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细菌大小的测定细菌大小的测定第一部分第一部分 细菌的染色技术细菌的染色技术目的要求目的要求染色剂和染色的原理染色剂和染色的原理实验材料实验材料实验程序实验程序实验材料实验材料显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯。接种环、载玻片、酒精灯。石炭酸复红染液石炭酸复红染液(草酸铵结晶紫染液草酸铵结晶紫染液或蕃红或蕃红染液)染液)菌种:菌种:金黄葡萄球菌或金黄葡萄球菌或大肠杆菌大肠杆菌实验程实验程序序 (细菌染色的方法和步骤)(细菌染色的方法和步骤)(细菌染色的方法和步骤)(细菌染色的方法和步骤)细菌染色的方法细菌染色的方法:简单染色法:简单染色法:用一种染色液染菌体后,就可以观察微生物用一种染色液染菌体后,就可以观察微生物的大小、形状和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的的大小、形状和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。特殊构造等。染色技术的一般过程染色技术的一般过程 涂片干燥固定染色水洗干燥镜检涂片干燥固定染色水洗干燥镜检第二部分第二部分 细菌大小的测定细菌大小的测定目的要求目的要求学习使用目测微尺和物测微尺在显微学习使用目测微尺和物测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。镜下测定微生物大小的方法。测定微生物细胞大小是在显微镜下利用测微尺进行。测微尺可分为目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺目镜测微尺是特制的圆形玻片,中央有一刻度尺(50等分),可放入目镜镜筒内,用于测定细胞大小。镜台测微尺镜台测微尺为一载玻片,上贴有圆形盖片,中央有总长度为1mm(100等分),每小格长0.01mm(10um)。目镜测微尺每小格大小随显微镜放大倍数不同而改变,使用目镜测微尺进行测量之前必须用镜台测微尺标定,以求出在某一放大倍数下目镜测微尺每小格所代表的长度,然后用标定好的目镜测微尺进行测量。实实验原理验原理(1)目测微尺的标定:)目测微尺的标定:1 将目测微尺装入目镜的隔板上,刻度朝下;将目测微尺装入目镜的隔板上,刻度朝下;把物测微尺放在载物台上,刻度朝上。把物测微尺放在载物台上,刻度朝上。2 用低倍镜找到物测微尺的刻度,移动物测用低倍镜找到物测微尺的刻度,移动物测微尺和目测微尺使两者的微尺和目测微尺使两者的第一条刻度线重合第一条刻度线重合,3 顺着刻度找出顺着刻度找出第二条第二条完全重合完全重合完全重合完全重合的刻度线的刻度线。4 计算两刻度间目测微尺的格数和物测计算两刻度间目测微尺的格数和物测 微尺的格数。微尺的格数。由物测微尺的刻度每格长由物测微尺的刻度每格长10m,得,得(2 2)用目镜测微尺测定枯草杆菌大小)用目镜测微尺测定枯草杆菌大小取取下物测微尺,将细菌染色标本置于载物台上,然后在下物测微尺,将细菌染色标本置于载物台上,然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。测定。测定10 0个菌体个菌体求出平均值求出平均值 例如:目镜测微尺在油镜下,每格相当于例如:目镜测微尺在油镜下,每格相当于1.5um,若细若细菌菌体平均长度相当于目镜测微尺的菌菌体平均长度相当于目镜测微尺的2格,则菌体长度格,则菌体长度为为3um 注意:注意:校正目测微尺必须针对特定的显微校正目测微尺必须针对特定的显微镜镜和和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度等等)进行,而且只能在这特定的情况下才进行,而且只能在这特定的情况下才可可重重复使用。复使用。实实验报告验报告 (1 1)目镜测微尺标定结果记录目镜测微尺标定结果记录物镜物镜物镜放大倍数物镜放大倍数目镜测微尺格数目镜测微尺格数镜台测微尺格数镜台测微尺格数目镜测微尺每格目镜测微尺每格代表长度(代表长度(umum)低倍镜低倍镜10油镜油镜100 (2 2)在油镜下测量细菌大小结果记录在油镜下测量细菌大小结果记录 菌菌体体编编号号大肠杆菌测定结果大肠杆菌测定结果金黄色葡萄球菌直径大小结果金黄色葡萄球菌直径大小结果宽宽长长目尺目尺格数格数菌体直菌体直径径平均值平均值目尺目尺格数格数菌体菌体宽宽(umum)平平均均值值目尺目尺格数格数菌体长菌体长(umum)平平均均值值1 12 23 34 45 51 10 0.实验结束实验结束
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