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选修一 专题二练习

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生物选修一 专题二 练习卷

一、选择题（题型注释）
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10

1．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是
A.都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D.都会在培养基表面形成单个的菌落
2．用稀释涂抹平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比( )
A．比实际值高
B．比实际值低
C．和实际值一致
D．可能比实际值高，也可能比实际值低
3．关于消毒和灭菌方法的选择，下列各项中错误的是（ ）
A．培养基---高压蒸汽灭菌 B．牛奶---煮沸消毒
C．接种环---灼烧灭菌 D．实验者双手---化学消毒
4．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是
A．接种时再拿起来方便
B．在皿底上标记日期等方便
C．正着放置容易破碎
D．可以使培养基表面的水分更好地挥发
5．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是
A．未接种的选择培养基
B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
D．接种了的选择培养基
6．能分解尿素的微生物所需要的碳源和氮源分别是
A．CO2和N2 B．葡萄糖和NH3
C．CO2和尿素 D．葡萄糖和尿素
7．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48 h
D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
8．在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。产生A同学结果的原因可能有（ ）
①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②③④
9．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是
A．经选择培养后即可将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
B．选择培养这一步可省略，但纤维素分解菌少
C．经稀释培养后，用刚果红染色
D．此实验中需设置对照组
10．生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型是
A．自养需氧型 B．异养厌氧型
C．异养需氧型 D．自养厌氧型

二、综合题（题型注释）
11．（15分）根据所学微生物的实验室培养和应用知识，完成下列问题。
（1）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有___________________ 、________和高压蒸汽灭菌。
（2）锥形瓶接种过程应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的________稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到________的表面，进行培养。
（4）平板划线操作（如右图所示）时要做到以下几点：

①第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行 ________，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免 ____________。
②划线时最后一区不要与第一区 。
③划线用力大小要适当，防止用力过大将____划破。
（5）土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成________，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到徨化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用________法，具体的操作流程是土壤取样→______→微生物的培养与观察 细菌的计数。
（6）统计的菌落往往比活菌的实际数目低，这是因为________________________________。
12．（12分）【生物—生物技术实践】
尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

KH2PO4
1.4g
Na2HPO4
2.1g
MgSO4·7H2O
0.2g
葡萄糖
10g
尿素
1g
琼脂
15g
将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
（1）此培养基能否用于植物组织培养？ ，理由是 。
（2）培养基中氮源是 ，这种培养基在功能上属于 培养基,目的是只允许能合成 的微生物生长，其他微生物均不能生长。
（3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用 法进行接种。
（4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是 法。
13．牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如右图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:

（1）巴氏消毒的方法是 ,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是 。
（2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是下图中的 。

（3）图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为 ___个。运用这种方法统计的结果往往较实际值 (填“偏大”或“偏小”),原因是 。
（4）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动? 。
（5）从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加人 ,菌落具有 特征的可以认定为大肠杆菌。

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参考答案
1．D
【解析】平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。
考点： 平板划线法和稀释涂布平板法
点评：识记平板划线法和稀释涂布平板法的区别是解答本题关键。
2．B
【解析】
试题分析：用稀释涂抹平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比低，因为当两个或对个细菌连在一起时，平板上长出的是一个菌落。
考点：本题主要考查微生物计数的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
3．B
【解析】
试题分析：培养基一般用高压蒸汽灭菌，A正确；牛奶消毒一般用巴氏消毒法，煮沸会破坏蛋白质结构，B错误；接种环一般用灼烧灭菌，C正确；实验操作者的双手用酒精擦拭消毒，D正确。
考点：本题主要考查无菌操作的相关知识，意在考查考生对相关知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
4．D
【解析】
试题分析：平板冷凝后，皿盖内侧会凝结水珠。将平板倒置，可以防止皿盖上的水珠落入培养基，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，也可避免造成污染。
考点：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生对所学知识要点的理解、识记能力。
5．C
【解析】
试题分析：对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验，判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。
考点：本题考查选择培养基的作用及分类，意在考查学生对所学知识要点的理解、识记能力。
6．D
【解析】
试题分析：能分解尿素的微生物，说明可以利用尿素中的氮元素，但尿素中含的C少，所以这类微生物常常需要葡萄糖作为它们的碳源，选D。
考点：本题考查微生物的营养成分，意在考查学生对所学知识要点的理解、识记能力。
7．D
【解析】检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的一组平板为代表进行计数。选D。
考点： 检测土壤中细菌总数”实验
点评：识记检测土壤中细菌总数”实验的原理和操作是解答本题关建。
8．A
【解析】
试题分析：A同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染（培养基灭菌不彻底或操作过程没有保证无菌操作都会导致菌落数偏多），还可能是操作失误，比如培养基的稀释倍数搞错了，或培养基中混入了其他含氮物质等，但与是否设置对照无关，故A项正确，B、C、D项错误。
考点：本题考查分离分解尿素的细菌的相关实验，意在考查考生具备验证简单生物学事实的能力，并对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。
9．A
【解析】经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。
考点： 分离纤维素分解菌的实验
点评：识记分离纤维素分解菌的实验的原理和操作步骤是解答本题关键。
10．B
【解析】
试题分析：动物胃内没有氧气，所以生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌的代谢类型是异养厌氧型。
考点：本题考查微生物的代谢类型，意在考查学生对所学知识要点的理解、识记能力。
11．（除标注外，每空1分，共15分）（1）灼烧灭菌 干热灭菌
（2）瓶口的微生物 干热灭菌 （3）浓度梯度 琼脂固体培养基
（4）灼烧灭菌 温度太高杀死菌种 相交 培养基
（5）脲酶 稀释涂布平板 样品的稀释
（6）菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多（2分）
【解析】（1）实验室常用的灭菌方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。
（2）接种时要通过火焰灼烧是为了防止瓶口的微生物污染培养基，对无角操作的玻璃器皿要进行干热灭菌，防止微生物污染。
（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养。
（4）第一次划线及每次划线之前都需要对接种环进行灼烧灭菌，以免被杂菌污染或残留有菌液，待接种环冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀灭菌种。划线时最后一区不要与第一区交叉，否则无法分离单个菌落。划线时用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
（5）土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们体内能合成脲酶，酶起到的是催化作用，此酶在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。统计样品中的分解尿素的活菌一般用稀释涂布平板法。具体的操作流程是土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察然后进行细菌的计数。
（6）因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。
12．（1）不能 缺少植物激素 （2）尿素 选择 脲酶（2分）（3）稀释涂布法或平板划线（2分） （4）酚红（2分） 刚果红染色法（2分）
【解析】
试题分析：（1）植物组织培养的培养基除了大量元素、微量元素和有机物等成分，还需要植物激素。
（2）培养基中氮源是尿素。只有能够合成脲酶的微生物才能以尿素为氮源，才能在该培养基生存，为选择培养基。
（3）通常用稀释涂布法或平板划线法进行接种。
（4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入酚红，指示剂变红色表明该培养基有分解尿素的微生物。刚果红与纤维素形成红色复合物，不能和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生红色反应，用来筛选纤维素分解菌。
考点：本题考查微生物的培养和运用相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。
13．（1）70—75℃煮30分钟（80℃煮15分钟）（2分） 牛奶的营养成分不被破坏（2分）
（2）B
（3）3.4×106（2分） 偏小（2分） 个别菌落可能是由2个或多个菌落形成（2分）
（4）稀释次数减少（2分）
（5）伊红美蓝 （金属光泽的紫）黑色
【解析】
试题分析：（1）采用巴氏杀菌法加工牛奶，在70—75℃煮30分钟或80℃煮15分钟进行杀菌，在杀灭牛奶中有害菌群的同时牛奶的营养成分不被破坏，完好地保存了营养物质和纯正口感。
（2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择涂布器，即图中的B。
（3）依题意并结合图示可推测牛奶中每毫升含细菌数为[（35＋33＋34）÷3]×104÷0.1＝3.4×106。在统计菌落时，当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落数，所以运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。
（4）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用稀释涂布平板法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应减少稀释次数。
（5）欲检测大肠杆菌，可在培养基中加人伊红美蓝，大肠杆菌菌落会呈深紫色，略带金属光泽。
考点：本题考查微生物的培养与应用的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。