DB42T2085.2-2023水产品加工副产物综合利用技术规范 第2部分：鱼精巢组织酸-酶提取法-(高清版）.pdf

ICS 67.120.30 CCS B 50 DB42 湖北省地方标准 DB42/T 2085.22023 水产品加工副产物综合利用技术规范 第 2 部分：鱼精巢组织酸-酶提取法 Specification for comprehensive utilization of aquatic processing by productsPart 2:Acid-enzyme extraction method of fish spermary 2023-07-27 发布 2023-09-27 实施 湖北省市场监督管理局 发 布 目次 前言.III 引言.IV 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 基本要求.1 4.1 原料要求.1 4.2 辅料要求.2 5 提取技术要求.2 5.1 工艺路线.2 5.2 脱脂.2 5.3 除 RNA.2 5.4 酸提.2 5.5 脱盐.2 5.6 乙醇沉降.2 5.7 酶解.2 5.8 减压干燥.2 6 包装.3 7 质量安全要求.3 8 检验.3 9 废水排放.3 10 质量管理.3 参考文献.4 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件是DB42/T 2085水产品加工副产物综合利用技术规范的第2部分。DB42/T 2085已经发布了以下部分：第1部分：鱼鳞鱼皮酶提取法；第2部分：鱼精巢组织酸-酶提取法。本文件由湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所提出。本文件由湖北省农业农村厅归口管理。本文件起草单位：湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所、湖北清江鲟鱼谷特种渔业有限公司、武汉梁子湖水产品加工有限公司。本文件主要起草人：李海蓝、鉏晓艳、熊光权、李小欣、廖涛、季坚义、李义勇、李鑫淼、白婵、杨国胜、王炬光、邱娟娟、蔡伟、邱亮、李洁。本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话：[phone]，邮箱：。对本标准的有关修改意见建议请反馈至湖北省农业科学院农产品加工与核农技术研究所，联系电话：[phone]，邮箱：。引言 水产品加工副产物的利用是提高其附加值，减少资源浪费和环境污染，推动水产品加工业可持续健康发展的重要环节。根据水产品加工副产物的种类及提取工艺的不同，DB42/T 2085水产品加工副产物综合利用技术规范,拟由2个部分构成。第 1 部分：鱼鳞鱼皮酶提取法。目的在于确立采用酶法从鱼鳞、鱼皮等中提取胶原蛋白肽的工艺流程及关键控制点要求。第 2 部分：鱼精巢组织酸-酶提取法。目的在于确立采用酸-酶法从鱼精巢组织中提取鱼精蛋白肽的工艺流程及关键控制点要求。水产品加工副产物综合利用技术规范 第 2 部分：鱼精巢组织酸-酶提取法 1 范围 本文件规定了鱼精巢组织酸-酶提取法的基本要求、提取技术要求、包装、质量安全要求、检验、废水排放、质量管理。本文件适用于采用酸-酶法从鱼精巢组织中提取鱼精蛋白肽的工艺流程。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2733 鲜、冻动物性水产品卫生标准 GB 2760 食品添加剂使用标准 GB 2762 食品中污染物限量 GB 3838-2002 地表水环境质量标准 GB 4806.7 食品接触用塑料材料及制品 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 7718 预包装食品标签通则 GB 28050 预包装食品营养标签通则 GB 28306 食品添加剂 L-精氨酸 GB 31645 胶原蛋白肽 GB/T 31962-2015 污水排入城镇下水道水质标准 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 鱼精巢组织 fish spermary tissue 又称鱼白，指成熟雄性鱼类的生殖腺。3.2 鱼精蛋白 protamine 又称精蛋白，是一类来源于鱼精巢组织的多聚阳离子蛋白，属于碱性蛋白。4 基本要求 4.1 原料要求 原料鱼质量应符合GB 2733和GB 2762中的相关规定。新鲜鱼精巢组织可直接经清洗后备用；冷冻鱼精巢组织应解冻后才能进行下一工序，解冻方式可采用室温自然解冻或流水解冻，自然解冻时室温不宜高于25，流水解冻水温不宜高于26。优先选取新鲜鱼的精巢组织作为原材料。4.2 辅料要求 加工用水及制冰用水应符合GB 5749的规定；蛋白提取过程中所使用的提取剂或添加剂应符合GB 2760的规定。5 提取技术要求 5.1 工艺路线 鱼精巢组织脱脂除RNA酸提脱盐乙醇沉降酶解减压干燥鱼精蛋白肽。5.2 脱脂 取一定量洗净的鱼精巢组织与2%5%NaHCO3溶液按照料液比1:12混合，浸泡时间为30 min60 min，清洗后沥干水分备用。若不能及时加工处理可放置于-20冻藏备用（需做好冻藏样品名称、冻藏日期等标识）。5.3 除 RNA 将脱脂后的鱼精巢组织经适当搅碎后加入2倍体积0.10 mol/L0.20 mol/L NaCl溶液，机械匀浆1 min，冰浴搅拌20 min，静置10 min，于4、8000 r/min离心10 min15 min，弃去上清液，沉淀重复操作一次，收集沉淀。5.4 酸提 根据沉淀质量加入4-5倍体积的1.0 mol/L硫酸溶液，在强度为1.0 W/cm2的超声中辅助提取1 h2 h，控制提取温度约为45；提取后静置1 h；然后于4、8000 r/min离心10 min20 min，收集上清液。5.5 脱盐 使用NaOH将5.4中上清液pH值调至7左右，用适当过滤精度的膜设备进行循环脱盐，循环温度保持30。5.6 乙醇沉降 纳滤后液体加入3倍4倍体积无水乙醇溶液进行沉淀，于4、8000 r/min离心10 min20 min，弃去上清液，沉淀即为鱼精蛋白。鱼精蛋白相对分子量约为13 kDa。5.7 酶解 使用适合的蛋白酶对5.6收集的鱼精蛋白进行酶解。按照料液比（g/mL）1:50，酶解温度37，pH 7，酶添加量2%（g/100g鱼精蛋白），建议单位酶活12000 U/g鱼精蛋白，酶解时间6 h，进行酶解。待酶解结束后沸水灭酶10 min，在4下以6000 r/min离心20 min，收集上清液，抽滤除去杂质。5.8 减压干燥 将去杂质后的上清液用减压干燥器进行干燥，设定温度为50，真空度3.5 Pa，根据实际情况确定干燥时间，所得干制品即为鱼精蛋白肽，其相对分子量7 kDa。6 包装 将所得鱼精蛋白肽粉末进行定量包装，其包装材料质量应符合GB 4806.7的规定，产品的预包装标签和营养标签应符合GB 7718和GB 28050的规定。产品净含量应符合 定量包装商品计量监督管理方法的规定。7 质量安全要求 产品中相对分子量7 kDa的肽的比例应90%（以干基计），精氨酸含量应15%（以干基计）。产品污染物限量和微生物限量应符合GB 31645的规定。8 检验 精氨酸检验参照GB 28306的规定执行，其他指标检验参照GB 31645的规定执行。9 废水排放 排放的废水需检测pH、氨氮、化学需氧量（COD）、五日生化需氧量（BOD5）、总磷、总氮等指标。排入城镇下水道的废水水质应符合GB/T 31962-2015中B级的规定；排入地表水域的废水水质应符合GB 3838-2002中III类的规定。10 质量管理 10.1 对蛋白提取过程中的关键工序：除杂、脱脂、除 RNA、酸提、纳滤脱盐、沉淀、减压干燥要重点控制。10.2 对蛋白提取过程中的关键参数：NaCl 溶液浓度、硫酸体积、pH 值、干燥温度要重点控制。10.3 生产前应检查设备、工具、容器等是否保持清洁、适宜状态。10.4 生产过程中质量控制发现异常时，应迅速查明原因并采取纠正预防相关措施。参考文献 1 国家市场监督管理总局令第70号公布.定量包装商品计量监督管理方法.2023年3月16日。