资源描述
规
模
化
猪
场
操
作
规
程
永州职业技术学院农学系
第一章 生产工艺流程及主要参数
1.生产工艺流程
1.1 两万头线生产工艺流程图
配种舍7周 怀孕舍10.3周 分娩舍♀5周 保育舍6周 生长育肥舍15周
转进
400头
6周 9.3周 饲养4周 保育5周
转出 转出 断奶转出 保育转出
复配8头
转进
460头
分娩48胎
配种55头
怀孕
分娩48头 断奶48头 13-14周
淘汰母猪6头 上市50头保育猪
…………………………………………………………………………………………
补充后备母猪6-7头 390头(上市)
注: 1.1.1 生产工艺流程上行每一阶段所需要时间是以栏舍准备和安排猪群转动的时间来界定的,方格间注释的时间是以每一阶段的猪群转入后实际所需要的饲养时间来界定的。
1.2.2 每一饲养段的猪群转动前栏舍消毒后准备一周,配种怀孕114天,21天仔猪断奶,产出至出栏饲养时间为154-161天(22-23周)。
1.2 全进全出按周生产制度
生产流程的每一阶段都必须执行严格的全进全出按周生产制度。
1.2.1 每个阶段同批猪群的调整转群尤其是产房、保育舍都要求以周为生产单元,每周一次,全进全出。
1.2.2 育肥舍猪未出完若要进猪,务必做到将剩余的大猪全部转出到专用栋栏饲养(每一条生产线确定一专用育肥栏饲养非正常转群猪只),同样亦要执行全进全出制度。
1.2.3 产房、保育舍、育肥舍空栏后彻底冲洗干燥后经严格消毒空一周时间再消毒进猪,配种怀孕舍空栏消毒空1-3天后载猪。
1.2.4 按周生产程序(以一条生产线为例)
阶 段
周一
周二
周三
周四
周五
周六
配种舍①
疫苗注射
已孕♀
转②
断奶母猪
转入
怀孕舍②
临产♀
攻胎
临产一周♀转③
疫苗注射
产仔舍③
空栏进猪
前消毒
♀转入,断奶
仔猪转④
疫苗注射
断奶♀转①
保育舍④
空栏进猪
前消毒
断奶转入,
分群
9周龄仔猪转⑤
空栏消毒
疫苗注射
生长育肥舍⑤
清洗空栏,
消毒
保育猪转入,分群
第二次
分群
疫苗注射
全 场
换消毒液
换消毒液
周计划报表
2.生产技术指标
项 目
商品生产线
种猪场
备 注
考核值
目标值
领先值
目标值
配种分娩率(%)
86
89
92
87
窝平健壮仔数(头)
9.6
10
11
10
0.80kg以上
平均初生重
1.45
1.5
1.6
1.5
平均断奶日龄(天)
21
18
14
25
21日龄转群重(Kg)
6.5
7.2
8
7.5
种猪场25天转群
母猪年产胎次
2.3
2.35
2.4
2.25
生产成活猪/♀/年
19.8
21
24
20.5
保育猪饲养天数(天)
35
35
56日龄保育猪转群重(Kg)
20
23
25
22
成
哺乳猪(%)
96
97
98
97
健壮仔成活率
活
保育猪(%)
97
98
99
98
率
生长育肥猪(%)
98.5
99
99.5
99
全程成活率(%)
91.7
94.1
96.5
94.1
种公猪更新率(%)
60
指人工授精站
种母猪更新率(%)
25
25
种猪死亡率(%)
2
1
0
1
病、残、死
出口率/供种率(%)
90
35
AAA级种猪
产品品质(良比)
65
65.5
66
15%出口猪最高卖价
850
900
950
港元/司马担
97kg体重日龄
155
150
145
145
日
6.5-21kg
400
450
480
450
增
21-53kg
760
780
800
760
重
53-75kg
860
870
880
860
75kg-出栏
760
850
料
6.5-21kg
1.40:1
1.30:1
1.25:1
1.30:1
肉
21-53kg
2.35:1
2.25:1
2.20:1
2.25:1
比
53-75kg
2.80:1
2.70:1
2.60:1
2.70:1
75-97kg
3.20:1
3.00:1
产出至97kg出栏料肉比
2.35:1
2.29:1
2.24:1
2.24:1
种猪耗料占料比
0.51:1
0.48:1
0.45:1
0.60:1
不含公猪料后备料
全群料肉比
2.86:1
2.77:1
2.69:1
2.84:1
不含公猪料后备料
3.周生产目标
项 目
二万头线
一万头线
商品线小 计
0.3万头种猪场
全 场 合 计
备 注
配种头数
55
27
136
8
144
需要精液数(头份)
115
55
285
17
302
2.1份
分娩胎数
48
24
120
7
127
87%
增加健壮仔数
461
230
1135
63
1198
9.6;9
转群断奶仔猪数
442
221
1107
60
1167
96%;97%;98.5%
保育
转出
转育肥猪数
390
184
975
29
1004
转出售数
40
30
110
30
140
小 计
430
214
1085
59
1144
出 栏 数
出口数
335
156
826
—
826
全年4.4万
供种数
—
—
—
18
18
♀的60%
内销数
50
25
125
10
135
出售保育猪数
40
30
110
30
140
合 计
425
211
1061
58
1119
每周增重(kg)
37700
17500
92900
3100
96000
生产/消耗饲料(T)
110
51
271
9
280
料肉比2.92:1
第二章 不同阶段猪群投料规则
1.各类饲料统一代号及规范
饲料类别
饲料统一代号
适用猪群
备 注
乳猪料
100-1
教槽至断奶后10天
100-2
断奶后10天—保育猪转群前4天
饲喂3周
小猪料
200
保育猪转群前4天至53kg左右
7周左右
中猪料
300
53kg至75kg左右
3周左右
大猪料
400
75kg至出栏
4周左右
后备料
500-1
后备期转配种舍前
怀孕料
500-2
怀孕0-90天
500-3
怀孕90-107天
哺乳料
600
产房母猪临产至断奶
公猪料
700
种用公猪
2.种猪投料表
阶段或类别
投 料 量 (kg)
饲料种类
每天投
料次数
夏天(4月1日-11月30日)
冬天(12月11日-3月31日)
后备♂
2.0-2.2
2.5-2.7
公猪料
2
役精♂
2.2-2.5
2.5-3.5
公猪料
2
后备♀(95kg以前)
体重的2.5-3%
体重的2.5-3%
中猪料
2
后备♀(95-125kg)
2.1-2.2
2.3-2.5
后备料
2
后备♀(125kg-配种)
2.5-2.8
2.8-3.0
怀孕料
2
0-3 天(配种后天数,下同)
1.0
1.3
怀孕前期料
1-2
4-42
1.2-1.4
1.6-1.8
怀孕前期料
1-2
43-84
1.6-1.8
2.0-2.3
怀孕前期料
2
85-107
2.5-3.2
2.8-3.5
怀孕后期料
2
108-110
3.0-3.2
3.2-3.5
哺乳料
2
111-113(分娩前3天)
2.0-2.2
2.0-2.5
哺乳料
2
114
1.0
1.0
哺乳料
1
115-117(分娩后1-3天)
1.5-2.5
2.0-3.0
哺乳料
2
118-121(分娩后4-7天)
2.5-3.5
3.0-4.0
哺乳料
2
122-134(分娩后8-20天)
5.0-6.0
6.0-7.0
哺乳料
4-5
135(21天断奶)
2.0
2.0
哺乳料
2
136(断奶当天)
1.0
1.0
哺乳料
1
137-141
2.0
2.5
哺乳料
2
142-144(配种前3天)
2.5
3.0
哺乳料
2
0-3
1.0
1.3
怀孕前期料
1-2
3.不同阶段母猪投料示意图
说明:
A. 初产母猪由于其体格仍处于一个生长过程,日粮在满足妊娠和维持需要的同时,还要满足部分生长需要,因此在妊娠前期控料阶段,应在经产母猪投料标准的基础上增加10-15%饲料。
B. 妊娠母猪的投料关键要做到“因猪而饲”,根据每一头母猪的膘情和怀孕阶段来确定投料量。
C. 哺乳母猪加料阶段,对于哺乳数少于8头的母猪,可以适当减少饲喂量至5kg左右。
4.提高哺乳母猪采食量的投料程序
冬春季哺乳母猪产后第2、3周投料程序表
投料时间
料槽余料情况
上午1
上午2
下午1
下午2
一粒不剩
2kg
2kg
2kg
2kg
很 少 量
2kg
1kg
1kg
2kg
< 1 kg
1kg
1kg
1kg
2kg
> 1 kg
0.5kg
0
0
0.5kg
一粒没吃
0
0
0
0
注:白天两次上班时的开料都必须对食槽进行全面清理,将剩余未污染且未变质的饲料投给食欲好的母猪吃,其它三次开料前则必须将污染或变质的饲料清理掉。
夏秋季哺乳母猪产后第2、3周投料程序表
投料时间
料槽余料情况
上午1
上午2
下午1
下午2
晚上0:00
一粒不剩
1kg
1kg
1kg
1kg
2kg
很 少 量
1kg
1kg
1kg
1kg
2kg
< 1 kg
0.5kg
0.5kg
0.5kg
1kg
1kg
> 1 kg
0.5kg
--
--
--
0.5kg
一粒没吃
0
0
0
0
0
注:上午下午上班时的两次开料都必须对食槽进行全面清理,将剩余未污染且未变质的饲料投给食欲好的母猪吃,开完料半个小时后,将剩余饲料分散喂给食欲好的母猪吃,保证空槽,以保持饲料的新鲜;晚班开料前对污染或变质的饲料进行清理。
5.仔猪投料
日龄(阶段)
自由采食量
(g/天)
饲料种类
投料次数
备 注
3-7日龄
3-5
教槽料
4-6次
诱食、教槽
8-14日龄
10-20
教槽料
3-5次
15-断奶前
20-50
教槽料
3-5次
断奶留栏阶段
150-200
教槽料
3-5次
保育舍第1周
180-500
教槽料
2-3次
断奶转至保育舍2天内适当限料;换料要逐渐过渡,3-5天完成
保育舍第2-4周
400-1000
保育料
2-3次
保育舍第5周
900-1200
小猪料
2-3次
注:
a 3-7日龄一定要开始教槽,越早教槽,越早成功,就越有助于提高断奶重。
b 产房仔猪投料要做到少投多次,随时保持食槽清洁,饲料新鲜。
c 断奶后拉稀较多可以考虑在开始1-2天适当控料,防止仔猪采食过度。
d 保育舍的两次换料要逐渐过渡,以防止换料应激和拉稀。
6.生长育肥猪投料
生 长 阶 段
小猪阶段
中猪阶段
大猪阶段
20-53kg
53-75kg
75-97kg
5月上旬—11月上旬
饲料浓度
DE (Kcal)
3220
3200
3050
CP (%)
20.5
19.2
17.8
投饲量 (kg)
自由采食
自由采食
2.1-2.25
12月中旬—3月下旬
饲料浓度
DE (Kcal)
3250
3220
3080
CP (%)
19.8
18.0
17.0
投饲量 (kg)
自由采食
自由采食
2.3-2.5
其它时间
饲料浓度
DE (Kcal)
3230
3120
3050
CP (%)
20.2
18.5
17.5
投饲量 (kg)
自由采食
自由采食
2.2-2.35
注:主任或主管将每栏投料类别和投食量制板,饲养员看板作业;
保育-中猪阶段自由采食量一般是其体重的3.5-4%左右;
7.投料要求
7.1 投料前必须清理或清洗食槽,确保猪只采食清洁,新鲜;
7.2 任何一次投料后都必须注意观察猪只的采食行为,采食异常的要纪录并查明原因采取措施;
7.3 投料动作要求准、快、轻,尽量减少浪费,掉到食槽外的饲料要捡入食槽;
7.4 必须遵循先进先出的原则,生产日期在前的饲料应该先投喂,保证饲料不变质;
7.5 乳猪保育猪阶段的换料应该逐步推进3-5天内完成,不要突然变料;
7.6 实行自由采食的猪群应该每天空槽一次,具体方法是:
第三章 人工授精技术操作规程
1.人工授精站主要工作任务
1.1 确保防疫安全、加强环境控制、提高猪群福利。
1.2 为生产线提供优秀种公猪的合格精液。
1.3 技术观念创新,吸纳国内外先进的人工授精技术。
2.人工授精公猪的选择和管理
2.1 人工授精公猪的选择:用于人工授精的公猪要求符合本品种特征、体质健壮、结构匀称、性欲旺盛、性能优秀。初选公猪要求射精量超过平均水平(250ml),精子活率达80%以上,畸型率不超过18%,精子的密度不低于1.8亿/ml。
2.2 后备公猪的调教:
2.2.1 种公猪7—8月龄开始调教训练采精:先让其观察1-2次成年公猪采精过程,然后开始调教。
2.2.2 调教过程中,可以给予一定的刺激,如发情母猪的尿液、母猪的叫声或按摩阴部。
2.2.3 采精员对不爬跨假母猪台的公猪一定要有耐心,不能态度恶劣的对待公猪。每次调教的时间为20分钟左右,一般一周可调教4次。
2.2.4 后备公猪在采到第一次精后,第二天再采精一次,以增强记忆。
2.2.5 在调教公猪的过程中,一定要让公猪养成一个好的习惯,以方便以后的采精工作。
2.3 公猪的使用:后备公猪必须在9月龄体重在130公斤以上,投入采精使用,青年公猪每周采精1—2次,成年公猪采精2—3次,固定采精频率。
2.4 公猪的运动:公猪除了在栏内运动外,应尽量赶到户外运动,上下午各一次,每天行程1公里,夏季(气温高于30℃)时,在早、晚凉爽时进行,冬季(气温低于10℃时)可在中午运动一次,下雨天及气温低于5℃应在走道内运动。
2.5 防暑降温:严格做好公猪的夏季防暑、冬季保温工作,同时适当注意室内采光和湿度控制。种公猪在33℃的高温环境下处理72小时,其精精品质受到严重的影响。表现出精子活力下降、总精子数和活精子数减少、畸型精子增加,因而使与配母猪的妊娠率下降,胚胎成活率低。从影响时间来看,处理58天后精液品质才恢复正常。现在人工授精站采用水帘降温设施,其操作程序如下:检查设备是否处于正常,包括水泵、水帘、风机、水源、及电路是否正常。在夏季室内气温高于29℃时,开启水帘降温设施,效果视气温而定:当外界气温在35℃以上时,可降下7—9℃;当外界气温在35—29℃,可以降下5℃左右。
2.6 防止公猪咬架:公猪好斗,如偶尔相遇也会打架。采取办法有:用发情的母猪引诱或用木板将其隔开,也可以用水猛冲公猪的眼部将其撵走。
2.7 公猪保健:每头公猪每周应洗刷体表1-2次,保持阴囊干净,经常剪掉公猪包皮周围毛丛,保持卫生。
2.8 公猪的淘汰:
2.8.1 有更优良的公猪时。
2.8.2 精液检查品质不行的公猪,活力低于0.6,密度达不到中级水平的公猪。
2.8.3 健康有问题的公猪。
2.8.4 过分凶的公猪。
2.8.5 年迈过老的公猪。
3.采精
3.1 采精室的准备:每天采精后必须对采精室进行一次清洗、消毒,并打开窗户,使之干燥。
3.2 采精用具的准备:用消毒外科纱布套好集精杯,连同集精杯、载玻片及稀释用的玻棒、温度计、盛有37℃稀释液的量杯放入37℃恒温箱中预温。
3.3 采精公猪的准备:
3.3.1 用来采精的公猪体表必须干净,脏的地方必须进行清洗。
3.3.2 清洗公猪阴茎外部并用0.7%的盐水冲洗,包皮有积尿的的公猪应先挤净尿液,清洗污垢;清洗过程中,对公猪阴部进行按摩。
3.4 采精员的准备工作:采精员先用清水将双手清洗干净,后用37℃的盐水冲净,冷天采精人员双手用温水暖热。
3.5 采精操作
3.5.1 将公猪赶至采精室,让公猪亲近、嗅闻假母猪台,以增强公猪的性欲。
3.5.2 采精人员蹲于假母猪台后则,与公猪同方向。
3.5.3 待公猪爬上假母猪台、阴茎伸出时,用手握住阴茎的龟头部,并趁公猪前拥之势,拉出阴茎,手握阴茎部位,要露出螺旋部1厘米。注意不要强拉出阴茎以免拉伤阴茎。特别指出:公猪阴茎对温度的敏感不及对压力的敏感,所以掌握适当的压力是采精成功的关键。
3.5.4 手心呈握拳状,力量多用在食指和中指上。注意:在公猪射精时,手用的力量只是不让阴茎从手中滑脱为准,以利于采到量更多、质量较好的精液;而且在射精时,手最好不要动,当公猪完成一次射精段时,可以每隔3—5秒有节奏的握动一次,以刺激公猪开始下一段落的射精。
3.5.5 公猪精液的收集:公猪射精分2—3个射精段,甚至更多。公猪先射出的第一部分是胶体,含精量少,而且有尿道内杂物,因此第一部份精液不收集。等清亮精液射出后,第二部分是精子数量多,质量最好,颜色呈乳白色,不透明的浓精,我们主要收集这一部分精液。第三部分精液为清的胶体,精子量少,该部分精液也不收集。收集精液时应小心,避免被任何脏物污染。
3.5.6 公猪射精完毕后,阴茎自然会软下来,要让其自然收回包皮,不能推阴茎,防止挫伤阴茎。
3.5.7 采精时,人员、场地要相对稳定,环境相对安静。
3.5.8 采完精后,先将采精上的过滤纱布去掉,然后用盖子盖住采精袋,通过与化验室的窗口交给化验员;轻轻的将公猪赶回原栏。
4.化验室的精液品质检查
4.1 外观检查
4.1.1 射精量:在天平上可以直接称取精液的重量,一般公猪射精为150—500ml ,成年公猪射精不低于200ml 。
4.1.2 色泽:正常精液的颜色应为淡灰色或乳白色。若呈粉红(有血液)、黄绿色(有脓或炎症)、褐色(被污染)等颜色均为不正常的颜色,这样的精液是不合格的精液。
4.1.3 气味:稍有腥味,若有其它的气味均为不合格。
4.2 显微镜粗检
4.2.1 在37—38℃带恒温板的显微镜下,用经酒精灯火焰消毒过的接种环取一滴精液于载玻片上,通过CCD摄像管连接电视,用10倍的物镜、目镜观察精液的上中下三层精液样本2-3个视野,判断直线运动的精子占总精子数的比率,评出该精液的活率。
4.2.2 精子的密度的粗评按精子空隙大小评定。密为精子旋转,精子之间容纳不下一个精子的头距(+++表示);稀为淡精液,可以有一个精子长度的距离(+表示);中间型在二者之间(++表示)。
4.2.2.1 用血球计数板测量精液的密度:
a 显微镜放大100~250倍寻找血细胞计数板上的计算室(计算室为25个大方格,每个大方格中又划分为16个小方格。计算室的面积为1平方毫米,高度为0.1毫米)
b 根据不同家畜精子密度的不同,分别采用红吸管(如牛、羊),白吸管(如猪、马)吸取精液样品。
c 用3%NACL溶液稀释样品并致死精子,便于观察记数。
d 将稀释后的精液滴入计算室内。
e 显微镜放大400—600倍抽样观察计算5个大方格(即80个小方格)内的精子数(抽样观察的5个大方格,应位于一条对角线上或取四角加中央5个大方格)。
f 将5个大方格内的精子总数代入计算公式,换算出每1毫升原精液内的精子数。
g 1毫升原精液内精子数=5个大方格内的精子数×5(等于整个计算室25个大方格内精子数)×10(等于1立方毫米内精子数)×1000(等于被检稀释精液样品内的精子数) ×被检精液的稀释倍数)
h 为了保证精子计数的准确性,在采用此法时特别注意以下几点:
一是:原精液样品的吸取与稀释要做到准确无误,滴入的精液不要太多也不要太少,切不可以滴入太多而外溢,也不可以太少以至室内出现空泡。
二是:为了既不遗漏也不重复计数,因此计算每一个大方格内的精子顺序可由上而下,由左至右,再由右至左进行。
而计算每一个小方格内的精子时,皆以精子头部为准。凡头部落在方格内,左限线上和上限线上者,均为本方格内的精子数。反之,凡属头部落在右限线上和下限线上,以及头部不落在本方格内的精子数,均不计入本方格内。简而言之,即所谓对压线的精子是数头不数尾,数上不数下,数左不数右。
三是,为了减少误差,每份精液都应取两个样本,求其平均数。
4.2.2.2 利用精子计数器计算精子的密度:
取具有代表性的鲜精0.3毫升,取2.7毫升充分溶解的稀释液,混匀,在归零的计数器中测量出比色皿的读数,得出计数表中的竖轴读数,在计数表中读出横轴读数,再在精子密度对照表中找出需要密度的原精液量(ml),除以该份精液的活率,即得出每份精液需要的原精量。(具体操作详见其说明书)
4.2.3 根据对精液的外观检查和精子活力显微镜观察,确定该份精液能不能用。
4.3 精子活力的评定:
4.3.1 精子活力的表示有两种方法:一种是欧美习惯用法,由世界卫生组织和国标识+、++、+++表示,在我国沿用前苏联的方法,以0-9级表示。
4.3.2 按欧美的表示方法是:取10-100微升原精液,置干净的载玻片上,用22平方毫米的盖玻片盖上,在400倍光镜下观察10个不同视野下必须有100个以上的精子,分别记录活动的状况,以0-4级统计精子运动的方向,活动力强弱,分别记录各级活动精子的百分率。
0、“0”无精子运动,为死精。
1“+”精子运动较差,为颤动或摆动。
2“++”精子运动尚可,可见向前运动,但速度很慢。
3、“+++”精子运动很好,向前运动较快。
4、“++++”精子运动极好,迅速向前运动。
4.3.3 精子运动力与受精力关系密切。在猪人工授精中原精活力低于于国内目前习惯评定0.7级,相当于欧美以及日本和台湾“+++”,冷冻精液解冻后不低于3级(++),即目前习惯上的0.6级。精子的运动力的测定在猪人工授精中尚缺统一的标准。
4.3.4 精子运动力是生殖力的重要的一项属性,没有高活性运动力的精子,其受精力是非常低的。
4.4 精子形态的检查
4.4.1 取精液样本一滴与10%的福尔马林相混合均匀,盖上盖玻片在相差显微镜400—600倍下观察。
4.4.2 取10ml 试管内盛伊红染液(1%)1 ml,加入精液0.2 ml,置于37℃水浴锅中恒温浸染20分钟,取一滴伊红染后的的精液,再滴加一滴5%苯胺黑或苯胺兰混匀染色后抹片,用显微镜在640或800倍下观察,死精子染为红色,活精子不着色。每个抹片观察200个以上的精子,得到活率。然后观察分类计数,正常头、大头、小头、梨形头、双头、双颈、双尾、无头、断尾、折尾、卷尾、颈和中段含有原生质滴以及稚形未成熟的精子等。正常形态精子在鲜精中应不低于82%,保存过的精液正常精子的不低于80%。
4.5 精子对1%氯化钠的抵抗力
4.5.1 此法由前苏联1934年提出,被称为精子抗菌素力试验。方法是采用定量的精液(0.02毫升),每次加入10毫升的1%的氯化钠溶液,混匀后镜检精子活力直至全部精子失去运动能力为止。最后按以下公式计算抗菌素力系数:
抗力系数=加入氯化钠溶液的总量÷所取原精液的量
4.5.2 为缩短时间,可以改为逐级扩大稀释的方法,一般要求在15分钟内。测定时的室温应保持18~25℃。
4.5.3 抗力系数的高低,反映了精子容忍偏高渗溶液和高倍稀释的能力,猪的抗力系数为2000~5000。
5.精液的稀释、分装与运输
5.1 好的稀释液应具备的条件
5.1.1 具有良好的缓冲能力
5.1.2 具有一定的能量
5.1.3 具有与精液几乎一样的渗透压
5.1.4 具有良好的卫生条件
5.1.5 具有良好的抗微生物繁殖的能力
5.1.6 具有精子能生存的ph值,且有助于精子的保护
5.1.7 具有良好的控制细菌生长的能力,防止细菌对精子造成威害
5.2 稀释液的准备:常用的稀释剂有KIEV、BTS、20RPVA。
成份
BTS
Guelph
Zorpva
Reading
Modena
保存时间(天)
3
3
5
5
5
D-葡萄糖
37.15
60.00
11.50
11.50
27.5
柠檬酸三钠
6.00
3.70
11.65
11.65
6.9
EDTA钠盐
1.25
3.70
2.35
2.35
2.35
碳酸氢钠
1.25
1.20
1.75
1.75
1
氯化钾
0.75
0.75
青霉素钠
0.60
50万单位
0.60
160万
硫酸链霉素
1.00
0.50
1.00
0.50
100万
聚乙烯醇(PVP,Type11)
1.00
1.00
三羟甲基氨基甲烷(Tris)
5.50
5.50
5.65
柠檬酸
4.10
4.10
2.9
半胱胺酸
0.07
0.07
海藻糖
1.00
林肯霉素
1.00
5.3 稀释液的配制的基本原则
5.4.1 配制稀释液的各种原料品质要纯净,一般要选则化学纯或分析纯制剂,同时要使用分析天平或电子天平严格按配方准确称量。不能以人用的口服葡萄糖代替化学纯或分析纯的葡萄糖;不能用未知含糖量的奶粉代替新鲜奶液;卵黄要取新鲜鸡蛋,并且不应混入蛋白或卵黄膜等杂物;稀释用水最好用ph 值为7左右的中性新鲜纯净蒸馏水,不要以普通开水代替;对新购进的抗菌药物,最好在大批使用前进行效果试验,证明对精子无害才可以安全使用。
5.4.2 配制和分装稀释液的的一切物品用具,事先都必须刷洗干净和严格消毒。
5.4.3 配制稀释液的各种药物原料用水溶解后要进行过滤,以尽可能除去杂物异物。然后采用隔水煮沸消毒或高压消毒。
5.4.4 配制好的稀释液如不现用,应注意密封保存不受污染。卵黄、奶类、抗生素等必需成分应在临用时添加。
5.4 稀释液的主要成分和作用
5.4.1 稀释剂:主要用以扩大精液的容量。因此,此类物质在稀释中的剂量,必须保证整个稀释液与精液具有相同或相似的渗透压。
5.4.2 营养剂:主要是提供营养,以补充精子在代谢过程中消耗的能源。由于精子代谢只是单纯的分解作用,而不能通过同化作用将外界物质转化为自身成分。因此,为了补充精子的能量消耗,只可能使用最简单的能量物质,一般多采用葡萄糖、果糖、乳糖等糖类以及鲜奶及奶制品、卵黄等。
5.4.3 保护剂:主要是保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。所以,保护剂以可以分为多种成分:
5.4.3.1 缓冲物质
缓冲物质是用以保持精液适当的ph 值。贮存于附睾中的精液呈酸性而有利于抑制精子的活动和代谢。但在射精过程中会与碱性的副性腺分泌物相混合而变为弱碱性,因而激发了精子活动和加速精子的代谢过程。在精子代谢过程中,由于代谢产物(如乳酸和碳酸)的积累,ph 又会发生偏酸性变化,会影响精液品质,甚至使精子自身酸中毒而发生不可逆的变性。因此,需要在稀释液中加入适量的缓冲剂,以保持精液相对恒定的ph 值。常用作缓冲剂的物质有柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠等。近年来在各种家畜精液稀释液中常采用tris ,这是一种碱性冲剂,对精子代谢酸中毒和酶活动反应具良好的缓冲作用。
5.4.3.2 非电解质和弱电解质
具有降低精清中电解质浓度的作用。副性腺体分泌物的电离度,比附睾中精液高10倍,因此射出的精液的精清中电离度也很高。这一方面在生理上具有激发精运动作用,而有利于精子和卵子的受精过程的完成;但同时又会促进精子的早衰,破坏精子脂蛋白膜,使精子失去电荷而凝聚,以至不利于精液的保存。为此,有必要在稀释液中加入适当的非电解质或弱电解质,以降低精清中的电解质浓度。一般常用的非电解质为各种糖类、弱电解质,如胱氨酸等。此外因猪精液的副性腺分泌物多,可以在稀释后再作适当的稀释。
5.4.3.3 防冷刺激物质
具有防止精子冷休克的作用。在保存精液时,常需降温处理,尤其是从20℃以上急剧降到0℃时,由于冷刺激,会使精子遭受冷休克而丧失活力。这是因为精子内的缩醛脂融点较高,低温下容易凝结,从而导致精子的代谢不能正常进行而造成不可逆的冷休克死亡。因此,在低温保存稀释液需要添加防冷休克的物质,其中以卵磷脂的效果最好。因为卵磷脂的融点低,在低温下不易冻结,进入精子体内后,可以替代缩醛磷脂保障代谢的正常进行从而维护精子的生存。此外脂蛋白以及含磷脂的脂蛋白复合物,亦有类似卵磷脂的防止冷休克的作用。
5.4.3.4 抗冻物质
具有抗冷冻危害的作用,精液在冷冻保存过程中,精子内外环境的水分,必将经历由液态到固态的转化过程,从而导致精子遭受冻害而死亡。而抗冻物质有助于减轻或消除这种危害。一般常用的抗冻物质有甘油、二甲基砜(DMSO)、tris 、N-三羟甲基-甲基-2-氨基乙烷磺酸(TES)等。
5.4.3.5 抗菌物质
具有抗菌作用,在人工授精过程中,即使努力改善环境卫生条件和严格操作规程,虽然能减少细菌微生物对精液和稀释液的污染,但很难做到无菌,而精液和稀释液都是营养丰富的物质,是细菌微生物孳生的适宜环境。这些细菌微生物的污染,不仅直接影响精子的生存,而且是引起母畜生殖道感染、不孕和早期胚胎死亡的原因之一。因此,在稀释液中有必要添加一定数量的抗菌物质。常用的有青霉素、链霉素、林可霉素、卡那霉素、多粘霉素、庆大霉素、氯霉素等。
5.4.4 其它添加剂
5.5.5.1 酶类
如过氧化氢酶能分解精子代谢过程中产生的有害物质—过氧化氢,消除其危害,从而具有提高精子活力的作用;β-淀粉酶则有促进精子获能、提高受胎率的作用。
5.5.5.2 维生素类
如维生素B1、B2、、B12、C、E等,具有保护精子活率、提高受胎率的作用。
5.5.5.3 激素类
如催产素类、PG、等具有促进母畜生殖道嚅动,有利于精子运行从而提高受胎率的作用。
5.5.5.4 其它添加成分
如CO2、已酸、植物汁液等可调节精液的pH值,有利于精液的常温保存。EDTA具有保护精子抗冷休克的作用,又可以通过改变细胞膜渗透力,降低果糖分解和精子活动,从而延长精子寿命并保持受精能力。鉴于有氧环境对精子的有害作用在于脂类氧化形成有毒物质,故在稀释液中加入抗氧化剂。
5.5 稀释液的种类及其选择依据
目前已有的各种家畜精液稀释种类很多,正在试验尚未公开的也很多,但根据其性质和用途,大致可分为下列4类:
5.5.1 现用稀释液:适用于采精后立即稀释输精,以单纯扩大精液容量,增加输精母畜为目的。此类稀释液常以简单而等渗的糖类和奶液为主体。如5%的葡萄糖,0.9%的nacl 等。
5.5.2 常温保存稀释液:适用于精液在常温下作短期保存,具有以糖类和弱酸盐为主体的ph 偏低(弱酸性)的特点。
5.5.3 低温保存稀释液:适用于精液低温保存,具有含卵黄或奶液为主体的抗休克的特点。
5.5.4 适用于精液超低温冷冻保存,具有甘油、二甲基亚砜(DMSO)等为主体的抗冻特点。
5.5.5 选择依据:
5.5.5.1 家畜种类不同,稀释液各不相同。
5.5.5.2 精液的保存方法不同,稀释液也不相同。
5.5.5.3 应选择实际稀释效果好,药物来源广,生产成本低,配制程序简单和贮藏使用方便的具有多方综合优点的稀释液配方。
5.6 精液的稀释
精液采到后,尽快进行稀释,(一般不能超过30分钟),并应减少与空气和各种器皿的接触,没有经过镜检的精液不能进行稀释,所以在采精前一定要作好各种准备工作,但在稀释过程中一定要注意以下事项:
5.6.1 采精前做好采精及稀释的各种准备
5.6.1.1 各种设备、仪器、用具、及操作台等都应是经过严格消毒、干燥。
5.6.1.2 各种需要用的物品及器具都应加温:①采精杯,采精袋、过滤纸在温度为37℃的干燥箱中预热。②稀释液、温度计、烧杯在水温为37℃的水浴锅中预热。
5.6.1.3 精液采到后,尽快稀释。
5.6.1.4 根据外观检查及各种实验室检查,确定精液的稀释倍数,确保每份精液中有效精子的数量不少于30亿。
5.6.1.5 将稀释液于精液升到同一温度,其中温差不能超过1℃,过冷过热都会造成精液品质下降。
5.6.1.6 稀释时将稀释液沿玻棒或温度计缓慢引流到精液中(不能将精液倒入稀释液中),速度不能太快,避免给精子所在环境改变太大,引起精子的死亡。
5.6.1.7 原精在镜检后,先将精液以1:1的比例稀释,然后再重复检查密度和活力,第一次稀释完之后3—5分钟再进行以后的稀释;每稀释完一次,都要缓慢的将精液袋中的精液与稀释液充分混匀。
5.6.1.8 在稀释过程中一定要注意精液温度的下降速度,不能对精液造成低温打击。
5.7 精液的包装
5.7.1 包装方法:
5.7.1.1 用包装机包装:在现代化的人工授精中,大多使用这种方法,值得注意的是一定要注意精液在开始包装时,吸液管中不能有其它杂物和其它液体及吸液管的温度不能太低,可用加温的稀释液对吸液管进预热。
5.7.1.2 手工包装:用温度计或玻棒缓慢的将精液倒入输精瓶中。
5.7.2 包装好后,要对精液粘好标签,以便区分精液的号码,也可以用不同颜色的输精瓶分开。
5.8 精液的保存
5.8.1 保存前处理:稀释后精液从33—35℃缓慢降到17℃(约2个小时),或用几层毛巾包被直接放置17℃的冰箱中。
5.8.2 保存方法:保存温度一般为16-18℃,常用17℃。保存
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