生物医药相关技术教程文件.doc

生物医药相关技术精品资料生物医药类相关技术1.特发性血小板减少性紫癜治疗药物罗米司亭项目简介：特发性血小板减少性紫癜( idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP)是一种常见的出血性疾病,系免疫系统引起的血小板破坏过多和巨核细胞导致的血小板减少所致的出血综合征。其中包括自身抗体引起的血小板减少以及同种类型抗体介导的免疫性血小板减少症( immune thrombocytopenic purpura)两部分。在美国,估计6万患者被诊断慢性ITP,在欧洲原发的ITP估计每年每百万人有50100例新患者。ITP患者经常由于小血管撞伤、挫伤、鼻出血、牙科手术等轻度出血难以停止,发展为更严重的出血甚至可威胁生命。正常的血小板计数应为150 109 400 109/L。血小板计数 150 109/L为血小板减少症,而血小板计数 50 109/L具有高度危险,容易引起出血并发症。慢性ITP的致病机制与自身免疫异常造成的血小板破坏或由于骨髓功能不全导致的血小板产生不足有关。此外,化疗和慢性肝脏疾病也可引起血小板减少。当前的治疗采用大剂量糖皮质激素、免疫球蛋白和抗D球蛋白、环孢素等免疫抑制剂、化疗药环磷酰胺、长春花碱或抗人CD20单克隆抗体利妥昔单抗。但很多ITP患者会复发,且这类治疗不良反应较多,对难治性病例还要进行脾切除手术,但是容易出现感染等并发症,故临床需要更加安全有效的治疗方法。2008年8月,美国FDA 批准Amgen公司的罗米司亭( romip lostim, Np late, AMG531)上市,用于治疗经糖皮质激素类药物、免疫球蛋白或脾切除术治疗无效的慢性ITP患者,罗米司亭只能用于血小板减少症出血危险增加的ITP患者。罗米司亭产生自大肠杆菌, 系利用重组DNA技术制成的能刺激血小板生成的Fc肽融合蛋白。本品分子包含2个相同的单链亚单元,每个单链包含IgG Fc恒定区域和TPO模拟肽。Fc段能有效地延长药物半衰期。而TPO 模拟肽与羧基端通过共价键链接,包含2个TPO受体结合区域,具有血小板生成素活性,能和巨核细胞表面的TPO受体结合,活化细胞内通路,使血小板增加,而且与TPO没有序列同源。技术创新点:目前分别构建了大肠杆菌表达系统和毕赤酵母表达系统，二者都实现了高效表达，大肠杆菌表达量在占菌种总蛋白30%左右，以包涵体形式表达，经过变、复性，得到有活性的重组蛋白。毕赤酵表达量在1.5g/L左右，重组蛋白经纯化用去糖基化酶去除糖链，得到与上市罗米司亭结构完全一致的蛋白。发酵和纯化小试也已完成了，近期准备中试。合作方式：转让或合作2.年龄相关性黄斑变性雷珠单抗项目简介：赖新生血管来供应肿瘤的营养。眼部的许多疾病都涉及血管发生，包括年龄相关性黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管、糖尿病视网膜病变(DR)视网膜新生血管和早产儿视网膜病等。在正常情况下内源性血管形成促进因子和抑制因子处于平衡状态，如果这种平衡被打破就会导致眼部新生血管性疾病的发生，如当眼球缺血、缺氧，相对的组织细胞会释放一些与血管增生相关的物质。VEGF被认为是血管发生的关键因素，人VEGF基因位于6p213，全长28kb，编码VEGF基因约14kb，基因由交替剪接的8个外显子、7个内含子组成，编码产物分子质量为(3445)103的同源二聚体糖蛋白。VEGF家族包括7种:VEGF-A，VEGF-B，VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E，VEGF-F和胎盘生长因子，它们都分泌多肽，有相似的结构单位，但生物学和物理学性质不同。VEGF现在已知的至少有6个亚型，通过RNA的剪切拼接产生不同的异构体，分别为VEGF206，VEGF189，VEGF183，VEGF165，VEGF148，VEGF145和VEGF121，VEGF165为最主要的异构体，体外可促进内皮细胞分裂生长，体内可诱导新生血管生成，导致视网膜血管增生和渗透性增加。VEGF广泛分布于人和动物体内的脑、肾、肝、眼等多种组织，一般在眼部视网膜的周细胞、视网膜色素上皮细胞和内皮细胞均有VEGF存在，对维持眼部血管完整性起了重要的作用，但过度表达会促进血管增殖。年龄相关性黄斑变性(AMD)患者的微血管膜发现有VEGF-165和VEGF-121，动物实验也证实了VEGF-165在炎症、白细胞诱导和神经对抗缺血性伤害方面起了一定的作用。AMD是引起脉络膜新生血管(CNV)的最常见的疾病，也是VEGF抑制剂治疗的首要眼部疾病。病变开始是干性AMD，特征是视网膜色素上皮层硫黄色颗粒形成和色素变，视网膜萎缩严重影响视力。湿性AMD，以CNV为特征，经常引起黄斑水肿、渗出和纤维化，导致视力丧失。只有10%的AMD患者有CNV，但几乎90%的CNV的患者都有严重的视力损害。有关资料证明，患者在干性AMD进展期的时候用大剂量的抗氧化剂效果很好，锌和高剂量抗氧化剂(维生素C、E和胡萝卜素)能减少发生视网膜萎缩和CNV，患者的视力损害也较轻。近年来，在AMD的发病机制和治疗方面已经有了突飞猛进的发展，AMD新生血管是目前治疗的焦点。光凝固疗法的研究显示热激光对异常血管治疗较好，但是这种疗法由于光斑密度和结构不同，在治疗视力丧失方面有一定的局限性。光动力学疗法(PDT)是用激光激活感光燃料封闭CNV，PDT能阻止患者的视力丧失，但不能明显地改善视力。VEGF抑制剂能明显改善湿性AMD的治疗效果，有关资料表明CNV的形成是与VEGF的水平相关。由于人们发现VEGF在新生血管的发生和发展中起主要作用，所以围绕VEGF的药物不断出现。雷珠单抗（Ranibizumab）是所有特异性人类VEGF亚型单克隆抗体片段的重组体。Ranibizumab对人类VEGF有高亲和力，通过产生中和效应抑制VEGF和受体的相互作用。在灵长类动物实验中，通过激光诱导脉络膜新生血管，玻璃体内注射Ranibizumab减少新生血管的发生率和血管渗透性。在另一份临床实验中，AMD患者随机接受常规护理或者玻璃体注射300g或500granibizumab，每28天注射1次，共4次，Ranibizumab治疗过程中除了有眼部炎症没有其他不良反应的发生。300g组在第98天和21天的视力测定有明显提高，同时，常规护理组患者在第98天视力有下降，第99天开始接受ranib-izumab治疗，第210天发现视力有所提高。美国FDA在2006年6月批准Ranibizumab用于治疗AMD和黄斑水肿。2006年，Ranibizumab的上市被评为美国的十大卫生新闻。上市以后，在销售额上，Ranibizumab也表现不俗，很快就挤身重镑炸弹级药物行列，2010年31.06亿美元，2011年37.23亿美元，2013年更是达到了39.75亿美元，排在生物药的第8位。2010年，诺华在中国申请进口药物的注册，目前还在审批阶段。技术创新点:适应症：年龄相关性黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管、糖尿病视网膜病变(DR)视网膜新生血管和早产儿视网膜病等Ranibizumab的专利将于2018年到期，我们于2011年启动仿制研究。目前，我们已完成高表达菌株构建、大规模发酵和纯化工艺小试研究。本项目已完成表达菌株构建、小试生产工艺研究，通过大肠杆菌分泌表达，成本低，表达量0.2g/L以上。合作方式：转让或合作3.长效升白细胞药物PEG-GCSF项目简介：中性粒细胞（ANC）减少症是化疗所致骨髓抑制最常见也是最严重的一种并发症，可增加患者感染的危险性，导致化疗剂量减少、时间延误。研究显示，约25%40%接受常规化疗的肿瘤患者会出现中性粒细胞减少性发热；当ANC1500/mm3时，感染危险性增加；当ANC500/mm3时，严重感染危险性明显增加；当ANC100/mm3时，10%20%甚至可能更多的患者会发生菌血症。重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）的上市解决了这个难题，可使肿瘤化疗患者白细胞迅速恢复，从而能够给病人更高的化疗剂量，同时本品也可以作为预防中性粒细胞（ANC）减少症应用。目前rhG-CSF制剂需要多次注射，使用不便。因此，如何在达到相同疗效的基础上，减少患者的药物注射次数，让他们在比较安全、减少痛苦的情况下接受化疗，一直是临床关注的重点问题。长效PEG-rhG-CSF是由一个20KDa的聚乙二醇（PEG）分子选择性地与rhG-CSF蛋白质N末端定点交联而成，通过PEG修饰从而延长其在体内的代谢时间（其血浆半衰期可延长至47小时），达到减少注射次数的目的。每个化疗周期只需用药一次，可避免反复注射rhG-CSF给病人带来的痛苦，以及长时间医患接触带来的感染可能；另外，PEG分子没有毒性和免疫原性，并可被肌体安全清除，从而使药物的免疫原性和抗原性降低，提高了安全性；PEG化使药物溶解性增加、生物利用度提高、制剂稳定性增强，其升白作用更平稳，可避免每两天检查血常规，并使多周期标准化疗方案成为可能；同时，也可减少住院时间、提高医院病床周转，使患者门诊化疗成为可能。大量临床研究结果显示，一个化疗周期注射一次PEG-rhG-CSF与多次注射rhG-CSF，在预防粒细胞减少症上疗效相同，但其不良反应明显减少。因而长效PEG-rhG-CSF具有很好的临床应用潜力。技术创新点：本项目，与有关研发企业合作，参考国内外相关的专利和文献，成功攻克PEG化G-CSF难题，取得了以下进展。(1)工艺简单可靠，修饰率高。在现有的G-CSF基础上，经过一步修饰，即可获得PEG化G-CSF，比活性不低于3.0107IU/mg蛋白，与已上市“津优力”和“培非司亭”相当(2)原液电泳纯度和HPLC纯度不低于95%，残留甲氧基聚乙二醇丙醛（PEG）含量不高于5%(3)修饰后纯化工艺简单可靠，收率高。经过粗提纯、精提纯、精提液的浓缩及过滤除菌等步骤，纯化收率约80%(4)建立了完善的工艺标准规程，提供相关的原辅料、半成品原液质量标准(5)提供相关的设备、填料类型等帮助，帮助生产企业尽快开展相关工作(6)可提供有关制剂的相关技术指导，协助生产企业尽快完成有关的制剂研究工作合作方式：转让或合作4.秸秆制生物可降解塑料前体L- 乳酸项目简介：L-乳酸是制造生物可降解塑料的原料，以往都是用玉米为原料，存在与人争粮的矛盾。另一方面玉米秸秆大量存在，成为一个污染物，为防止农民燃烧秸秆，各级政府每年投入大量人力物力。用秸秆替代粮食生产L-乳酸是个很好的设想，本实验室已经将其变为现实，生产成本比用玉米为原料相当或更低，每3.5吨秸秆可产1吨L-乳酸。该项目具有很大创新性，全球范围内还未见有产业化实施报道。该项目已拥有三项相关发明专利，ZL 201110109682，ZL 2012104080186，ZL 201410060025.0，形成了较高的竞争壁垒，还有至少两项专利待申请。秸秆与粮食一样含有70%的糖类，只是这些糖连接的方式不太一样，更难水解，还有一半是使戊糖。本项目利用化学和酶解方法获得葡萄糖和戊糖，再发酵为L-乳酸。相关原料所带来问题都得到很好解决。技术创新点：在最经济的条件下，每3.5吨秸秆可产1吨L-乳酸。创新点是采用未曾工业化使用的新原料。合作方式：技术转让、技术入股5.无痛内镜专用呼吸三通管项目简介：无痛内镜专用呼吸三通管是2013年3月13日被授权的国家实用新型专利，该三通管的主管下端与呼吸面罩相接，另一端的侧管可以连接螺纹管，与呼吸囊或者呼吸机相通，主管上端的连接孔有活瓣构造，不需要使用内窥镜设备时，可以自动封闭，需要使用内窥镜设备时，可从活瓣构造处直接插入。本品为一次性医疗耗材，主要用于无痛内镜诊疗必需的供氧环节，以河南省人民医院为例，2014年度，无痛内镜达4万余例，如能应用于全省乃至全国各级医院，将是一个广阔巨大的市场空间，本品拥有国家实用新型专利证书，在研发过程中多次征求麻醉专业、内镜专业权威人士建议和意见，反复修改，结构设计成熟，技术方面认可度高，加之结构并不复杂，原材料采用合成树脂，无需巨额资金的投入。在医械准入方面，由于不与患者直接接触，故相对容易通过审批，拿到资质后，即可大量生产，产生效益。技术创新点: 采用合成树脂制成，面罩连接管直径为22mm，螺纹管连接处直径为22mm，活瓣开口处直径约8mm。主要创新点：呼吸面罩是在手术麻醉或抢救呼吸骤停的患者时，为患者提供氧气的一种辅助呼吸装置，该装置通过与呼吸机或者呼吸囊的联通，给患者供氧，这一操作通常由麻醉医师来完成。传统呼吸面罩的接头只有一种连接方式，一端与面罩相连，一端与呼吸囊或者呼吸机相连，所以在使用无痛内镜设备，比如胃镜或纤支镜时，就必须将面罩摘掉，不能达到不间断供氧的目的，因此会影响手术的进展，甚至延误宝贵的抢救时间。 本三通管主管的下端与呼吸面罩相连接，面罩罩于患者面部，另一端的螺纹管连接管可与连接呼吸囊或者呼吸机，以供氧。当需要使用无痛内镜设备时，内镜设计可以通过主管顶端的连接孔插入，经过面罩进入患者口腔并至体内，可以更加方便快捷的完成检查和治疗工作。成功解决了在进行无痛内镜检查时时，面罩会与患者面部脱离，造成供氧不足的问题，不会影响麻醉过程中对于呼吸道的管理。 主管上端的内窥镜连接孔由活瓣覆盖，该活瓣由硅胶材质制成，具有良好的收缩和紧闭性，当不需要呼吸囊或者呼吸机供氧时，活瓣会自动封闭，如果需要使用无痛内镜时，可将内镜从活瓣处直接插入，不会妨碍供氧管道的使用。 内镜通过的管道较短，由于硅胶活瓣具有良好的弹性，所以内镜在管道内可以任意角度旋转，而且构造简洁，体型小巧，制作成本较低。可适用于一般普通面罩，不需另行配置特殊面罩。主要风险：本产品实用性强，在国内尚无产品普及，有着巨大的市场需求和空间，市场风险不大。合作方式：转让或合作6.口服避孕药屈螺酮的新制备工艺项目简介：屈螺酮是第四代女用口服避孕药的代表药物，由德国先令公司(Schering AG)开发，其与雌二醇或炔雌醇组成的复方制剂安全有效，副作用小。自2000年在欧洲上市以来，已成为全球销量第一的女用口服避孕药。为降低屈螺酮的生产成本，本课题组采用化学方法结合生物转化方法，以去氢表雄酮为起始原料，9步制得屈螺酮，使制备工艺大大简化，收率达到国内领先水平。该路线所用菌株具有自主知识产权，并且合成工艺先进，操作简单，绿色环保，具有大规模工业生产的潜力。该路线的小试总收率可达到25%左右，接近文献报道的最好收率。应用前景：中国零售药品研究发展中心（MDC）的统计数据显示，2009年国内避孕药零售销售比2008年增长了13.5%，且近年来一直呈上升趋势，说明口服避孕药在我国也越来越受到认可和接受。但是该药目前还是进口药品，在国内的售价较高，是同类药品的5-6倍，属于高附加值的甾体激素类药物。本项目的实施可以使屈螺酮的生产成本降低50%以上，可为实现屈螺酮的大规模工业生产奠定基础，并且对开发高端激素药物，促进我国激素制药工业的发展产生深远意义，具有潜在的巨大的社会和经济效益。关键技术路线如下：合作方式：技术转让仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除 谢谢10