JJF 1614-2017抗生素效价测定仪校准规范-(高清原版）.pdf

中华人民共和国国家计量技术规范J J F1 6 1 42 0 1 7抗生素效价测定仪校准规范C a l i b r a t i o nS p e c i f i c a t i o nf o rA n t i b i o t i c sP o t e n c yA n a l y z e r s 2 0 1 7-0 2-2 8发布2 0 1 7-0 5-2 8实施国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局 发 布市场监管总局市场监管总局抗生素效价测定仪校准规范C a l i b r a t i o nS p e c i f i c a t i o nf o rA n t i b i o t i c sP o t e n c yA n a l y z e r sJ J F1 6 1 42 0 1 7 归 口 单 位:全国生物计量技术委员会 主要起草单位:河南省计量科学研究院 参加起草单位:中国计量科学研究院济宁市计量测试所 本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局本规范主要起草人:丁峰元(河南省计量科学研究院)隋志伟(中国计量科学研究院)许建军(河南省计量科学研究院)雷军锋(河南省计量科学研究院)参加起草人:孙 文(济宁市计量测试所)张 玲(中国计量科学研究院)纪祥娟(济宁市计量测试所)J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局目 录引言()1 范围(1)2 引用文件(1)3 概述(1)4 计量特性(1)5 校准条件(2)5.1 环境条件(2)5.2 校准设备(2)6 校准项目和校准方法(2)6.1 管碟法仪器(2)6.2 浊度法仪器(3)7 校准结果表达(5)8 复校时间间隔(5)附录A 校准记录格式(6)附录B 校准证书内页格式(8)附录C 测量不确定度评定示例(9)J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局引 言本规范主要依据J J G8 6 12 0 0 7 酶标分析仪检定规程、J J F1 1 0 12 0 0 3 环境试验设备温度、湿度校准规范,参考 中华人民共和国药典完成本规范的制定。本规范为首次发布。J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局抗生素效价测定仪校准规范1 范围本规范适用于管碟法和浊度法的抗生素效价测定仪(以下简称仪器)的校准。2 引用文件本规范引用了下列文件:J J G8 6 12 0 0 7 酶标分析仪J J F1 0 7 12 0 1 0 国家计量校准规范编写规则J J F1 1 0 12 0 0 3 环境试验设备温度、湿度校准规范中华人民共和国药典凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。3 概述仪器是通过检测抗生素对试验菌生长的抑制作用,计算抗生素的效价。根据测量原理,仪器分为管碟法和浊度法两种。管碟法仪器是利用抗生素在固体培养基内的扩散作用,通过分别测量标准样品和被测样品对接种的试验菌在固体培养基上产生抑菌圈的直径值或面积值,以计算被测样品抗生素效价的仪器。浊度法仪器是利用抗生素对液体培养基中试验菌生长的抑制作用,通过分别测量加入标准样品和被测样品的液体培养基的吸光度值,以计算被测样品抗生素效价的仪器。4 计量特性参考J J G8 6 12 0 0 7第3章和J J F1 1 0 12 0 0 3第4章要求,仪器校准项目及技术指标见表1。表1 校准项目及技术指标要求仪器类型校准项目技术指标管碟法直径示值误差0.1mm直径测量重复性0.1mm浊度法吸光度零点漂移0.0 0 5吸光度示值漂移0.0 0 5吸光度示值误差0.0 3吸光度测量重复性0.0 0 5吸光度通道差异0.0 31J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局表1(续)仪器类型校准项目技术指标浊度法温度偏差1.0温度均匀度1.0温度波动度0.5 注:以上技术指标不是用于合格性判别,仅供参考。5 校准条件5.1 环境条件仪器使用允许的环境条件,校准过程中应记录环境温度、相对湿度数据。5.2 校准设备5.2.1 标准圆盘含二剂量和三剂量标准圆盘各一块。二剂量标准圆盘:含S1,S2,T1,T2共4个圆孔。参照 中华人民共和国药典要求,S2孔直径在1 8mm2 2mm范围内,孔直径:S1S2,T1T2,每个圆孔直径扩展不确定度优于0.0 3mm(k=2)。三剂量标准圆盘:含S1,S2,S3,T1,T2,T3共6个圆孔。参照 中华人民共和国药典要求,S2孔直径在1 5mm1 8mm范围内,孔直径:S1S2S3,T1T2T3,每个圆孔直径扩展不确定度优于0.0 3mm(k=2)。5.2.2 数字温度计可至 少 同 时 测 量5组 温 度 数 据,测 量 范 围 满 足2 0 4 0,最 大 允 许 误差0.3。5.2.3 光谱中性滤光片吸光度标称值为0.3、0.5、0.7、1.0的滤光片各1片,每片在波长5 3 0n m和5 8 0n m处有吸光度标准值,相对扩展不确定度优于2%(k=2)。6 校准项目和校准方法6.1 管碟法仪器6.1.1 直径示值误差根据仪器测量方式,选择相应的二剂量标准圆盘或三剂量标准圆盘。将标准圆盘平稳放入仪器通道中,测量标准圆盘各孔直径,每孔重复测量3次,按式(1)计算每孔的直径示值误差。如果仪器为多通道,其他通道的直径示值误差按照以上方法测量。D=D-Ds(1)式中:D 某孔直径示值误差,mm;D 该孔3次直径测量平均值,mm;Ds 该孔直径标准值,mm。2J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局6.1.2 直径测量重复性按照6.1.1的方法,对S2孔连续测量6次,按式(2)计算直径测量标准偏差s,即为直径测量重复性。sD=ni=1(Di-D)2n-1(2)式中:sD 直径测量标准偏差,mm;n 重复测量次数,n=6;Di S2孔第i次直径测量值,mm;D S2孔n次直径测量平均值,mm。6.2 浊度法仪器6.2.1 吸光度零点漂移及示值漂移在无遮挡光路条件下,以空气为参比,调节仪器吸光度为0.0 0 0,3 0m i n后再记录仪器吸光度示值,即为吸光度零点漂移。将吸光度标称值为1.0的滤光片垂直置于样品槽中,以空气为参比,测量仪器初始吸光度示值,3 0m i n后再次测量仪器吸光度示值,按式(3)计算吸光度示值漂移。r=A3 0m i n-A初始(3)式中:r 吸光度示值漂移;A3 0m i n 3 0m i n后仪器吸光度示值;A初始 仪器初始吸光度示值。6.2.2 吸光度示值误差根据仪器的工作波长,在无遮挡光路条件下,以空气为参比,将吸光度标称值为0.3、0.5、0.7、1.0的4片滤光片分别垂直置于样品槽中。每片滤光片重复测量3次,取其平均值,按式(4)计算每片滤光片的吸光度示值误差。A=A-As(4)式中:A 某滤光片吸光度示值误差;A 该滤光片3次吸光度测量平均值;As 该滤光片吸光度标准值。6.2.3 吸光度测量重复性按照6.2.2方法,对吸光度标称值为0.5的滤光片连续测量6次,按式(5)计算吸光度测量标准偏差s,即为仪器吸光度测量重复性。sA=ni=1(Ai-A)2n-1(5)3J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局 式中:sA 吸光度测量标准偏差;n 吸光度重复测量次数,n=6;Ai 第i次测量吸光度值;A n次测量吸光度平均值。6.2.4 吸光度通道差异将标称值为0.5的滤光片依次垂直置于各通道样品槽中,以空气为参比,每个通道连续测量3次取平均值作为该通道吸光度示值,各通道吸光度示值的最大值与最小值之差为通道差异,按式(6)计算吸光度通道差异。R=Am a x-Am i n(6)式中:R 吸光度通道差异;Am a x 各通道吸光度示值的最大值;Am i n 各通道吸光度示值的最小值。6.2.5 温度偏差在仪器控温方阵中心孔位比色皿中加入2/3体积的蒸馏水,将数字温度计测温端置于该比色皿内蒸馏水的中部。设定仪器温度为工作温度,当温度稳定后,每隔3m i n分别记录仪器温度显示值和数字温度计实测值,数字温度计实测值即为对应孔位的温度测量值,连续记录1 0次。1 0次仪器温度显示值的平均值为仪器温度示值,1 0次中心孔位温度测量值的平均值为该孔位温度标准值。温度偏差为仪器温度示值与仪器中心孔位温度标准值之差,按式(7)计算。td=td-t0(7)式中:td 温度偏差,;td 仪器温度示值,;t0 仪器中心孔位温度标准值,。6.2.6 温度均匀度按照6.2.5方法,测量仪器控温方阵5个孔位的温度(分别为中心孔位和其他均匀分布的4个孔位)。当温度稳定后,每隔3m i n分别记录5个测温孔位的温度测量值,连续记录1 0次,按式(8)计算温度均匀度。tu=ni=1(tim a x-tim i n)n(8)式中:tu 温度均匀度,;tim a x 第i次测量时5个孔位温度测量值的最大值,;tim i n 第i次测量时5个孔位温度测量值的最小值,;4J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局n 温度测量次数,n=1 0。6.2.7 温度波动度按照6.2.5方法进行测量,温度波动度为仪器控温方阵中心孔位温度随时间的变化量,即中心孔位在3 0m i n内,1 0次温度测量值的最大值与最小值之差的一半,冠以“”号,按式(9)计算。tf=(t0 m a x-t0 m i n)2(9)式中:tf 温度波动度,;t0 m a x 中间孔位1 0次温度测量值的最大值,;t0 m i n 中间孔位1 0次测量测量值的最小值,。7 校准结果表达经校准后的抗生素效价测定仪应填发校准证书,校准证书应符合J J F1 0 7 12 0 1 0中5.1 2的要求,根据附录A的原始记录及附录C的不确定度评定示例,参照附录B给出校准项目名称、测量值以及扩展不确定度。8 复校时间间隔由于复校时间间隔的长短是由仪器的使用情况、使用者、仪器本身质量等诸因素所决定的,因此,送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔,建议不超过1年。5J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局附录A校准记录格式(推荐性格式)送校单位:校准日期:年 月 日仪器名称:制造厂:型号:出厂编号:证书编号:校准地点:环境温度:相对湿度:%A.1 管碟法仪器A.1.1 直径示值误差 mm通道圆孔标准圆盘直径标准值直径测量值123直径测量平均值直径示值误差S1S2S3T1T2T3A.1.2 直径测量重复性 mm圆孔直径测量值123456测量重复性S2A.2 浊度法仪器A.2.1 吸光度零点漂移及示值漂移项目吸光度初始值3 0m i n后吸光度值漂移值零点漂移示值漂移A.2.2 吸光度示值误差仪器波长n m滤光片编号吸光度标准值吸光度测量值123吸光度测量平均值吸光度示值误差6J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局A.2.3 吸光度测量重复性滤光片编号吸光度测量值123456测量重复性A.2.4 吸光度通道差异通道吸光度测量值123吸光度测量平均值通道差异A.2.5 控温性能比色皿孔位温度测量值1234567891 0平均值左上右上左下右下中间单次均匀度仪器温度示值温度偏差 ;温度均匀度 ;温度波动度 。7J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局附录B校准证书内页格式(推荐性格式)B.1 管碟法仪器序号校准项目校准结果1直径示值误差2直径测量重复性 本次校准直径示值误差测量结果的不确定度为:B.2 浊度法仪器序号校准项目校准结果1吸光度零点漂移2吸光度示值漂移3吸光度示值误差4吸光度测量重复性5吸光度通道差异6温度偏差7温度均匀度8温度波动度 本次校准吸光度示值误差测量结果的不确定度为:校准员:核验员:8J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局附录C测量不确定度评定示例C.1 管碟法仪器直径示值误差的不确定度评定C.1.1 测量模型D=D-Ds式中:D 某孔直径示值误差,mm;D 该孔3次直径测量平均值,mm;Ds 该孔直径标准值,mm。C.1.2 不确定度来源1)直径测量重复性引入的不确定度;2)标准圆盘标准值引入的不确定度。C.1.3 不确定度的计算C.1.3.1 直径测量重复性引入的不确定度u(D)对S2孔连续1 0次的测量值为:2 1.7 9mm,2 1.7 9mm,2 1.8 0mm,2 1.7 9mm,2 1.8 1mm,2 1.8 0mm,2 1.7 9mm,2 1.7 9mm,2 1.8 1mm,2 1.8 2mm。则s(D)=ni=1(Di-D)2n-1=0.0 1 1mm实际以3次测量平均值为测量结果,则u(D)=0.0 1 1/3=0.0 0 64mm。C.1.3.2 标准圆盘标准值引入的不确定度u(Ds)标准圆盘校准证书的扩展不确定度为0.0 0 4mm(k=2),则u(Ds)=0.0 0 2mm。C.1.4 标准不确定度分量一览表直径示值误差测量结果的标准不确定度分量见表C.1。表C.1 直径示值误差测量结果的标准不确定分量一览表标准不确定度分量ui来源标准不确定度/mmu(D)测量重复性0.0 0 64u(Ds)标准圆盘0.0 0 2C.1.5 合成标准不确定度uc(D)=u(D)2+u(Ds)2=0.0 0 67mmC.1.6 扩展不确定度取包含因子k=2,则仪器直径示值误差的扩展不确定度为:U=kuc(D)=20.0 0 67mm=0.0 2mmC.2 浊度法仪器吸光度示值误差的不确定度评定J J F1 6 1 42 0 1 7市场监管总局市场监管总局J J F1 6 1 42 0 1 7C.2.1 测量模型A=A-As式中:A 某滤光片吸光度示值误差;A 该滤光片3次测量吸光度平均值;As 该滤光片吸光度标准值。C.2.2 不确定度来源1)吸光度测量重复性引入的不确定度;2)光谱中性滤光片引入的不确定度。C.2.3 不确定度的计算C.2.3.1 吸光度测量重复性引入的不确定度u(A)对吸光 度 标 称 值 为0.3的 中 性 滤 光 片 连 续1 0次 的 测 量 值 为:0.3 0 2,0.3 0 3,0.3 0 5,0.3 0 4,0.3 0 2,0.3 0 4,0.3 0 2,0.3 0 3,0.3 0 4,0.3 0 4。则s(A)=ni=1(Ai-A)2n-1=0.0 0 11实际以3次测量平均值为测量结果,则u(A)=0.0 0 11/3=0.0 0 06 4。C.2.3.2 光谱中性滤光片引入的不确定度u(As)光谱中性滤光片校准证书的相对扩展不确定度为2%(k=2),标准值为0.3 0 1,则u(As)=0.3 0 12%/2=0.0 0 3。C.2.4 标准不确定度分量一览表吸光度示值误差测量结果的标准不确定度分量见表C.2。表C.2 吸光度示值误差测量结果的标准不确定分量一览表标准不确定度分量ui来源标准不确定度u(A)测量重复性0.0 0 06 4u(As)光谱中性滤光片0.0 0 3C.2.5 合成标准不确定度uc(A)=u(A)2+u(As)2=0.0 0 31C.2.6 扩展不确定度取包含因子k=2,则仪器吸光度示值误差的扩展不确定度为:U=kuc(A)=20.0 0 31=0.0 0 7市场监管总局市场监管总局