GPC凝胶净化系统基础知识.pptx

现状现状食品安全、环境保护日益受到关注。要求仪器更快、更准、更有效。样品前处理对于保证结果的一致与准确至关重要。第1页/共30页主要内容主要内容凝胶色谱的原理LabTech GPC Cleanup系统GPC法规GPC的应用第2页/共30页凝胶色谱的原理凝胶色谱的原理 凝胶色谱：凝胶色谱：Gel Permeation Chromatography Size Exclusion Chromatography 是根据溶质分子大小进行分离的色谱技术。柱填料凝胶具有不同尺寸的孔穴，凝胶孔径与分离组分分 子大小相应，当大小不同的组分分子随流动相进入凝胶，他们进入微孔的程度不同，大分子不能进入孔穴，而分子 越小进入微孔越深。因而保留时间不同。试样中各组分按 分子大小进行洗脱。第3页/共30页第4页/共30页凝胶色谱的固定相凝胶色谱的固定相凝胶色谱柱的固定相种类很多，化学组成分为三类a)有溶胀性的交联高聚物类的疏水性有机凝胶。代表：交联聚苯乙烯。b)水做溶剂的亲水性凝胶，如：交联葡聚糖凝胶、琼脂。c)非溶胀性的无机凝胶，如多空硅胶、多孔玻璃GPC凝胶净化净化柱固定相 EPA推荐：推荐：多空乙烯苯二乙烯苯聚合物 Bio-Breads S-X3 200-400目目 排阻极限：排阻极限：2000 第5页/共30页凝胶色谱的流动相凝胶色谱的流动相原则：原则：在选择溶剂时，应该选择与仪器、净化柱兼容的溶剂及样品 溶解性相符的溶剂。原因：原因：选择性仅与分子大小的差异有关。要改进分离度只能靠凝胶 的孔径大小和孔径分布的最佳化来实现。试样的分离并不依 赖于溶剂与试样间的相互作用力（与一般色谱的不同）.第6页/共30页什么是什么是“凝胶净化系统凝胶净化系统”输液泵将流动相与样品带入净化柱，试样中各组分按照分子大小顺序洗脱，大分子油脂、色素、生物碱、聚合物先淋洗出来农药等较小分子后淋洗出来，检测器检测出信号，组分收集器收集含有目标组分的洗脱液。第7页/共30页输液泵进样阀（自动进样器）GPC净化柱馏分收集器检测器第8页/共30页LabTech GPC凝胶净化系统GPC Cleanup 600GPC Cleanup 800第9页/共30页仪器特点仪器特点高性能输液泵多波长紫外检测器可供选择多种收集管架的馏分收集器 集进样与收集于一体的自动液体处理器多种收集模式第10页/共30页GPC净化柱填料：Bio-Beads SX-3 200-400目（EPA 3640）30g,50g,60g、70g净化柱：不锈钢柱、玻璃柱 尺寸：25*300，25*400，25*500，25*700mm（可定制）第11页/共30页灵活多变的灵活多变的GPC工作站工作站第12页/共30页GPC工作示意图LSM溶剂溶剂废液废液馏分馏分第13页/共30页GPCGPC净化适用法规及推荐方法净化适用法规及推荐方法 US EPA SW-846 方法方法3640AFDA杀虫剂分析方法杀虫剂分析方法AOAC 分析方法分析方法DFG S19 第14页/共30页GPCGPC净化适用法规及推荐方法净化适用法规及推荐方法方法目标物质样品基质流动相填料USEPA 3640AUSEPA 625-S半挥发有机物、BNAs(Bases Neutral Acid),多氯联苯、有机氯杀虫剂环境样品、土壤、底泥等100%二氯甲烷S-X3GelFDA Pesticide Analytical Methods有机氯杀虫剂、有机磷杀虫剂、多氯联苯、各种杀真菌剂等脂肪、谷物、植物材料50/50 乙酸乙酯/环己烷S-X3GelFDA Pesticide Analytical Methods各种杀虫剂和除草剂脂肪食品 羊毛脂50/50 正己烷/二氯甲烷 S-X3GelAOAC Methods of Analysis有机氯农药动物、鱼、家禽、植物油品50/50 环己烷/二氯甲烷AOAC Methods of Analysis有机氯和有机磷杀虫剂、,三嗪化合物、氨基甲酸盐化合物动物、鱼、家禽、植物油品15/85 二氯甲烷/环己烷S-X3GelFDA Pesticide Analytical Methods有机氯 有机磷杀虫剂、多环芳烃脂肪、谷物、植物材料70/30乙酸乙酯/环戊烷S-X3GelGB/T 19650-2005 动物组织中农药多残留分析农药动物组织50/50乙酸乙酯/环己烷S-X3第15页/共30页EPA 3640EPA 3640：GPCGPC净化系统测试净化系统测试EPA SW-846 3640 方法进行校正方法进行校正校准物：玉米油（Corn oil）双（2-乙基己基）邻苯二甲酸酯（bis-(2-ethylhexyl)phthalate）甲氧滴滴涕（methoxychlor）二萘嵌苯（Perylene）硫 LabTech GPC Cleanup600LabTech GPC Cleanup600净化柱净化柱20*300mm 20*300mm Bio-Breads Bio-Breads SXSX3 3 不锈钢柱不锈钢柱第16页/共30页应用应用Why“GPC”?减少对仪器的损害和待机时间提高准确率，确保平行性。提高效率，并且回收率稳定提高回收率提高仪器的检出限节约溶剂节约人力第17页/共30页凝胶渗透色谱净化在土样有机氯测定中的应用（环境科学与技术，vol29，3）第18页/共30页应用领域应用领域农产品及食品农产品及食品（农残、药残）（农残、药残）农残：蔬菜、水果、谷物、饲料、肉类、水产品、茶叶、蜂蜜 二氧杂环：奶类 黄曲霉素：奶类、食油第19页/共30页应用应用1 饲料中有机氯测定（农科院饲料所）称取5.000g配合饲料若干份,分别加提取液25ml，超声提取15min，用加有5g无水硫酸钠漏斗过滤 GPC 条件：条件：LabTech Cleanup 600 二氯甲烷环己烷=11，流速：5.0 ml/min 波长：258nm 标准标准 DDT+六六六的六六六的GPC的流出图的流出图检测样品提取液的检测样品提取液的GPC图图检测样品溶液检测样品溶液GC色谱图色谱图第20页/共30页组分名称组分名称样品溶液样品溶液(n=5)(n=5)峰面积均值峰面积均值回收率均值回收率均值RSDRSD-BHC-BHC3111154.63111154.687.054.0487.054.045.05.0-BHC-BHC147761147761106.55.8106.55.84.14.1-BHC-BHC2796123279612394.164.194.164.14.44.4-BHC-BHC3085146308514697.744.797.744.74.84.8p,pp,p-DDE-DDE2401112240111299.664.699.664.64.74.7o,po,p-DDT-DDT28481332848133101.14.5101.14.54.74.7p,pp,p-DDD-DDD15401071540107105.97.4105.97.47.07.0p,pp,p-DDT-DDT176777176777102.64.5102.64.54.44.4第21页/共30页应用应用2：仪器系统：LabTech GPC Cleanup800GPC条件：流动相：二氯甲烷；检测波长：254nm；流速：3ml/min；进样量5ml。图图1 食用油（含邻苯二甲酸二辛酯）食用油（含邻苯二甲酸二辛酯）图图2 食用油（空白）食用油（空白）第22页/共30页食用油中增塑剂HPLC谱图浓度添加值/ugml-1测定值/ugml-1平均回收率/%555.37883.9610109.53281.754202025.46120.71回收率结果(n=3)第23页/共30页环保环保 多环芳烃（PHAs）：污水、土壤 多氯联苯（PCBs）：废水第24页/共30页应用实例：应用实例：在土壤样品中加入16种多环芳烃混合标准品，萃取浓缩后以LabTech GPC Cleanup 进行净化，对收集部分进行分析。A:mixture of 16 PAHs B:Soil extractionmixture of 16 PAHs and Soil extraction HPLC谱图第25页/共30页经GPC净化后16种多环芳烃的回收率CompoundRecovery(%)Naphthalene89.6Acenaphthylene93.4Acenaphthene90.4Fluorene96.4Phenanthrene92.1Anthracene91.2Fluoranthene97.6Pyrene94.2Benzo(a)anthracene92.1Chrysene97.5Benzo(b)fluoranthene95.1Benzo(k)fluoranthene90.1Benzo(a)pyrene98.6Dibenzo(a,h)anthracene86.4Benzo(g,h,i)perylene90.6Indeno(1.2.3-.cd)pyrene95.2第26页/共30页土壤中应用土壤中应用2 土壤中有机氯GPC净化图片第27页/共30页 “过程”典型的GPC净化残留农药制备过程第28页/共30页有机样品净化、浓缩全套解决方案有机样品净化、浓缩全套解决方案第29页/共30页 Your Your LabLab,Our Tech,Our Tech！北京莱伯泰科仪器有限公司北京莱伯泰科仪器有限公司北京莱伯泰科仪器有限公司 （LabLabLabTech Ltd.Tech Ltd.Tech Ltd.）电话：电话：电话：[phone] 传真：传真：传真：[phone] 电子邮件：电子邮件：电子邮件：电子邮件：电子邮件：电子邮件：第30页/共30页