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基础课时案39 微生物的培育和利用
2022备考·最新考纲
1．微生物的分别和培育。2.培育基对微生物的选择作用。
一、微生物的试验室培育
1．培育基
(1)
(2)分类
2．无菌技术
(1)关键：防止外来杂菌的入侵。
(2)不同对象的无菌操作方法[连一连]
3．大肠杆菌的纯化培育
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基
→→→→
(2)纯化大肠杆菌的方法
①纯化培育原理：想方设法在培育基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。
③常用的微生物接种方法有两种
a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。
b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面，进行培育。
(3)菌种的保存方法
①对于频繁使用的菌种，可以接受临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种，可以接受甘油管藏的方法。
深度思考
如图是接受纯化微生物培育的两种接种方法接种后培育的效果图，请思考
(1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么？
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发觉培育基上的菌落连成一片，最可能的缘由是什么？应当怎样操作才可避开此种现象？
提示 (1)获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法，获得效果B的接种方法为平板划线法。
(2)最可能的缘由是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灭菌；实行的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灭菌。
二、微生物的筛选和计数
1．土壤中分解尿素的细菌的分别与计数
(1)分别原理：土壤中的细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。
(2)统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。
(3)试验流程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培育与观看→细菌的计数。
2．分解纤维素的微生物的分别
(1)纤维素酶
①组成：纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。
②作用
纤维素纤维二糖葡萄糖
(2)纤维素分解菌的筛选
①原理
纤维素分解菌
↓
→红色复合物红色消逝，消灭透亮 圈
②筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生透亮 圈来筛选纤维素分解菌。
③培育基：以纤维素为唯一碳源的选择培育基。
④试验流程
土壤取样：富含纤维素的环境
↓
选择培育：用选择培育基培育，以增加纤维素分解菌的浓度
↓
梯度稀释：制备系列稀释液
↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培育基上
↓
选择产生透亮 圈的菌落
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