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中国科学院2001-生物化学与分子生物学真题上课讲义.doc

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中科院2001生化B卷 一.是非题(1X10) 1. 所有a氨基酸中的a碳原子都是一个不对称的碳原子( ) 2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( ) 3. 根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( ) 4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( ) 5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( ) 6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( ) 7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( ) 8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( ) 9. 线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( ) 10. 脂质体的直径可以小到150 ?( ) 11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( ) 12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( ) 13. CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( ) 14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( ) 15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( ) 16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( ) 17. 真核生物m RNA两端都含有3'-OH.( ) 18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( ) 19. 所有氨酰-t RNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在Trna末端核糖的3'-羟基上( ) 20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( ) 二.选择题(1x25) 1. 绒毛膜促性激素是一种_____________ A. 甾醇类激素 B. 脂肪酸衍生物激素 C. 含氮激素 2,溴化氰(CNBr)作用于____________ A. 甲硫氨酰-X B. 精氨酰-X C. X-色氨酸 D. X-组氨酸 3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力____________ A. ATP酶 B. 蛋白质激酶 C. 蛋白水解酶 4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成________ A. αα B. ββ C. α2βγ2 5.胰岛素原是由一条"连接肽"通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条"连接肽"称为_________ A. A链 B. B链 C. C肽 6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为___________ A. Km B. Vmax C. Km/Vmax D. Vmax/Km 7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶__________________ A. 由低活性形式变为高活性形式 B. 由高活性形式变为低活性形式 C. 活性不受影响 8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于______ A. 结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能 C. 增加的结合能被用来降低Km D. 增加的结合能被用来增大Km 9.TGFβ受体具有下列哪一种酶的活性___________ A. 酪氨酸激酶 B. 酪氨酸磷酸酯酶 C. 丝氨酸/苏氨酸激酶 D. 腺苷酸环化酶 10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关:_______________ A. 结构生理学 B. 发育生理学 C. 神经生物学 D. 免疫学 11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在_______________ A. 钠钾ATP酶 B. 线粒体ADP-ATP载体 C. 蛋白激酶C D. 线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶 12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过__________ A. 离子键 B. 疏水键 C. 氢键 D. Van der Waal氏力 13.生物膜的基本结构是___________ A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质 B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间 C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中 14.辅酶Q是____________ A. NADH脱氢酶的辅基 B. 电子传递链的载体C. 琥珀酸脱氢酶的辅基 D. 脱羧酶的辅酶 15.完整线粒体在状态4下的跨膜电位可达_____________ A. 1mv B. 10mv C. 100mv D. 200mv 16.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做___________ A. 有义链 B. 反义链 C. 重链 D. cDNA链 17.一段寡聚合糖核苷酸TψCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基(非修饰核苷): A. 3个 B. 4 C. 5 D. 6 18.已知有的真核内含子能编码RNA,这类RNA是___________ A. 核小分子RNA(sn RNA) B. 核仁小分子RNA(sno RNA) C. 核不均一RNA(hnRNA) 19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是____________ A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成 B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成C. 尿酸氧化酶的激活剂,加速尿酸的降解 20.α-鹅膏覃碱能强烈抑制___________ A. 细菌RNA聚合酶 B. 真核RNA聚合酶 C. 细菌DNA聚合酶 D. 真核DNA聚合酶 21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关? A. ATP的水解 B. GTP的水解 C. Camp的水解 D. 烟酰胺核苷酸参与 22. 基因重组就是DNA分子之间的: A. 共价连接 B. 氢键连接 C. 离子键连接 23. DNA复制过程中双链的解开,主要靠什么作用__________ A. 引物合成酶 B. Dnase I C. 限制性内切酶 D. 拓扑异构酶 24. 包括中国在内,有很多国家科学家参与的人类基因组计划,到目前为止的进展情况如何? A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱 B. 仅测定了7,10合22号染色体的核苷酸序列 C. 测定了人基因组3X10^9碱基的全序列,但只是一部"天书",无法知道它的全部意义 D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息,已经了解大部分基因的功能 25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是:________ A. 磷酸吡哆醛 B. 泛酸 C. 烟酰胺 D. 硫氨素 三填空题(每空一分) 1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为__________________然后是胰岛素的前体,称为_________ 2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种___________结构,其中每一股又是一种特殊的_____________结构. 3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_________型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_____________ 4. "蛋白质组"是指____________________ 5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp,蛋白激酶C的专一活化因子是__________,此外还有某类型的蛋白激酶可以由_______作为专一激活因子 6. 已阐明原子分辨率三维结构的膜固有蛋白有______________,__________________等(仅写两个) 7. 霍乱毒素的受体是一种____________化合物 8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成ATP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是__________ 9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,影响膜脂流动性的主要因素是_____________-- 10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离_________于后者;前者的直径__________于后者 11. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP)都是通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有___________和____________活性 12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸PRPP)除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与___________和_____________氨基酸代谢有关. 13. 大肠杆菌的启动子序列包含有___________-,_______________及____________等信息. 14. 逆转录病毒含有单链RNA,感染细胞后转变成双链DNA,这种DNA必须__________,才能发生病毒的复制. 15. 真核RNA聚合酶I主要位于细胞__________中,合成大分子核糖体RNA前体 四.问答题(5X6) 1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个阶段?(仅需写出阶段名称) 2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的损失,因此操作过程通常要求在低温下进行.如果醇化一个热稳定(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作?请简述你的见解. 3. 由一个抑制剂抑制完整线粒体β-羟基丁酸或琥珀酸的氧化,但不抑制(维生素C+四甲基对苯二胺)的氧化,这个抑制剂的抑制部位应该在电子传递链的什么部位?为什么? 4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接 5. 酵母细胞利用半乳糖的几种酶基因GAL7-GAL10-GAL1,它们的转录是如何受调控因子GAL4和GAL80调节的? 中国科学院2002年研究生入学试题《生物化学与分子生物学》 一、是非题:15题,每题1分,共15分。答"是"写"+",答"非"写"- ",写在题后的()中。 1.维生素对人体的生长和健康是必需的,但人体不能合成维生素。 ( ) 2.能被某种振奋分子识别,并与其特异和共价结合的原子,原子团和分子,称为配基。 (  ) 3.当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶柱层析时,小分子物质因体积小最先被洗脱出来。 (  ) 4.酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念,但两者之间有相关性,两个数值通常比较接近或相同。 (  ) 5.对于一个酶而言,其过渡态的底物类似物与底物的物相比较,是更有效的竞争性抑制剂。 ( ) 6.Km值是酶的牲常数之一,与酶浓度、pH值、离子强度等条件或因素无关。 (  ) 7.磷脂酶A水解脂生成磷脂酸。 (  ) 8.NAD 不能由细胞浆通过线粒体内膜进入线柆体内,而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。 (  ) 9.寡霉素是线粒体ATP合成酶的抑制剂。 ( ) 10.核苷磷酸化酶催化腺苷的磷酸化,生成腺嘌呤和核糖-5-磷酸。 (  ) 12.肿瘤RNA病毒的复制过程为RNA->DNA->RNA。 ( ) 13.肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合,这种激素  受体复合物能直接活化环化酶,使细胞cAMP浓度增加,引起级联反应。 (  ) 14.维生素E是一种抗氧化剂,对线体膜上的磷脂有抗自由的作用。 ( ) 15.吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇的磷酸酯都可以作为转氨的辅酶。 ( ) 二、选择题:20题,每题1分,共20分。请将选择答案的号码填入()中。 1.为稳定胶原三股螺旋结构,三联体的每三个氨基酸的位置必须是: ( ) ①丙氨酸;②谷氨酸;③甘氨酸 2.分离含胡二硫键的肽段可以用 ( ) ① SDS  PAGE电泳;②对角线电泳;③琼脂糖电泳 3.引起疯牛病(牛海绵脑病)的病原体是: ( ) ①一种DNA;②一种RNA;③一种蛋白质;④一种多糖 4.胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种: ( )  ①激酶;②脱氢酶;③转氨酶 5.在酶的可逆抑制剂中,不影响酶的二级常数(Kcat/Km)的是: ( ) ①竞争性抑制剂;②非竞争性抑制剂;③反竞争性抑制剂;④都不是 6.所谓"多酶体系"是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系,多酶体系中的酶通常具有以下性质。 ( ) ① 只是在功能上相互有联系,在结构上互不相关,不存在相互作用;② 不仅在功能上相互有联系,在结构上也有相互联系,形成复合体;③ 上述两种情况都存在。 7.所谓"代谢物"指的是下面哪一条? ( ) ① 特指代谢反应中的反应物;② 特指代谢反应中的产物; ③ 特指代谢反应中的中间物;④ 所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。 8.有的酶存在多种同工酶形式,这些同工酶所催化的反应: ( ) ① 并不完全相同;② 完全相同,而且反应的平衡常数也相同; ③ 完全相同,但由于每种同工酶活性不同,反应平衡常数可以不相同。 9.脂肪肝是一种代谢疾病,它的产生主要是由于: ( ) ① 肝脏脂肪水解代谢障碍;② 肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出; ③ 肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸;④ 肝脏细胞膜脂肪酸载体异常 10.线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是: ( ) ① 需能传送;② 促进传送;③ ATP、ADP的通道;④ ATP水解酶 11.辅酶Q是线粒体内膜: ( ) ① NADH脱氢酶的辅酶;② 琥珀酸脱氢酶的辅酶;③ 二羧酸载体;④ 呼吸链的氢载体 12.线粒体蛋白的跨膜传送是一种: ( ) ① 类似细胞膜的吞噬作用;② 蛋白质解折叠后传送; ③ 通过对各个蛋白质专一的载体传送;④ 膜内外同类蛋白质交换 13.Poly d(A-T)的Tm值较poly d(G  C)为: ( ) ① 高;②低;③相同 14.反密码子为IGC,可识别密码子: ( ) ① GCA;;②GCG;;③ACG 15.RNA形成二级结构的碱基对,除了A-U和G-C外,还有: ( ) ① A  C;②A  G;③G  U 16.RNA用强碱水解,产生: ( ) ① 2'  和5'  核苷酸混合物;② 2'  和3'  核苷酸混合物;③ 3'  和5'  核苷酸混合物; 17.能与受体结合,形成激素  受体复合物,进入细胞核调节基因表达的激素是: ( ) ① 甲状腺素② 肾上腺素;③ 溏皮质激素;④ 前列腺素 18.原核生物基因转终止子在终止点前均有: ( ) ① 回文结构;② 多聚A序列;③ TATA序列;④ 多聚T序列 19.能专门水解DNA  RNA杂交分子中RNA的酶是 ( ) ① DNA聚合酶I:② 逆转录酶;③ Rnase A;④ 核酸外切酶III 20.真核生物中,存在于核仁中的RNA聚合酶是: ( ) ① RNA聚合酶I;②RNA聚合酶II;③RNA聚合酶III 三、填空题:9题,每空格答对1分,共15分 1. 已知三种超二级结构的基本组合形式___,___,___。 2. Western印迹法的原理是用___鉴定蛋白质的一种方法。 3. 酶容易失活,如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有___和___等。 4. 红细胞膜带3蛋白是一种___。 5. 肝素是一种____,它的主要药理作用是____。 6. 细胞核内除了DNA外,还发现至少有二类小分子RNA,它们是核小分子RNA和____。 7. 核酸变性时,紫上吸收值增高,叫___效应。 8. 限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构,形成末端有粘性末端和___末端。 9. 内质网分为两种类型,一种是粗糙内质网,为________的场所;另一种为光滑型内质网,与____和____合成有关。 四、问答题:10题,每题5分,共50分。 1. 根据氨基酸通式的R基团极性性质,20种常见的氨基酸可分成哪四类? 2. 简述蛋白质翻译后的加工过程 3. 葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6  磷酸葡萄糖,催化这一步反应有两种酶,已糖激酶和葡萄糖激酶。己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度,而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。此外,己糖激酶受6  磷酸葡萄糖强烈抑制,而葡萄糖激酶不受6  磷酸葡萄糖的抑制。上述描述,请你说明两种酶在调节上的特点是什么? 4. 请解释什么是酶的活力和酶的比活力,并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么? 5. 写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤(写出九步即可)。(A卷此题不同,大概是讲为什么会得脂肪肝的原理) 6. 写出氧化磷酸化的五个作用部位不同的抑制剂,并写出各处的抑制部位。 7. 真核生物mRNA的3'  末端有一段poly(A),5'  末端有一个"帽子","帽子"的结构特点是什么? 8. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)是一个重要的代谢中间物,试举出二个反应合例子。 9. 试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。 10。真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式。 中科院02年研究生入学试题 生化B答案 一、 1  - 2  - 3  - 4  - 5  + 6  - 7  - 生成溶血磷脂 8  - 9  + 10 - 11 12 -有的为RNA->RNA 13 - 14 + 15 - 二 1  C 2  B 3  C 4  A 5  C 6  C 7  D 8  C 9  B 10 A 11 D 12 B 13 B 14 A 15 C 16 B 17 C 18 A 19 B 20 A 三、 1、αα、ββ、βαβ 2、抗原抗体结合的专一性 3、低温    干燥 4、糖蛋白(阴离子交换蛋白) 5、多聚阴离子    抗凝血 6、snoRNA 7、增色效应 8、平末端 9、光面内质网    脂质     胆固醇 四 1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。 2、(1)末端端修饰  细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸,真核生物的多肽N末端都是甲硫氨酸,通常N末端的甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的N末端氨基酸残基都要被除去。真核生物的多肽的N末端残基还要进一步的乙醇化。羧基端的再修饰也时有发生。    (2)切除信号序列。    (3)非末端氨基酸的修饰  丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化;赖氨酸、谷氨酸残基的甲基化;谷氨酸、天冬氨酸的羧基化。    (4)糖基化工厂 糖蛋白的末冬酰氨,丝氨酸、苏氨酸和糖基结合。    (5)附加异戊二烯基团。许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合。    (6)添加辅基  这些辅基和解键共价结合,如血红素,叶绿素、生物素等。    (7)前体修饰。有些蛋白生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的要通过蛋白酶的切割,成为较小的活性分子。    (8)形成二硫键 3、同一种底物的同一种反应,有两种酶存在,但两种酶的活性调节能力不同:已糖激酶对6-碳糖不加选择,肌肉中的已糖激酶为别构酶,特别受其产物6-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制;葡萄糖激酶则对D-葡萄糖有专一性,为诱导酶,活性不被6-磷酸葡萄糖抑制,在进食后血糖升高时,可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。 4、酶活力也叫酶活性,可以用酶活力单位表示,酶活力是由酶自身催化一定反应的的能力决定的,比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数,酶的比活力反应酶的纯度。 5、生化下P67 6、生化下P129 7、真核生物mRNA的5'端有一个帽子结构。这一结构的最大特点是7-甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'端通过5'-5'三磷酸酯键相连,另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2‘羟基甲基化;真核mRNA的3‘末端有一个多聚A尾,这些结构都是转录后加上去的。 8、生化下P393 P397 9、有4个关键的位点 (1)反密码子 (2)携带氨基酸的3’末端的氨基酸臂 (3)和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和TΨC环 (4)氨酰t-RNA合成酶的结合位点 10、生化下P571 中国科学院2003年 攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》卷 一.是非题(共25分) 1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链() 2.分子量相同的两种蛋白质,如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同,,其摩尔消光系数可能不同() 3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右() 4.苯丙氨酸是人体必需氨基酸() 5.丝-酪-丝-甲硫-谷-组-苯丙-赖-色-甘十肽经胰蛋白酶部分水解后,溶液中将有两种肽段存在() 6.核酸在pH3.5的缓冲液中电泳时,是从正极向负极运动的() 7.核糖体上蛋白质生物合成时,催化肽键合成的是核糖体RNA() 8.tRNA转录后加工有剪接反应,它是有蛋白质催化的() 9.核酸降解成单核苷酸时,紫外吸收值下降() 10.RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA() 11.DNA的复制方法有多种,滚动式复制方式通常以双向方式进行() 12.色氨酸操纵子(trpoperon)中含有衰减子序列() 13.对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录() 14.RecA蛋白只能与单链DNA结合,并发挥NTP酶活性() 15.在克隆载体pBSK质粒中,利用完整的lacZ基因作为筛选标记,白色转化菌落表明重组质粒含有插入片断() 16溶菌酶水解的底物是N-乙酰氨基葡萄糖的聚合物() 17.激素受体都具有酪氨酸受体结构域() 18.在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下,酶催化反应为零级反应() 19.蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团() 20.蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关() 21.心碱脂是一种在中性pH下带正电荷的磷脂() 22.生物膜上有许多膜固有蛋白,他们的跨膜肽段大多呈α螺旋结构() 23.生物膜以脂双层结构为骨架,虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成,但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的() 24.NADH氧化时的P/O比值时3() 25.生物膜是离子与极性分子的通透屏障,但水分子是例外() 二.选择题(共20分) 1.胰岛素的功能单位是 单体; 二体; 四体; 六体 2.1mol/L硫酸钠溶液的离子浓度为 2; 3; 6; 8 3.某蛋白质的pI为8,在pH6的缓冲液中进行自由界面电泳,其泳动方向为 像正极方向泳动; 没有泳动; 向负极方向泳动; 向正负极扩散 4.今有A,B,C,D四种蛋白质,其分子体积由大到小的顺序是A>B>C>D,在凝胶过滤柱层析过程中,最先洗脱出来的蛋白质一般应该是 A; B; C; D 5.噬菌体展示可用来研究: A蛋白质-蛋白质相互作用; B蛋白质-核酸相互作用; C 核酸-核酸相互作用; D噬菌体外壳蛋白性质 6.DNA合成仪合成DNA片断时,用的原料是( )4种dNTP; 4种NTP; 4种dNDP; 4种脱氧核苷的衍生物 7.酒精沉淀核酸时,下列何种长度核苷酸不能被沉淀() 10; 20; 50; 100 8.反密码子IGC可以识别的密码子是() GCG; GCA; ACG; ICG 9.真核RNA聚合酶2最大亚基C末端重复序列的功能是 磷酸化使RNA聚合酶2与其它转录因子解离,促进转录的起始与延伸; 乙酰化使RNA聚合酶2与组蛋白竞争结合与DNA上,促进转录的起始与延伸; 甲基化使RNA聚合酶2活化,促进转录的起始与延伸; 三者都有 10.GAL4因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录,它的DNA结合结构域属于() 锌指结构; 亮氨酸拉链结构; 螺旋-环-螺旋结构; 螺旋-转角-螺旋结构 11.NA聚合酶1的功能是() 转录tRNA和5sRNA基因; 转录蛋白质基因和部分snRNA基因; 只转录rRNA基因; 转录多种基因 12.在真核细胞内,着丝粒是指 两个构成染色体DNA分子的连接区域; 一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区; 染色体DNA上的一段特殊序列,能够促进与纺锤体的相互作用; 大约430bp长的一段序列,两端为两段高度保守的序列 13.下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应( )羧肽酶Y; 胃蛋白酶; 木瓜蛋白酶; 胰凝乳蛋白酶 14.达到反应平衡时,决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是 酶的比活力高低; 酶的Vmax大小; 酶的转化数; 酶的Km 15.自然界通过光合作用生成大量的植物干物质,其中含量最高的是 淀粉;木质素;纤维素;半纤维素 16.能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是 枯草杆菌蛋白酶; 胃蛋白酶; 嗜热菌蛋白酶; 金黄色葡萄糖球菌v8蛋白酶 17.下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂 氯霉素;抗酶素A; 2,4-二硝基苯酚;β-羟基丁酸 18.蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化,它是 酪氨酸残疾; 组氨酸残基; 丝氨酸残基; 门冬氨酸残基 19.钠钾ATP酶催化一分子ATP水解时,同时 泵出2Na+,泵入2K+; 泵出3Na+,泵入3K+; 泵出2Na+,泵入3K+; 泵出3Na+,泵入2K+; 20.动物细胞质中游离Ca+2的浓度大约是细胞外的 1/1000;1/200;1/50;1/10 三.填空(共25分) 1.肌红蛋白分子中的辅基含有——离子(金属),在正常状态下,该离子的化合价为—— 2.在朊病毒致病过程中,其分子中的——结构转变为——结构,从而使其分子产生—— 3.Northern杂交是用——鉴定—— 4.真核生物主要有三类DNA聚合酶:DNA聚合酶1,DNA聚合酶2和DNA聚合酶——;他们分别催化rRNA,mRNA,和——的转录 5.——通过结合反式因子,改变染色质DNA的结构而促进转录 6.λ噬菌体侵入大肠杆菌细胞后通过——重组而进入溶源状态 7.在同源重组过程中,常常形成——中间体 8.大肠杆菌DNA依赖的RNA聚合酶由α2ββ‘σ五个亚基组成,——亚基与转录启动有关 9.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片断发生连接,这是因为天然染色体的末端存在——结构 10.真核生物的基因组中有许多来源相同,结构相似,功能相关的基因,这样的一组基因称为—— 11.酶活性调节控制包括,酶的别构调节(或正负反馈调节),可逆的化学修饰,酶原活化,激活蛋白或抑制蛋白的调控。此外,还有——和——调控等 12.多酶复合体具有自身调节的机制,第一步反应一般是限速步骤,可被其他反应产物——。这种作用被称之为——,催化这步反应的酶往往是——。 13.紧密偶联的线粒体内膜在状态4时的跨膜电位为——伏特 14.磷酸酯酶C水解磷脂酰胆碱,生成——和—— 15.蛋白质识别磷酸化酪氨酸残基的结构域是—— 16.表皮生长因子受体与胰岛素受体分子的结构域功能的共同特点是受体的胞内区都具有—— 四.问答题(10*8) 1.某一单链蛋白质,经过实验测得,在20摄氏度时其解折叠反应(N<=>D,其中N为该蛋白质的折叠态,D为非折叠态)的平衡常数是1.0*10^(-8),试求该种蛋白质在该条件下折叠反应的自由能.(R=1.9872cal/(mol*K)或R=8.3144J/(mol*K)) 2.何谓蛋白质组,简述其研究特点。 3.请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类 4.说明基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义 5.简述反转录(还原)病毒HIV的结构特征及其可能的致病机理 6.简述真核生物染色体上组蛋白的种类,组蛋白修饰的种类及其生物学意义 7.如何用实验证明双功能酶所催化的2种化学反应是否发生在同一催化部位 8.为什么说体外蛋白质复性或折叠与细胞内蛋白质折叠的机制是不同的 9.试管内偶联线粒体加琥珀酸与ADP产生状态3呼吸耗氧时,在分光光度计下检测到线粒体内源NAD+还原。这有那几种可能的机制?最后证明是何种机制 10.信号转导中第二信使指的是什么?试举两个第二信使的例子与他们在细胞内的主要作用。 中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》参考答案(答案为网友所提供非正式答案,仅供参考) 1. dG''=-2.303RTlnK. 2.蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线(转自37度医学网,谢谢!!) 基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质称为蛋白质组(proteome)。同理,不同细胞在不同生理或病理状态下所表达的蛋白质的种类也不尽相同。蛋白质是基因功能的实施者,因此对蛋白质结构,定位和蛋白质-蛋白质相互作用的研究将为阐明生命现象的本质提供直接的基础。 生命科学是实验科学,因此生命科学的发展极大地依赖于实验技术的发展。以DNA序列分析技术为核心的基因组研究技术推动了基因组研究的日新月异,而以基因芯片技术为代表的基因表达研究技术为科学家了解基因表达规律立下汗马功劳。在蛋白质组研究中,二维电泳和质谱技术的黄金组合又为科学家掌握蛋白质表达规律再铸辉煌。蛋白质组学(proteomics)就是指研究蛋白质组的技术及这些研究得到的结果。 蛋白质组学的研究试图比较细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同,对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能。 蛋白质组学的研究内容包括: 1.蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。 2.翻译后修饰:很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化,糖基化,酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式,因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明 3.蛋白质功能确定:如分析酶活性和确定酶底物,细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。 4对人类而言,蛋白质组学的研究最终要服务于人类的健康,主要指促进分子医学的发展。如寻找药物的靶分子。很多药物本身就是蛋白质,而很多药物的靶分子也是蛋白质。药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。 在基础医学和疾病机理研究中,了解人不同发育、生长期和不同生理、病理条件下及不同细胞类型的基因表达的特点具有特别重要的意义。这些研究可能找到直接与特定生理或病理状态相关的分子,进一步为设计作用于特定靶分子的药物奠定基础。 不同发育、生长期和不同生理、病理条件下不同的细胞类型的基因表达是不一致的,因此对蛋白质表达的研究应该精确到细胞甚至亚细胞水平。可以利用免疫组织化学技术达到这个目的,但该技术的致命缺点是通量低。LCM技术可以精确地从组织切片中取出研究者感兴趣的细胞类型,因此LCM技术实际上是一种原位技术。取出的细胞用于蛋白质样品的制备,结合抗体芯片或二维电泳-质谱的技术路线,可以对蛋白质的表达进行原位的高通量的研究。很多研究采用匀浆组织制备蛋白质样品的技术路线,其研究结论值得怀疑,因为组织匀浆后不同细胞类型的蛋白质混杂在一起,最后得到的研究数据根本无法解释蛋白质 在每类细胞中的表达情况。虽然培养细胞可以得到单一类型细胞,但体外培养的细胞很难模拟体内细胞的环境,因此这样研究得出的结论也很难用于解释在体实际情况。因此在研究中首先应该将不同细胞类型分离,分离出来的不同类型细胞可以用于基因表达研究,包括mRNA和蛋白质的表达。  LCM技术获得的细胞可以用于蛋白质样品的制备。可以根据需要制备总蛋白,或膜蛋白,或核蛋白等,也可以富集糖蛋白,或通过去除白蛋白来减少蛋白质类型的复杂程度。相关试剂盒均有厂商提供。 蛋白质样品中的不同类型的蛋白质可以通过二维电泳进行分离。二维电泳可以将不同种类的蛋白质按照等电点和分子量差异进行高分辨率的分离。成功的二维电泳可以将2000到3000种蛋白质进行分离。电泳后对胶进行高灵敏度的染色如银染和荧光染色。如果是比较两种样品之间蛋白质表达的异同,可以在同样条件下分别制备二者的蛋白质样品,然后在同样条件下进行二维电泳,染色后比较两块胶。也可以将二者的蛋白质样品分别用不同的荧光染料标记,然后两种蛋白质样品在一块胶上进行二维电泳的分离,最后通过荧光扫描技术分析结果。  胶染色后可以利用凝胶图象分析系统成像,然后通过分析软件对蛋白质点进行定量分析,并且对感兴趣的蛋白质点进行定位。通过专门的蛋白质点切割系统,可以将蛋白质点所在的胶区域进行精确切割。接着对胶中蛋白质进行酶切消化,酶切后的消化物经脱盐/浓缩处理后就可以通过点样系统将蛋白质点样到特定的材料的表面(MALDI-TOF)。最后这些蛋白质就可以在质谱系统中进行分析,从而得到蛋白质的定性数据;这些数据可以用于构建数据库或和已有的数据库进行比较分析。实际上像人类的血浆,尿液,脑脊液,乳腺, 心脏,膀胱癌和磷状细胞癌及多种病原微生物的蛋白质样品的二维电泳数据库已经建立起来,研究者可以登录www.expasy.ch/www/tools.html等网站进行查询,并和自己的同类研究进行对比分析。 LCM-二维电泳-质谱的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线,除此以外,LCM-抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。即通过LCM技术获得感兴趣的细胞类型,制备细胞蛋白质样品,蛋白质经荧光染料标记后和抗体芯片杂交,从而可以比较两种样品蛋白质表达的异同。 传统的蛋白质研究注重研究单一蛋白质,而蛋白质组学注重研究参与特定生理或病理状态的所有的蛋白质种类及其与周围环境(分子)的关系。因此蛋白质组学的研究通常是高通量的。适应这个要求,蛋白质组学相关研究工具通常都是高度自动化的系统,通量高而速度快,配合相应分析软件和数据库,研究者可以在最短的时间内处理最多的数据。 中科院2003生物化学大题 (上海命题 ) 参考答案(续)由我作出, 仅供参考而已!! 3.RNA功能很多,比如:翻译模板(MRNA),连接子(TRNA),ribozyme,Gene silencing,翻译阻遏(micRNA),构成翻译机器rRNA--------一些也是ribozyme但是不全是,RNA的剪接/切,RNA editing(如guideRNA),Genome,DNA复制引物等. 4. 基因芯片是最重要的一种生物芯片,是指将大量探针分子固定于支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过杂交信号的强弱判断靶分子的数量。用该技术可将大量的探针同时固定于支持物上,所以一次可对大量核酸分子进行检测分析,从而解决了传统核酸印迹杂交技术操作复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、效率低等不足。它能在同一时间内分析大量的基因,使人们准确高效地破译遗传密码。这将是继大规模集成电路后又一次意义深远的科技革命。转自:生物谷,谢谢!! 5.HIV有两条+RNA衣壳和包膜,其受体为CD4,为反转录病毒,侵染后,整合入淋巴细胞GENOME,并引起淋巴细
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