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第2讲 微生物的培育和利用
(时间:30分钟)
一、选择题
1.(2021·东城区检测)欲从土壤中分别出能分解尿素的细菌,下列试验操作中不正确的是 ( )。
A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
C.可将未接种的培育基在相同条件下培育作为对比
D.用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解尿素的细菌
解析 本题考查微生物的分别与培育,意在考查考生的试验分析力量。为了获得单个菌落,应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释,A正确;为了使结果更加精确 ,同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复试验,然后计算平均值,B正确;加入刚果红的培育基用来筛选纤维素分解菌,D错误。
答案 D
2.(2021·广东深圳一模,2)某学者欲争辩被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是 ( )。
A.利用平板划线法对细菌进行计数
B.用以石油为唯一碳源的培育基筛选
C.接受稀释涂布平板法分别菌种
D.称取和稀释土壤时应在火焰旁
解析 平板划线法能对细菌分别纯化,但不能对细菌进行计数,稀释涂布平板法可以分别菌种还可进行计数,A项错误。
答案 A
3.(2021·成都模考)分别土壤中分解尿素的细菌,对培育基的要求是 ( )。
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦ B.①③⑤⑧
C.②④⑥⑧ D.①④⑥⑦
解析 土壤中分解尿素的细菌能够利用尿素作为氮源,因此若培育基中氮源只有尿素,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长;分别微生物要用固体培育基,必需加入琼脂;土壤中分解尿素的细菌属于异养型微生物,需要加葡萄糖作为碳源。
答案 B
4.(2021·成都模考)关于制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的叙述错误的是 ( )。
A.操作挨次为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C.等培育基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D.待平板冷却凝固5~10 min后将平板倒过来放置
解析 操作挨次为先灭菌再倒平板;牛肉膏会黏附在称量纸上,应当将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯;培育基冷却至50 ℃左右既没有凝固,同时又不烫手,可以进行倒平板;为了防止冷却过程中培育皿盖上凝集的水珠对平板的污染,培育基冷却凝固后就要将平板倒过来放置。
答案 A
5.(2021·淮阴期末质量调研,14)如图是微生物平板划线示意图。划线的挨次为12345。下列操作方法正确的是 ( )。
A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B.划线操作应在火焰上进行
C.在5区域中才可以得到所需菌落
D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析 本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰旁进行。在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培育即可获得所需菌落。
答案 D
6.(2022·东城区检测)下列关于微生物分别和培育的叙述,错误的是 ( )。
A.微生物培育前,需对培育基进行消毒
B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法
C.分别土壤中不同的微生物,要接受不同的稀释度
D.分别能分解尿素的细菌,要以尿素作为培育基中的唯一氮源
解析 微生物培育前,需对培育基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法;分别土壤中不同的微生物,要接受不同的稀释度,由于不同的微生物在土壤中的含量不同;分别能分解尿素的细菌,要以尿素作为培育基中的唯一氮源。
答案 A
7.(经典高考)下列是关于“检测土壤中细菌总数”试验操作的叙述,其中错误的是 ( )。
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平
板上
C.将试验组和对比组平板倒置,37 ℃恒温培育24~48 h
D.确定对比组无菌后,选择菌落数在300以上的试验组平板进行计数
解析 本题以“检测土壤中细菌总数”试验为命题点,考查考生对基础学问的识记状况。在细菌计数时,为保证结果精确 ,一般选择菌落数目在30~300的平板进行计数。
答案 D
二、非选择题
8.(203·潍坊三模A卷)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开头萌发,生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗寄主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下面的问题:
(1)从自然菌样中筛选较抱负的生产用菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培育→________→性能测定。白僵菌的菌样应从________采集。
(2)分别白僵菌菌种的培育基属于________培育基。在配制白僵菌培育基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,蔗糖属于________养分物质。
(3)白僵菌纯化培育常用的接种方法是________和________。
(4)分别与培育过程中,培育基和接种工具都要进行________处理,利用高温可以使微生物的________等物质发生变性。
答案 (1)纯化分别 感病昆虫 (2)选择 碳源 (3)平板划线法 稀释涂布平板法或稀释混合平板法 (4)灭菌 蛋白质和核酸
9.(2021·山东潍坊一模,34)某试验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计试验步骤如下,请赐予合理的补充。
(1)采样与培育:将采集的土样混匀后称取1 g,置于经过________法灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培育基中,28 ℃振荡培育。
(2)接种与选择:为避开培育液中菌体浓度过高,需将培育液进行________处理之后,将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培育基上,30 ℃条件下培育。为避开污染,需将培育皿呈________状态放置。
(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落四周,假如菌落四周的现象是________,则说明此种菌能够________。从平板中挑取试验效果明显的目的菌株,接受________法接种于新的培育基平板,可对菌株进行进一步的纯化。
答案 (1)高压蒸汽灭菌 液体 (2)系列稀释(或“梯度稀释”) 淀粉 倒置 (3)消灭透亮 圈 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 (平板)划线
10.(2021·枣庄一模)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣扬的一样具有较强的抑菌功效,某生物爱好小组的同学设计了如下试验(符合无菌操作要求)。请分析下述试验过程并回答下列问题。
①用无菌水漱口,向漱口液中加入适量的该中药牙膏;
②配制牛肉膏蛋白胨固体培育基;
③将上述样品接种到培育基上,在适宜条件下进行培育;
④一段时间后,对培育结果进行观看并进行菌落计数
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、________;培育基在分装前往往要进行________。
(2)本试验样品接种时最好接受________法。培育一段时间后,培育基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的________。
(3)食品平安检测时通常接受大肠杆菌作为致病微生物的指示菌,为测定哪些菌属于大肠杆菌,可选用________培育基对菌落进行鉴定,大肠杆菌的菌落在该培育基上呈现黑色。
(4)本试验设计中的一个明显错误是________,请加以改正_______________ __________________________________________________。
(5)证明所用培育基已经彻底灭菌的方法是_____________________________。
答案 (1)倒平板 高压蒸汽灭菌 (2)稀释涂布平板 一个活菌
(3)伊红—美蓝 (4)没有设置对比试验 应将漱口液分为两份,一份加牙膏,一份不加牙膏分别接种培育
(5)对未接种的培育基进行培育,如无菌落消灭,则证明培育基已彻底灭菌
11.(2021·淄博二模)生物乙醇是以生物质为原料生产的可再生能源,工业上利用微生物将木屑、废纸(主要成分为木质纤维)转化为乙醇的基本工艺流程如图所示,请回答:
(1)筛选微生物X菌种的培育基中,应以________为唯一碳源,在培育基中加入________,并依据水解圈的大小来筛选微生物X。
(2)微生物筛选常用的接种方法有________和________。
(3)下表为筛选时,同一培育基上的单细胞形成的菌落状况:
菌落编号
菌落直径/mm
水解圈直径/mm
菌落特征
①
2
7
菌丝较粗而长,菌落干燥呈绒毛状或棉絮状,有霉味
②
1
2
③
2
5
④
3
13
⑤
3
11
微生物X应是______________,筛选时应选择________号菌落,理由是________________________________________________________________。
(4)微生物Y主要是________。
答案 (1)纤维素 刚果红 (2)平板划线法 稀释涂布平板法
(3)霉菌 ④ 生长速度快,纤维素酶产量(活性)高 (4)酵母菌
12.苹果醋具有养分丰富,增加机体免疫力,护肤养肝等多种功效,以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下,请分析并回答:
(1)过程甲中使用的微生物是________。将鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约________的空间,经过10~12天后,在酸性条件下用重铬酸钾检测样液,假如颜色变为________色,说明产生了酒精。
(2)过程乙中使用的微生物是________,可以从食醋中分别纯化获得,步骤如下:
第一步:配制________(填“固体”或“液体”)培育基。
其次步:对培育基进行高压蒸汽灭菌。
第三步:接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。
第四步:培育。温度把握在________℃范围内。
第五步:选择符合要求的___________________________________________。
(3)在________________的条件下,假如缺少糖源,乙中的微生物将甲过程的产物变为________________,再将其变为醋酸。
解析 (1)制作果酒应选用酵母菌。将鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约的空间。重铬酸钾溶液与酒精反应呈灰绿色。(2)制作果醋应选用醋酸菌;分别纯化菌种需要固体培育基;醋酸菌生长的最适温度为30~35 ℃。(3)氧气充分时,假如缺少糖源,醋酸菌会将乙醇变为乙醛,再将其变为醋酸。
答案 (1)酵母菌 灰绿
(2)醋酸菌 固体 30~35 菌落
(3)氧气充分(有氧) 乙醛
13.(2021·西安统考)35%~40%的甲醛水溶液(福尔马林)可作为防腐剂,其防腐的原理是使蛋白质变性。自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌。下图为分别和纯化分解甲醛细菌的试验过程。请分析回答:
(1)②过程的目的是________________________________________________,③过程培育出的是_________________________________________________。
(2)上述试验中,不需要进行灭菌处理的是________,培育基灭菌的常用方法为_______________________________________________________________。
(3)由③―→④的接种可选用________法,通过培育能获得________。经过⑤过程后,取样测定甲醛浓度,选出________,再分别、培育菌株。此菌种异化作用的类型是___________________________________________________。
(4)为争辩甲醛初始浓度对菌株降解甲醛力量的影响,进行了相应试验并得到如下结果。由图可知,当甲醛的初始浓度小于1 200 mg/L时,菌株________;当甲醛的初始浓度增高至1 600 mg/L时,48 h后菌株对甲醛的降解力量很弱,甚至失去降解力量,其缘由可能是___________________________________
__________________________________________________________________
_________________________________________________________________。
答案 (1)增加目的菌的菌群数量(提高菌的种群密度) 以甲醛为唯一碳源的细菌 (2)活性污泥 高压蒸汽灭菌法 (3)平板划线(稀释涂布) 单个菌落 甲醛浓度最低的培育瓶 需氧型 (4)可以完全降解甲醛 甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性,从而降低了细菌降解甲醛的力量(甲醛浓度过高会产生毒害作用,降低了细菌降解甲醛的力量)
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