1、临床微生物质量控制临床微生物质量控制临床微生物的质量控制第1页 临床微生物检验是对人体各种物质进行微生物学检验,整个检验过程包含病人样品采集、运输、处理,样品中致病微生物分离、培养、判定,药品敏感试验,出具检验汇报。临床微生物检验,在感染性疾病及相关病患诊疗治疗预防及研究工作中起着越来越主要作用,为了保障检验结果准确性和可靠性,日常工作中要注意开展质量控制。临床微生物的质量控制第2页临床微生物检验质控工作特点u步骤多u包括知识面广u复杂性高、需要超强责任心临床微生物的质量控制第3页临床微生物检验质量控制相关概念临床微生物检验质量控制相关概念u细菌检验质量细菌检验质量 结果真实显示标本中存在病原
2、菌及其生化特征和抗药性u细菌检验质量控制细菌检验质量控制 制订细菌检验质量水平,并采取监测伎俩,这一过程称为细菌检验质量控制。u质量确保质量确保 为到达应有质量水平而采取办法u质量评价质量评价 用一个客观公认标准来评定一个试验室或试验室中某项试验是否到达标准过程临床微生物的质量控制第4页室间质量控制室间质量控制 室间质量控制是各地试验室之间进行质量控制一个方式,也是上一级试验室对各试验室进行质量管理伎俩。参加由省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织室间质控,会遇见一些平时罕见或未见过菌株,经过质控检验对它们生长条件、菌落形态、染色、镜下形态等有了较深感性认识。日后工作中倘若再遇见这些菌将不再见
3、漏检。临床微生物的质量控制第5页室内质量控制室内质量控制 做好室内质控直接关系到日常检验工作质量。室内质控主要包含几个方面:试验室前质量控制、标本接种前质量控制、培养基质量控制、试剂质量控制、惯用仪器质量控制、药敏试验质量控制、及发汇报前质量控制。临床微生物的质量控制第6页试验室前质量控制试验室前质量控制 要想取得可靠检验结果,首先要取得一份合格标本,所以试验室前质量控制是保障检验结果准确性关键。包含标本采集时间(时 机)、采集方法与运输等。临床微生物的质量控制第7页血液细菌培养血液细菌培养 临床上疑为败血症、脓毒血症或其它血流感染患者,需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离
4、出病原菌,才能正确实施有效地抗菌治疗,从而有利于提升治愈率和降低医疗费用。临床微生物的质量控制第8页1.1.采血时机采血时机 应在用抗菌素治疗前,最好在患者发冷发烧前半小时采血为宜。临床微生物的质量控制第9页2.2.采血次数与间隔采血次数与间隔u急性感染患者急性感染患者 从两臂分别采2份血样。u感染性心内膜炎患者感染性心内膜炎患者 24h内采血3次,每次间隔不少于30分钟。u发烧原因不明患者发烧原因不明患者 2448h后可再采血2次,间隔不少于60分钟。临床微生物的质量控制第10页呼吸道标本细菌培养呼吸道标本细菌培养 u标本留取质量好坏直接影响到对下呼吸道病原学诊疗u标本采集要尽可能降低上呼吸
5、道正常菌群干扰 u应在用药前或停药1天后留取标本。临床微生物的质量控制第11页泌尿道标本细菌培养泌尿道标本细菌培养u应在用药前或停药5天后留取标本,并使尿液在膀胱内停留68h以上。u尽可能防止或降低尿道口正常菌群干扰。u采集中段尿 u尿量不宜太多,试管塞子与尿液不应直接接触 u留取导尿管尿要排空导尿管内陈旧尿液,倘留置尿管超出三天应防止采取。临床微生物的质量控制第12页粪便标本采集粪便标本采集 u应在发病早期而且尽可能在用抗生素治疗前采集,稀便不少于1ml,固体便不少于1克,无便患者可用直肠拭子采集标本。u要挑取含脓、黏液、血等病理改变或水样粪便送检。直肠拭子采样量要足够,拭子上肉眼应可见粪便
6、。临床微生物的质量控制第13页脓液标本 要尽可能防止病灶表面细菌污染。开放性脓肿,采样前无菌盐水冲洗伤口,拭去表面污染脓液,挑取病灶深部脓液;封闭性脓液,严格病灶皮肤或黏膜表面消毒后用无菌干燥注射器穿刺抽取,置无菌试管内送检,或切开排脓时用无菌拭子采集深部脓液。临床微生物的质量控制第14页标本接种前质量控制标本接种前质量控制 各种临床标本送到试验室后,大致检验其是否合格。不合格标本不应进行检验。临床微生物的质量控制第15页痰痰外外 观观 分为脓痰(P)、粘液(M)、血(B)、唾液(S)、水样(W)五个级别,以P、M、B级别适合细菌培养。临床微生物的质量控制第16页痰标本显微镜检验分类痰标本显微
7、镜检验分类分类白细胞上皮细胞5 25 25 1025 3 25 25 2 1025 25 1 25临床微生物的质量控制第17页u13类为不合格标本,不做培养。u45类为合格标本。u油镜下观察并统计可能病原菌,尤其是白细胞内吞噬细菌临床微生物的质量控制第18页首首先先用用灭灭菌菌生生理理盐盐水水将将痰痰液液洗洗3 3次次,然然后后将将痰痰块块打打坏坏,或或加加入入等等量量10g/L10g/L胰蛋白酶将痰块消化后再接种。胰蛋白酶将痰块消化后再接种。临床微生物的质量控制第19页培养基质量控制 u普通性状普通性状u无菌试验无菌试验 u细菌生长试验细菌生长试验临床微生物的质量控制第20页、普通性状、普通
8、性状u外外观观透明、清亮、无混浊、无沉淀,颜色符合要求,表面湿润但无水汽、平整、光洁无凹坑和气泡。整块平板厚薄均匀。u厚厚度度普通厚度在3mm,但MH平板厚度不得小于4mm。斜面长度不得超出试管长度2/3。upHpH 是细菌生长主要条件之一,合格培养基pH应在要求值上下0.2范围内。临床微生物的质量控制第21页2 2、无菌试验、无菌试验 新制备培养基要随机抽取一定数量样品作无菌试验。对于压力蒸气灭菌后倾注固体培养基,抽样后放351温箱培养 2448h;灭菌后经 无 菌 操 作 分 装 液 体 培 养 基 要 全 部 放 入351温箱内培养24h;对有些无需高压灭菌只需煮沸消毒选择性培养基要取部
9、分琼脂,放入无菌肉汤管培养24h。上述试验证实无细菌生长时才算合格。若有细菌生长,说明培养基制备过程中已受杂菌污染,除了寻找原因外,应不再使用。临床微生物的质量控制第22页、细菌生长试验、细菌生长试验 全部培养基在使用前除了做无菌试验外还必须用已知标准菌株做细菌生长试验以测定培养基性能是否符合要求。标准菌株分 2 种:一个是已知可在某种培养基上生长并产生经典生物学性状,对培养基中某种物质产生阳性反应菌株;另一个是用已知不能在某种培养基上生长或对培养基中某种物质产生阴性生化反应菌株。临床微生物的质量控制第23页试剂质控试剂质控 临床微生物试验室惯用试剂包含染色液、诊疗血清以及各种生化反应试剂等。
10、临床微生物的质量控制第24页染色液及染色方法质量控制染色液及染色方法质量控制 染色液配置必须按标准方法与分量,过滤后使用,每次统计配置量与操作者。还要进行染色步骤质控。如革兰染色在一张玻片上同时涂有金葡菌和大肠杆菌。以确保染色性判断准确无误。临床微生物的质量控制第25页惯用生化试剂质控惯用生化试剂质控 伴随细菌判定仪和快速微量生化判定板条普及,临床微生物检验惯用生化试剂种类日趋降低,应注意在用试剂在贮存时避光、冷藏等要求,确保试剂稳定性。不要使用过期试剂。临床微生物的质量控制第26页诊疗血清质控诊疗血清质控 诊疗血清是一个主要细菌判定试剂,应从有资质生产单位购置。验收时必须看清生产批号、血清效
11、价、透明度与色泽。试验中应注意无菌操作,防止细菌污染。要经常检验贮存在4冰箱中各种血清,若发觉混浊,出现絮状,应停顿使用。为确保血清凝集反应结果准确,应每3个月对血清进行一次质控。不要使用过期血清。临床微生物的质量控制第27页仪器设备质控仪器设备质控 包含对冰箱、二氧化碳孵箱、普通孵箱、水浴箱等基本设备每日温度、气体浓度监控统计;显微镜、细菌判定仪等仪器使用、保养、维修统计。以保障试验室各种设备、仪器正常运转。临床微生物的质量控制第28页药品敏感试验质控药品敏感试验质控 药品敏感试验是临床微生物检验主要步骤之一,其结果正确是否包括治疗效果好坏。临床微生物的质量控制第29页影响药敏试验原因u菌悬
12、液浓度u药敏纸片质量uMH 培养基质量u孵育时间、温度、气体u操作人员技术临床微生物的质量控制第30页药敏质控系统药敏质控系统u经过正规培训,掌握药敏试验操作方法人员 u有标准操作规程,包含药敏试验方法、标准菌株种类及应用、药敏试验质控方法及允许范围、药品种类选择与判断标准等 u有试验所需质控菌株 u使用质量合格消耗性检验材料 u仪器设备运转正常,控制标准在允许范围内 临床微生物的质量控制第31页纸片药敏试验室内质控纸片药敏试验室内质控u基础质控:连续做30天,如失控超出3次还需继续,如失控低于3次可改为每七天1次。u纠控:每七天质控中发生失控应纠控,方法:连续5天,天天1次,每次重复5个纸片,如找到明确失控原因,可马上改为每七天1次,不然继续。临床微生物的质量控制第32页发汇报前质量控制发汇报前质量控制u核实病原菌判定结果u被判定细菌菌落形态、生化特征等与判定出来菌种是否相吻合 u被判定菌是否真需要或值得判定与汇报u核实药敏结果u抑菌圈测量是否准确u特殊药敏现象有没有遗漏u是否符合耐药规则临床微生物的质量控制第33页 最终质控是前面全部质控效果总体表现,也是质控最终目标:临床微生物试验室发出检验汇报准确、可靠,对临床医生就有较高诊疗、治疗参考价值。临床微生物的质量控制第34页谢谢!谢谢!临床微生物的质量控制第35页