1、 检测检测生物组织中生物组织中 糖类糖类、脂肪脂肪、蛋白质蛋白质第1页苹果苹果马铃薯马铃薯黄豆黄豆花生花生?它们中那它们中那种有机物种有机物最丰富最丰富第2页 一些化学试剂能够使生物组织中相关有机一些化学试剂能够使生物组织中相关有机化合物产生化合物产生特定颜色特定颜色反应。反应。试验原理:试验原理:判定物质判定物质还原性糖还原性糖脂脂 肪肪蛋蛋 白白 质质淀淀 粉粉试试 剂剂试验现象试验现象 斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色 双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色 碘碘 蓝色蓝色 第3页试验材料选择和处理有什么要求?试验材料选择和处理有什么要求?材料选择材料选择材
2、料处理材料处理还原性糖判定还原性糖判定脂肪判定脂肪判定含还原糖高,颜含还原糖高,颜色为白色植物组色为白色植物组织如苹果和梨织如苹果和梨富含脂肪种子富含脂肪种子,如花生,如花生浸泡浸泡34小时小时/蛋白质判定蛋白质判定富含蛋白质富含蛋白质牛奶或鸡蛋清牛奶或鸡蛋清鸡蛋清要先稀释鸡蛋清要先稀释淀粉判定淀粉判定马铃薯马铃薯/第4页一、可溶性还原糖检测:一、可溶性还原糖检测:还原糖:含有还原性基团(醛基或酮基)糖类,还原糖:含有还原性基团(醛基或酮基)糖类,如如葡萄糖、果糖和麦芽糖葡萄糖、果糖和麦芽糖等。等。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。1、选材:苹果、梨、白萝卜等。(
3、含糖量、选材:苹果、梨、白萝卜等。(含糖量较高较高,颜,颜色为色为白色或近于白色白色或近于白色植物组织)植物组织)2、检测试剂:、检测试剂:斐林试剂斐林试剂甲液:甲液:0.1g/mLNaOH乙液:乙液:0.05g/mLCuSO4等量混匀等量混匀后制成后制成第5页选材:选材:3.试验流程试验流程(步骤步骤)制备组织样液制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)过滤:(用单层纱布)样液:样液:显色显色反应反应 现象:现象:2 ml组织组织样液样液1 ml新配制新配制斐林试剂斐林试剂50 65水浴加热水浴加热约约2min棕棕 色色浅蓝色浅蓝色砖红色砖红色第6页
4、一、可溶性还原糖检测:一、可溶性还原糖检测:4、检测原理:、检测原理:0.1g/mLNaOH溶液与溶液与0.05g/mLCuSO4 溶液混合后,溶液混合后,马上生成马上生成淡蓝色淡蓝色Cu(OH)2悬浊液悬浊液。还原糖还原糖在在水浴加热水浴加热条件下,可将条件下,可将Cu(OH)2还原为还原为砖红色砖红色Cu2O沉淀沉淀。第7页二、蛋白质检测:二、蛋白质检测:1、选材:、选材:鸡蛋清、鸡蛋清、牛奶牛奶2、检测试剂、检测试剂双缩脲试剂双缩脲试剂A液:液:0.1g/mL NaOHB液:液:0.01g/mL CuSO4三、淀粉检测:三、淀粉检测:1、选材:面粉、马、选材:面粉、马 铃薯样液铃薯样液2
5、、试剂:、试剂:碘液碘液 3、检测过程:、检测过程:2 ml组织样液组织样液 滴加碘液滴加碘液观察颜色改变观察颜色改变3.检测过程:检测过程:鸡蛋清溶液鸡蛋清溶液 结果显示结果显示 NaOH 溶液溶液滴加滴加CuSO2 溶液溶液,滴加后均需摇匀滴加后均需摇匀第8页二、蛋白质检测:二、蛋白质检测:4、试验原理:、试验原理:碱性环境碱性环境(NaOH)中,蛋)中,蛋白质中白质中肽键肽键能和能和双缩脲试剂中双缩脲试剂中Cu2+反应生成反应生成紫色络化物紫色络化物,这,这个反应叫做双缩脲反应个反应叫做双缩脲反应三、淀粉检测:三、淀粉检测:4、原理:、原理:蓝色蓝色淀粉淀粉+碘液碘液 第9页比较项目比较
6、项目试剂及成份原理原理方法方法加热是否结果结果可溶还原糖判定斐林试剂斐林试剂甲液甲液:NaOHNaOH,0.1g/mL乙液乙液:CuSOCuSO4 4,0.05g/mL砖红砖红色沉色沉淀淀蛋白质判定双缩脲双缩脲试剂试剂A A液液 NaOH NaOH 0.1g/mLB B液液 CuSOCuSO4 4 0.01g/mL溶液溶液呈紫呈紫色色斐林试剂与双缩脲试剂二者有何不一样?斐林试剂与双缩脲试剂二者有何不一样?新配制新配制Cu(OH)2溶液与加入溶液与加入还原糖,在还原糖,在加热条件下加热条件下生成砖红色生成砖红色Cu2O在在碱性碱性环境环境下下CuCu2+2+,与类似与类似于双缩脲结构于双缩脲结构
7、肽键肽键发生反应发生反应生成紫色络合生成紫色络合物物甲乙等量甲乙等量混合混合而后而后马上使用马上使用先先A液液1mL,然,然后再加后再加B液液4滴滴水浴水浴加热加热不不需需要要第10页四、脂肪检测四、脂肪检测1、选材:经浸泡去种皮花生种子。、选材:经浸泡去种皮花生种子。2、检测试剂:、检测试剂:苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液染液3、试验步骤:、试验步骤:第11页橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪脂肪+苏丹苏丹(或(或苏丹苏丹)染液)染液 橘黄色橘黄色(或(或红色红色)4、试验原理:、试验原理:第12页若取少许植物油,加入苏丹若取少许植物油,加入苏丹(IV),),震荡,可看到溶液
8、呈什么颜色?震荡,可看到溶液呈什么颜色?橘黄色(红色)橘黄色(红色)第13页问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质判定试验时,为何要留出一部、在做还原糖、蛋白质判定试验时,为何要留出一部分样液?分样液?作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为何、使用双缩脲试剂时为何B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能过量?过量?过量双缩脲试剂过量双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应,使溶液呈蓝色,反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成紫色。而掩盖生成紫色。3、为何斐林试剂要现配现用,不能放置太久?为何斐林试剂要现配现用,不能放置太久?时间太长,时间太长,Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液
9、就沉淀在试管底部而无法参加反应。无法参加反应。l拓展拓展第14页4.若有西瓜、西红柿,适合作检测还原性若有西瓜、西红柿,适合作检测还原性糖材料吗?糖材料吗?不适合,此材料中虽富含还原糖,不适合,此材料中虽富含还原糖,但含有色素,会遮盖反应颜色但含有色素,会遮盖反应颜色5.甘蔗、甜菜根适合作检测还原性糖甘蔗、甜菜根适合作检测还原性糖材料吗?材料吗?此材料中虽不含色素,富含蔗糖,但蔗此材料中虽不含色素,富含蔗糖,但蔗糖是非还原性糖糖是非还原性糖第15页安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引发世人注目。判安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引发世人注目。判定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,必定不需要用到化学定脱脂淡奶
10、粉是否为伪劣产品,必定不需要用到化学试剂是试剂是()A.斐林试剂斐林试剂 B.红墨水红墨水C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹染液染液 B第16页 各种可供试验材料梨梨黄桃黄桃胡萝卜胡萝卜黄豆黄豆花生种子花生种子小麦种子小麦种子 其中适合于判定其中适合于判定可溶性还原糖可溶性还原糖是是 ,理由是梨,理由是梨组织细胞组织细胞 ,你打,你打算用什么试剂判定算用什么试剂判定?。小麦种子不如花生种子更适适用来判定脂肪,这是小麦种子不如花生种子更适适用来判定脂肪,这是因为因为 ,你打,你打算用什么试剂判定算用什么试剂判定?.例例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白
11、质判定试验时,需要依据试验需要选择不一样试验质判定试验时,需要依据试验需要选择不一样试验材料。请依据下表所列各种材料回答下列问题:材料。请依据下表所列各种材料回答下列问题:梨梨 颜色为白色,而且糖含量较高颜色为白色,而且糖含量较高 斐林试剂斐林试剂脂肪含量不如花生高,也不轻易做切片脂肪含量不如花生高,也不轻易做切片 用苏丹用苏丹或苏丹或苏丹试剂试剂第17页小麦种子中糖类化合物小麦种子中糖类化合物 含量很高,却不适适用含量很高,却不适适用来判定来判定 _,这是因为,这是因为 _。适合于判定蛋白质是适合于判定蛋白质是 ,理由是,理由是 ,判定所用试剂是,判定所用试剂是 。蛋白质含量高蛋白质含量高
12、黄豆和花生黄豆和花生 双缩脲试剂双缩脲试剂淀粉淀粉 可溶性还原糖可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水淀粉是非还原糖且不溶于水 第18页 还原糖还原糖还原糖还原糖脂脂脂脂 肪肪肪肪淀淀淀淀 粉粉粉粉蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质斐林试剂斐林试剂斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹苏丹苏丹碘碘碘碘 液液液液双缩脲双缩脲双缩脲双缩脲预测预测预测预测实测实测实测实测预测预测预测预测实测实测实测实测预测预测预测预测实测实测实测实测预测预测预测预测实测实测实测实测必必必必做做做做苹果匀浆苹果匀浆苹果匀浆苹果匀浆植物油植物油植物油植物油豆豆豆豆 浆浆浆浆马铃薯匀浆马铃薯匀浆马铃薯匀浆马铃薯匀浆花生种子花生种子花生种子花生种子切片切片切片切片选选选选做做做做小组结论和疑问小组结论和疑问小组结论和疑问小组结论和疑问成份及试剂成份及试剂检测结果检测结果待测样品待测样品表格表格第19页