液速度控制在180-200滴/分(45-50滴/15秒,30-33滴/10秒)为宜;3.解剖取出肺时,注意勿损伤肺表面和挤压肺组织,以防止水肿液流出,影响肺系数值;4.动物对注入肾上腺素的耐受性个体差异较大,有些动物需注入较多量的肾上腺素才出现急性肺水肿。思考题思考题根据实验结果,联系理论,分析肺水肿发生机理。根据实验结果,联系理论,分析肺水肿发生机理。典型结果典型结果l实验兔在注入肾上腺素
5、后当血压升高时,可见呼吸浅慢甚至暂停,但稍后即可恢复。l出现肺水肿时,可见动物口唇紫绀,呼吸困难,以致仰头呼吸,呼吸先浅快后浅慢,心跳增快,听诊可闻啰音。l多数动物可见从口鼻或气管插管有粉红色泡沫状液体流出,最后全身抽搐而死。l肺系数自4.1-5.0增至6.3-12.5(克/千克)。l解剖可见肺脏外形增大,中间有淤血,切面有泡沫液体流出。实验原理实验原理l肺水肿肺水肿是指由于肺内组织间液的生成大于回流,而使肺间质内液体积聚过多溢入肺泡腔的病理过程。l水肿的发生是与影响血管内外液体交换的因素(流体静压、胶体渗透压、血管通透性等)发生了有利于组织液形成的改变有关。即血管内流体静压升高,胶体血管内流
6、体静压升高,胶体渗透压降低,血管通透性增高渗透压降低,血管通透性增高均可促使水肿发生。l肺水肿发生的原因很多,主要为肺毛细血管流体静压升高、肺血容量急剧增加、肺毛细血管通透性增高、血浆胶体渗透压下降、肺淋巴回流障碍肺淋巴回流障碍等。在上述一个或多个因素同时或相继作用下,先出现间质型肺水肿,当肺间质内液体积到一定量时,溢入肺泡腔,发展成肺泡型肺水肿。为什么要快速、大量地输液?为什么要快速、大量地输液?l可引起血容量增加,回心血量增加,血液稀释而致肺毛细血管肺毛细血管内流体静压上升;单位容积血浆蛋白浓度单位容积血浆蛋白浓度下降,血浆胶体渗透压下降,有利于肺水肿发生。也就是说,在大量快速输液的基础上
7、,注入肾上腺素更容易引起肺水肿。l快速,大量输液以不引起对照组发生肺水肿为限度,否则难以观察肾上腺素的作用。肾上腺素为什么会引起肺水肿?肾上腺素为什么会引起肺水肿?l1、因为体循环外周血管的a受体密度较大,注入肾上腺素引起外周血管广泛收缩外周血管广泛收缩,导致血液由体循环急速转移到肺循环由体循环急速转移到肺循环,左心房压力和肺毛细血管流体静压突然升高流体静压突然升高,液体滤入间质空隙增多,随而出现肺水肿。l2、由于肺循环血量急剧增加,血管被动地扩张可使毛细血管内皮细胞的间隙增大,导致血管通透性增大血管通透性增大。(肾上腺素是肾上腺素是受体激动剂受体激动剂,主要作用于小动脉及毛细血管前括约肌,因
8、为这些小血管壁的受体密度比较高;而静脉和大动脉上的受体密度较低,所以肾上腺素作用比较弱。另外,我们从生理学中可知肺循环的血管壁比体循环血管壁薄,因此肺循环上的受体密度也相应比体循环上的低。)实验中是否发现实验中是否发现肺毛细血管通透性增加肺毛细血管通透性增加?l出现粉红色泡沫痰,说明肺毛细血管通透性增高。泡沫痰说明水肿液中蛋白质成分较高,即血浆透过肺血管进入呼吸道,在呼吸过程中气体流过时很容易形成泡沫且不容易消除,使呼吸道内很快被泡沫充塞,严重影响气体交换。粉红色说明有红细胞滲出。(肺水肿一旦发生,则肺泡上皮的屏障功能就会发生根本性的改变,水和各种溶质包括蛋白质、红细胞等都可以不受限制而自由通
9、过上皮层进入气管管腔内,此时水肿液则可随呼吸运动由气管残端排出,故我们可以观察到气管插管内有苍白色或粉红色泡沫液流出。)实验中肺毛细血管通透性增加实验中肺毛细血管通透性增加机制是什么机制是什么?l肺毛细血管壁通透性不仅可因结构或构型改变而发生变化,也因血液动力学因素改变而受影响,包括肺血容量增多和微血管流体静压明显增高。当肺毛细血管流体静压明显增高时,内皮细胞间的空隙增加,甚至可能使毛细血管内皮层被牵张破裂,出现继发性通透性增高。为什么注入肾上腺素可引起为什么注入肾上腺素可引起呼吸抑制甚至暂停?呼吸抑制甚至暂停?l注入肾上腺素可使外周血管广泛收缩,导致血压骤升。通过减压反射可使心血管迷走中枢兴
10、奋性提高,此兴奋也可反射地使呼吸中枢迷走兴奋性加强,抑制呼吸。另由于血流速度增加,颈动脉窦化学感受器的氧供给较为充足,传入呼吸中枢的冲动因而减少,也抑制了呼吸。家兔实验性肺水肿观察指标表肺呼吸频率(次/分)湿罗音粉红色泡沫液颜色质地肺系数对照组对照组60无无暗红柔软5实验组实验组8或无有有粉红较韧15_家兔简介家兔简介l兔,性情温顺,胆小怕惊。草食性。l适用体重:23kg,性成熟年龄:57月,年产56胎,每胎110只(平均6只)。l家兔耳大、血管清晰,便于注射和取血。l家兔正常体温39.0(38.539.50)、心跳频率2582.8次/分,动脉血压110(95130)mmHg,呼吸频率51(3860)次/分,寿命412年。