三阴性乳腺癌组织中ZNF5...预后及腋窝淋巴结转移的关系_蒋楠.pdf

现代医学Modern Medical Journal2023，Apr;51(4):462-468 收稿日期2023-01-01 修回日期2023-04-12 基金项目河北省卫生健康委科研基金项目青年科技课题(20210771)作者简介蒋楠(1985 )，男，河北保定人，主治医师，医学硕士。E-mail:jiangnan7450163 com 通信作者马杰E-mail:tjmajie2022163 com 引文格式蒋楠，王雅琪，陈晶晶，等 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系 J 现代医学，2023，51(4):462-468 论著 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系蒋楠，王雅琪，陈晶晶，崔志超，王宏，马杰(唐山市人民医院 乳腺外一科，河北 唐山063001)摘要目的:探讨三阴性乳腺癌组织锌指蛋白 545(ZNF545)的表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测 107 例三阴性乳腺癌患者癌组织中 ZNF545、Wnt/-catenin 信号通路相关蛋白(-catenin 和 C-myc)表达水平。采用 Logistic 多因素分析影响三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的影响因素。Kaplan-Meier 法用于三阴性乳腺癌患者预后的单因素分析，Cox 比例风险回归模型用于三阴性乳腺癌患者预后的多因素分析。结果:三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 低表达者 50 例(46 7%)。ZNF545 低表达患者腋窝淋巴结转移高于 ZNF545 高表达患者(2=4 709，P=0 030)，ZNF545 表达水平与-catenin、C-myc 表达水平均呈负相关(r 值分别为 0 553 和 0 551，均 P 0 001)。ZNF545 低表达患者的 5 年总生存(OS)率(58 0%)低于 ZNF545 高表达患者(84 2%)，差异有统计学意义(2=9 839，P=0 002)。多因素分析显示，ZNF545 低表达(O=2 462，95%CI 1 186 5 750，P=0 017)、组织学分级低(O=2 650，95%CI 1 101 4 924，P=0 027)及有淋巴结转移(O=6 307，95%CI 2 651 16 351，P 0 001)是三阴性乳腺癌患者预后的独立危险因素。ZNF545 低表达是三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的独立危险因素(O=2355，95%CI 1 080 5 134，P=0 031)，且 ZNF545 表达水平与腋窝淋巴结转移数目呈负相关(r=0.324 1，P=0 013)。结论:ZNF545 低表达是三阴性乳腺癌患者预后和腋窝淋巴结转移的独立危险因素，其可能通过影响 Wnt/-catenin 信号通路相关蛋白参与三阴性乳腺癌的进展。关键词锌指蛋白 545;三阴性乳腺癌;淋巴结转移;预后 中图分类号392 3 文献标志码A 文章编号1671-7562(2023)04-0462-07doi:10 3969/j issn 1671-7562 2023 04 006elationship between ZNF545 expression and prognosis and axillarylymph node metastasis in triple negative breast cancerJIANG Nan，WANG Yaqi，CHEN Jingjing，CUI Zhichao，WANG Hong，MA Jie(Department of Breast Surgery，Tangshan Peoples Hospital，Tangshan 063001，China)AbstractObjective:To investigate the relationship between zinc finger protein 545(ZNF545)expression andprognosis and axillary lymph node metastasis in triple negative breast cancer(TNBC)Methods:The expressionlevels of ZNF545 and Wnt/-catenin signaling pathway related proteins(-catenin and C-myc)in 107 cancerissues of TNBC patients were detected by immunohistochemical staining Logistic multivariate analysis was used toanalyze the influencing factors of axillary lymph node metastasis of TNBC Kaplan-Meier method was used to264analyze the single factor survival of patients with TNBC Cox proportional hazard regression model was used toanalyze the independent prognostic factors of TNBC patients esults:There were 50 cases(46 7%)with lowexpression of ZNF545 in TNBC The axillary lymph node metastasis rate of ZNF545 low expression group washigher than that of ZNF545 high expression group(2=4 709，P=0 030)The expression level of ZNF545 wasnegatively correlated with the expression levels of-catenin and C-myc(r=0 553 and 0 551，respectively，P 0 001)The 5-year overall survival(OS)rate of ZNF545 low expression group(58 0%)was lower than that ofZNF545 high expression group(84 2%)，and the difference was statistically significant(2=9 839，P=0 002)Multivariate analysis showed that lower expression of ZNF545(O=2 462，95%CI 1 186 5 750，P=0 017)，lower histological grade(O=2 650，95%CI 1 101 4 924，P=0 027)and lymph node metastasis(O=6 307，95%CI 2 651 16 351，P 0 001)were independent prognostic risk factors for patients with TNBC Lowexpression of ZNF545 was an independent risk factor for axillary lymph node metastasis in patients with TNBC(O=2 355，95%CI 1 080 5 134，P=0 031)The expression level of ZNF545 was negatively correlated with thenumber of axillary lymph node metastases(r=0 324 1，P=0 013)Conclusion:Low expression of ZNF545，which may be involved in the process of TNBC by affecting Wnt/-catenin signaling pathway related proteins，is anindependent risk factor of prognosis and axillary lymph node metastasis in patients with TNBC Key wordszinc finger protein 545;triple negative breast cancer;lymph node metastasis;prognosis与其他类型的乳腺癌相比，三阴性乳腺癌更容易复发和转移1。寻找评价三阴性乳腺癌转移的新型分子生物学标志物是临床和基础研究的重点内容。启动子区 CpG 岛(CGI)的高甲基化是肿瘤抑制基因沉默的一种机制，可能发生在肿瘤早期，并已被用作三阴性乳腺癌诊断的新的肿瘤标志物2。锌指蛋白(ZNF)的异常表达有助于各种癌症的发生。不同类型的 ZNF显示出巨大的生物功能多样性。约三分之一的 ZFP包含 kruppel 相关盒(KAB)基序，超过一半的 KABZFP 聚集在区域 19q13。KAB ZFPs 在调节细胞增殖、凋亡、分化和肿瘤发生中发挥重要作用。锌指蛋白545(ZNF545)是 Dapper 的同源物，位于染色体区域19q131，最初被鉴定为 Wnt/-catenin 和 JNK 信号通路的去水平(Dvl)相关拮抗剂3。ZNF545 已显示在几种肿瘤中表达减少，ZNF545 表达异常与肿瘤患者预后不良相关4-5。然而，ZNF545 在三阴性乳腺癌发病机制中的表达和生物学功能尚不清楚。本研究采用免疫组织化学染色法检测三阴性乳腺癌组织中 ZNF545表达情况，分析其与临床病理特征和腋窝淋巴结转移的关系，基于 Wnt/-catenin 信号通路背景进一步证明ZNF545 在三阴性乳腺癌中的生物学功能。1资料与方法1 1一般资料收集 2015 年 1 月至 2017 年 12 月在唐山市人民医院进行手术切除的 107 例三阴性乳腺癌患者的临床资料及病理标本。纳入标准:(1)年龄 18 岁;(2)组织病理学检查证实为浸润性导管癌;(3)临床资料完整。排除标准:(1)合并其他部位肿瘤;(2)术前接受过放疗或化疗;(3)临床资料不全。本研究经医院伦理委员会批准(MYY-LLKS-2020-052)。1 2免疫组织化学染色法检测组织切除三阴性乳腺癌患者肿瘤组织后，将其包埋在石蜡中，切片 5 m，并置于聚 L-赖氨酸玻片上。将组织切片在65 下孵育4 h，用二甲苯脱蜡，不同密度的乙醇再水合，并在 3%H2O2中孵育 10 min，以消除内源性过氧化物酶活性。用 10 mmolL1柠檬酸钠缓冲液(pH=6 0)重 新 检 测 抗 原，并 与 兔 抗 ZNF545(Abcam 公司，1 200，ab228946)、兔抗-catenin(美国圣克鲁斯公司，1 2 000)和兔抗 C-myc(中国中山金桥公司，1 100)在 4 下孵育过夜。然后，将切片用磷酸波形蛋白缓冲盐水(PBS)洗涤 3 次，在 37 下与二级抗体孵育 30 min。用 PBS 洗涤 3 次后，将切片与 3，30-二氨基联苯胺(DAB)孵育 1 min，然后用苏木精孵育3 min。最后，将切片脱水并密封。每张切片随机取 10 个视野，每个视野计数 100 个细胞，根据细胞的染色强度及阳性细胞比例判断目的蛋白表达情况。染色强度评分:0 分(阴性)，1 分(浅黄色)，2 分(棕黄色)，3 分(棕褐色)。阳性细胞比例评分:1 分(0%9%)，2 分(10%49%)，3 分(50%79%)，4 分(80%100%)。将两项得分相乘得出最终结果:0分()，1 4 分(+)，5 8 分(+)，9 12 分(+)。0 4 分为低表达，5 12 分为高表达 6。1 3统计学处理采用 SPSS 21 0 软件进行数据分析。计数资料组364蒋楠，等 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系间比较采用 2检验;多因素分析采用 Logistic 回归分析;相关性分析采用 Spearman 秩相关分析。生存曲线通过 Kaplan-Meier 法进行分析，并与对数秩检验进行比较。Cox 比例风险回归模型用于多因素生存分析。P 0 05 为差异有统计学意义。2结果2 1患者临床病理资料入组患者年龄 26 81 岁，平均年龄(58 45 10.71)岁;绝经期 38 例;组织学分级 级 68 例，级 32 例;肿瘤2 cm 59 例;Ki-67 20%66 例;发生腋窝淋巴结转移 48 例。2 2ZNF545 在三阴性乳腺癌组织中的表达ZNF545 主要表达于三阴性乳腺癌细胞的细胞质和细胞核中，其中 ZNF545 低表达 50 例(46.7%)，高表达57 例(53 3%)。免疫组织化学染色评分示例见图 1。A、B ZNF545 低表达;C、D ZNF545 高表达图 1免疫组织化学染色示例(400)2 3ZNF545 表达水平与三阴性乳腺癌临床病理特征、-catenin 表达水平和 C-myc 表达水平的关系与 ZNF545 高表达比较，ZNF545 低表达的腋窝淋巴结转移率高(2=4 709，P=0 030)、-catenin 表达水平低(2=32 748，P 0 001)、C-myc 表达水平低(2=32481，P 0 001)，见表 1。相关性分析结果显示，ZNF545 表达水平与-catenin、C-myc 表达水平均呈负相关(r 值分别为 0553 和 0551，均 P 0001)。2 4ZNF545 表达与三阴性乳腺癌患者预后的关系ZNF545 低表达患者 5 年总生存(overall survival，OS)率(58 0%)低于 ZNF545 高表达患者(84 2%)，差异有统计学意义(2=9 839，P=0 002)，见图 2。单因素分析显示，ZNF545 表达(2=9 839，P=0.002)、组织学分级(2=5 473，P=0 019)、肿瘤大小(2=6 198，P=0 013)及有无淋巴结转移(2=22.204，P 0 001)是三阴性乳腺癌患者的预后影响因素。多因素分析显示，ZNF545 低表达(O=2 462，95%CI 1 186 5 750，P=0 017)、组织学分级低(O=2 650，95%CI 1 101 4 924，P=0 027)及有淋巴结转移(O=6 307，95%CI 2 651 16 351，P 0 001)是三阴性乳腺癌患者预后的独立危险因素，见表 2。2 5三阴性乳腺癌患者 ZNF545 表达与腋窝淋巴结转移的关系单因素分析显示，ZNF545 表达(2=4 709，P=0 030)、肿瘤大小(2=4 676，P=0 031)是三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的影响因素。多因素分析显示，ZNF545 低表达是三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移的独立影响因素(O=2355，95%CI 1 080 5.134，464现代医学(Modern Medical Journal)2023 年 4 月，51(4)表 1三阴性乳腺癌患者的临床病理特征比较例临床病理特征ZNF545低表达(n=50)高表达(n=57)2值P 值年龄0 7500 38660 岁334260 岁1715Ki-670 2130 64420%182320%3234手术方式0 0010 996传统根治术4349保乳手术78肿瘤大小1 7860 1812 cm19292 cm3128淋巴结转移4 7090 030阴性2237阳性3820组织学分级0 3810 537 36441413-catenin32 7480 001低表达1043高表达4014C-myc32 4810 001低表达1144高表达3911P=0 031)，见表 3。ZNF545 表达水平与腋窝淋巴结转移数目呈负相关(r=0 324 1，P=0 013)，见表 4。3讨论复发和转移仍然是三阴性乳腺癌患者癌症相关死亡的主要原因。确定可靠的转移相关预后标志物显然是最具挑战性的问题之一，这对于预防和治疗三阴性乳腺癌至关重要5-6。越 来 越 多 的 证 据7-9 证 明，ZNF545 在不同癌症中频繁甲基化;ZNF545 肿瘤细胞中启动子区的高甲基化，可导致 ZNF545 低表达;低表达的 ZNF545 可通过抑制溶酶体的生物合成，诱导鼻咽癌、食管癌、肺癌、胃癌、结肠癌和乳腺癌等肿瘤细胞的凋亡。潘烽平等10 用 qT-PC 法检测 32 对结直肠癌组织及癌旁正常组织中 mNA 相对表达量，结果显示 ZNF545 在结直肠癌组织中呈低表达，与患者肿瘤直径、浸润深度、TNM 分期及生存预后有关。本研究发现 ZNF545 主要表达在三阴性乳腺癌患者肿瘤细胞的细胞质和细胞核中，46 7%的样本ZNF545 呈低表达。ZNF545 低表达是三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移和预后的独立危险因素，且 ZNF545表达水平与腋窝淋巴结转移数目呈负相关，此外，ZNF545 低表达患者的 5 年 OS 率显著低于 ZNF545 高表达患者，与既往研究10 相似:以上证据表明 ZNF545低表达患者的预后较差。564蒋楠，等 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系图 2三阴性乳腺癌患者 ZNF545 不同表达组的 5 年 OS 率比较既往研究11 报道 ZNF545 是多个实体癌中的一种功能性肿瘤抑制基因，并证明其经常通过启动子甲基化沉默;ZNF545 高表达可抑制细胞增殖和诱导凋亡从而显著抑制肿瘤生长，ZNF545 可能是针对多发性骨髓瘤的潜在治疗靶点。Wang 等7 研究发现，ZNF545通过抑制 rNA 转录和蛋白质翻译来抑制结直肠癌。靶向 ZNF545 沉默肿瘤中的 rNA 生物合成是结直肠癌的潜在治疗策略。Deng 等12 研究发现，ZNF545 因启动子被甲基化而在胃癌细胞系和组织中被沉默或减少，ZNF545 启动子甲基化与胃癌的预后显著相关。Yang 等13 研究发现，ZNF545 抑制人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭，诱导 G1/S 阻滞和凋亡。本研究发现ZNF545 表达水平分别与-catenin、C-myc 表达水平呈负相关。ZNF545 低表达时活性-catenin 及其下游靶表 2三阴性乳腺癌患者生存影响因素的单因素及多因素分析临床病理特征5 年 OS 率/%单因素分析多因素分析2值P 值O(95%CI)P 值年龄0 2310 63160 岁73 360 岁68 8Ki-673 9840 04620%82 920%65 2手术方式1 9040 168传统根治手术73 9保乳手术60 0肿瘤大小6 1980 0132 cm83 32 cm62 7淋巴结转移22 2040 0016 307(2 651 16 351)0 001无89 8有50 0组织分级5 4730 0192 650(1 101 4 924)0 027 77 555 6ZNF5459 8390 0022 462(1 186 5 750)0 017低表达58 0高表达84 2664现代医学(Modern Medical Journal)2023 年 4 月，51(4)表 3三阴性乳腺癌患者淋巴结转移影响因素的单因素及多因素分析临床病理特点腋窝淋巴结单因素分析多因素分析否(n=59)是(n=48)2值P 值O(95%CI)P 值年龄0 0230 88060 岁413460 岁1814Ki-670 0250 087520%231820%3630肿瘤大小4 6760 0312 cm32162 cm2732组织学分级0 0030 960 44361512ZNF5454 7090 0302 355(1 080 5 134)0 031低表达3720高表达2228表 4三阴性乳腺癌患者腋窝淋巴结转移数目与ZNF545 表达的关系ZNF545 表达腋窝淋巴结转移数目01 3 个4 10 个10 个17375+5553+11730+26541基因 C-myc 的表达增加，这表明 ZNF545 可能通过Wnt/-catenin 信号通路调节-catenin、C-myc 表达水平来参与三阴性乳腺癌的进展过程。综上所述，ZNF545 低表达水平是三阴性乳腺癌淋巴结转移和预后的独立危险因素，且 ZNF545 可能通过影响 Wnt/-catenin 信号通路相关蛋白参与三阴性乳腺癌的进展。参考文献 1BAANOVA A，KASNOSELSKYI M，STAIKOV V，et alTriple-negative breast cancer:current treatment strategies andfactors of negative prognosisJ J Med Life，2022，15(2):153-161 2HEY J，HALPEIN C，HATMANN M，et al DNA methyla-tion landscape of tumor-associated macrophages reveals path-ways，transcription factors，and prognostic value relevant to tri-ple-negative breast cancer patientsJ Int J Cancer，2023，152(6):1226-1242 3YANG P，WANG Y，MACFALAN T S The role of KAB-ZFPs in transposable element repression and mammalian evo-lution J Trends Genet，2017，33(11):871-881 4LUPO A，CESAO E，MONTANO G，et al KAB-zinc fingerproteins:a repressor family displaying multiple biologicalfunctions J Curr Genomics，2013，14(4):268-278 5孙雨露，尤鑫，赵怡欣，等 肿瘤浸润淋巴细胞在三阴性乳腺癌中作用的研究进展J 东南大学学报(医学版)，2021，40(2):243-247 6唐燕，张喆 PDL1 和 Ki67 在三阴性乳腺癌中的表达及其与临床病理资料的相关性分析J 现代医学，2021，49(7):793-797 7WANG S，WONG C C，ZHANG Y，et al ZNF545 loss promotesribosome biogenesis and protein translation to initiate colorec-tal tumorigenesis in miceJ Oncogene，2021，40(48):6590-6600 8DONG B，YANG Y，HAN A，et al Ectopic expression of HS-764蒋楠，等 三阴性乳腺癌组织中 ZNF545 表达与预后及腋窝淋巴结转移的关系现代医学Modern Medical Journal2023，Apr;51(4):468-473DL2 is related to cell proliferation and prognosis in breastcancer J Cancer Manag es，2019，12(11):6531-6542 9CHENG Y，LIANG P，GENG H，et al A novel 19q13 nucleolarzinc finger protein suppresses tumor cell growth through inhibi-ting ribosome biogenesis and inducing apoptosis but is fre-quently silenced in multiple carcinomas J Mol Cancer es，2012，10(7):925-936 10 潘烽平，陈一鹏，李彦，等 锌指蛋白 545 对结直肠癌上皮间质转化和迁移侵袭的影响 J 浙江医学，2020，42(7):656-659 11 DENG S，XIANG J J，GE H P，et al The role of MI-186 andZNF545 in inhibiting the proliferation of multiple myelomacellsJ J Biol egul Homeost Agents，2019，33(3):721-729 12 DENG J，LIANG H，YING G，et al Poor survival is associatedwith themethylateddegreeofzinc-fingerprotein 545(ZNF545)DNA promoter in gastric cancerJ Oncotarget，2015，6(6):4482-4495 13 YANG W，YANG S，ZHANG M，et al ZNF545 suppresses hu-man hepatocellular carcinoma growth by inhibiting NF-B sig-naling J Genes Cancer，2017，8(3-4):528-535 收稿日期2023-01-15 修回日期2023-03-07 基金项目海南省科技计划项目(ZDYF2020134)作者简介林赛短(1983 )，女，海南临高人，主管护师。E-mail:lin18089733088126 com 引文格式林赛短，王云，陈家诚，等 肝癌患者疾病接受度现状及影响因素分析J 现代医学，2023，51(4):468-473 论著 肝癌患者疾病接受度现状及影响因素分析林赛短1，王云2，陈家诚3，刘飞1，王开琼2(1 海南省临高县人民医院 肿瘤外科，海南 临高571800;2 海南省人民医院 肝胆胰外科一区，海南 海口570311;3 海南省人民医院 胆胰外科，海南 海口570311)摘要目的:调查肝癌患者疾病接受度现状，并分析其影响因素。方法:采用一般资料调查表、疾病接受度量表(AIS)、特质应对方式问卷(TCSQ)和社会支持评定量表(SSS)对 2021 年 1 月至 2022 年 7 月在海南省临高县人民医院和海南省人民医院就诊的 343 例肝癌患者进行调查，最终回收有效问卷的患者 315 例，分析其疾病接受度现状，采用 Pearson 相关分析探讨 TCSQ、SSS 得分与 AIS 得分的相关性，采用多元线性回归分析 AIS 得分的影响因素。结果:肝癌患者 AIS 得分为(18 81 3 48)分;不同性别、文化程度、家庭人均月收入、居住地、癌症分期、癌症转移情况的肝癌患者 AIS 得分比较，差异有统计学意义(P 0 05);肝癌患者积极应对、SSS 总分及各维度得分与 AIS 得分均呈正相关(P 0 05)，消极应对得分与 AIS 得分呈负相关(P 0.05);性别、文化程度、癌症是否转移、消极应对、SSS 总分是 AIS 得分的主要影响因素，可预测 54 8%的总变异。结论:肝癌患者疾病接受度为低水平。医护人员要加强对女性、文化程度低和癌症发生转移患者的关注，帮助患者转变应对方式并调动其社会支持系统，从而提高其疾病接受度。关键词肝癌;疾病接受度;应对方式;社会支持 中图分类号473 73 文献标志码A 文章编号1671-7562(2023)04-0468-06doi:10 3969/j issn 1671-7562 2023 04 007Analysis of the status and influencing factors of acceptance of illnessamong patients with liver cancerLIN Saiduan1，WANG Yun2，CHEN Jiacheng3，LIU Fei1，WANG Kaiqiong2864